全 文 ：园 艺 学 报 ， （ ）： – 2014 41 11 2275 2280 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期：2014–08–01；修回日期：2014–11–04
基金项目：北京市科技计划研发攻关项目（YLHH201200109）；中国农业科学院与北京市大兴区科技合作项目（YLHH200900106）；农
业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目
氨磺灵、氟乐灵和秋水仙素诱导安祖花多倍体的
研究
储丽红 1,2，彭佳佳 1,3，王 钊 1，赵 凯 1，袁素霞 1，明 军 1，刘 春 1,*
（1中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081；2 南京林业大学风景园林学院，南京 210037；3 宁夏大学农学院，
银川 750021）
摘 要：采用氨磺灵、氟乐灵和秋水仙素对‘Dakota’安祖花组培苗进行浸泡处理，诱导多倍体产生。
结果表明，15 mg · L-1 氨磺灵处理 7 d，死亡率为 14.58%，诱导率达 48.72%；100 mg · L-1氟乐灵处理 5 d，
死亡率为 16.67%，诱导率达 71.79%；0.5%秋水仙素处理 5 d，死亡率为 31.11%，诱导率达 62.96%。
关键词：安祖花；氨磺灵；氟乐灵；秋水仙素；多倍体诱导；除草剂
中图分类号：S 682.1+4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）11-2275-06

Studies on Polyploid Induction in Anthurium andraeanum Using Oryzalin，
Trifluralin and Colchicine
CHU Li-hong1,2，PENG Jia-jia1,3，WANG Zhao1，ZHAO Kai1，YUAN Su-xia1，MING Jun1，and
LIU Chun1,*
（1Institute of Vegetables and Flowers，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100081，China；2College of
Landscape Architecture，Nanjing Forestry University，Nanjing 210037，China；3College of Agriculture，Ningxia University，
Yinchuan 750021，China）
Abstract：In vitro polyploid plants of Anthurium andraeanum‘Dakota’were induced by using
oryzalin，trifluralin and colchicine with different concentrations and treatment duration. The results showed
that there were significant differences among different inducers. For oryzalin，maximum induction rate was
48.72% and the plants death rate was 14.58% at 15 mg · L-1 level. Trifluralin，the maximum induction rate
was 71.79% at 100 mg · L-1 level with just 16.67% death rate. As colchicine，the highest induction rate
62.96% while the death rate reached up to 31.11% at 0.5% level.
Key words：Anthurium andraeanum；oryzalin；trifluralin；colchicine；polyploid induction；
herbicide

安祖花（Anthurium andraeanum L.）又名红掌、大叶花烛，具极高的观赏价值。多倍体育种是
植物育种的重要手段，多倍体植株常具有花大、对称、抗逆性强、生长健壮等特点，大大提高了植
物的观赏价值（王冲 等，2011）。目前关于安祖花多倍体诱导的报道较少，张志胜等（2007）、Chen

* 通信作者 Author for correspondence（E-mail：liuchun@mail.caas.net.cn）
2276 园 艺 学 报 41 卷
等（2011）采用不同浓度秋水仙素对其愈伤团块进行处理，多倍体诱导率为 7.6% ~ 45.45%，但随着
处理时间延长和秋水仙素浓度加大，愈伤组织褐化严重。秋水仙素作为一种高效的多倍体诱导剂被
广泛使用（Kermani et al.，2004；陶抵辉 等，2007）。但其加倍不够稳定，易造成染色体缺失，使
再生植株生长异常，且秋水仙素剧毒，会麻痹神经，价格昂贵。研究者们开始寻找更安全高效的诱
导剂（赵璘 等，2008）。
除草剂氨磺灵和氟乐灵以低毒性及良好的诱导效果，在马蹄莲（张锡庆 等，2008）、秋石斛（李
秀兰和安东，2009）、半枝莲（岳敏 等，2011）、甜瓜（魏育国和蒋菊芳，2006）、南瓜（章鹏 等，
2011）等植物上得到应用。DeFrank 和 Leary（2004）研究氨磺灵等 4 种除草剂对安祖花叶片及花朵
生长的影响，结果表明，在氨磺灵处理条件下植株花朵数显著高于对照，叶片数及叶片干样质量则
无显著变化。目前尚未见到氟乐灵在安祖花多倍体育种上的报道。
本试验中分别采用氨磺灵、氟乐灵及秋水仙素对安祖花组培苗进行加倍处理，旨在寻找安祖花
安全高效的多倍体诱导途径，为其多倍体育种提供技术支持。
1 材料与方法
1.1 试验材料及其多倍体植株的获得与培养
以安祖花品种‘Dakota’叶片为外植体，选取生长健壮、整齐一致、继代 2 次（继代周期 30 d）
的组培苗为试验材料。分别配置不同浓度的氨磺灵（10、15 和 20 mg · L-1）、氟乐灵（25、50 和
100 mg · L-1）及秋水仙素（0.1%、0.3%和 0.5%）溶液，在超净工作台上过滤灭菌。将组培苗分别放
入各诱导溶液中浸泡，每 30 株组培苗浸泡于 10 mL 溶液中，每 6 h 摇晃 1 次，后倾斜放置（避免组
培苗一直浸泡在溶液中），分别处理 3、5 和 7 d。设 3 次重复。处理完毕后接种在 1/2MS + NAA 0.1
mg · L-1 + IBA 0.1 mg · L-1 + 活性炭 3 g · L-1 培养基上，在光周期 16 h · d-1，温度（25 ± 1）℃条件下
进行生根培养。观察组培苗的生长、死亡、形态变化及生根情况，统计植株死亡率。
1.2 染色体数鉴定与叶面气孔观察
于上午 10：00—11：00 取 0.3 ~ 0.5 cm 幼嫩根尖于 0.1%秋水仙素溶液中，常温黑暗条件下处理
4 h；蒸馏水冲洗 3 遍后转入卡诺固定液（无水乙醇︰冰醋酸 = 3︰1），4 ℃下处理 24 h；蒸馏水冲洗
3 遍，用 0.075 mol · L-1 KCl 溶液低渗 30 min；弃去废液，加入 1 mol · L-1 HCl 在 60 ℃水浴中解离 8
min；蒸馏水冲洗 3 ~ 5 遍后备用。取根尖 1.0 ~ 1.5 mm 于载玻片上，用镊子压碎后滴上 2 ~ 3 滴改良
卡宝品红溶液，静置 5 ~ 6 min 后盖上盖玻片，用镊子轻敲盖玻片后在 100 倍显微镜下观察，拍照。
选取生长健壮的各处理组培苗，用镊子撕取植株顶端向下第 3 片叶片的下表皮（冯辉 等，2011），
置于载玻片上，滴上清水，盖上盖玻片后于 40 倍显微镜下，随机观察 10 个视野中气孔及保卫细胞
的大小和数量，用目镜测微尺进行测量。
2 结果与分析
2.1 安祖花加倍植株的形态观察及倍性鉴定
氨磺灵、氟乐灵和秋水仙素处理均获得数量不等的多倍体植株。如图 1，A 所示，同一生长条
件及生长时间下，多倍体植株生长健壮，株形高大，叶片宽大厚实，叶色深绿，与四倍体的一般特
征一致。经倍性鉴定（图 1，B、C），确认诱导获得了四倍体（2n = 4x = 60）植株。
11 期 储丽红等：氨磺灵、氟乐灵和秋水仙素诱导安祖花多倍体的研究 2277
图 1 氟乐灵诱导的四倍体植株（A）及其染色体对比（B、C）
Fig. 1 Tetraploid plants（A）induced by trifluralin and the chromosome number of diploid（B）and tetraploid（C）

经气孔观察发现，二倍体与四倍体植株的气孔大小、气孔数量及保卫细胞大小存在显著差异。
（表 1，图 2）四倍体植株气孔和保卫细胞明显变大，气孔宽度无显著差异。同一视野中气孔数减少，
均符合多倍体植株特征。

表 1 ‘Dakota’安祖花二倍体与四倍体气孔及保卫细胞比较
Table 1 Comparing of stomatal and guard cells of diploid and tetraploid of‘Dakota’
倍性
Ploidy level
保卫细胞长/μm
Length of guard cell
保卫细胞宽/μm
Width of guard cell
气孔长度/μm
Length of stomatal cell
气孔宽度/μm
Width of stomatal cell
气孔个数/视野
Number of stomatal cell per view
二倍体 Diploid 16.10 ± 1.49 b 14.00 ± 1.20 a 10.08 ± 0.79 b 3.96 ± 0.56 a 15.67 ± 1.63 a
四倍体 Tetraploid 19.09 ± 1.19 a 15.46 ± 0.99 a 13.73 ± 0.67 a 5.51 ± 0.45 a 9.33 ± 0.82 b













图 2 ‘Dakota’安祖花二倍体（A）和四倍体（B）植株表皮气孔数量及大小比较
Fig. 2 Comparison of stomata size on epidermis between diploid（A）and tetraploid（B）plants of‘Dakota’

2.2 氨磺灵处理对安祖花多倍体的诱导效果
氨磺灵不同浓度和处理时间对安祖花‘Dakota’组培苗的诱导效果如表 2 所示。在同一浓度下，
随着处理时间的增加，植株死亡率呈上升趋势。在同一处理时间下，随着药剂浓度的增加植株死亡
率增加。10 和 15 mg · L-1氨磺灵作用下，不同处理时间对植物死亡率的影响差异不显著，死亡率较
低，在 4.44% ~ 14.58%之间。20 mg · L-1 浓度下，处理时间对植株死亡率的影响差异显著，死亡率
较高，在 28.89% ~ 42.22%之间。
15 mg · L-1 氨磺灵处理 7 d，诱导效果最佳，死亡率为 14.58%，诱导率达 48.72%。10 mg · L-1
氨磺灵处理 7 d，诱导效果次之，死亡率为 8.89%，诱导率达 20.51%。

2278 园 艺 学 报 41 卷
表 2 氨磺灵不同浓度、处理时间对‘Dakota’安祖花诱导的影响
Table 2 Effects of oryzalin concentration and treatment duration on chromosome induction of‘Dakota’
氨磺灵/
（mg · L-1）
Oryzalin
处理时间/d
Treatment
duration
处理株数
Number of
treated plants
死亡株数
Number of
dead plants
死亡率/%
Death rate
检测株数
Number of plants
determined
四倍体株数
Number of
tetraploid plants
诱导率/%
Induction rate
10 3 45 2 4.44 d 39 1 2.56 d
5 48 4 8.33 cd 42 3 7.14 cd
7 45 4 8.89 cd 39 8 20.51 b
15 3 51 4 7.84 cd 42 4 9.52 cd
5 45 5 11.11 cd 36 5 13.89 bc
7 48 7 14.58 c 39 19 48.72 a
20 3 45 13 28.89 b 30 4 13.33 bc
5 48 18 37.50 a 24 2 8.33 cd
7 45 19 42.22 a 24 1 4.17 cd
注：同列不同小写字母表示在 0.05 水平上差异显著。下同。
Note：Different lowercase letters mean significanct difference at 0.05 level. The same below.
2.3 氟乐灵处理对安祖花多倍体的诱导效果
如表 3 所示，低浓度（25 mg · L-1）氟乐灵对‘Dakota’组培苗诱导效果不明显；50 mg · L-1 浓
度处理 7 d 的诱导率为 19.05%；100 mg · L-1 处理时，植株死亡率为 11.11% ~ 22.22%，四倍体植株
诱导率显著增加，达 46.67% ~ 71.79%，其中处理 5 d 时达最佳，植株死亡率 16.67%，诱导率达
71.79%。
表 3 氟乐灵不同浓度、处理时间对‘Dakota’安祖花诱导的影响
Table 3 Effects of trifluralin concentration and treatment duration on chromosome induction of‘Dakota’
氟乐灵/
（mg · L-1）
Trifluralin
处理时间/d
Treatment
duration
处理株数
Number of
treated plants
死亡株数
Number of
dead plants
死亡率/%
Death rate
检测株数
Number of
plants determined
四倍体株数
Number of
tetraploid plants
诱导率/%
Induction
rate
25 3 42 2 4.76 d 36 2 5.56 e
5 45 2 4.44 d 42 2 4.76 e
7 48 5 10.42 bcd 42 2 4.76 e
50 3 45 4 8.89 cd 39 4 10.26 e
5 48 5 10.42 bcd 42 3 7.14 e
7 51 6 11.76 bc 42 8 19.05 d
100 3 45 5 11.11 bcd 39 23 58.97 b
5 48 8 16.67 ab 39 28 71.79 a
7 45 10 22.22 a 30 14 46.67 c
2.4 秋水仙素处理对安祖花多倍体的诱导效果
如表 4 所示，随着秋水仙素浓度及处理时间的增加植株死亡率增大。在 0.1%秋水仙素作用下，
四倍体诱导率随处理时间的增加而增大。0.3%秋水仙素处理 3 d、5 d 及 7 d，诱导效果无显著差异，
0.5%浓度处理，植株死亡率及多倍体诱导率均达较高水平，处理 5 d 时死亡率为 31.11%，诱导率最
高，达 62.96%。
表 4 秋水仙素不同浓度、处理时间对‘Dakota’安祖花诱导效果的影响
Table 4 Effects of colchicine concentration and treatment duration on chromosome induction of‘Dakota’
秋水仙素/%
Colchicine
处理时间/d
Treatment
duration
处理株数
Number of
treated plants
死亡株数
Number of
dead plants
死亡率/%
Death rate
检测株数
Number of
plants determined
四倍体株数
Number of
tetraploid plants
诱导率/%
Induction rate
0.1 3 48 4 8.33 e 42 2 4.76 e
5 45 7 15.56 d 39 7 17.95 d
7 51 10 19.61 cd 42 13 30.95 c
0.3 3 45 7 15.56 d 36 7 19.44 d
5 48 8 16.67 cd 39 6 15.38 d
7 45 10 22.22 c 33 6 18.18 d
0.5 3 48 14 29.17 b 33 7 21.21 cd
5 45 14 31.11 b 27 17 62.96 a
7 51 23 45.10 a 27 13 48.15 b
11 期 储丽红等：氨磺灵、氟乐灵和秋水仙素诱导安祖花多倍体的研究 2279
3 讨论
除草剂氨磺灵、氟乐灵以其低毒性和良好的多倍体诱导效果等优势在多种植物上已得到应用
（赵璘 等，2008；章鹏 等，2011）。本试验中，氨磺灵、氟乐灵及秋水仙素对安祖花的最高诱导率
分别达到 48.72%、71.79%和 62.96%，相应植株死亡率分别达 14.58%、16.67%与 31.11%。张志胜等
（2007）利用 0.2 g · L-1 秋水仙素对安祖花愈伤组织进行浸泡培养，多倍体诱导率最高达 45.5%，不
同品种间诱导效果差异不显著。本试验中加倍植株与对照植株在染色体数量、植株形态、气孔数量
及大小均存在显著差异，与张志胜等（2007）在安祖花上的研究结果一致。由此可见，氨磺灵、氟
乐灵对安祖花多倍体诱导效果明显，为安祖花有效的多倍体诱导试剂。
本试验中，随着诱导剂浓度的提高及处理时间的增加，植株死亡率上升，这与张志胜等（2007）
在安祖花上的研究结果一致。岳敏等（2011）采用 10 μmol · L-1 氨磺灵对半枝莲茎段进行浸泡振荡
培养 12 h 后，植株诱变率达 71.0%。低浓度（5 μmol · L-1）氨磺灵条件下植株诱变率随处理时间的
增加而增大，高浓度（15 μmol · L-1）条件下植株诱变率随处理时间的增加而降低。赵胜杰等（2010）
设置 30、60、90 μmol · L-1 氨磺灵对小型西瓜幼苗进行滴苗处理，氨磺灵浓度为 30 μmol · L-1 时，诱
导率最高，达 11.11%。本试验中，在 10 mg · L-1 和 15 mg · L-1 氨磺灵条件下，随处理时间的增加，
植株诱导率呈上升趋势，处理 7 d 时诱导效果最佳，诱导率达 48.72%。在 20 mg · L-1 氨磺灵条件下，
随处理时间的增加，植株诱导率呈下降趋势。
章鹏等（2011）研究发现，180 μmol · L-1 的氟乐灵对南瓜幼苗具有良好的诱导效果，可代替秋
水仙素诱导植株加倍。本试验中，在 100 mg · L-1 氟乐灵处理 5 d 条件下诱导率达 71.79%。童俊等
（2009）采用秋水仙素对 3 种紫薇进行诱导试验，均获得多倍体植株，在 0.5%秋水仙素条件下处理
72 h，多倍体诱导率高达 54.17%。本试验中，0.5%秋水仙素处理 5 d，诱导率最高达 62.69%。
由以上可以得出，氨磺灵、氟乐灵对部分植物的处理浓度均明显低于秋水仙素处理浓度。秋水
仙素在多倍体诱导过程中易造成染色体缺失，形成嵌合体，使得多倍体诱导率降低（赵璘 等，2008；
董飞 等，2011）。而多种除草剂能够避免秋水仙素的缺陷，获得良好的加倍效果。

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