全 文 ：园 　　艺 　　学 　　报 32卷
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收稿日期 : 2004 - 11 - 11; 修回日期 : 2005 - 04 - 29
基金项目 : 重庆文理学院 (原渝西学院 ) 重点科研项目 ( Z2004SK12)
尾巨桉的离体培养和快速繁殖
刘奕清 　王大平 　熊运海　 (重庆文理学院生命科学系 , 重庆 402160)
In V itro Culture and Rap id Propaga tion of‘T13’ ( Euca lyptus uorphylla ×
E. grandis)
L iu Yiqing, W ang Dap ing, and Xiong Yunhai (D epartm ent of the L ife and Science, Chongqing U niversity of A rts and
Sciences, Chongqing 402160, Ch ina)
关键词 : 桉树 ; 尾巨桉 ; 离体培养 ; 快速繁殖
中图分类号 : S 68　　文献标识码 : A　　文章编号 : 05132353X (2005) 0420672201
材料与方法
尾巨桉 ‘T13’ ( Eucalyptus uorphy lla ×E. grand is) 是尾叶桉与巨桉的杂交种。作者对其进行离体快繁技术研究 ,
旨在为其广泛应用和种质资源的试管保存提供基础。
于生长季节在福建省漳州市林业组培中心采穗圃取尾巨桉 ‘T13’的半木质化嫩枝 , 去除叶片 , 剪成单芽茎段 ,
用自来水冲洗 15 m in, 015%洗衣粉溶液浸泡 15 m in, 再用自来水冲洗干净。将材料分别放入无菌塑料空杯中 , 每杯放
15～20个 , 75%酒精浸泡 30 s, 011%的升汞消毒 10～12 m in, 最后用无菌水冲洗 3～5次 , 接种到诱导培养基中。诱
导腋芽萌发和增殖继代的基本培养基为改良 MS (硝酸铵减为 1 /3, 简称 EU ) , 生根的基本培养基为 1 /2MS, 附加不
同浓度的 BA、 IBA、NAA、活性炭 (AC) , 蔗糖 3% , 琼脂 510 g·L - 1 , pH 610。诱导培养利用室内自然散射光 (不
开灯 ) , 增殖继代、壮苗生根培养 , 光照 12 h /d, 光强 1 500～2 000 lx, 温度 (26 ±3) ℃, 环境湿度 40% ～70%。
结果与分析
将外殖体接种在 EU +BA 115 mg·L - 1 (单位下同 ) + NAA 012、EU + BA 110 + NAA 012、EU + BA 015 + NAA
012的诱导培养基中 , 培养诱导 30 d。结果表明 , 3种培养基均能诱导切段膨大产生愈伤组织 , 以 EU +BA 015 +NAA
012效果最佳 , 15 d后切段基部开始膨大并陆续出现愈伤组织 , 同时腋芽萌动 , 40 d后芽苗长至 115 cm。把获得的无
菌芽苗接种于增殖培养基中 , 每 25 d继代 1次。结果表明 , 以 EU +BA 015 +NAA 012综合增殖效果最好 , 每个外植
体可产生 4～5个芽 , 易于转接 ; 以 EU +BA 210 +NAA 012的增殖系数最大 , 但芽苗细弱 , 且连续培养多代之后芽苗
叶片变尖、叶形扭曲 , 产生变异苗。BA对不定芽的增殖有明显的促进作用 , 随 BA浓度增加其增殖系数增大。
把有 3～4个芽苗的增殖团块接种于添加 AC的继代壮苗培养基中 , 每 18～23 d继代 1次 , 结果表明 , 在没有植
物生长调节剂的 EU中添加 011% ～013%的 AC对壮苗有显著的促进作用 , 但是连续培养 4～5代后丛生芽苗开始退
化 , 变得非常细弱 , 因而在生产工艺上要及时补充增殖芽的数量。
把经过继代的高 ≥115 cm、茎粗 110 mm的再生芽苗接种于生根培养基 , 培养 8～9 d后茎基部开始膨大 , 10～
12 d陆续长根 , 15 d后 3种培养基均可诱导生根。根白色健壮 , 长 1～2 cm, 每株有 4～5条 , 生根率达 95%以上。
把已长根的试管苗移入温室炼苗 2～3 d, 取出洗净培养基 , 移栽在装有木屑 +五色土 (体积比 2∶1) 的基质中 ,
前 10 d每天喷水 3～4次 , 之后适量浇水 , 每 7 d浇灌 011%的 N、P、K进口复合肥 1次 , 培养 50～60 d即可出圃。
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