全 文 ：植物科学学报　 ２０１３ꎬ ３１(６): ５９０~ ５９５
Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
　 　 ＤＯＩ:１０􀆰 ３７２４ / ＳＰ􀆰 Ｊ􀆰 １１４２􀆰 ２０１３􀆰 ６０５９０
乌桕叶片及其乳汁中酚类物质比较分析
顾 雪１ꎬ２ꎬ 王 毅１∗ꎬ 任明迅１ꎬ 高少雄３ꎬ 朱 琳４ꎬ 丁建清１
(１. 中国科学院水生植物与流域生态重点实验室ꎬ 中国科学院武汉植物园ꎬ 武汉 ４３００７４ꎻ ２. 中国科学院大学ꎬ 北京 １０００４９ꎻ
３. 山东农业大学生命科学学院ꎬ 山东泰安 ２７１０１８ꎻ ４. 山东农业大学植物保护学院ꎬ 山东泰安 ２７１０１８)
摘　 要: 大戟科乌桕(Ｔｒｉａｄｉｃａ ｓｅｂｉｆｅｒａ)是我国南方重要的经济和绿化树种ꎮ 分析了乌桕叶片乳汁中单宁和类黄
酮的含量ꎬ 并与叶片中单宁和类黄酮的含量进行对比ꎮ 研究发现ꎬ 在乳汁和叶片中共同检测到的 ２ 种单宁和 ２
种类黄酮物质ꎬ 它们在叶片中的浓度远远高于乳汁中的浓度ꎮ 这表明乌桕中的单宁和类黄酮这类防御物质主要
存在于叶片中ꎮ 乌桕各种群间单宁与类黄酮含量都有显著差异ꎬ 这可能是不同种群所处的生态环境以及面临植
食昆虫的不同而导致的ꎮ
关键词: 乌桕ꎻ 乳汁ꎻ 单宁ꎻ 类黄酮ꎻ 抗性
中图分类号: Ｑ９４６􀆰 ８　 　 　 　 　 文献标识码: Ａ　 　 　 　 　 文章编号: ２０９５￣０８３７(２０１３)０６￣０５９０￣０６
　 　 　 收稿日期: ２０１２￣ １２￣ １１ꎬ 修回日期: ２０１３￣ ０３￣ １７ꎮ
　 基金项目: 国家重点基础研究发展规划(９７３计划)(２０１２ＣＢ１１４１０４)ꎮ
　 作者简介: 顾雪(１９９０￣)ꎬ 女ꎬ 硕士研究生ꎬ 研究方向为入侵生物学(Ｅ￣ｍａｉｌ: ｗａｎｙｕ２１３＠１６３􀆰 ｃｏｍ)ꎮ
　 ∗ 通讯作者(Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ. Ｅ￣ｍａｉｌ: ｗａｎｇｙｉｗａｎｇ＠ａｌｉｙｕｎ􀆰 ｃｏｍ)ꎮ
Ｐｈｅｎｏｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｉｎ Ｌｅａｖｅｓ ａｎｄ Ｌａｔｅｘ ｏｆ Ｔｒｉａｄｉｃａ ｓｅｂｉｆｅｒａ
ＧＵ Ｘｕｅ１ꎬ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｙｉ１∗ꎬ ＲＥＮ Ｍｉｎｇ￣Ｘｕｎ１ꎬ ＧＡＯ Ｓｈａｏ￣Ｘｉｏｎｇ３ꎬ ＺＨＵ Ｌｉｎ４ꎬ ＤＩＮＧ Ｊｉａｎ￣Ｑｉｎｇ１
(１􀆰 Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｑｕａｔｉｃ Ｂｏｔａｎｙ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｓｈｅｄ Ｅｃｏｌｏｇｙꎬ Ｗｕｈａｎ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｇａｒｄｅｎꎬ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ
Ｗｕｈａｎ ４３００７４ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２􀆰 Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００４９ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３􀆰 Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｔａｉａｎꎬ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ２７１０１８ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ４􀆰 Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｔａｉａｎꎬ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ２７１０１８ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｒｉａｄｉｃａ ｓｅｂｉｆｅｒａ (Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ) ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｅｃｏｎｏｍｉｃ ａｎｄ ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ ｔｒｅｅ
ｓｐｅｃｉｅｓ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ􀆰 Ｈｅｒｅꎬ ｗｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔａｎｎｉｎｓ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ
ｂｏｔｈ ｔａｌｌｏｗ ｌｅａｖｅｓ ａｎｄ ｌａｔｅｘ􀆰 Ｗｅ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｗｏ ｔａｎｎｉｎｓ ａｎｄ ｔｗｏ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ
ｌａｔｅｘ ｗｅｒｅ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｌｅａｖｅｓ􀆰 Ｔｈｉｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｍｏｓｔ ｔａｎｎｉｎｓ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｅｘｉｓｔｅｄ
ｉｎ ｔａｌｌｏｗ ｌｅａｖｅｓ􀆰 Ｗｅ ａｌｓｏ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔａｎｎｉｎｓ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｄ ａｍｏｎｇ ｓｅｖｅｎ
ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓꎬ ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｂｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓ ａｎｄ ｈｅｒｂｉｖｏｒｅｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｔｒｉａｄｉｃａ ｓｅｂｉｆｅｒａꎻ Ｌａｔｅｘꎻ Ｔａｎｎｉｎｓꎻ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓꎻ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
乌桕(Ｔｒｉａｄｉｃａ ｓｅｂｉｆｅｒａ (Ｌ􀆰 ) Ｒｏｘｂ􀆰 )为大戟
科落叶乔木ꎬ 主要分布于我国黄河以南各省区ꎬ 是
重要的油料树种和绿化树种ꎮ 乌桕种子中提取的桕
脂和梓油都被广泛应用于能源和化工产业ꎬ 其根、
叶和树皮具有重要的药用价值ꎬ 乌桕木材可作为家
具和雕刻等用材ꎮ 此外ꎬ 乌桕树形整齐ꎬ 春秋季叶
色红艳夺目ꎬ 是园林绿化中重要的护堤、 庭荫及行
道树种[１]ꎮ
乌桕叶片含有多种酚类、 萜类化学物质[２－５]ꎬ
其中的单宁、 类黄酮等物质具有重要的抑菌和抗虫
作用[６－８]ꎮ 单宁主要通过抑制昆虫的消化吸收能力
来防御昆虫[９]ꎬ 而类黄酮的防御功能主要体现在
过滤紫外线、 刺激或抑制取食以及化感和毒性作用
等方面[１０ꎬ１１]ꎮ 但是关于乌桕乳汁化学成分的研究
还鲜有报道ꎮ 乳汁是从植物受到机械损伤或植食者
取食的位置流出的液体[１２]ꎮ 被子植物中大约有 ４０
个科的 ２万多个物种含有乳汁ꎬ 常见有罂粟科、 桑
科、 大戟科、 番木瓜科、 夹竹桃科、 旋花科、 菊
科、 桔梗科等[１３]ꎮ 植物乳汁中含有的各种次生化
合物如类黄酮、 单宁、 萜类、 生物碱等ꎬ 以及各种
蛋白质类如蛋白酶、 几丁质酶和葡萄糖苷酶等ꎬ 对
多种植食性昆虫都有毒性[１２－１６]ꎬ 是植物的一种重
要防御方式ꎮ 但涉及乌桕叶片乳汁化学成分及其防
御作用的研究报道较少ꎮ
本研究通过对国内乌桕不同种群中 ２种酚类物
质(单宁和类黄酮)的含量进行分析ꎬ 探索各个种
群乌桕叶片和叶片乳汁中化学物质的差异ꎬ 同时研
究乌桕乳汁与叶片在防御昆虫方面的作用ꎮ 该研究
结果对进一步揭示乌桕体内的次生代谢物质及其抗
虫作用将具有重要意义ꎮ
１　 材料与方法
１􀆰 １　 材料
２０１１年秋季ꎬ 我们采集到 ７ 个乌桕(Ｔｒｉａｄｉｃａ
ｓｅｂｉｆｅｒａ )种群的种子ꎬ 它们分别来自贵州桃花岛、
广西桂林、 浙江杭州、 江苏南京、 江西鹰潭、 四
川青城山和广东阳山ꎮ 用洗衣粉溶液浸泡种子以
去掉种子外的蜡质层ꎬ 然后将种子在 ４℃条件下层
积 ４０ ｄ[７]ꎮ ２０１２ 年 ４ 月ꎬ 将种子放在温室中萌
发ꎬ 后将幼苗移栽到苗盆中ꎬ 每株植物罩上透明的
纱网以隔绝昆虫ꎮ
２０１２年 ７ 月进行乳汁、 叶片采集ꎮ 从每个种
群中随机挑选 ３盆大小一致的乌桕幼苗ꎮ 用灭过菌
的剪刀从叶片基部剪下ꎬ 用玻璃毛细管吸取流出的
乳汁ꎬ 然后移入灭过菌的微量离心管中ꎮ 一株苗上
收集的所有叶片乳汁都放在一个称过重的离心管
中ꎬ 用分析天平称取离心管中乳汁的重量ꎮ 乳汁样
品放在冰箱－２０℃条件下保存备用ꎮ 采集完乳汁的
叶片用信封收集ꎬ 烘干后用于化学物质分析ꎮ
１􀆰 ２　 方法
采用高效液相色谱法对乌桕叶片乳汁和叶片的
化学物质进行分析ꎮ 我们主要分析其中 ５种类黄酮
单体化合物 (异槲皮苷、 山奈苷、 槲皮苷、 槲皮
素、 山奈酚)和 ４ 种单宁类化合物(没食子酸、 单
宁酸、 儿茶素、 鞣花酸)的含量ꎮ 分析仪器为 Ｄｉ￣
ｏｎｅｘ ｕｌｔｉｍａｔｅ ３０００ ＨＰＬＣ 仪(美国 Ｄｉｏｎｅｘ 公司)ꎬ
所用色谱柱为 ＺＯＲＢＡＸ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８(４􀆰 ６ ｍｍ×
２５０ ｍｍꎬ ５ μｍ)(美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司)ꎮ
１􀆰 ２􀆰 １　 样品处理
将乌桕叶片乳汁溶解在 ４００ μＬ 的过膜水中ꎬ
稀释 １０ 倍后过 ０􀆰 ４５ μｍ 的水系滤膜ꎬ 取 １００ μＬ
滤液进行 ＨＰＬＣ分析ꎮ
将烘干后的乌桕叶片用研钵磨碎ꎮ 准确称取
５０ ｍｇ 样品ꎬ 用甲醇 ∶ ０􀆰 １％磷酸(１ ∶ １ Ｖ / Ｖ)萃
取 ２４ ｈꎬ ２５００ ｒ / ｍｉｎ 离心 ３０ ｍｉｎꎬ 取上清液过
０􀆰 ４５ μｍ的有机滤膜ꎮ 取 １００ μＬ 滤液直接进行
ＨＰＬＣ分析ꎮ
１􀆰 ２􀆰 ２　 色谱条件
单宁类物质: 流动相 Ａ 为甲醇ꎬ Ｂ 为 ０􀆰 １％磷
酸ꎻ 梯度洗脱程序为: ０~７􀆰 ５ ｍｉｎꎬ Ａ ∶ Ｂ＝３０ ∶ ７０ꎻ
８~１７ ｍｉｎꎬ Ａ ∶ Ｂ ＝５５ ∶ ４５ꎻ 流速为 １􀆰 ０ ｍＬ / ｍｉｎꎻ
检测波长: 没食子酸、 单宁酸和儿茶素为 ２７９ ｎｍꎬ
鞣花酸为 ２６０ ｎｍ[７]ꎮ
类黄酮类物质: 流动相 Ａ为甲醇ꎬ Ｂ为 ０􀆰 ０４％
磷酸ꎬ 梯度洗脱程序为: ０~１０ ｍｉｎꎬ Ａ ∶ Ｂ＝４８ ∶ ５２ꎻ
１０􀆰 ５~１８􀆰 ５ ｍｉｎꎬ Ａ ∶ Ｂ＝６５ ∶ ３５ꎻ 流速为 １􀆰 ０ ｍＬ/ ｍｉｎꎻ
检测波长均为 ２５４ ｎｍ[７]ꎮ
１􀆰 ２􀆰 ３　 数据计算分析
根据仪器测得的峰面积以及测量的样品质量ꎬ
经标准曲线方程换算ꎬ 最后得到乌桕叶片乳汁中单
宁和类黄酮化学成分的质量分数ꎬ 单位均为 μｇ / ｇꎮ
采用方差分析(ＡＮＯＶＡ)来检验各种群间乳汁与
叶片中单宁和类黄酮含量的差异ꎮ 所有数据采用
ＳＰＳＳ １６􀆰 ０ (ＳＰＳＳ Ｉｎｃ.ꎬ Ｃｈｉｃａｇｏꎬ ＩＬꎬ ＵＳ)进行
分析ꎮ
２　 研究结果
２􀆰 １　 单宁
从乌桕叶片乳汁中检测到 ２ 种单宁类物质:
儿茶素和没食子酸ꎬ 单宁酸和鞣花酸未检测到ꎮ
其中ꎬ 四川种群乳汁中的儿茶素含量最高 (为
２０１􀆰 ４ μｇ / ｇ)ꎬ 杭州种群含量最低(为 ４１􀆰 ２ μｇ / ｇ)
(图 １: Ａ)ꎻ 而没食子酸只在广西、 江苏、 四川和
广东 ４个种群的叶片乳汁中检测到ꎬ 广西种群乳汁
中没食子酸含量最高(为 ５５􀆰 ６ μｇ / ｇ) (图 １: Ａ)ꎮ
各种群之间ꎬ 叶片乳汁中单宁含量都有显著差异
(ｐ<０􀆰 ０５ꎬ 表 １)ꎮ
从乌桕叶片中检测到 ３种单宁类化合物: 单宁
酸、 儿茶素和没食子酸ꎬ 鞣花酸未检测到ꎮ 其中ꎬ
四川种群中叶片单宁酸含量最高(为 ４９４２􀆰 ６ μｇ / ｇ)
(图 １: Ｂ)ꎬ 且种群间差异显著(ｐ<０􀆰 ０１ꎬ 表 １)ꎻ
各种群间叶片儿茶素含量的差异不太显著(ｐ>０􀆰 ０５ꎬ
１９５　 第 ６期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 顾 雪等: 乌桕叶片及其乳汁中酚类物质比较分析
图 １　 乌桕不同地理种群叶片乳汁(Ａ)与叶片(Ｂ)的单宁含量(种群按纬度由高到低排列)
Ｆｉｇ􀆰 １　 Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔａｎｎｉｎｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｌａｔｅｘ (Ａ) ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ (Ｂ) ａｍｏｎｇ ｓｅｖｅｎ ｔａｌｌｏｗ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
(Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｓｏｒｔｅｄ ｂｙ ｌａｔｉｔｕｄｅ ｉｎ ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ ｏｒｄｅｒ)
　
表 １　 乌桕各种群间叶片乳汁和叶片中单宁
含量的方差分析
Ｔａｂｌｅ １　 ＡＮＯＶＡ ｔｅｓｔｉｎｇ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔａｎｎｉｎｓ ｉｎ
ｔａｌｌｏｗ ｌｅａｆ ａｎｄ ｌａｔｅｘ ａｍｏｎｇ ｓｅｖｅｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
因素
Ｆａｃｔｏｒ
乳汁 Ｌａｔｅｘ 叶片 Ｌｅａｖｅｓ
儿茶素
Ｃａｔｅｃｈｉｎ
没食子酸
Ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄ
儿茶素
Ｃａｔｅｃｈｉｎ
没食子酸
Ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄ
单宁酸
Ｔａｎｎｉｃ ａｃｉｄ
ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ
种群
Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ６ ０􀆰 ０３６ ３ ０􀆰 ０４７ ６ ０􀆰 ０５３ ６ ０􀆰 ０００ ６ ０􀆰 ０００
表１)ꎻ江苏种群叶片没食子酸含量最高(为３４２ μｇ/ ｇ)ꎬ
广东种群叶片没食子酸含量最低(为 ５１􀆰 ６ μｇ / ｇ)
(图 １: Ｂ)ꎬ 各种群间ꎬ 叶片没食子酸含量的差异
显著(ｐ < ０􀆰 ０１ꎬ 表 １)ꎮ
２􀆰 ２　 类黄酮
从乌桕叶片乳汁中检测到 ３ 种类黄酮物质:
山奈酚、 异槲皮苷和槲皮苷ꎬ 槲皮素和山奈苷未
检测到ꎮ其中ꎬ贵州种群叶片乳汁中山奈酚的含
量最高(为 ８２􀆰 １ μｇ / ｇ)ꎬ 广西种群含量最低(为
３４􀆰 ６ μｇ / ｇ)(图 ２: Ａ)ꎬ 各种群间ꎬ 叶片乳汁山奈
酚的含量有显著差异(ｐ<０􀆰 ０５ꎬ 表 １)ꎻ 而各种群
间叶片乳汁中异槲皮苷和槲皮苷的含量差异均不显
著(ｐ>０􀆰 ０５ꎬ 表 ２)ꎮ
从乌桕叶片中检测到 ４ 种类黄酮物质: 山奈
苷、 异槲皮苷、 槲皮素和槲皮苷ꎬ 山奈酚未检测
到ꎮ 其中ꎬ 四川种群叶片中山奈苷的含量最高(为
６０１９􀆰 ４ μｇ / ｇ)ꎬ 浙江种群含量最低(为 ９８４􀆰 ２ μｇ / ｇ)
(图 ２: Ｂ)ꎬ 各种群间ꎬ 叶片中山奈苷的含量差异
显著(ｐ<０􀆰 ０１ꎬ 表 ２)ꎻ 江苏种群叶片异槲皮苷的
含量最高(为 ５０９４􀆰 ２ μｇ / ｇ)ꎬ 四川种群含量最低
(为 ６７９􀆰 １ μｇ / ｇ) (图 ２: Ｂ)ꎬ 各种群间ꎬ 叶片异
槲皮苷的含量差异显著(ｐ<０􀆰 ０１ꎬ 表 ２)ꎻ 江苏种
群叶片中槲皮素的含量最高(为 ２４７􀆰 ４ μｇ / ｇ)ꎬ 贵
州种群含量最低(为 ７９􀆰 ２ μｇ / ｇ) (图 ２: Ｂ)ꎬ 各
种群间ꎬ叶片中槲皮素的含量差异显著(ｐ<０􀆰 ０５ꎬ
２９５ 植 物 科 学 学 报 第 ３１卷　
图 ２　 乌桕不同地理种群叶片乳汁(Ａ)与叶片(Ｂ)的类黄酮含量(种群按纬度由高到低排列)
Ｆｉｇ􀆰 ２　 Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｌａｔｅｘ (Ａ) ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ (Ｂ) ａｍｏｎｇ ｓｅｖｅｎ ｔａｌｌｏｗ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
(Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｓｏｒｔｅｄ ｂｙ ｌａｔｉｔｕｄｅ ｉｎ ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ ｏｒｄｅｒ)
　
表 ２　 乌桕各种群间叶片乳汁和叶片中类黄酮含量的方差分析
Ｔａｂｌｅ ２　 ＡＮＯＶＡ ｔｅｓｔｉｎｇ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｔａｌｌｏｗ ｌｅａｆ ａｎｄ ｌａｔｅｘ ａｍｏｎｇ ｓｅｖｅｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
因素
Ｆａｃｔｏｒ ｄｆ
乳汁　 Ｌａｔｅｘ
山奈酚 ｐ值
Ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
异槲皮苷 ｐ值
Ｉｓｏｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
槲皮苷 ｐ值
Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
叶片　 Ｌｅａｖｅｓ
山奈苷 ｐ值
Ｋａｅｍｐｆｅｒｉｔｒｉｎ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
异槲皮苷 ｐ值
Ｉｓｏｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
槲皮素 ｐ值
Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
槲皮苷 ｐ值
Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
ｐ￣ｖａｌｕｅ
种群
Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ６ ０􀆰 ０３４ ０􀆰 １４５ ０􀆰 １３６ ０􀆰 ０００ ０􀆰 ０００ ０􀆰 ０４０ ０􀆰 ２１９
表 ２)ꎻ 各种群间叶片槲皮苷含量差异不显著(ｐ>
０􀆰 ０５ꎬ 表 ２)ꎮ
２􀆰 ３　 乌桕叶片乳汁和叶片中单宁与类黄酮含量的
比较
从总体上看ꎬ 乌桕叶片乳汁中儿茶素和没食子
酸的含量都显著低于叶片中这两种单宁的含量(ｐ<
０􀆰 ０１)(图 ３: Ａꎬ 表 ３)ꎮ 并且ꎬ 叶片乳汁中槲皮
苷和异槲皮苷的含量也都显著低于叶片中这 ２种类
黄酮的含量(ｐ<０􀆰 ０１)(图 ３: Ｂꎬ 表 ３)ꎮ
３　 讨论
植物产生乳汁是植物通过物理或化学的方式对
昆虫进行防御的策略ꎮ 由于植物本身的特性以及昆
虫种类的不同ꎬ 不同植物在乳汁的化学组成上可能
出现差异[１２ꎬ１３]ꎮ 例如ꎬ 在番木瓜科、 桑科、 夹竹
桃科、 大戟科和旋花科等植物的乳汁中发现了对昆
虫有毒的半胱氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶ꎻ 桔梗
科、 桑科和罂粟科的植物中含有多种有毒的生物碱
３９５　 第 ６期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 顾 雪等: 乌桕叶片及其乳汁中酚类物质比较分析
图 ３　 乌桕乳汁与叶片中单宁(Ａ)和类黄酮(Ｂ)含量的差异
Ｆｉｇ􀆰 ３　 Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔａｎｎｉｎｓ (Ａ) ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ (Ｂ)
ｃｏｎｔｅｎｔ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌａｔｅｘ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ
　
表 ３　 乌桕叶片与叶片乳汁中单宁和类黄酮含量的方差分析
Ｔａｂｌｅ ３　 ＡＮＯＶＡ ｔｅｓｔｉｎｇ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔａｎｎｉｎｓ
ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔａｌｌｏｗ ｌｅａｆ ａｎｄ ｌａｔｅｘ
因素
Ｆａｃｔｏｒ
单宁 Ｔａｎｎｉｎｓ 类黄酮 Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
儿茶素
Ｃａｔｅｃｈｉｎ
没食子酸
Ｇａｌｌｉｃ ａｃｉｄ
异槲皮苷
Ｉｓｏｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
槲皮苷
Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ ｄｆ ｐ
叶片 ｖｓ.乳汁
Ｌｅａｖｅ ｖｓ􀆰
ｌａｔｅｘ
１ ０􀆰 ０００ １ ０􀆰 ００５ １ ０􀆰 ０００ １ ０􀆰 ０００
类ꎬ 如吗啡、 模拟糖生物碱、 白屈菜碱等ꎮ 酚类物
质是在植物中起防御作用的一类次生代谢化合物ꎬ
主要包括单宁、 类黄酮、 木质素等等[１３]ꎮ 已有研
究报道了乌桕叶片中含有大量的单宁和类黄酮等酚
类物质ꎬ 并起到了防御昆虫和病菌的重要作
用[２－７ꎬ１７ꎬ１８]ꎮ 本研究首次在乌桕叶片乳汁中检测到
单宁和类黄酮这两类酚类物质ꎮ 我们的研究发现ꎬ
乌桕叶片乳汁中这 ２种酚类物质的含量均显著低于
叶片中这 ２类物质的含量(图 ３)ꎮ 我们推测ꎬ 乌桕
体内用于防御食叶昆虫的酚类化学物质主要存在于
叶片中ꎬ 而乌桕乳汁中的其它防御化学物质及其抗
性作用有待深入研究ꎮ
已有研究表明ꎬ 从乌桕叶乙醇提取物的醋酸乙
酯萃取物中可以提取槲皮素、 山奈酚、 异槲皮苷、
没食子酸和鞣花酸等物质[４ꎬ５ꎬ１８]ꎬ 而本研究在乌桕
叶片中未检测到山奈酚和鞣花酸ꎮ 这可能是因为本
研究中的乌桕叶样品是用流动相(甲醇与 ０􀆰 １％磷
酸)萃取后直接离心ꎬ 与之前的分离方法不同[４ꎬ１８]
所致ꎮ 此外ꎬ 不同的检测仪器及其对应的色谱条件
也会导致物质鉴定的差异ꎮ 因此还应当进一步优化
检测方法ꎬ 以得到更加准确的分析结果ꎮ
Ｓａｌｍｉｎｅｎ等[９]认为单宁是通过抑制昆虫的消
化吸收能力来防御昆虫的ꎬ 主要用于防御专食性的
昆虫[１９]ꎻ 而类黄酮物质的防御功能主要体现在过
滤紫外线、 刺激或抑制取食以及化感和毒性作用等
方面[１０ꎬ１１]ꎬ 主要用于防御广食性昆虫[１９]ꎮ 本研究
发现ꎬ 乌桕不同种群间ꎬ 无论是乳汁还是叶片中ꎬ
其单宁和类黄酮含量均有显著差异ꎮ 此外ꎬ 各种群
化学物质的变化情况与其对应的纬度高低没有明显
的相关性(图 １、 图 ２)ꎮ 这可能是因为不同的乌桕
种群面对的植食性昆虫不同ꎬ 因而植物体内相应的
防御化学物质含量也会出现差异ꎮ 下一步有望通过
详细调查各乌桕种群主要天敌昆虫的类型与密度
等ꎬ 进一步确定化学防御物质变化的原因ꎮ
参考文献:
[ １ ] 　 张建民ꎬ 薛大阵ꎬ 李冬林. 乌桕的经济价值与壮苗
培育[Ｊ] . 特种经济动植物ꎬ ２０１０ꎬ １０: ３４－３５.
[ ２ ] 　 陈玉ꎬ 杨光忠ꎬ 张世琏. 乌桕化学成分研究进展
[Ｊ] . 天然产物研究与开发ꎬ １９９９ꎬ １１(５): １１４.
[ ３ ] 　 霍光华ꎬ 高荫榆ꎬ 陈才水. 乌柏属植物化学成分研
究综述[Ｊ] . 江西林业科技ꎬ ２００２ꎬ ４: ３７－３９.
[ ４ ] 　 霍光华ꎬ 高荫榆. 乌桕叶主要黄酮类物质的定性定
量[Ｊ] . 食品科学ꎬ ２００４ꎬ ２５(１０): ２８０－２８３.
[ ５ ] 　 柳润辉ꎬ 孔令义. 乌桕叶酚性成分研究[Ｊ] . 中国中
药杂志ꎬ ２００５ꎬ ３０(５): １２１３－１２１５.
[ ６ ] 　 霍光华ꎬ 高荫榆ꎬ 陈明辉. 乌桕叶抑菌活性功能成
分的研究[ Ｊ] . 食品与发酵工业ꎬ ２００５ꎬ ３１ (３):
５２－５６.
[ ７ ] 　 Ｗａｎｇ Ｙꎬ Ｓｉｅｍａｎｎ Ｅꎬ Ｗｈｅｅｌｅｒ Ｇ Ｓꎬ Ｚｈｕ Ｌꎬ Ｇｕ Ｘꎬ
Ｄｉｎｇ Ｊ􀆰 Ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ａｎｔｉ￣ｈｅｒｂｉｖｏｒｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｄｅｆｅｎｓｅｓ ｉｎ ａｎ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｐｌａｎｔ[ Ｊ] . Ｊ Ｅｃｏｌꎬ ２０１２ꎬ
４: ８９４－９０４.
４９５ 植 物 科 学 学 报 第 ３１卷　
[ ８ ] 　 彭小列ꎬ 刘世彪ꎬ 张丽ꎬ 杨珂. 乌桕叶提取物的体
外抑菌试验[Ｊ] . 湖南农业科学ꎬ ２０１１ꎬ ９: １０５－
１０７.
[ ９ ] 　 Ｓａｌｍｉｎｅｎ Ｊ Ｐꎬ Ｋａｒｏｎｅｎ Ｍ. Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｅｃｏｌｏｇｙ ｏｆ
ｔａｎｎｉｎｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ: ｗｅ ｎｅｅｄ ａ ｃｈａｎｇｅ ｉｎ
ａｐｐｒｏａｃｈ[Ｊ] . Ｆｕｎｃｔ Ｅｃｏｌꎬ ２０１１ꎬ ２５: ３２５－３３８.
[１０] 　 Ｈａｒｂｏｒｎｅ Ｊꎬ Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｃ. Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ
ｒｅｓｅａｒｃｈ ｓｉｎｃｅ １９９２ [ Ｊ] . Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ ２０００ꎬ
５５: ４８１－５０４.
[１１] 　 Ｉｗａｓｈｉｎａ Ｔ. Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ
ｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ[ Ｊ] . Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｓｐａｃｅꎬ
２００３ꎬ １７: ２４－４４.
[１２] 　 Ｋｏｎｎｏ Ｋ. Ｐｌａｎｔ ｌａｔｅｘ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｅｘｕｄａｔｅｓ ａｓ ｐｌａｎｔ
ｄｅｆｅｎｓｅ ｓｙｓｔｅｍｓ: Ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｄｅｆｅｎｓｅ ｃｈｅｍｉ￣
ｃａｌｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ｔｈｅｒｅｉｎ [ Ｊ] . Ｐｈｙｔｏ￣
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ ２０１１ꎬ ７２: １５１０－１５３０.
[１３] 　 Ａｇｒａｗａｌ Ａ Ａꎬ Ｋｏｎｎｏ Ｋ. Ｌａｔｅｘ: ａ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｕｎ￣
ｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓꎬ ｅｃｏｌｏｇｙꎬ ａｎｄ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ
ｏｆ ｐｌａｎｔ ｄｅｆｅｎｓｅ ａｇａｉｎｓｔ ｈｅｒｂｉｖｏｒｙ[ Ｊ] . Ａｎｎｕ Ｒｅｖ
Ｅｃｏｌ Ｅｖｏｌ Ｓｙｓｔꎬ ２００９ꎬ ４０: ３１１－３３１.
[１４] 　 Ｓｅｓｓａ Ｒ Ａꎬ Ｂｅｎｎｅｔｔ Ｍ Ｈꎬ Ｌｅｗｉｓ Ｍ Ｊꎬ Ｍａｎｓｆｉｅｌｄ
Ｊ Ｗꎬ Ｂｅａｌｅ Ｍ Ｈ. Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ｓｅｓｑｕｉｔｅｒ￣
ｐｅｎｅ ｌａｃｔｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｌａｃｔｕｃａ ｓｐｅｃｉｅｓ [ Ｊ] . Ｊ Ｂｉｏｌ
Ｃｈｅｍꎬ ２０００ꎬ ２７５: ２６８７７－２６８８４.
[１５] 　 Ｋｏｎｎｏ Ｋꎬ Ｈｉｒａｙａｍａ Ｃꎬ Ｎａｋａｍｕｒａ Ｍꎬ Ｔａｔｅｉｓｈｉ Ｋꎬ
Ｔａｍｕｒａ Ｙꎬ Ｈａｔｔｏｒｉ Ｍꎬ Ｋｏｈｎｏ Ｋ. Ｐａｐａｉｎ ｐｒｏｔｅｃｔｓ
ｐａｐａｙａ ｔｒｅｅｓ ｆｒｏｍ ｈｅｒｂｉｖｏｒｏｕｓ ｉｎｓｅｃｔｓ: ｒｏｌｅ ｏｆ
ｃｙｓｔｅｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ ｉｎ ｌａｔｅｘ [ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｊꎬ ２００４ꎬ
３７: ３７０－３７８.
[１６] 　 Ｋｏｎｎｏ Ｋꎬ Ｏｎｏ Ｈꎬ Ｎａｋａｍｕｒａ Ｍꎬ Ｔａｔｅｉｓｈｉ Ｋꎬ
Ｈｉｒａｙａｍａ Ｃꎬ Ｔａｍｕｒａ Ｙꎬ Ｈａｔｔｏｒｉ Ｍꎬ Ｋｏｙａｍａ Ａꎬ
Ｋｏｈｎｏ Ｋ. Ｍｕｌｂｅｒｒｙ ｌａｔｅｘ ｒｉｃｈ ｉｎ ａｎｔｉｄｉａｂｅｔｉｃ ｓｕｇａｒ￣
ｍｉｍｉｃ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｆｏｒｃｅｓ ｄｉｅｔｉｎｇ ｏｎ ｃａｔｅｒｐｉｌｌａｒｓ[ Ｊ] .
ＰＮＡＳꎬ ２００６ꎬ １０３: １３３７－１３４１.
[１７] 　 Ｈｕａｎｇ Ｗꎬ Ｓｉｅｍａｎｎ Ｅꎬ Ｗｈｅｅｌｅｒ Ｓ Ｇꎬ Ｚｏｕ Ｊꎬ
Ｃａｒｒｉｌｌｏ Ｊꎬ Ｄｉｎｇ Ｊ. Ｒｅｓｏｕｒｃｅ ａｌｌｏｃａｔｉｏｎ ｔｏ ｄｅｆｅｎｓｅ
ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ａｒｅ ｄｒｉｖｅｎ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ
ｇｅｎｅｒａｌｉｓｔ ａｎｄ ｓｐｅｃｉａｌｉｓｔ ｈｅｒｂｉｖｏｒｙ ｉｎ ａｎ ｉｎｖａｓｉｖｅ
ｐｌａｎｔ[Ｊ] . Ｊ Ｅｃｏｌꎬ ２０１０ꎬ ９８: １１５７－１１６７.
[１８] 　 王洪庆ꎬ 赵春阳ꎬ 陈若芸. 乌桕叶化学成分研究
[Ｊ] . 中国中药杂志ꎬ ２００７ꎬ ３２(１２): １１７９－１１８１.
[１９] 　 Ｍüｌｌｅｒ￣Ｓｃｈäｒｅｒ Ｈꎬ Ｓｃｈａｆｆｎｅｒ Ｕꎬ Ｓｔｅｉｎｇｅｒ Ｔ. Ｅｖｏ￣
ｌｕｔｉｏｎ ｉｎ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｐｌａｎｔｓ: ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
ｃｏｎｔｒｏｌ[ Ｊ] . Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｃｏｌ Ｅｖｏｌꎬ ２００４ꎬ １９: ４１７ －
４２２􀆰
(责任编辑: 张 平 )
５９５　 第 ６期　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 顾 雪等: 乌桕叶片及其乳汁中酚类物质比较分析