全 文 ：武汉植物学研究 2002, 20 (6) : 467～ 469
J ourna l of W uhan B otan ica l Resea rch
桑枝提取物及抗炎作用研究
王　蓉　卢笑丛　王有为Ξ
(中国科学院武汉植物研究所, 武汉　430074)
摘　要: 桑枝 (R am u lus m ori)乙醇提取物经不同有机溶剂萃取、浓缩得到石油醚提取物 (É )、乙酸乙酯提取物 (Ê )
和正丁醇提取物 (Ë )三部分, 分别进行定性分析, 并灌胃给药进行抗炎实验。结果显示: É 和Ë 的 0130 gökg 组对二
甲苯致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用; É 的 0115 gökg 组有明显的抑制毛细血管通透性的作用。
关键词: 桑; 桑枝提取物; 抗炎
　　中图分类号: R 931. 71　　　　　文献标识码: A 　　　　　文章编号: 10002470X (2002) 0620467203
An tiinf lammatory Activ ity of the Extracts of R am u lus m or i
W AN G Rong, LU X iao2Cong, W AN G You2W eiΞ
(W uhan Institu te of B otany , T he Ch inese A cad emy of S ciences,W uhan　430074, Ch ina)
Abstract: T h ree differen t parts are ob ta ined from ethano l ex tract of R am u lus m ori, w h ich are ex2
t racts of petro leum ether (É ) , E tOA c (Ê ) and n2BuOH (Ë ) , respect ively. T he qualita t ive
analysis of ex tracts is done. Fu rthermo re, the an t iinf lamm ato ry act ivit ies of the ex tracts are
studied. T he resu lts suggest tha t the part É show s obviou s an t iinf lamm ato ry act ivity.
Key words: M orus a lba L. ; T he ex tracts of R am u lus m ori; A n t iinf lamm ato ry
　　桑科植物桑枝的药理作用在我国很早就有医书
记载, 其功效主要为祛风湿, 利关节, 行水, 临床上用
于治疗风寒湿痹, 四肢拘挛, 脚气浮肿[1 ]。近年来, 关
于桑枝抗炎的药理研究已有初步的报道[2 ]。为了寻
找其抗炎组分, 我们对桑枝进行了粗提、分离, 鉴识
了各提取部分的化合物类型, 并对其抗炎组分进行
了初筛。
1　材料和方法
1. 1　实验材料
受试样品的制备: 桑枝 215 kg, 2000 年 11 月采
自武汉植物研究所植物园, 经本所分类室鉴定为
M orus a lba L. 的嫩枝。将桑枝切碎, 用 95% 乙醇回
流提取, 减压浓缩, 所得浸膏加水稀释, 依次用石油
醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取, 各部分萃取液过滤, 减压
浓缩, 干燥后得三部分: 石油醚提取物É (23170 g)、 乙酸乙酯提取物Ê ( 37150 g )、正丁醇提取物Ë(19130g)。阳性对照药: 阿司匹林, 江苏淮阴华新药业有限公司产品, 批号为 20000805。阴性对照药: 对照 1 组给予同容量生理盐水, É样品不溶于水, 用吐温280 助溶, 用吐温280 配制的生理盐水作为对照 2 组。试剂: 二甲苯、伊文斯兰、冰醋酸、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、三氯化铝、浓硫酸、乙醇。以上试剂均为分析纯。实验动物: 昆明种小鼠, 雌雄均有, 体重 21～25 g, SPF 级, 合格证号为医动字第 192082 号, 湖北省实验动物研究中心提供。实验环境: SPF 级, 环境设施合格证号为医动字第 192074 号。Ξ 收稿日期: 2002206209, 修回日期: 2002208223。作者简介: 王蓉 (1974- ) , 女, 硕士研究生, 从事天然活性成分研究。通讯作者 (Em ail: w yw @ ro se. w h iob. ac. cn)。
实验仪器: 直径 9 mm 打孔器, 751 分光光度
计, 3650 ∼ 长波紫外分析仪。
1. 2　实验方法
1. 2. 1　桑枝各提取部分的定性分析　层析条件: 高
效薄层硅胶板 310 cm ×915 cm。É 用氯仿÷甲醇
(10÷ 1) 展开, Ê 用氯仿÷甲醇 (5÷ 1) 展开, Ë 用氯仿÷
甲醇÷水 (7÷3÷0. 5)展开。显色剂: 1% 三氯化铝乙醇
液、5% 浓硫酸乙醇液。3 个样品展开后, 用 1% 三氯
化铝乙醇液显色, 置紫外分析仪 365 nm 下观察荧
光斑点。若无荧光显示, 则改用通用显色剂 5% 浓硫
酸乙醇液观察斑点情况。
1. 2. 2　桑枝提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制
作用　将雄性昆明种小鼠 90 只随机分为 9 组, 每组
10 只。3 种受试样品分别设低剂量组 0115 gökg 和
高剂量组 0130 gökg 及生理盐水、吐温280—生理盐
水、阿司匹林共 9 个实验组。各组灌胃给药, 连续 3
天, 于最后一次给药 2 h (阿司匹林给药 1 h) 后, 按
文献 [ 3 ]的方法, 将二甲苯 0105 mL 涂于小鼠右耳
正反两面, 15 m in 后颈椎脱臼处死, 用直径 9 mm 打
孔器在左右两耳廓相同部位打孔取样, 及时称重, 按
下式计算抑制率及肿胀度, 用 t 检验进行统计学处
理, 并与对照组进行比较。
抑制率= (对照组肿胀度—给药组肿胀度)÷对
照组肿胀度×100%
肿胀率= (右耳片重—左耳片重)÷左耳片重
1. 2. 3　桑枝提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的
影响　将 70 只昆明种小鼠按性别不同分为 7 组, 每
组 10 只, 雌雄各半, 按上述方法分组给药, 各组于最
后一次给药 2 h (阿司匹林给药 30 m in) 后, 按文献
[ 3 ]的方法, 尾静脉注射 1% 伊文斯兰 (40 m gökg) ,
同时腹腔注射 0. 7% 冰醋酸 0. 2 mL , 15 m in 后颈椎
脱臼处死小鼠, 并注入 5 mL 生理盐水于小鼠腹腔,
抽取腹腔液于 4°C 放置 6 h, 取其上清液, 用 751 分
光光度计 (590 nm ) 比色, 比较给药组与对照组间的
差异, 按下式计算抑制率, 进行统计学 t 检验。
抑制率= (对照组伊文斯兰渗出量—给药组伊
文斯兰渗出量)÷对照组伊文斯兰渗出量×100%
2　结果与讨论
2. 1　薄层层析检测结果
3 个样品展开后, 用 1% 三氯化铝乙醇液显色,
置紫外分析仪 365 nm 下观察荧光斑点。É 无荧光
显示, 用 5% 浓硫酸乙醇液显色, 有深紫色, 橘黄色
斑点, 示石油醚部分有甾醇或萜类物质。Ê 除了黄色
斑点外, 还有亮蓝紫色荧光, 示乙酸乙酯部分有黄
酮, 香豆素类成分。Ë 显示出大量的亮黄及黄绿色斑
点, 示正丁醇提取物主要含黄酮类化合物。据文献
[ 1 ]报道, 桑枝中主要含有黄酮类, 香豆素类, 萜类及
甾醇类化合物, 且桑中的黄酮具有较强的抗氧化作
用[4 ] , 并已认为此类化合物的药理作用与其抗氧化
作用有关[5 ]。甾醇及萜类物质也有较强的生物活性。
因此, 究竟那一类或哪几类化合物是桑枝抗炎的活
性成分, 需分离其有效单体并加以考证, 其抗炎作用
机制有待今后深入研究。
2. 2　桑枝提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用
桑枝石油醚提取物和正丁醇提取物 0. 30 gökg
剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用,
抑制率分别为 35181% 和 42114% , 分别与阴性对照
组 2、组 1 比有显著差异 (P < 0105) ; 乙酸乙酯提取物
各剂量组和阴性对照组 1 的肿胀率值及两耳廓差值无显
著差异(P > 0105) , 因此认为乙酸乙酯提取物对二甲苯致
小鼠耳肿胀没有明显的抑制作用, 结果见表1。
表 1　桑枝提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用
T able 1　Effect of the ex tracts of R am u lus m ori on the xylene2induced ear oedem a in m ice (X{ ±SD )
组别
Group
剂量 (gökg)
Do se
两耳廓重量差值 (m g)
M ean increase in ear w eigh t
抑制率 (% )
Inh ib it ion
肿胀率
Ear sw elling
生理盐水 N S - 26. 32±8. 19 1. 38±0. 36
吐温2生理盐水 Tw eens2N S - 26. 81±8. 23 1. 41±0. 47
阿司匹林 A sp irin 0. 20 16. 55±9. 173 37. 12 0. 79±0. 493 3É 　　　 0. 30 17. 21±9. 433 35. 81 0. 84±0. 473É 　　　 0. 15 20. 88±8. 23 22. 12 1. 05±0. 44Ê 　　　 0. 30 20. 98±9. 14 21. 75 1. 14±0. 37Ê 　　　 0. 15 19. 33±8. 75 27. 97 1. 09±0. 49Ë 　　　 0. 30 15. 23±11. 913 3 42. 14 0. 79±0. 633 3Ë 　　　 0. 15 23. 51±14. 99 10. 71 1. 30±0. 88
　　3 与吐温280—生理盐水组比较, P < 0. 05; 3 3 与生理盐水组比较, P < 0. 05。3 Compared w ith tw eens2N S group , P < 0. 05; Compared w ith N S group , 3 3 P < 0. 05.
864 武 汉 植 物 学 研 究　　　　　　　　　　　　　　　　第 20 卷　　
2. 3　桑枝提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影
响
石油醚提取物 0115 gökg 剂量组有显著抑制毛
细血管通透性的作用 (P < 0105)。正丁醇提取物的
各剂量组虽有一定的抑制毛细血管通透性的趋势,
但与对照组 1 比无显著差别 (P > 0105) , 见表 2。
表 2　桑枝提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
T able 2　Effect of the ex tracts of R am u lus m ori
on the penetrab ility of m ice’s b lood cap illary (X{ ±SD )
组别
Group
剂量
(gökg)
Do se
伊文斯兰渗出量
A bso rbance
抑制率 (% )
Inh ib it ion
rate
生理盐水 N S - 0. 155±0. 15
吐温2生理盐水
Tw eens2N S - 0. 125±0. 08
阿司匹林 A sp irin 0. 20 0. 084±0. 02 45. 8É 0. 30 0. 087±0. 03 30. 4É 0. 15 0. 06±0. 033 52. 0Ë 0. 30 0. 091±0. 04 41. 3Ë 0. 15 0. 093±0. 06 40. 0
　　3 与吐温280—生理盐水组比较, P < 0. 05。3 Compared w ith tw eens2N S group , P < 0. 05.
《本草撮要》云:“桑枝, 功专去风湿拘挛。”可见,
从古至今中医将其作为治疗关节炎的常用药。关节
炎属祖国医学痹症范畴, 多为肝肾亏损, 湿热之邪侵
袭, 其主要病理变化为局部关节结缔组织血液循环
障碍渗出, 而致血脉瘀滞, 关节肿痛。《内经》曰:“诸
风掉眩, 皆属于肝。”桑枝归肝经, 性平味苦, 用于治
湿热痹方四妙汤中利四肢关节以祛风通络, 痹症自
除, 获良效; 用于经验方桑枝膏丸中调肝利湿, 用于
肝血不足, 湿热之邪趁虚而入所致气血不畅而发痛
麻之痹。本药理实验结果为桑枝的这种传统主治提
供了一定的理论依据。此外, 其镇痛、免疫抑制等药
效有待进一步研究。
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964　第 6 期　　 　　　　　　　　　　　　王 蓉等: 桑枝提取物及抗炎作用研究