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Evaluation and Screening of Resistance to Barnyardgrass in Germplasm of Wild Rice(Oryza sativa) and African Cultivar

野生稻和非洲栽培稻抗稗草种质资源筛选和评价



全 文 :Vol130 , No111
pp1 1140 - 1144  Nov1 , 2004作  物  学  报ACTA AGRONOMICA SINICA第 30 卷 第 11 期2004 年 11 月  1140~1144 页
野生稻和非洲栽培稻抗稗草种质资源筛选和评价
张付斗1  郭怡卿1 , 3  余柳青2  陶大云3 Ξ
(1 云南省农业科学院植物保护研究所 ,云南昆明 650205 ;2 中国水稻研究所 ,浙江杭州 310064 ;3 云南省农业科学院粮食作物研究所 ,云南昆明
650205 )
摘  要  以盆栽试验对 20 份野生稻和 5 份非洲栽培稻材料的稗草出苗率、距离稻株不同范围播种的稗草株高和干重的
抑制效果进行评价 ,并通过聚类分析和方差分析 ,将其划分为 6 类。再以稻叶水提液培养稗草 ,依其发芽抑制率、芽长抑
制率、根长抑制率和发芽指数 ,再次聚类并划分为 5 类。盆栽和浸提液试验中效果均好的 3 份野生稻 S37、S68、S72 和 1
份非洲栽培稻 Y11002 确定为具有化感作用潜力的资源 ;盆栽试验效果好 ,但浸提液生物活性差的 2 份 (S113、Y11004) 确
定为竞争作用强的资源 ;盆栽和水提液试验均表现较差的 5 份野生稻材料 (S43、S47、S40、S73、S111) 和 2 份非洲栽培稻
( Y11005、Y11001)为非抗性材料。
关键词  野生稻 ;稗草 ;抗性 ;评价
中图分类号 : S511
Evaluation and Screening of Resistance to Barnyardgrass in Germplasm of Wild
Rice( Oryza sativa) and African Cultivar
ZHANG Fu2Dou1 , GUO Yi2Qing1 , 3 , YU Liu2Qing2 , TAO Da2Yun3
(1 Plant Protection Institute , Yunnan Academy of Agricultural Sciences , Kunming 650205 , Yunan ;2 China National Rice Research Institute , Hangzhou
310006 , Jiangsu ;3 Cereal Crops Institute , Yunnan Academy of Agricultural Sciences , Kunming 650205 , Yunan , China)
Abstract  The resistance of 20 wild rice accessions( Oryza sativa) and 5 African cultivars to barnyardgrass ( E1 crusgalli)
was studied in pot experiment1 According to the effect of germination percentage of barnyardgrasses , and its plant height
and dry weight of plant at different distance with rice seedlings , there were 6 types of wild rice clustered by means of cluster
analysis and variance analysis1 In bioassay the allelopathic effect of wild rice extracted solution from rice leaf on barnyard2
grasses germination , the length of bud and root and so on were measured , based on the data ,25 accessions of germplasm
were into 5 types1 The results showed that 3 wild rice accessions , S37 , S46 , S72 ,and 1 African cultivar ,Y11002 were de2
fined as the allelopathic potential germplasm , they caused significantly resistant effect in pot experiment and bioassay exper2
iment ; S113 and Y11002 were defined as strong competitive germplasm showing good effect in pot experiment , but low inh2
ibition in bioassay experiment1 5 wild rice accessions , S43 , S47 , S40 , S73 , S111 , and 2 African cultivars Y11005 ,
Y11001 showed the least effect both in pot experiment and bioassay experiment , were defined as non2resistance rice1
Key words  Wild rice ; Echinochloa crusgalli ;Resistance to weed ;Evaluation
  为了适应农田草害可持续治理的要求 ,植物的
化感作用已成为近年来的研究热点[1 ,2 ] 。美国、韩
国、日本和菲律宾国际水稻研究所等国家和单位的
杂草科学家通过多年的研究 ,都筛选到具抗草作用
的水稻种质资源 ,并证实抗草品种的利用是控制杂
草危害非常有效的措施[3 ,4 ] 。美国杂草科学家已筛
选到抗草水稻品系 PI312777 和 PI3380648 等 ,对 C1
gperusiria L1 ,A1 coccinea 和Bacopa rotundifolia Wettest
等杂草的控制作用高达 95 %。如果预先用这些品
种的秸秆覆盖处理稻田 ,再种植这些水稻品系 ,则几
乎可以控制伴生杂草 ,其效果已和化学除草剂苄嘧
磺隆相当[5 ] 。研究结果表明化感作用是受多基因控Ξ基金项目 : 云南省自然科学基金资助项目 (2000C0094M) ,国家自然科学基金资助项目 (30170620) 。
作者简介 : 张付斗 ,男 ,助理研究员 ,主要从事农田草害生态调控技术研究。3 通讯作者 :郭怡卿 ,副研究员 ,云南省农业科学院植物保护研
究所 (邮编 :650205) 。
Received(收稿日期) :2003206210 ,Accepted(接受日期) :20042022251

制的数量性状[6 ] ,有望在不远的将来利用化感水稻
资源培育抗草品种。
作物野生近缘类群中蕴涵着高产、抗病、抗逆等
特异性状。野生稻具有丰富的遗传多样性 ,已成为
现代水稻育种中新基因的一个重要来源[7 ] 。已筛选
获得对无芒稗草具有显著抗性作用 DY212 和 DY216
材料[8 ] 。
我国在植物化感作用领域的研究自 1995 年以
来发展迅速 ,有关水稻品种对杂草的化感作用研究
已有大量报道。由于评价方法不一致 ,影响了评价
的准确性 ,甚至同样的评价结果和方法相互矛盾 ,这
种状况有碍于对抗草品种的研究和应用[9 ] 。作物对
杂草的影响一方面存在化感作用 ,另一方面存在生
长的相互竞争 ,并且通常二者同时作用[10 ] 。自 2000
年以来 ,我们对不同野生稻和云南地方稻进行了广
泛的抗稗草筛选评价及评价方法的研究 ,旨在为今
后大规模抗性种质资源筛选、抗性机理和遗传规律
研究打下基础。
1  材料与方法
111  试验材料
  长雄野生稻 ( O1 longistaminata) S37 , S38 , S40 ,
S42 ,S43 ;巴蒂野生稻 ( O1 barthii) S44 ,S45 ,S46 ,S47 ,
S48 ;普通野生稻 ( O1 rufipogon ) S67 , S68 , S71 , S72 ,
S73 ;尼瓦拉野生稻 ( O1 nivara ) : S105 , S108 , S110 ,
S111 , S113 ; 非洲栽培稻 ( O1 glaberrima ) Y11001 ,
Y11002 ,Y11003 ,Y11004 ,Y11005(由云南省农业科学
院粮食作物研究所提供 ,为 AA 基因组) 。
稗草 ( Echinochloa crusgalli) 为多年保存、纯化的
种子。土壤 :有机质含量 118 % ,pH 519 ,取自多年未
施用化学除草剂的水稻实验田。
112  试验设计
11211  野生稻对稗草的抑制作用   野生稻种子
用 10 %次氯酸钠消毒 10 min ,蒸馏水冲洗干净 ,28 ℃
的人工气候箱中催芽 48 h 后 ,播入盆中育苗。30 d
后单苗移栽入直径 30 cm 的盆内 ,每份野生稻种设 4
次重复 ,置 25~30 ℃温室内。移栽后 7 d ,播入经挑
选的稗草籽 ,1 gΠ盆 (干重 ,约 500 粒) ,盖土 2 cm ,无
水层 ,每天喷水使土壤饱和湿润。播后 10 d 调查各
盆内稗草出苗数 ,调查距离稻苗 3 cm 内、3~6 cm、6
~9 cm 各半径范围稗草株高。播后 20 d ,从以上 3
种距离范围内 ,分别随机取样 30 株稗草 ,于 65 ℃烘
6 h 后称取稗草地上部分干重 ,以无野生稻和非洲栽
培稻的稗草量为对照计算稗草出苗率及抑制率。秧
龄 60 d 和 90 d 时 (即移栽后 30 d 和 60 d) 测量稻株
高和分蘖数。
11212  野生稻植株水提液对稗草的抑制作用   
野生稻移栽后 60 d ,各处理剪取新鲜水稻叶片 25 g
样品。用 10 %次氯酸钠消毒 10 min ,再用蒸馏水冲
洗干净后切成约 1 cm 碎片 ,用 150 mL 蒸馏水在
10 ℃条件下浸提 24 h ,过滤待用。培养皿中垫定性
滤纸 (作培养床) ,每皿播稗草种子 25 粒 ,并加入 10
mL 浸提液。在 20 000 lx , (28 ±015) ℃,每天光照 12
h 的人工气候箱中培养 7 d ,调查稗草根长、芽长、发
芽率 ,与清水对照比较 ,计算抑制率和发芽速度指数
( I) 。I = 2 ×(5 ×X1 + 4 ×X2 + 3 ×X3 + 2 ×X4 + 1 ×
X5 ) ,式中 X 为间隔 24 h 的种子发芽数[11 ] 。
11213  分析方法和对稗草抗性综合评价   通过
盆栽试验测定 3 种距离范围内稗草的株高、干重抑
制率和密度防效 ( %) 。结果采用系统聚类方法 (平
方欧氏最短距离) 进行聚类 ,绘出聚类图 (图 1) ,得
出各大类的抗稗草趋势。对聚类图中各大类求其 2
项关键指标 ,3~6 cm 范围内稗草干重抑制率 ACW
(average control of plant dry weight)以及密度防效 ACS
(average control of seedling ) 。叶片水提液对稗草影
响的生物测定 ,以根长抑制率、芽长抑制率、发芽率
抑制率、发芽速度指数进行聚类 ,绘出聚类图 (图
2) ,对聚类图中各大类求其发芽率抑制率 AIG(aver2
age inhibition of germination) 和根长抑制率 AIR (aver2
age inhibition of root) 2 项关键指标。4 项关键指标的
每次数据采用随机区组资料的统计方法进行方差分
析 ,采用 Duncan’s 新复极差法对方差分析结果进行
多重比较。聚类图 1 和图 2 中均表现较好的视为具
化感作用潜力的种质资源 ,均表现较差的为非抗性
种质资源 ,图 1 中表现较好 ,而图 2 中表现较差的为
竞争力强的抗性种质资源。
1411 11 期 张付斗等 :野生稻和非洲栽培稻抗稗草种质资源筛选和评价    

表 1 野生稻对不同距离范围内稗草的影响
Table 1 Allelopathic effect of wild rice and African cultivar on barnyardgrass at different distances
编号
Code
密度防效
Seedling control
( %)
对不同范围稗草株高的抑制
The plant height inhibition at different distances( %)
对不同范围稗草干重的抑制
The dry weight inhibition at different distances( %)
0 - 3 cm 3 - 6 cm 6 - 9 cm 0 - 3 cm 3 - 6 cm 6 - 9 cm
S37 5014 b 6712 a 3217 d 1117 5112 c 4416 e 2419
S38 4116 c 3414 d 417 g 412 1813 h 612 m 411
S40 2416 de 1116 f 816 g 816 712 hi 312 mn 016
S42 4814 b 3015 d 1817 ef 712 4117 d 1313 k 1215
S43 3315 d 2716 e 513 g 419 1119 i 216 mn 216
S44 1716 e 1112 f 213 h 210 512 j 112 n 019
S45 4117 c 4016 c 2811 e 2412 3718 de 3112 g 2716
S46 1214 ef 3519 d 2718 e 2614 4010 d 3819 f 3514
S47 2219 de 017 g 017 i 013 010 k 010 n 010
S48 3016 d 2416 e 1113 f 1111 2511 g 1712 j 1712
S67 5112 b 3711 d 814 g 616 4114 d 517 m 511
S68 7413 a 5515 b 4711 bc 4211 6713 b 5816 b 2114
S71 3514 d 4711 ed 2412 ef 2017 3514 e 2115 i 1917
S72 7514 a 6212 b 5019 b 4718 7114 a 6413 a 3817
S73 2215 de 2418 e 214 h 214 1116 i 014 n 010
S105 414 g 2414 e 2112 ef 916 3114 f 2516 h 2214
S108 1117 ef 2117 e 1917 ef 1815 2517 g 1816 j 1712
S110 118 h 3412 d 2716 e 2014 3611 e 3114 g 2918
S111 819 f 3817 d 2211 ef 1413 2716 g 1213 k 1016
S113 712 f 5716 b 4215 c 3617 5514 c 4818 d 3417
Y11001 316 g 3314 d 1013 f 014 3811de 412 m 116
Y11002 4918 b 5917 c 5816 a 5211 6315 b 5217 cd 2117
Y11003 3114 d 3115 g 814 g 814 4110 d 912 l 910
Y11004 1515 e 4617 4512 bc 1317 6916 ab 5414 c 2414
Y11005 217 g 312 016 i 010 018 k 015 n 010
 注 :表中防效 ( %)或抑制率 ( %)以空白对照 (CK)结果 ,稗草出苗数为 496 苗Π盆 ,平均株高 618 cm ,每 10 株干重为 1518 mg 计算。公式为抑制
率 ( %) = (CK- 处理) ×100ΠCK。表中字母 a、b、c、d 等示方差分析 P = 0105 水平显著的多重比较。
Notes :Seedling control ( %) and inhibition( %) were the results of comparing with CK; seedling quantities were 496 plants per pot ,average height were 618 cm ,
dry weight of 10 plants were 1518 mg in the pot without rice1 Inhibition rate ( %) = (CK - treatment) ×100ΠCK;values followed by the different letters
within a column are significantly different as significantly indicated by variance analysis at P = 01051 The same below1
2411    作   物   学   报 30 卷  

2  结果与分析
211  野生稻抗稗草作用
  表 1 的方差分析结果表明 ,对稗草的密度防效
以 S68 和 S72 最好 ,达 7413 %和 7514 %。其次为
S37、S38、S42、S45、S67、Y11002 ,为 4116 %~5112 % ,
它们之间在 P = 0105 水平上无显著差异。效果以
S105、S110、S111、Y11001、Y11005 效果最差 ,防效低
于 10 %。对稗草株高和干重抑制率 ( %) ,以距离稻
苗越近的稗草受影响越大 ,且对稗草干重的影响较
株高明显 ,确定密度防效和 3~6 cm 范围内稗草干
重抑制率为关键评价指标。通过聚类分析结果 ,大
致分为 6 类 (图 1) , Ⅰ类 :S37 ,ACS = 5014 % ,ACW =
4416 % ; Ⅱ类 : S38、S43、S73、S40、S47、Y11005 ,ACS =
2416 % ,ACW = 212 % ; Ⅲ类 : S42、S67、Y11003、S48、
S46、S110、S105、S111、Y11001 ,ACS = 2416 % ,ACW =
216 % ; Ⅳ类 : S113、Y11004 , ACS = 1114 % , ACW =
5116 % ; Ⅴ类 : S45、S71 , ACS = 3816 % , ACW =
2614 % ; Ⅵ类 : S68、S72、Y11002 , ACS = 7919 % ,
ACW = 6115 %。根据 ACS和 ACW值 ,它们对稗草的
抗性趋势为 Ⅵ类 > Ⅰ类 > Ⅴ类 > Ⅲ类 > Ⅱ类。第 Ⅳ
类表现比较特殊 ,ACW 值较第 Ⅰ类大 ,而 ACS 值最
小 ,表明 S113 和 Y11004 对稗草出苗影响较小 ,但却
显著抑制稗草的正常生长。
212  野生稻株型比较和植株叶片水提液对稗草的
影响
  通过测定野生稻和非洲栽培稻水浸提液对稗草
生长的影响。清水空白对照 ,发芽指数为 182 ,发芽
率为 9814 % ,根长 3196 cm ,芽长 4135 cm。计算得抑
制率 ( %) ,结果见表 2。株型比较 ,长雄野生稻和非
洲野生稻表现株型上的高大优势。水提液培养结
果 ,对根长抑制较芽明显 ,故确定发芽抑制率和根长
抑制率为关键测定指标。聚类分析结果大致分为 5
类 (图 2) , Ⅰ类 :S37、S38、Y11002 ,AIG = 6513 % ,AIR
= 8419 % ; Ⅱ类 : S40、S42、S73、S105、S108 , AIG =
3110 % ,AIR = 2110 % ; Ⅲ类 : S43、S113、Y11004、S47、
S111、Y11001、Y11005 ,AIG = 817 % ,AIR = 510 % ; Ⅳ
类 : S44、S45、S110、S48、Y11003、S67、S71 , AIG =
5117 % ,AIR = 4412 % ; Ⅴ类 : S46、S68、S72 , AIG =
6016 % ,AIR = 7517 %。根据 AIG和 AIR 值 ,它们的
水提液活性趋势为 Ⅰ类 > Ⅴ类 > Ⅳ类 > Ⅱ类 > Ⅲ
类。方差分析结果 , 5 份材料 ( S37、S38、S68、S72、
Y11002)的水提液对稗草的抑制率 ( %)最高 ,其次为
另 6 份材料 (S44、S45、S46、S105、S110、Y11003) ,效果
以 S43、Y11001、Y11005 最差 ,在 P = 0105 水平上显
著低于其他材料。
表 2 野生稻株型比较和植株叶片水提液对稗草的影响
Table 2 Wild rice plants height and tillering and effect of water extract from leaf on barnyard grass seedling growth
编号
Code
秧龄 60 d
60 d after seeded
秧龄 90 d
90 d after seeded
株高
Height
茎蘖数
Tillering
株高
Height
茎蘖数
Tillering
发芽速度指数
Index of
sprouting
speed
抑制率
Inhibition of percentage ( %)
发芽率
Germination
根长
Root
芽长
Shoot
S37 6410 718 8616 g 1413 18 7917 a 9417 a 7911 a
S38 6815 611 8918 fg 1013 29 6410 b 8913 b 6911 c
S40 5217 1817 9619 e 1517 171 3116 j 1718 l 914 n
S42 4915 1614 9617 e 1218 176 1914 k 2012 k 1411 m
S43 5712 1611 9213 f 1313 185 1012 m 417 n 116 o
S44 5117 1016 8815 fg 1417 160 3819 i 5610 e 3911 h
S45 4910 317 6512 jk 513 158 4217 gh 3911 h 2019 l
S46 2011 3512 4113 k 3315 a 126 5617 d 7814 c 5614 e
S47 4716 815 11215 c 1513 d 189 1116 m 613 n 217 o
S48 5018 318 11418 c 511 g 166 3118 j 4514 f 2513 k
S67 3513 313 6715 j 918 ef 177 4814 f 4617 f 2712 k
S68 5115 1012 7513 i 1918 c 145 6011 c 7017 d 6614 d
S71 4716 811 7019 j 1714 cd 175 4417 g 4112 g 3515 i
S72 4418 713 8113 h 1819 c 133 6419 b 7811 c 7316 b
S73 4517 912 8415 g 1612 cd 187 2110 k 1617 l 918 n
S105 5514 617 9516 e 1416 c 186 2113 k 2414 j 1316 m
S108 6117 1114 11211 c 2015 bc 180 3112 j 2519 j 1217 m
S110 6119 519 6718 j 2518 b 162 4915 f 4711 f 3114 j
S111 5213 614 7812 i 2211 bc 179 1712l 416 n 017 o
S113 4612 718 6915 j 2613 b 182 1118 m 211 o 114 o
Y11001 5516 711 11119 c 1116 e 184 018 o 017 o 217 o
Y11002 4712 618 10817 d 915 ef 36 5211 e 7016 d 6412 d
Y11003 4716 517 11712 bc 1013 ef 170 2816 jk 3317 i 2716 k
Y11004 6910 612 12113 b 1211 e 184 1416 l 412 n 213 o
Y11005 7213 719 12611 a 815 f 186 311 n 1117 m 811 n
3411 11 期 张付斗等 :野生稻和非洲栽培稻抗稗草种质资源筛选和评价    

213  对稗草抗性综合评价
综合 211 和 212 的结果 ,盆栽和水提液试验均
表现较好的为具有化感作用潜力的野生稻和非洲栽
培稻 ,分别为 S37、S68、S72 和 Y11005 ,其相互间差异
在 P = 0105 水平时不显著。有 2 份竞争力强的材
料 ,S113 和 Y11004 盆栽中表现较好 ,显著抑制稗草
的株高和干重 ,但对出苗率影响不大 ,水提液生物活
性差 ,株形表现高秆、大冠层、分蘖数量多。盆栽和
水提液试验均表现较差的为非抗性野生稻 ,有 S43、
S47、S40、S73、Y11005 和 Y11001 等 7 份材料。比较
特殊的有两份材料 ,S38 和 S46 的叶片水提液效果
较好 ,处于图 2 中 Ⅰ类和 Ⅴ类 ,但盆栽中却表现非抗
性 ,处于聚类图 1 中 Ⅱ类和 Ⅲ类。其余 10 份野生稻
材料也表现出对稗草有一定抗性 ,但差异不显著。
3  讨论
311  植株水提液的生物活性测定是目前国内外化
感作用研究常用方法之一。可快速测定、筛选出具
化感作用潜力的品种 ,但因实验室内的生物测定并
不总是与田间表现一致[11 ] ,因此结果必须经过田间
检验。本研究中 ,测定的野生稻 S38 和 S44 的水提
液具有较高活性 ,但与盆栽结果并不一致 ,原因有待
进一步研究。
312  本研究评出的竞争能力强的非化感野生稻
S113 非洲栽培稻 Y11004 ,由表 2 可见 ,具有植株高
大、分蘖能力较强的特点。对稗草出苗无明显影响 ,
但其周围稗草生长受到严重抑制 ,是其竞争作用的
结果 ,这方面已有过相关报道[4 ,12 ] 。而化感品种则
没有特殊的株型。本文中评价的野生稻对杂草的抗
性不能简单地理解为化感作用或竞争作用 ,通常化
感作用与竞争作用是共同存在的 ,但可以认为化感
资源的化感作用在对稗草的抗性中占主导地位 ,在
生物测定和盆栽试验中均表现出对稗草明显的抑制
作用。竞争能力强的非化感野生稻在盆栽中对稗草
有明显抑制效果 ,但在生物测定中化感作用效果较
差。非抗性野生稻在生物测定和盆栽中都未表现或
表现出极低抑制作用。
313  本研究获得的抗草资源 ,将与国际水稻所 ( IR2
RI)提供的 AC1423 和美国农业部水稻研究中心提供
的 PI312777 进行抗性比较并开展化感物质的分离
和鉴定研究。本研究获得的抗稗草种质为进一步研
究作用机理和遗传学规律提供了资源。
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