全 文 ：园 艺 学 报 ， （增刊）： 2011 38 2495 http: // www. ahs. ac. cn
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收稿日期：2011–07–28
基金项目：国家自然科学基金项目（30671455）；科技部社会公益研究专项（2005DIA4J047）
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枣树盐胁迫反应的比较蛋白质组学分析
曹尚银1,*，沈程清 2，郭俊英1，薛华柏1，刘 丽1，谢深喜3，张 玲2
（1中国农业科学院郑州果树研究所，郑州 450009；2湖南省临武县农业局，湖南临武 424300；3湖南农业大学园艺
园林学院，长沙 410128）
枣原产我国，抗盐碱，耐旱、耐瘠薄。近年来，我国的新疆和沿海地区，在盐碱地上正探索大
面积发展枣树生产，这对减轻人类所面临的土地资源、淡水资源、粮食供需的矛盾以及有效控制环
境恶化都有重要意义。分析枣树耐盐胁迫反应相关蛋白，以期为进一步研究盐胁迫下枣叶片特异蛋
白质的功能及选择耐盐枣育种材料和揭示枣耐盐分子机制奠定基础。
选用七月鲜枣当年生扦插苗。盆栽基质为普通土加草炭 100 g · kg-1（干质量，下同）和河沙 50
g · kg-1，混匀、过筛。每盆栽大小基本一致的 3株枣苗，每个处理 3次重复，每个重复 10盆。NaCl
处理浓度为：0，0.60%（按基质干质量计）。取相应量NaCl兑水至 1 500 mL，一次浇入。自然光照
避雨状态下培养，25 d时分别采集每株苗中部 3片成熟叶用ddH2O冲洗干净后迅速用滤纸轻轻擦干，
称取 500 mg，加入 0.5 mL全细胞裂解液（7 mol · L-1尿素，2 mol · L-1硫脲，65 mmol · L-1 Tris，4%
CHAPS，0.2% IPGbuffer），混均，超声破碎细胞（冰浴）。离心 12 000 g，45 min，取上清液，用 0.22 μm
过滤，获得澄清溶液。上清液采用Bradford法定量，100 μg分装样品，–80 ℃保存。双向电泳根据
Bio-Rad公司的ProteomeWorksTM System中的方法进行。双向电泳凝胶染色采用改良的银染法。双向
电泳凝胶图象扫描采用GS800光密度扫描仪（Bio-Rad），用PDQuest8.0版软件进行图象分析，斑点
检测和匹配分析，找出差异蛋白。
试验结果表明：用 Image Master 2D图象处理软件进行背景消除、污染点去除和放大检测，共检
测出枣在盐胁迫下 26个蛋白质点发生了变化，其中 6个上调蛋白、20个下调蛋白。6个受胁迫上调
蛋白分别是 1717、1253、1459、1233、2120、287；20个受胁迫下调调蛋白分别是 2443、2496、2498、
2474、2543、2288、2550、1896、1418、1527、1526、1374、1362、1438、6811、655、1528、1182、
647、492。在上调的蛋白质点中，1459变化最大，与对照相比，受盐胁迫诱导增加了近 4倍；其次
是 2475、1253和 2120，这 3个蛋白质点在盐胁迫后相对丰度增加了 2倍以上，表现出强烈的盐诱
导特性，说明其可能在枣的抗盐机制中发挥重要作用。在下调的蛋白质点中，2543受盐胁迫抑制最
大，其相对丰度降低至对照的 1/8左右，表现出强烈的盐抑制特性，说明 2543可能是对盐胁迫比较
敏感的一个蛋白质或多肽，并且在枣的抗盐性机制中也发挥比较重要的作用。其它受盐胁迫抑制而
相对丰度降低比较大的蛋白质点还有 2498、2496、287、647、1526、1527、2550、492等。

关键词：枣；盐胁迫反应；比较蛋白组学；双向电泳
中图分类号：S 665.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2495-01