全 文 ：园 艺 学 报 ， （增刊）： 2011 38 2486 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com

收稿日期：2011–08–01
基金项目：江苏省农业科技支撑项目（BE2010326）
*通信作者（E-mail：fanggg@njau.edu.cn；Tel：025-84399069）
葡萄microRNA156 及其靶基因vv-SPL9 在冬芽
二次成花过程中的表达特性分析
王 晨1，张演义2，房经贵1,*，宋长年1，刘 洪1,3，王西成1
（1南京农业大学园艺学院，南京 210095；2聊城大学园艺学院，山东聊城 252000；3上海农业科学院生物技术研究
所，上海 201106）
利用‘藤稔’葡萄为试材，对葡萄 microRNA156（vv-miR156）及其靶基因 vv-SPL9 在冬芽二
次成花过程中的表达特性及其作用机制进行了研究，对于深入了解葡萄花发育的分子机理以及对其
表达的合理调控等具有重要的理论指导意义。
所用材料是南京农业大学江浦实验基地种植的树龄为 7年生的‘藤稔’葡萄植株；促进冬芽成
花的措施是采取第 9 或 10 节位摘心和抹去 1 ~ 6 节位夏芽处理；通过 RLM-5′-RACE 技术验证
vv-miR156对其靶基因 vv-SPL9的作用方式；利用荧光定量 RT-PCR技术检测它们在 3次摘心处理
后的冬芽以及对照冬芽的各生长时期表达水平的变化情况。
比较 3 次摘心处理后的冬芽与对照冬芽生长发育情况发现，第 1、第 2 次处理及对照组中未有
花芽分化，第 3次处理能够进行花芽分化并形成花序。RLM-5′-RACE技术检测结果表明，vv-miR156
介导其靶基因 vv-SPL9裂解，并且该靶基因被 vv-miR156剪切的位点在第 10和 11位之间。荧光定
量 RT-PCR 结果表明，vv-miR156 在第 3 次处理中表达水平下降的趋势均最明显，花序中有最低表
达，并且该 miRNA 表现为依次缓慢降低；靶基因 vv-SPL9 在冬芽成花过程中的表达水平呈现出与
其 miRNAs基本上相反的变化趋势，表明 vv-miR156在冬芽成花过程中负调控其靶基因。上述结果
表明第 3 次摘心处理对葡萄冬芽二次成花过程中的促花效果最明显；葡萄 miR156 通过介导其靶基
因 vv-SPL9的裂解调控其靶基因的表达，从而影响葡萄冬芽的二次成花。

关键词：葡萄；microRNAs；靶基因；冬芽；荧光定量 RT-PCR；RNA连接酶介导的 5′-RACE
中图分类号：S 663.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2486-01