全 文 ：作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2013, 39(7): 1141−1147 http://www.chinacrops.org/zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn

本研究由国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08012-004)资助。
* 通讯作者(Corresponding authors): 路兴波, E-mail: luxb99@sina.com, Tel: 0531-83179095; 赵蕾, E-mail: zhaolei@sdu.edu.cn, Tel: 0531-88177190
Received(收稿日期): 2012-12-27; Accepted(接受日期): 2013-02-15; Published online(网络出版日期): 2013-04-23.
URL: http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20130423.1403.017.html
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.01141
转基因玉米 MIR162 转化事件特异性检测方法及其标准化
张广远 1,2 孙红炜 1 李 凡 1 杨淑珂 1 路兴波 1,* 赵 蕾 2,*
1山东省农业科学院植物保护研究所, 山东省植物病毒学重点实验室, 山东济南 250100; 2山东师范大学生命科学学院, 山东济南
250014
摘 要: 转基因玉米 MIR162 是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立
该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性 PCR体系经实验室内部比对及实验室间
循环验证结果表明, 该体系特异性强, 灵敏度较高(0.1%), 具有良好的重复性和再现性。TaqMan 探针实时荧光 PCR
检测结果表明, 所设计的探针特异性强, 检测低限(LOD)在 0.01%以下; 定量标准曲线 R2 均为 0.999, 扩增效率为
98.622%和 99.602%, SD范围为 0.014~0.209, RSD的范围为 0.049%~0.879%, 稳定性好; 对转基因含量为 1.0%、0.5%、
0.1%的样品定量结果相对偏差在 8.0%以内, 结果较为准确。本研究建立的方法完全可用于含转基因玉米 MIR162 成
分样品的检测。
关键词: 转化体特异性; MIR162; 定性 PCR; TaqMan探针实时荧光 PCR; 标准化
Event-Specific PCR Detection Method of Genetically Modified Maize MIR162
and Its Standardization
ZHANG Guang-Yuan1,2, SUN Hong-Wei1, LI Fan1, YANG Shu-Ke1, LU Xing-Bo1,*, and ZHAO Lei2,*
1 Institute of Plant Protection, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Shandong Key Laboratory of Plant Virology, Jinan 250100, China;
2 College of Life Science, Shandong Normal University, Jinan 250014, China
Abstract: Genetically modified maize MIR162 with resistances to Lepidoptera insects is developed by U.S. Syngenta Company
through recombinant DNA technology. The purpose of this study was to establish and standardize the event-specific detection
method of this line in China. The primers and Taqman probe were designed based upon the revealed 3 and 5 flanking sequences
of MIR162. After validated by six external laboratories, results showed that the qualitative PCR detection method could specifi-
cally detect the samples of MIR162 with the detection sensitivity about 0.1%, a good repeatability and reproducibility. The quan-
titative PCR system was based on TaqMan. Two standard curves and corresponding linear regression equations of Quantitation-Ct
between endogenous zSSIIb gene and transgenic target gene of MIR162 maize in standard material were generated. Results
showed that the standard curves had good linear relationships. Their R2 values both were 0.999 and the recovery rates were
98.622% and 99.602%. Moreover, the standard deviations (SD) and relative standard deviations (RSD) of repeatability ranged
from 0.014 to 0.209 and 0.049% to 0.879%. The limit of detection (LOD) was 0.01%. Thereafter, three mixed corn samples con-
taining 1.0%, 0.5%, and 0.1% MIR162 were quantified employing the developed quantitative PCR method, and the quantified
bias between the true value and tested value was below 8.0%. All these results suggested that the developed qualitative and quan-
titative PCR methods can be used for the identification and quantification of GM maize MIR162.
Keywords: Event-specific; MIR162; Qualitative PCR; TaqMan Real-time PCR; Standardization
转基因玉米 MIR162 是美国先正达公司应用现
代分子生物学技术将含有抗鳞翅目昆虫蛋白基因质
粒载体 pNOV13000 (14.4 kb)通过农杆菌介导转化到
玉米幼胚中培育而成。它含有 2个外源基因(Vip3Aa
和 manA)表达盒(gene expression cassette), 插入序列
约为 9.4 kb。Vip3Aa 基因表达盒包含抗虫蛋白
Vip3Aa20编码基因、ZmUbiInt启动子和 35S终止序
列; manA基因表达盒包含 manA编码基因、ZmUbiInt
启动子和 NOS终止序列。
目前转基因玉米 MIR162 已在美国、加拿大、
1142 作 物 学 报 第 39卷

巴西和阿根廷获得商业化种植的批准, 越南也于近
期批准了该转基因品种的田间试验申请。由于已大
面积商业化生产该玉米品系, 其产品有可能出现在
我国进口玉米及其加工品之中, 但是目前国内并没
有该转基因玉米及其衍生品种转化事件特异性检测
的标准, 也未见相关检测方法的研究报道, 因而亟
需建立该转基因品系的检测方法。
转基因产品的检测应具快速、准确、灵敏、适
应样品量大等特点 [1], 在世界范围内应用最广的属
PCR技术。以 PCR技术为基础的转基因产品检测根
据其特异性的不同至少可以分成 4 类[2-5]即筛查法
(screening PCR)、基因特异性方法 (gene-specific
PCR)、构建特异性方法(construct-specific PCR)和转
化事件特异性方法(event-specific PCR)。筛查法是对
转基因产品中通用元件进行检测, 包括启动子、终
止子和标记基因; 基因特异性方法是指对导入的目
的基因进行检测, 比筛查法更具有特异性; 构建特
异性方法是在插入载体中具有完整表达能力的基因
盒(gene cassette)上设计引物, 该方法具有比前两者
更高的特异性; 而转化事件特异性是检测外源基因
在受体基因组的插入位点, 由于该位点具有唯一特
异性, 转化事件特异性能够区分相同转化载体的不
同转化事件, 因而具有最高的特异性[6-7]。到目前为
止, 大量转基因作物的检测方法均建立在转化事件特
异性上, 例如对转基因玉米MON863 [8-9]、Bt176 [10-11]、
Bt11 [12], 转基因大豆 DP305423 [13]和转基因油菜
GT73 [14]等的检测。
本研究的目的在于建立抗虫转基因玉米
MIR162 及其加工品的转化事件检测方法, 并形成
国家标准, 为我国转基因玉米的检测、安全评估和
监管提供一定的技术和理论支持。
1 材料与方法
1.1 材料
转基因玉米(MIR162、MON810、Bt176、59122)、
转基因大豆(CV127、DP305423和 A2704-12)、转基
因棉花 (MON1445、MON531)、转基因甜菜(H7-1)
和非转基因玉米郑单958种子粉末由本实验室提供。
1.2 样品 DNA提取
用 DNA 提取试剂盒(Omega)提取实验材料的
DNA, 用紫外分光光度计(Beckman)检测所提模板
的纯度和浓度。
1.3 转化体特异性引物和探针设计
通过查询转基因玉米 MIR162 插入载体与旁侧
序列信息, 应用 Primer Express 3.0在插入序列和玉
米基因组连接处分别设计定性 PCR引物和定量 PCR
探针, 玉米内标引物及探针为上海交通大学设计的
国家标准引物及探针。所有引物与探针均由上海生
工生物工程有限公司合成。
1.4 定性 PCR体系
定性 PCR 反应体系含 2×rTaq Mastermix (Ta-
KaRa) 10 μL, 上、下游引物(10 μmol L–1)各 1 μL, 模
板 DNA (100 ng μL–1) 1 μL, 加水补充至 20 μL体系。
反应程序为预变性 95℃ 5 min; 变性 95℃ 30 s, 退
火 58℃ 30 s, 延伸 72℃ 30 s, 35个循环; 72℃ 5 min。
以 2%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR产物。
1.5 比对及循环验证实验
对实验所确立的定性检测方法的特异性和灵敏
度进行实验室内部比对和实验室间循环验证, 以确
保检测方法的科学性。
1.6 TaqMan探针实时荧光 PCR定量检测
采用罗氏(Roche) TaqMan探针定量 PCR反应试
剂盒。反应体系含 2×FastStart Universal Probe Master
(Rox) 12.5 μL, 上、下游引物(10 μmol L–1)各 1 μL,
探针(10 μmol L–1) 0.5 μL, 模板 DNA (100 ng μL–1)
1 μL, 加水补足至 25 μL。
使用 Prism stepone plus (ABI)实时荧光定量
PCR 仪扩增, 反应程序为 95℃ 10 min; 95℃ 15 s,
60℃ 1 min (收集荧光信号), 40个循环。
1.7 标准曲线的制作
提取的样品总 DNA 用 Easy Dilution 缓冲液
(TaKaRa)按 5倍倍比依次稀释至 37 500、7500、1500、
300 和 60 copies μL–1, 以此为标准品分别扩增内标
基因 zSSIIb和MIR162转化体特异性基因, 每个梯度
设置 3个平行重复, 绘制标准曲线。
2 结果与分析
2.1 引物及探针的设计
所设计引物与探针序列见表1, 扩增靶标序列如
图 1。
2.2 定性检测方法
2.2.1 普通 PCR检测 以引物 MIR162-F/R扩增
4个转基因玉米(MIR162、MON810、Bt176和 59122)、
3个转基因大豆(CV127、DP305423和 A2704-12)、2
个转基因棉花(MON1445、MON531)、1个转基因甜
第 7期 张广远等: 转基因玉米 MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化 1143


菜(H7-1)和非转基因玉米郑单958显示, 引物MIR162-
F/R能特异地从 MIR162样品中扩增出预期 97 bp的
产物, 在其他样品中没有目的产物出现(图 2), 表明
该引物具有良好的特异性。

表 1 引物与探针序列
Table 1 Primer pairs and fluorogenic probes used in this study
扩增类别
PCR system
名称
Primer name
引物探针序列
Sequence (5–3)
扩增大小
Amplicon (bp)
MIR162-F CCCGGGTCTAGACAATTCAGT 普通 PCR
Conventional PCR MIR162-R GCCCAGTAAAACAACTACCACAAG
97
ZSSIIb-QF CGGTGGATGCTAAGGCTGATG
ZSSIIb-QR AAAGGGCCAGGTTCATTATCCTC
ZSSIIb-QP FAM-TAAGGAGCACTCGCCGCCGCATCTG-Eclipse
88 [9]
MIR162-QF CTGTCTAATAGTTTGAGTGA
MIR162-QR GTGACTCCCTTAATTCTC
实时荧光 PCR
Real-time PCR
MIR162-QP FAM-CAGATTGTCGTTTCCCGCCTTC-Eclipse
94


图 1 MIR162 插入与旁侧序列图示
Fig. 1 Insert and flanking sequences of the transgenic maize MIR162
A: MIR162外源载体示意图; B: MIR162 5端旁侧序列, 箭头代表引物与探针的设计位置和方向;
C: MIR162 3端旁侧序列, 箭头代表引物的设计位置和方向。
A: Schematic diagrams of the inserted T-DNA region of gene construct for event MIR162; B: Sequences flanking the 5 of the T-DNA in
MIR162, the arrows show the location and orientation of primers and probe; C: Sequences flanking the 3 of the T-DNA in MIR162, the
arrows show the location and orientation of primers.


图 2 MIR162 转化事件特异性定性 PCR 扩增
Fig. 2 Specific detection for event-specific MIR162 using traditional PCR
M: marker I; 1~11: 分别以 MIR162、MON810、Bt176、59122、CV127、DP305423、A2704-12、MON1445、MON531、H7-1和郑单
958为模板; 12: 空白对照。
M: marker I; 1-11: Correspond to MIR162, MON810, Bt176, 59122, CV127, DP305423, A2704-12, MON1445, MON531, H7-1, and Zheng-
dan 958; 12: H2O.
1144 作 物 学 报 第 39卷

将转基因玉米MIR162的 DNA和非转基因玉米
DNA 按不同比例(W/W)混合, MIR162 DNA 的含量
分别为 100%、50%、10%、5%、1%、0.5%、0.1%、
0.05%、0.01%和 0。以稀释的 MIR162 DNA为模板
进行 PCR 扩增, 检测方法的灵敏度, 每个浓度设置
2个重复。结果显示, 随着转基因玉米 MIR162含量
的减少 , 目的条带的亮度逐渐降低 , 当含量为
0.05%时, 目的条带比较模糊, 当含量低于 0.01%时
无目的条带出现, 说明引物 MIR162-F/R 的检测低
限(limit of detection, LOD)为 0.1% (图 3), 满足转基
因定性检测要求。
2.2.2 重演性验证 对建立的 MIR162 转化体特
异性定性检测方法, 首先由实验室内不同人员进行
特异性和灵敏度验证, 结果与预期相同, 说明该方
法在实验室内具有很好的重演性。
为测试该定性 PCR的特异性、灵敏度和重演性,
在全国选择 6 家已通过“双认证”的转基因生物安全
检测机构对该标准文本进行循环验证、检验测试和
综合评价, 验证单位分别为农业部农产品质量安全
及转基因生物产品成分监督检验测试中心(杭州)、农
业部转基因植物环境安全监督检验测试中心(武汉)、
农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心(北
京)、农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心
(长春)、农业部转基因生物产品成分监督检验测试中
心(天津)和农业部转基因植物用微生物环境安全监
督检验测试中心(北京)。
在特异性测试中, 共设置 9个对照样品, 分别为
科丰 2 号水稻(含量 1%)、3272 玉米(含量 1%)、转
基因大豆 356043、305423、CV127、MON89788、
A5547-127、A2704-12、GTS40-3-2 混合样品(含量
各 5%)、转基因玉米 Bt11、Bt176、MON810、
MON863、GA21、NK603、T25、TC1507、MON89034、
59122、MIR604、MON88017混合样品(含量各 5%)、
转基因油菜 MS1、MS8、RF1、RF2、RF3、T45、
Oxy235、Topas19/2 混合样品(含量 5%)、转基因棉
花MON1445、MON531、MON15985、LLCOTTON25、
MON88913混合样品(含量各 5%)、转基因水稻科丰
6号、科丰 8号、克螟稻、M12、TT51混合样品(含
量各 5%)、非转基因水稻吉粳 88、日本晴、扬稻 6
号、明恢 86混合样品和非转基因玉米吉单 180、吉
东 26、沈玉 21、郁青 281混合样品。6家验证单位
仅从转基因玉米 MIR162 样品中扩出目的产物, 在
对照样品中均无预期片段出现, 表明 MIR162 转化
体特异性定性 PCR 具有高度特异性; 在灵敏度测试
中, 共设置 MIR162 玉米纯合体含量分别为 1%、
0.5%、0.1%、0.05%、0 (W/W)的 5个样品, 6家验证
单位在 MIR162含量为 0.1%及以上的样品中均扩增
出清晰的目的条带, 表明该定性检测方法灵敏度较
高, 为 0.1%; 证明所建立的定性 PCR检测体系具有
良好的稳定性和重演性。
2.2.3 TaqMan 探针在定性检测中的应用 转基
因玉米 MIR162 TaqMan探针检测法的特异性如图 4,
结果显示该探针检测体系能特异性检测MIR162样品,
对其他转基因及非转基因样品无扩增, 特异性良好。
将转基因玉米 MIR162 模板 DNA 按 10 倍梯度
依次稀释至 100%、10%、1%、0.1%、0.01%和 0, 以
建立的探针法检测体系对这 6 个浓度梯度进行扩增
检测灵敏度, 结果如图 5, 0.01%的扩增 Ct 值为 36,
表明该检测体系的灵敏度较高, LOD在 0.01%以下。
2.3 TaqMan探针实时荧光 PCR定量检测
2.3.1 标准曲线的建立 以梯度稀释的基因组
DNA (37 500、7500、1500、300和 60 copies μL–1)
为模板 , 通过实时荧光定量 PCR 扩增内标基因
(zSSIIb)和转化体特异性基因(MIR162)。以 TaqMan
探针法得到的内标准基因 zSSIIb 扩增曲线和标准曲
线见图 6, zSSIIb基因 Ct值与起始模板量线性方程为


图 3 MIR162 转化事件特异性灵敏度测试
Fig. 3 Sensitivity test of MIR162 event-specific assay
M: marker I; 1~2: MIR162含量为 100%; 3~4: MIR162含量为 50%; 5~6: MIR162含量为 10%; 7~8: MIR162含量为 5%; 9~10: MIR162
含量为 1%; 11~12: MIR162含量为 0.5%; 13~14: MIR162含量为 0.1%; 15~16: MIR162含量为 0.05%; 17~18: MIR162含量为 0.01%;
19~20: MIR162含量为 0。
M: marker I; 1–2: 100% MIR162; 3–4: 50% MIR162; 5–6: 10% MIR162; 7–8: 5% MIR162; 9–10: 1% MIR162; 11–12: 0.5% MIR162; 13–14:
0.1% MIR162; 15–16: 0.05% MIR162; 17–18: 0.01% MIR162; 19–20: without MIR162.
第 7期 张广远等: 转基因玉米 MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化 1145


Y = −3.355X + 38.88, 相关系数 R2=0.999, 扩增效率
为 98.622%, 所得参数可信度较高。MIR162转化体
特异性扩增曲线和标准曲线见图 7, 转化体特异性
扩增 Ct值与起始模板量线性方程为 Y = −3.332X +
39.843, 线性相关系数 R2=0.999, 扩增效率为
99.602%, 结果比较可信。
2.3.2 重复性分析 根据 3次平行测定的 Ct值计
算标准偏差(SD)和相对标准偏差(RSD), 结果如表 2
所示, SD 变化范围为 0.014~0.209, RSD 的范围为


图 4 TaqMan 探针实时荧光 PCR 特异性检测
Fig. 4 Specific detection for event-specific MIR162 using
TaqMan Real-time PCR
图中扩增曲线为 MIR162特异性扩增, 阴性及空白对照为
MON810、Bt176、59122、CV127、DP305423、A2704-12、
MON1445、MON531、H7-1、郑单 958和 H2O。
The amplification plots are these of MIR162. The negative and
blank control were MON810, Bt176, 59122, CV127, DP305423,
A2704-12, MON1445, MON531, H7-1, Zhengdan 958, and H2O.
0.049%~0.879%。说明本研究建立的定量检测方法重
复性较好, 结果比较可信。
2.3.3 转基因玉米 MIR162 混合样品定量检测 根
据 Ct 平均值和标准曲线得出样品中内标准基因
zSSIIb 和目的基因(MIR162 转化体特异性序列)的
DNA拷贝数, 转基因含量[15](%)=转化体特异性序列
DNA拷贝数/内标准基因拷贝数×100%。
表 3表明, 转基因成分含量 1.0%、0.5%和 0.1%
的样品检测结果分别为 0.940%、0.470%和 0.092%,
相对偏差分别为 6%、6%和 8%, 均小于 25%, 定量
准确度较高。


图 5 TaqMan 探针实时荧光 PCR 灵敏度测试(6 个浓度梯度:
100%、10%、1%、0.1%、0.01%和 0)
Fig. 5 Sensitivity test of MIR162 event-specific assay using
TaqMan Real-time PCR (100%, 10%, 1%, 0.1%, 0.01%, and 0)


图 6 内标基因(zSSIIb)扩增曲线(A)及标准曲线(B)
Fig. 6 Amplification plots (A) and standard curves (B) of zSSIIb gene
(A) 1~5: 基因组 DNA拷贝数分别为 37 500、7500、1500、300和 60; (B)线性回归方程参数, 斜率−3.355与理论值−3.322较为接近。
(A) 1−5: 37 500, 7500, 1500, 300, and 60 copies of genomic DNA respectively; (B) Parameters of the regression line, the slop of regression
line (−3.355) is close to theoretical value of −3.322.
1146 作 物 学 报 第 39卷



图 7 MIR162 转化体特异性扩增曲线(A)及标准曲线(B)
Fig. 7 Amplification plots (A) and standard curves (B) of MIR162
(A)1~5: 基因组 DNA拷贝数分别为 37 500、7500、1500、300和 60; (B)线性回归方程参数, 斜率−3.332与理论值−3.322较为接近。
(A) 1–5: 37 500, 7500, 1500, 300, and 60 copies of genomic DNA respectively; (B) Parameters of the regression line, the slop of regression
line (−3.332) is close to theoretical value of −3.322.

表 2 TaqMan 探针定量 PCR 标准偏差(SD)与相对标准偏差(RSD)分析
Table 2 SD and RSD of TaqMan quantitative PCR systems
zSSIIb MIR162 基因组 DNA拷贝数
DNA copy number Ct mean Ct SD Ct RSD (%) Ct mean Ct SD Ct RSD (%)
37500 23.740 0.079 0.333 23.781 0.209 0.879
7500 26.058 0.086 0.330 26.008 0.102 0.392
1500 28.447 0.066 0.232 28.483 0.014 0.049
300 31.158 0.039 0.125 31.260 0.104 0.333
60 33.648 0.116 0.345 33.560 0.065 0.194
SD: standard deviations; RSD: relative standard deviations.

表 3 TaqMan 探针法定量检测结果
Table 3 Quantitative results of the maize samples including MIR162 using the established TaqMan systems
样品
Sample
理论含量
True value (%)
内标基因 zSSIIb拷贝数
Copy number of zSSIIb
MIR162转化体特异性 DNA拷贝数
Copy number of MIR162
定量结果
Result (%)
相对偏差
Bias (%)
1 1.0 38145 359 0.940 6
2 0.5 37954 179 0.470 6
3 0.1 36902 34 0.092 8

3 讨论
由于以 PCR 法检测相对快速、准确, 我国转基
因产品检测主要采取该方法。本实验在转基因玉米
MIR162 插入载体与旁侧序列连接处设计引物和探
针, 该序列横跨玉米自身基因和外源基因, 在对含
有多组分加工产品检测时, 可以确定所检出的外源
基因来自玉米, 从而达到品种和品系同时鉴定的目
的。根据对 GC 含量、发卡结构、二级结构、Tm值
和扩增片段大小等参数分析发现, 在 5端旁侧序列
处具有最佳探针序列, 3端旁侧序列处具有最佳引物
序列。根据软件分析结果合成验证, 从而避免了盲
目选择引物与探针造成的不必要的浪费。
定性检测采用普通 PCR和 TaqMan探针实时荧
光 PCR 两种, 本研究及实验室间循环验证结果表明
所建立普通 PCR 体系特异性较强, 稳定性好, 灵敏
度较高(0.1%); TaqMan 探针法特异性强, 灵敏度为
0.01%, 可有效检测复杂混合样品中转基因玉米
MIR162成分。
相比 SYBR Green I染料法, TaqMan探针荧光定
量法具有特异性强, 准确度高, 检测结果可靠等特
点[16], 由于 SYBR Green I染料对双链 DNA的结合
没有特异性, 在 PCR 扩增中若存在微量引物二聚体
和非目的片段的扩增均可与该染料结合, 造成荧光
信号非特异性积累, 使得本底较高, 容易导致检测
结果高于实际值[17], 且在实际应用时溶解曲线的分
第 7期 张广远等: 转基因玉米 MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化 1147


析导致更长的检测周期。在定量 PCR 检测中, 理想
的扩增效率为 100%, 此时的标准曲线斜率为−3.32,
然而在实际检测中由于探针设计、操作手法、所用
试剂和仪器等原因, PCR很难达到 100%的扩增, 扩
增效率在 90%~110%之间(对应斜率平均值在−3.6~
−3.1之间), R2在 0.99以上, 便能够获得较为可靠的
定量结果。本实验建立的 TaqMan探针定量检测方法,
内标基因 zSSIIb 和转化体特异性片段扩增效率分别
为 98.622%和 99.602%, 对应斜率为−3.355和−3.332,
R2均为 0.999, 说明所建立的标准曲线扩增效率高、
线性相关度高, 能较好地反映 PCR 扩增过程的真实
性。3次平行重复的标准偏差(SD)变化范围为 0.014~
0.209, 相对标准偏差 (RSD)的范围为 0.049%~
0.879%, 说明该定量检测方法重复性较好, 结果比
较可信。对 MIR162含量为 1.0%、0.5%和 0.1%的标
准样品定量检测的结果分别为 0.940%、0.470%和
0.092%, 相对误差均在 25%以内(6%、6%和 8%), 表
明本实验建立的转基因玉米 MIR162 转化体特异性
定量 PCR 检测方法重复性好, 准确度高, 可作为转
基因玉米 MIR162定量检测方法。
4 结论
本研究建立了完整的抗虫玉米 MIR162 及其产
品转基因成分定性、定量检测体系, 为规范转基因
产品标识制度和进出口产品检验提供了有力的技术
支持。

致谢: 农业部科技发展中心组织了本研究定性检测
部分的循环验证, 农业部农产品质量安全及转基因
生物产品成分监督检验测试中心(浙江杭州)、农业部
转基因植物环境安全监督检验测试中心(湖北武汉)、
农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心(北
京)、农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心
(吉林长春)、农业部转基因生物产品成分监督检验测
试中心(天津)和农业部转基因植物用微生物环境安
全监督检验测试中心(北京)参加了此次循环验证试
验, 特此致谢。
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