全 文 ：园 艺 学 报 2001, 28 ( 3) : 265~ 267
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期: 2000- 12- 18; 修回日期: 2001- 04- 06
酸枣及 17个枣品种叶片过氧化物酶同工酶的研究
苏冬梅 陈书君 毕方铖
(中南林学院资源与环境学院, 株洲 412006)
摘 要: 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳, 分析了酸枣和 17 个枣品种叶片过氧化物酶同工
酶, 并运用相似关系 R- 链连接法进行了模糊聚类分析划分了类群, 探讨类群之间的亲缘关
系, 从分子水平的表型证实了酸枣是栽培枣的原生种, 其它类群分化程度较大, 进化历史较
长, 但都与酸枣有着密切的亲缘关系。
关键词: 枣; 酸枣; 过氧化物酶同工酶; 原生种; 亲缘关系
中图分类号: S 665. 1 文献标识码: A 文章编号: 0513353X ( 2001) 03026503
1 目的、材料与方法
我国有关枣品种的分类方法尚未统一, 迄今对于不同品种间的亲缘演化关系仍知之甚
少, 既能反映品种间亲缘关系又简单实用的枣品种分类系统尚未建立1 。在 DNA分子标
记技术还没有变得经济、简便以前, 运用同工酶电泳分析仍然可以获得有价值的亲缘信
息。我们分析了酸枣和 17个枣品种成熟叶片过氧化物酶同工酶, 并运用模糊聚类分析的
相似关系 R- 链连接法2 进行了分类, 试图从分子水平上探索它们之间的亲缘关系。试材
采自湖南茶陵县枣树乡枣树品种园。取 14年生树采果后 ( 10月 2日) 的成熟叶片制备酶
液。称取 1 g 叶片于冷研钵中, 加入稀释 4倍的浓缩胶缓冲液 2 mL 和 0. 5%的 PVP 溶液
0. 05 mL, 研成匀浆, 10 000 ! g离心 15 min, 上清液即为酶液, 置冰箱备用。电泳方法参
考文献 2 , 采用联苯胺染色法。酶谱相似系数 S= 2w/ ( a+ b) ! 100%, 其中 a、b和 w
分别代表 a树种, b树种和 a、b两树种相同的酶带数。
2 结果与分析
2. 1 过氧化物酶同工酶谱及各酶带相对迁移率 (Rf)
从图 1可以看出, 18种枣成熟叶片过氧化物酶同工酶谱都有相同的 A带区的 b、c、d
带, B带区的 e、f、g带, C带区的 t带, D带区的 d、e带, 这是枣属叶片的专一酶谱或
酶带。各品种间的差异主要在 C区, 其次在 B、D、A区, 这反映枣叶片过氧化物酶同工
酶的品种专一性。
2. 2 相似系数矩阵表
相似系数 S以小数表示, 并求得相似矩阵如表 1。从相似系数矩阵表可以看出: 枣与
酸枣的相似系数值均在 61%以上, 说明这些枣品种与酸枣有着十分密切的亲缘关系。
2. 3 模糊聚类
由表 1中的数据进行聚类, 得聚类图。从图 2 可见, 取 4= 0. 84时, 聚类为好, 18
种枣聚为 8类, 分别是∀, 酸枣; #, 板枣、骏枣、鸡蛋枣、壶瓶枣、官滩枣、中南林优
6、梨枣; ∃, 团枣、园枣、尖枣; %, 无核小枣; &, 不落酥、中南林优 2; ∋ , 美密
枣; ( , 灌阳长枣、义乌大枣; ) , 灰枣。此结果与其它生物学特性较为吻合, 故聚合水
平为 0. 84。
根据Garua 等3 所提出的同工酶带越多的品系越进化, 可以认为酸枣是较为原始的
种, 其它 7类分化程度较大, 较为进化。
过氧化物酶同工酶谱与枣果形态并不总是吻合, 这是由于一种性状往往不是单一基因
决定的。一种或几种同工酶可能参与了某种形态建成, 也可能与该性状无关。
图 1 酸枣和 17个枣品种过氧化物酶同工酶谱及各酶带的 Rf值
1. 酸枣, 2. 板枣, 3. 骏枣, 4. 鸡蛋枣, 5. 官滩枣, 6. 美密枣, 7. 中南林优 6, 8. 团枣, 9. 园枣, 10. 尖枣,
11. 无核小枣, 12. 梨枣, 13. 不落酥, 14. 壶瓶枣, 15. 灌阳长枣, 16. 灰枣, 17. 义乌大枣, 18. 中南林优 2。下同。
Fig. 1 The peroxidase isoenzyme zymogram of Ziziphus spinosus and 17 varieties of Z. jujuba
1. Z. spinosus , 2. Banzao, 3. Junzao, 4. Jidanzao, 5. Guantanzao, 6. Meimizao, 7. Zhongnanlinyou6, 8. Tuanzao,
9. Yuanzao, 10. Jianzao, 11. Wuhexiaozao, 12. Lizao, 13. Buluosu, 14. Hupingzao, 15. Guanyangchangzao,
16. Huizao, 17. Yiwudazao, 18. Zhongnanl inyou2. The same below.
266 园 艺 学 报 28卷
表 1 相 似 系 数 矩 阵 表
Table 1 The matrix table of similarity coefficient
R 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
1 1
2 0. 80 1
3 0. 77 0. 86 1
4 0. 76 0. 85 0. 76 1
5 0. 71 0. 82 0. 74 0. 91 1
6 0. 71 0. 76 0. 74 0. 79 0. 76 1
7 0. 79 0. 78 0. 73 0. 97 0. 88 0. 81 1
8 0. 80 0. 82 0. 80 0. 79 0. 82 0. 76 0. 75 1
9 0. 80 0. 82 0. 80 0. 79 0. 82 0. 76 0. 75 1. 00 1
10 0. 80 0. 82 0. 80 0. 79 0. 82 0. 76 0. 75 1. 00 1. 00 1
11 0. 67 0. 65 0. 63 0. 67 0. 65 0. 65 0. 69 0. 65 0. 65 0. 65 1
12 0. 67 0. 78 0. 76 0. 86 0. 89 0. 78 0. 81 0. 72 0. 72 0. 72 0. 61 1
13 0. 73 0. 71 0. 74 0. 79 0. 71 0. 76 0. 81 0. 71 0. 71 0. 71 0. 65 0. 72 1
14 0. 83 0. 85 0. 76 0. 81 0. 81 0. 79 0. 84 0. 79 0. 79 0. 79 0. 67 0. 74 0. 73 1
15 0. 73 0. 76 0. 68 0. 72 0. 70 0. 70 0. 80 0. 70 0. 70 0. 70 0. 70 0. 77 0. 76 0. 78 1
16 0. 71 0. 74 0. 78 0. 71 0. 69 0. 69 0. 73 0. 74 0. 74 0. 74 0. 74 0. 70 0. 80 0. 71 0. 79 1
17 0. 71 0. 74 0. 67 0. 76 0. 69 0. 69 0. 73 0. 69 0. 69 0. 69 0. 74 0. 76 0. 74 0. 76 0. 95 0. 78 1
18 0. 75 0. 78 0. 76 0. 80 0. 72 0. 67 0. 82 0. 72 0. 72 0. 72 0. 78 0. 68 0. 89 0. 74 0. 82 0. 81 0. 81 1
图 2 酸枣及 17个枣品种模糊聚类图
Fig. 2 Fuzzy cluster dendrogram of Z. spinosus and 17 varieties of Z. jujuba
参考文献:
1 刘孟军. 枣属植物分类学研究进展. 园艺学报, 1999, 26 (5) : 302~ 308
2 苏冬梅. 柿属君迁子和湖南九个乡土柿品种过氧化物同工酶的研究. 武汉植物学研究, 1991, 9 ( 3) : 253~ 258
3 Garia A, Tsuneuaki K. Electrophoret ical studies on peroxidase isozymes. Japanese Journal of Genetics, 1977, 52: 284~ 286
A Study on Peroxidase Isoenzymes of Leaves in Ziziphus spinosus Hu. and Seven
teen Varieties of Z. juj uba Mill.
Su Dongmei, Chen Shujun, and Bi Fangcheng
( College of Resource and Environment, Central South Forestry University , Zhuzhou 412006)
Abstract: Peroxidase isoenzymes of leaves in Ziz iphus spinosus Hu. and 17 varieties of Z. jujuba Mill. were
analyzed by means of perpendicularplate type of polyacrylamide gel electrophoresis. Fuzzy cluster analysis was conduc
ted based on the similarity coefficients of the isoenzyme zymogram, using the Rchain link method of similarity relation
ship. Z . spinosus Hu. and 17 varieties of Z. juj uba Mill. were classified into several groups. and the relationship
among the groups was discussed. From the phenotype of molecular enzyme level, it has been proved that Z. spinosus is
the primeval species of the cultivated Z. jujuba, which is the result of a longtime evolution. But both species are closely
related to each other.
Key words: Ziziphus j uj uba Mill. ; Ziz iphus spinosus Hu. ; Peroxidase isoenzymes; Primeval species; Phyloge
netic relationship
2673期 苏冬梅等: 酸枣及 17个枣品种叶片过氧化物酶同工酶的研究