全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 23 期 2015 年 12 月

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·中药现代化论坛·
中药制剂指标性成分群辨识思路与方法解析
王灯节 1，刘 廷 1，狄留庆 1, 2, 3*，李俊松 1, 2, 3，单进军 1, 2, 3，赵晓莉 1, 2, 3，康 安 1, 2, 3，乔宏志 1, 2, 3
1. 南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023
2. 江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心，江苏 南京 210023
3. 南京市中药微丸产业化工程技术研究中心，江苏 南京 210029
摘 要：中药制剂具有多成分、多靶点、多环节整体作用的特点，使得其制备工艺优化及质量标准体系构建困难，正确辨识
中药制剂中与功效密切相关的主要活性成分群并以此构建中药制剂工艺、质量评价体系成为中药制剂工艺设计与质量控制亟
待解决的关键科学问题。较为全面地分析了谱-效相关、中药药动学、血清药物化学和血清药理学、整合效应关联性分析、
计算机虚拟筛选以及敲入/敲除对比分析等研究方法的可行性，以期为中药制剂工艺与质量评价基于标志性活性成分群的辨
识思路提供借鉴。
关键词：指标性成分群；谱-效相关；药动学；血清药物化学；血清药理学；整合效应关联性分析；计算机虚拟筛选；敲入/敲除
中图分类号：R284；R285 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)23 - 3447 - 08
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.23.001
Analysis on ideas and methods to identify target components group of Chinese
materia medica preparation
WANG Deng-jie1, LIU Ting1, DI Liu-qing1, 2, 3, LI Jun-song1, 2, 3, SHAN Jin-jun1, 2, 3, ZHAO Xiao-li1, 2, 3,
KANG An1, 2, 3, QIAO Hong-zhi 1, 2, 3
1. College of Pharmacy, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China
2. Jiangsu Engineering Research Center for Efficient Delivery System of TCM, Nanjing 210023, China
3. Nanjing Engineering and Technology Research Center for TCM Pellets, Nanjing 210029, China
Abstract: The preparation of Chinese materia medica (CMM) possesses the characteristic of holistic function involving
multi-component, multi-target, and multi-link. This characters make it difficult to optimize the preparation process and construct the
quality standards of CMM. Thus process building and quality evaluation system based on correctly identifying the components that
closely related to the efficacy is a key scientific issue in the preparation process design and quality control of CMM. In this paper, a
more comprehensive analysis on the feasibility of different research methods was carried out, including the spectral-efficiency
relationships, pharmacokinetics, serum medicinal chemistry and serum pharmacology of drugs, the effect of integration effect
correlation analysis, virtual screening, and comparative analysis of knock-in/knock-out. The purpose of this article is to provide the
reference for identifying the bioactive marker group which is used for the CMM preparation process and quality evaluation.
Key words: target components group; spectral-efficiency relationships; pharmacokinetics; serum medicinal chemistry; serum pharmacology;
integration effect correlation analysis; virtual screening; knock-in/knock-out

中药制剂是在中医理论指导下，以中医方剂为
基础，中药饮片为原料，通过提取、分离、纯化获
得半成品，再经药剂学方法加工制成各种剂型的药
品。按原料性质的不同，中药制剂可以分为具有明
确化学结构的中药单体成分制剂，如葛根素
（puerarin）；有效成分有明确定量范围规定的中药有

收稿日期：2015-09-03
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81273655）；江苏省“333 高层次人才培养过程”资助项目（BRA2013201）；江苏高校优势学科建设
工程资助项目；江苏省“青蓝工程”创新团队支持计划资助
作者简介：王灯节（1992—），女，硕士研究生，研究方向为中药新剂型新技术应用与评价。Tel: (025)85811230 E-mail: dengjiewellbeing@163.com
*通信作者 狄留庆，教授，博士生导师。Tel: (025)85811230 E-mail: diliuqing@hotmail.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 23 期 2015 年 12 月

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效部位制剂，如黄芩提取物；中药复方提取后的中药
复方提取物制剂，如复方丹参滴丸[1]。其中，中药有
效部位制剂和中药复方提取物制剂的成分体系极其
复杂，其功效往往是多种成分整体协同作用的综合体
现。至今为止，中药制剂中所含的成分在整体方剂中
的作用仍不太明确，限制了中药制剂制备工艺的优化
及质量标准的构建[2]。因此，辨识中药制剂中与功效
密切相关的主要活性成分群并以此优化中药制剂工
艺、构建质量评价体系，已成为中药制剂工艺设计与
质量控制亟待解决的关键科学问题之一。
本文通过对谱-效相关、中药药动学、血清药物
化学和血清药理学、整合效应关联性分析、计算机
虚拟筛选以及敲入/敲除对比分析等目前几种指标
成分辨识方法的论述，探讨从中药制剂复杂成分群
中寻找到与功效相关的主要活性成分群用于构建质
量评价体系的研究思路，以期为中药制剂工艺优选
与质量评价体系构建提供借鉴。
1 中药制剂指标性成分群辨识方法分析
1.1 谱-效相关性分析
谱-效相关性分析是指将中药指纹图谱或特征图
谱中化学成分的变化与其疗效变化相结合，研究其相
关性，找出与药效活性相关的药效物质群，即“谱效
关系”研究，目前成为探索中药标志性药效物质基础
的主要方法与手段。谱-效相关性分析属于体外辨识方
法，其研究思路分为 3 步：（1）多维联用技术分析“药
效检测”信息处理；（2）获取中药指纹图谱和药效数
据结果；（3）通过数学处理，建立谱-效数学模型，确
定出与药效相关的成分群，用于工艺优选与质量评
价。其数学分析方法有相关分析、回归分析、神经网
络分析、灰色关联度分析和主成分分析等[3]。
Xu 等[4]收集了 78 批葛根样品并分别获得每一批
样品与混合对照品的指纹图谱和抗氧化活性，运用安
全独立筛选方法（SIS）联合区间偏最小二乘法（iPLS）
建立葛根指纹图谱与抗氧化活性之间的相关关系，再
运用逐步回归法和留一法从指纹图谱中筛选出与抗
氧化活性相关性大的区间，最终确定 5 个异黄酮类成
分共同决定葛根的抗氧化活性。蒋建兰等[5]基于
GC-MS 分析，运用正交投影偏最小二乘法和双变量
相关分析，建立了姜黄挥发油的化学成分与其抑制人
宫颈癌 HeLa 细胞作用的谱效关系模型，发现 9 个特
征峰与姜黄挥发油抑制 HeLa 细胞活性显著相关，并
鉴定出 8 个化合物，分别为芳姜黄酮（ar-tumerone）、
β-姜黄酮（β-tumerone）、姜烯（zingiberene）、β-榄香
烯（β-elemene）、α-姜黄烯（α-curcumene）、α-姜黄酮
（α-tumerone）、吉马酮（germacrone）和 β-倍半水芹
烯（β-sesquiphellandrene）。
谱-效相关性分析方法的特色在于将指纹图谱
中的化学成分信息与药效信息相结合，建立特征图
谱与药效相关性；并可在已有谱效相关方程的基础
上预测中药制剂药效，指导中药制剂工艺优化。该
方法同时也存在如下问题：（1）指纹图谱具有模糊
性，不能全面显示化学成分信息。中药成分复杂，
量相差悬殊，化合物结构不尽相同，现有图谱获取
方法无法体现中药成分同时测定的准确性、重复性
及微量性。指纹图谱或特征图谱的共有峰均为人为
识别，进行相关分析时未能稳定表达的特征峰或响
应值低、分离度差的特征成分往往被忽略。（2）现
有中药药效指标的选择过于笼统，没有针对性。很
多中药制剂来自于中药复方，偏于整体调节，作用
广泛，但现阶段缺乏能够较好反映中医证候特点的
动物模型以及与该模型匹配的公认、专属、高灵敏
度的指标。（3）中药制剂的体内过程较为复杂，使
得图谱中成分的量与药效不成线性关系，简单用一
级速度过程或线性过程来描述，无法有效得到图谱
与真正药效之间的关系[6]。
1.2 中药药动学研究
中药制剂的成分虽然极其复杂，但是一定存在着
能够对疾病起到治疗作用的物质基础，而这些效应物
质在体内必定经过吸收、分布、代谢、排泄（ADME）
的动态变化，从而发挥作用。因此，通过研究中药制
剂的药动学变化，可以阐明和辨识效应物质基础，为
中药制剂工艺评价及质量标准建立提供科学依据。
中药药动学属于体内辨识方法，近年来，研究
发现血药浓度法、生物效应法和药动（PK）/药效
（PD）学模型结合法等经典药动学研究方法无法系
统地揭示中药在体内的众多复杂生理过程，于是提
出了中药多组分整合药动学、药动标志物（PK
marker）、网络药理学、代谢组学等新理念与研究方
法，大大推进了中药药动学研究的进展[7]。
1.2.1 经典中药药动学 黄开福[8]在四物汤指纹图
谱的基础上，以梓醇（catalpol）为主药，将梓醇、
藁本内酯（ligustilide）、阿魏酸（ferulic acid）、芍
药苷（paeoniflorin）和川芎嗪（tetramethylpyrazine）
进行组合配伍给药，结果表明，配伍后梓醇和阿魏
酸在大鼠体内的暴露量明显减少，而川芎嗪暴露量
增加。同时，芍药苷、川芎嗪和芍药苷＋川芎嗪可
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以反转梓醇＋阿魏酸对藁本内酯达峰时间的影响，
亦可以改变阿魏酸在大鼠体内的吸收行为。而梓醇、
藁本内酯、阿魏酸和芍药苷则可以改变川芎嗪在大
鼠体内的吸收行为，认为梓醇、芍药苷和芍药内酯
苷均可作为四物汤的代表性组分。李涛[9]采用体外
化学指纹图谱-在体肠肝摄取成分谱-整体动物多成
分药代特征的研究思路，对黄芩汤的药动学特征进
行研究，对不同给药剂量、不同给药次数和生理、
病理状态下的药动学行为进行比较，确定甘草素二
糖苷（liquiritin apioside）、甘草苷（liguiritin）、黄
芩苷（baicalin）、甘草素（liguiritigenin）、千层纸素
A 葡萄糖苷（oroxylin A glucoside）、汉黄芩苷
（wogonoside）、黄芩素（baicalein）、异甘草素
（isoliquiritigenin）、汉黄芩素（wogonin）和千层纸
素 A（oroxylin A）是黄芩汤发挥药效的物质基础，
是黄芩汤潜在的“质量控制标志物（quality control
marker，QC marker）”和“药动标志物”，其中黄
芩苷是体内潜在的“药物代谢标志物（ drug
metabolism marker，DM marker）”。
1.2.2 PK-PD相关性 Han等[10]应用药动学方法研
究泻心汤的药效物质基础，结果发现泻心汤可以促
进结肠炎的恢复并通过降低髓过氧化物酶（MPO）
水平和肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）与核因子 -κB
（NF-κB）p65 炎症因子的表达，促进白细胞介素-10
（IL-10）的产生，从而减轻溃疡性结肠炎模型大鼠
的结肠炎症损伤。大鼠血浆中有 5 个成分的 AUC
与泻心汤疗效呈正相关，分别是黄芩苷、小檗碱
（berberine）、次黄芩苷（wogonoside）、汉黄芩素、
大黄酸（rhein）；结肠组织中有 6 个化合物的浓度
也与疗效呈正相关，分别是黄连碱（coptisine）、药
根碱（jatrorrhizine）、非洲防己碱（palmatine）、小
檗碱、黄芩素和大黄素（emodin），这些成分可能是
泻心汤的药效物质基础。
1.2.3 整合药动学 Xie 等[11]研究了五味子中 5 种
成分对 CCl4 诱导的肝损伤治疗作用的整合药动学
行为，发现整合参数及 CYP450 酶系 CYP3A 活性
与天冬氨酸转氨酶（ALT）及丙氨酸转氨酶（AST）
水平有很好的相关性，说明几种成分的整合药动学
参数可以用来评价五味子各种成分的整体体内药动
学过程。Xiong 等[12]研究了大鼠 ig 鸡骨草提取物后，
3 种黄酮碳苷类成分 6-C-葡萄糖基-8-C-木糖基洋芹
素（vicenin-2）、异夏佛塔苷（isoschaftoside）、夏佛
塔苷（schaftoside）的整合药动学和体内分布及其与
生物效应的相关性，利用整合双峰值药动学模型发
现这 3 种成分在小肠可能有 2 个特定吸收部位，且
胆汁流量与脚趾肿胀实验表明，药动学和药效学之
间有显著相关性。同样，Dong 等[13]利用 AUC 加权
平均法对闹羊花中闹羊花素与心脏毒性的相关性进
行了整合药动学研究，He 等[14]通过给大鼠 ig 交泰
丸，研究了其中的 5 种原小檗碱型生物碱的单剂量
与多剂量的整合药动学，均促进了整合药动学在中
药制剂效应物质基础辨识中的应用。
1.2.4 代谢组学 中药中有些成分体外不能被吸收
或代谢后失活，有些成分在体外无效而在体内代谢
转化为活性成分或通过神经体液系统而发挥药效，
因此，研究中药不仅要研究其本身的化学成分，还
要研究给药后在体内的代谢产物，运用代谢组学结
合多元统计学工具进行体液多成分综合分析是一种
有效可行的方法[15]。Kim 等[16]分别比较了台湾中医
药数据库（TCM Database@Taiwan）中 14 306 个成
分和 DrugBank 3.0 数据库中 1 394 个成分与京都基
因和基因组百科全书（KEGG）中 2 889 个人体代
谢物的相似度，发现中药成分与人体代谢产物的结
构相似度很高，于是提出中药成分与人体代谢产物
结构相似性是中药诱导人体靶点及作用通路从而发
挥药效的假说，并由此提出一种系统研究中药的思
路，即从中药中寻找与人体代谢产物结构相似的物
质，从而借鉴代谢产物的作用机制分析中药的作用
机制，从中药中发现新靶点及新药。Hu 等[17]研究
po 三七提取物后，三七中皂苷类成分的人体药动学
特征，发现 20(S)-原人参二醇 [20(S)-protopanaxadiol]
和 20(S)-原人参三醇 [20(S)-protopanaxatriol] 的氧
化代谢产物是人参皂苷在血液中的主要形式，与三
七的临床疗效密切相关。
中药药动学能够反映药物在体内的 ADME 过
程及其相关规律。但是目前研究存在以下问题：（1）
许多药效成分在复方中的量很低，导致其在全身的
暴露水平更低，以至于难以检测；（2）中药复方不
仅在体外涉及到多种药物的配伍，而且服用后体内
影响因素也非常多，如内源性杂质、降解产物、被
吸收入血的其他成分，均可能干扰生物样品的分离
测定；（3）中药成分复杂，体内效应与成分之间存
在非直接相关性[18]。
1.3 血清药物化学和血清药理学研究
血清药物化学是指采用现代分析方法对含药血
清中的药源性成分进行定性和定量分析的方法。血清
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药理学是指将含药血清作用于体外细胞模型进行药
效学评价的方法[19]。两者相互验证，均属于体内辨识
方法，其核心思想为入血成分可能是中药有效成分，
入血成分可为原型成分和代谢产物。其技术路线包括
提取物制备及指纹图谱建立、血中移行成分辨识、血
中移行成分分离与鉴定、血中移行成分活性测定[20]。
郭辉等[21]对大黄附子汤进行血清药物化学初
步研究，在大鼠 ig 给予大黄附子汤后的血清中发现
18 个入血成分，其中 14 个为代谢产物，4 个为原型
成分，为深入阐述大黄附子汤药效物质基础提供依
据。田友清等[22]结合血清药理学与血清药物化学研
究香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的物质基础，
结果香青兰在血清中出现的 4 个移行成分能够显著
升高总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性及细胞活力，
明显抑制细胞凋亡，可能为香青兰保护心肌细胞缺
氧/复氧损伤的物质基础。王喜军等[23]研究茵陈蒿
汤不同配伍对大鼠血中移行成分的影响，发现茵陈
蒿汤给药后大鼠血中移行成分有 21 个，其中在全方
配伍时才能被机体吸收且具有较强保肝利胆活性的
成分有 8 个。
血清药物化学研究思路的优势在于从入血成分
入手分析药物的效应物质基础，成本较低，易操作，
应用面广。存在的问题包括：（1）该方法主要适用
于口服中药，且需要有效成分吸收入血，不适用于
非口服给药或口服不吸收但通过调节胃肠神经体液
起效的药物；（2）某些吸收入血的成分可能因为量
低难以检测而被忽略；（3）研究从化学成分指纹图
谱的建立开始，需进行植物化学分离、药理活性检
测，周期相对较长[20]。
1.4 整合效应关联性分析
整体观念是中医的两大基本观念之一，中药制
剂发挥药效亦是多成分、多靶点、多环节整体作用
的体现，而中药效应物质基础的研究很长一段时间
都是在化学分离之后逐个进行活性测试或活性导向
下的追踪分离。随着中药物质基础研究的不断深入，
逐渐意识到中药“整体作用大于各部分作用之和”
的重要性。姜廷良等[24]提出中药及其方剂的终末效
应是其相应活性物质群作用于多个靶点的优势、放
大、选择、嵌合、适应等作用的综合、聚类、协调、
反馈、平衡，即“整合”的结果。而单个活性物质
群可以形成一个整合效应，多个整合效应之间亦可
发挥协同增效作用，于是提出整合效应关联性分析
的概念。目前，除了从拆方与配伍方面研究复方制
剂的整合效应之外，亦从效应部位分析中药的整合
效应，但研究还相对较少。
刘立等[25]运用整合生物效应评价桃红四物汤
及其各分离部位对热板致小鼠疼痛、醋酸致小鼠扭
体反应、小鼠痛经模型及离体子宫收缩的影响，探
讨效应部位群的物质基础，结果表明桃红四物汤效
应部位除整方水煎液（TH-2）和醇沉上清部位
（TH-4）外，30%醇洗部分（TH-9）、40%醇洗部分
（TH-10）和 50%醇洗（部分 TH-11）是主要的效应
部位群，包括单萜苷类、苯酞类、有机酸类等成分，
其中 TH-9 的效应较强。陈磊等[26]通过文献研究，
归纳整理出丹参的活性成分主要为脂溶性的二萜醌
类化合物和水溶性的酚酸类化合物，并试图找出丹
参中发挥抗肿瘤作用的结构母核，提出以结构母核
为基础研究丹参活性成分的整合效应的研究思路。
宋宗华等[27]采用正交试验设计对苓桂术甘汤进行
拆方配伍研究，对配伍得到的 16 个处方进行小鼠常
压耐缺氧、对抗氯仿所致小鼠心律失常等药理实验，
运用 HPLC 指纹图谱，将所得药理数据和各指纹峰
的峰面积相关联，探讨复方苓桂术甘汤的药效物质
基础。结果从 50 个色谱峰中辨识出 17 个成分作为
药效物质基础，其中桂皮酸（cinnamic acid）、甘草
酸（glycyrrhizin）和去氢土莫酸（dehydrotumulosic
acid）被确定为质量控制指标。
整合效应关联性分析体现了中药复方制剂的整
体作用，与中医“君、臣、佐、使”组方原则相吻
合，是符合中医药理念的一种方法，有较大的发展
前景。但是在“整合”之前必定需要先确定组成“整
体”的各个“部分”的整体效应，如今对整体的分
割还缺少有说服性的依据。曹俊岭等[28]提出的生物
热力学可为中药及复方整合作用研究提供较好的思
路和方法，运用生物热力学可以间接了解生物体新
陈代谢状态和变化规律，可以高通量筛选和分析药
物的生物活性，进一步结合药理、毒理、化学分析
手段阐明中药及复方的整合作用。然而整合效应之
间的关联性分析还未有人提出合适的数学模型。
1.5 计算机虚拟筛选
虚拟筛选是针对重要疾病特定靶标生物大分子
的三维结构或定量构效关系（QSAR）模型，从现
有小分子数据库中，搜寻与靶标生物大分子结合或
符合 QSAR 模型的化合物，进行实验筛选研究。其
目的是从几十到上百万个分子中，发现有潜在可能
活性的化合物，集中目标进行攻关。计算机虚拟筛
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选方法主要有 2 种：一是基于配体小分子的虚拟筛
选，根据现有药物的结构、理化性质与活性关系的
分析，建立定量构效关系或药效基团模型，预测筛
选新化合物的活性；二是基于受体生物大分子结构
的虚拟筛选，即基于分子对接的虚拟筛选方法，是
根据实验测定的或同源模建的受体生物大分子的三
维结构，通过分子对接的方法，确定小分子与受体
的结合构象，并评价其与受体的结合活性[29-30]。分
子对接、反向分子对接相似度搜索、子结构搜索、
药效团搜索、类药性筛选及化学成分毒性预测等技
术，在中药制剂效应物质基础辨识过程中，为处方
优化及新处方设计提供依据[31]。
陈少军等[32]利用分子对接技术，选取 149 个丹
参化学成分作为配体，选取与血栓密切相关的 4 种
蛋白抗凝血酶 III、凝血酶、血栓调节蛋白、凝固因
子 Xa 作为受体，运用 PyRx 0.8 软件 Autodock Vina
模块进行对接，发现 3-(3,4-二羟基苯基)乳酰胺
[3-(3,4-dihydroxyphenyl) lactamide] 、 原 儿 茶 酸
（protocatechuic acid）、油酰新隐丹参酮（oleoyl neo
cryptotanshinone）、丹参内酯（tanshilactone）分别
与抗凝血酶 III、凝血酶、血栓调节蛋白 EGF（4-5）、
凝固因子 Xa 结合的活性较高。翟西峰等[33]应用分
子模拟软件 Sybyl-x 2.0 软件中的 Surflex-Dock 模
块，以黄芪中已报道的小分子化合物作为配体，分
别与糖尿病相关的 5 种受体进行对接，以亲和力打
分判断黄芪中的降血糖活性成分，发现黄芪皂苷 I
（astragaloside I）、黄芪甲苷（astragaloside A）、5-
羟基-4-甲氧基黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-丙二酸
酯与 α-葡萄糖苷酶的结合活性较高；黄芪异黄烷-
7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-丙二酸酯与二肽酰多肽酶
IV（DPP-IV）的结合活性较高；黄芪紫檀烷-3-
O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-丙二酸酯与 PPARγ 的结合活
性较高；黄芪皂苷 I（astragaloside I）、大豆皂苷 I
（soyasaponin I）与蛋白酪氨酸磷酸酶 1B（PTP1B）
的结合活性较高；黄芪甲苷（astragaloside A）、黄
芪皂苷 VIII（astragaloside VIII）、芒柄花素-7-O-β-D-
葡萄糖苷-6″-O-丙二酸酯、2′-羟基-3′,4′-二甲氧基-
异黄烷葡萄糖苷与醛糖还原酶的结合活性较高。龙
伟等[34]采用计算机虚拟筛选技术以中医组方理论
“君、臣、佐、使”为参照，对黄连解毒汤药效分子
进行功能分群。经过实验建立的复方分子功能分群
标准，发现黄连解毒汤 265 个化学成分分子中君药
分子 12 个，臣药分子 152 个，佐药分子 48 个，使
药分子 53 个。说明中药复方药效成分之间存在“君、
臣、佐、使”的功能分群，具有分子微观意义。
计算机虚拟筛选通过计算机技术快速、大量富
集活性化合物，减少药物筛选的盲目性，大大缩短
研究周期，降低筛选成本，提高药物筛选可行性。
与传统直接药理测试筛选相比，计算机虚拟筛选过
程不受样品的限制、方便快捷。然而，在中药研究
中，计算机虚拟筛选技术只能作为一种辅助工具，
仅为随后实验提供一些研究思路和线索，应该合理
选择应用。目前国内用于大规模虚拟筛选的服务平
台鲜为少见，缺少一个拥有大量中药化学成分的数
据库。计算机在筛选药物过程中仅考虑受体和配体
的作用，而未考虑药物之间复杂的作用机制，且目
前缺乏一种完善有效的评价方法来评价配体，导致
该方法易出现假阳性和假阴性结果。
1.6 敲入/敲除比较分析
敲入/敲除技术是借鉴“基因诊断治疗”策略，以
中药谱效关系为切入点，建立基于成分敲入/敲除的中
药“谱-效”关系和“量-效”关系的研究模式，即通
过成分敲除的策略分析和辨识中药关键药效组分，通
过成分敲入的策略确定关键组分的“量-效（毒）”关
系，从而定性、定量地辨识中药制剂效应物质基础[35]。
该方法辨识中药制剂效应物质基础需完成 3 个
步骤：（1）选择性敲除某一中药或其制剂的成分并
制备其阴性样品；（2）评价目标成分、阴性样品以
及方药总提取物的生物活性；（3）确定关键药效组
分及其“量-效”关系。
目前已有研究者基于成分敲入/敲除技术，辨识中
药牛黄[35]、金银花[36]和黄连[37]的药效物质基础，研究
各药的质量控制模式，进一步揭示了金银花、牛黄和
黄连的抗菌活性物质基础，为其质量标准完善奠定了
基础。Chen 等[38]为了找出龙眼籽提取物抗氧化活性
的有效物质，将活性评价测定、FT-ICR-MS 和
HPLC-ESI-MS 分析方法与敲除技术相结合，研究结
果表明，鞣花酸（ellagic acid）及其衍生物和 p-coumaric
acid glycoside 对龙眼籽抗氧化活性有重要贡献，而没
食子酸（gallic acid）、柯里拉京（corilagin）、(S)-
flavogallonic acid、甲基鞣花葡萄糖苷酸（methyl-ellagic
acid glucopyranoside）和没食子酸乙酯（ethyl gallate）
的贡献值非常小。Liu 等[39]使用乙酰胆碱酯酶（AChE）
和辐照诱导过的石蒜鳞茎作为实验材料，从石蒜鳞茎
中筛选出 4 个目标峰，通过目标峰的捕获和敲除，结
合活性评价，观察到 4 峰混合物的生物活性与石蒜鳞
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茎提取物的生物活性相似，并提出应用在线成分捕
集制备系统，结合自动化阵列管理，精准定向、自
动无损捕获目标候选等效成分群及其剩余部分。Liu
等[40]提出通过体外多种药理模型和系统生物学方
法评价敲除的“候选成分群”对复方“整体”药效
的贡献度，同时评价敲除剩余部分的活性，进行正
反验证，再经过多轮筛选与等效性评价，发现能基
本达到原方整体药效的等效成分群的方法。应用此
方法从复方丹参滴丸中发现 18 个成分组成的等效
成分群，其总量占复方制剂的 15.01%，可视作制剂
的有效组分“标示量”，且该成分群在细胞模型和大
鼠心肌梗死、缺血再灌注模型上均呈现出与复方丹
参滴丸相当的药效。
敲入/敲除技术以中药整体为出发点，始终关联药
效，注重中药多组分的整合作用，可快速准确地辨识关
键药效物质及其相互作用关系，在此基础上，可制定各
药效物质“量而又准、关联药效、可控可评”的质量控
制标准[41]，为打破现行中药质量控制标准的窘局找到了
突破口。存在的问题是该技术对分离、分析技术要求较
高，且该方法的实用性和操作性仅适用于疗效确切、药
理药效作用客观、指标可量化的中药制剂，不适用于化
学成分复杂、本底不清的中药及中药复方制剂。
2 中药制剂指标性成分群辨识思路与方法
鉴于每种指标性成分群的辨识方法各有长处，因
此可选择性地将各种方法联用，取长避短，本文提出
中药制剂指标性成分群辨识模式，见图 1。

图 1 中药制剂指标性成分群辨识模式
Fig. 1 Identification mode of target components group from CMM preparation
GC
GABA
AT III
FX
TNF-α
NF-κB
Asp189
Ary221
EGF
P2X2/3
Lys224
基于文献研究的中药制剂组成药物中主要成分
及其相关活性表达研究分析
中药制剂主要活性成分群
Au1k<.³1/EÝ

5%4°9C)Ú:Úd

中药制剂与疗效相关的主要活性成分
Û4ÒBB,ÌGûÚd

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PK
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中药制剂主要活性成分群（标志性成分及其比例关系）
PK
PD
PK-PD
君
臣
佐
使
Herbal
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 23 期 2015 年 12 月

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中药制剂指标性成分群的辨识是中药制剂工艺
合理性评价体系构建的工作基础，对避免当前中药制
剂工艺合理性评价体系存在的指标成分单一或体系
指标性过多依赖化学分析而淡化生物效应关联性的
问题具有重要指导意义。本文提到的 6 种思路方法中
谱-效相关、中药药动学研究是中药制剂指标性成分群
辨识最常用的思路与方法，血清药物化学和血清药理
学尚不能够全面反映药物的作用基础，整合效应关联
性分析、计算机虚拟筛选以及敲入/敲除技术属于后起
之秀，它们的应用有待进一步验证与发展。这 6 种思
路与方法都可以从不同方面辨识中药制剂指标性成
分群，但是各又存在着局限性，其中分离、分析手段、
中医药药效指标的选择及其灵敏度问题，是限制各种
方法发展的共性问题。近年来，固相萃取技术、固相
微萃取技术、液相微萃取技术、分子印记聚合物技术、
涡流色谱技术等分离、分析手段正在不断的发展与应
用，使得到高纯度与浓度的分离物并能够快速分析成
为可能。同时，由于中药往往具有双向调节及偏于整
体调节作用，整体动物药效学评价越来越得到认可，
但是需要在研究设计中谨慎且全面地选择更为客观
的检测指标以及更为规范化的药效学研究作为研究
结果可靠、准确的必要条件。
提出的中药制剂指标性成分群辨识模式综合了
谱-效相关与中药药动学相结合、谱-效相关与敲入/
敲除技术相结合、中药药动学与整合效应关联性分
析相结合等，最终在中药制剂处方配伍理论指导下，
确定中药制剂指标性成分群，从而为揭示中药制剂
物质基础，完善工艺、质量评价体系提供科学有力
的依据。
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