全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 13 期 2015 年 7 月
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上海地区 10 种中药饮片微生物污染情况研究
范一灵，李琼琼，房 蕊，杨美成
上海市食品药品检验所，上海 201203
摘 要：目的 考察上海地区生产的 10 种中药饮片微生物污染情况。方法 参考《中国药典》2015 年版第 3 公示稿微生物
相关检查方法，对 94 份样品进行微生物计数、耐热菌计数和 7 种致病菌的检查，初步了解各类中药饮片的生物负载水平。
结果 样品需氧菌总数计数结果介于 10～108 CFU/g，霉菌和酵母菌总数计数结果介于 10～107 CFU/g，耐胆盐革兰阴性菌
（MPN 法）和耐热菌的检出率分别为 22.3%（21/94）和 76.6%（72/94），有 1 批样品检出大肠埃希菌（100＜N＜103 MPN/g）。
样品中均未检出沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、志贺氏菌（GB 4789.5）和溶血性链球菌（GB 4789.11）。
按《欧洲药典》8.0 版、《日本药典》16 版和《美国药典》37 版相关限度标准判断，本实验考察的中药饮片样品中微生物项
目不合格率分别为 5.3%、18.1%和 23.4%。结论 中药饮片极易受到多种微生物的污染，需要开展更深入的风险评估工作，
完善中药饮片检验方法和评价标准，降低患者用药风险。
关键词：中药饮片；微生物污染；耐热菌；需氧菌；霉菌；酵母菌；耐胆盐革兰阴性菌；大肠埃希菌；沙门菌；金黄色葡萄
球菌；铜绿假单胞菌；白色念珠菌；志贺氏菌；溶血性链球菌
中图分类号：R921.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)13 - 1908 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.13.009
A survey of microbial contamination for ten processed pieces of Chinese materia
medica in Shanghai
FAN Yi-ling, LI Qiong-qiong, FANG Rui, YANG Mei-cheng
Shanghai Institute for Food and Drug Control, Shanghai 201203, China
Abstract: Objective To investigate the microbial contamination of ten kinds of processed pieces of Chinese materia medica (CMM)
manufactured in Shanghai. Methods The bio-burden of 94 samples was analyzed for microbial enumeration, heat-resistant strains
enumeration and detection of seven pathogens according to microbiology methods in Chinese Pharmacopeia 2015 (the third draft for
public release). Results The range of total aerobic microbial count was from 10—108 CFU/g. The range of total combined yeasts and
molds count was from 10—107 CFU/g. The detection rate for bile-tolerant Gram-negative bacteria (MPN method) and heat-resistant
strains were 22.3% (21/94) and 76.6% (72/94), respectively. Meanwhile, Escherichia coli was detected in one sample (100 < N < 103
MPN/g). However, other pathogens such as Salmonella, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Shigella
(GB 4789.5) and hemolytic Streptococcus (GB 4789.11) were not detected. In this study, 5.3%, 18.1%, and 23.4% of the total samples
were not consistent with the microbiology requirement of EP 8.0, JP 16, and USP 37, respectively. Conclusion This study shows that
processed pieces of CMM is contaminated by varied microorganisms. Further research on risk assessment should be carried out to
re-evaluate the test method and process system of processed pieces of CMM for the sake of reducing patients’ risk.
Key words: processed pieces of Chinese materia medica; microorganism; contamination; heat-resistant strains; aerobic
microorganism; molds; yeasts; bile-tolerant Gram-negative bacteria; Escherichia coli; Salmonella; Staphylococcus aureus;
Pseudomonas aeruginosa; Candida albicans; Shigella; hemolytic Streptococcus
中药饮片（processed pieces of Chinese materia
medica）是中药材经炮制加工后可用于中医临床的
产品，许多中药饮片来自于天然植物、昆虫、动物
或矿物，自身带有大量微生物。中药饮片来源的多
样性与加工、运输和储藏的随意性使得中药饮片极
易受到微生物污染，并已影响到饮片自身和其下游
收稿日期：2015-02-21
基金项目：国家药典委员会 2013 年度国家药品标准提高工作（附录）（编号：1209）；上海市食品药品检验所重点项目（SKT-2014-10）
作者简介：范一灵（1983—），男，硕士，主管药师，从事食品和药品的微生物检验和方法研究。Tel: 13512104684 E-mail: tcfyl@163.com
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中成药产品的质量和安全性[1-4]。由于中药饮片样品
的特殊性，其微生物检验方法与一般化学药和中成
药在取样量、检验步骤和评价标准上均有不同。《欧
洲药典》8.0 版（EP 8.0）和《日本药典》16 版（JP
16）中已明确收载了中草药（天然药物）微生物限
度的检查方法和限度标准[5-6]。
虽然，《上海市中药炮制规范》2008 版已经收
载了 965 个中药饮片品种，《中国药典》2010 版一
部中收载药材 593 种和饮片 822 种，但除直接入口
的中药品种外都未规定微生物限度标准，也没有针
对性的微生物检查方法[7]。我国中药饮片微生物检
查方法和标准长期处于缺失状态。中药饮片的炮制
过程多数较为简单，通过传统的挑拣和切制等传统
工艺极可能带入新的污染。即使经过加热或酒精处
理等工艺也不能完全去除潜在的微生物致病性风
险[8]，尤其是耐热菌和各类微生物的毒素残留[9-11]。
中药饮片的微生物污染情况未能得到应有的关注，
导致饮片中微生物污染相关的安全评价缺失。本研
究通过对上海地区生产的常见的 10 种中药饮片微
生物污染情况的调查，初步掌握中药饮片的生物污
染负载水平，了解中药饮片的微生物危害因子，为
中药饮片微生物污染风险评估和炮制过程中的微生
物控制提供数据支持。
2 方法与结果
2.1 中药饮片样品采集
本研究收集上海地区市场上常见的 10 种中药
饮片共计 94 批次，由上海 5 家中药饮片生产厂家提
供，分别为上海华宇药业有限公司（HY）、上海青
浦中药饮片厂（QP）、上海康桥中药饮片厂（KQ）、
上海虹桥中药饮片厂（HQ）和上海养和堂中药饮片
厂（YHT）（表 1）。其中山慈菇采集到 4 个批次，
其余 9 个品种均采集到 10 个批次，每批次样品量不
少于 100 g。样品均由笔者按《中国药典》2010 年
版各药材项下相关要求鉴定，结果见表 1。
表 1 试验所用中药饮片样品
Table 1 Processed pieces of CMM tested in this study
来源和批数 序号 品种 用法 炮制工艺
HY QP KQ HQ YHT 总批次合计
1 山药 Dioscoreae opposita 口服 切制 2 2 2 1 3 10
2 炙甘草 Glycyrrhiza uralensis 口服 蜜炙 2 1 1 1 5 10
3 玄参 Scrophularia ningpoensis 口服 切制 3 1 2 2 2 10
4 川芎 Ligusticum chuanxiong 口服 切制 2 2 1 1 4 10
5 连翘 Forsythia suspensa 口服 净制 0 1 1 1 7 10
6 赤芍 Paeonia veitchii 口服 切制 2 1 1 1 5 10
7 醋延胡索 Corydalis yanhusuo 口服 醋制 3 2 2 1 2 10
8 甘草 Glycyrrhiza uralensis 口服 切制 3 1 2 1 3 10
9 山慈菇 Cremastrae Pseudobulbus Pleiones Pseudobulbus 口服兼外用 切制 1 1 1 1 0 4
10 川楝子（炒）Melia toosendan 口服兼外用 清炒 1 2 2 1 4 10
2.2 微生物计数
2.2.1 计数方法 称取 25 g 样品至无菌拍打袋中，
加入 pH 7.0 氯化钠-缓冲蛋白胨水溶液 225 mL，用
均质器拍打 1 min，静置 1 min 后取清液为 1∶10 供
试液。按《中国药典》2015 年版第 3 公示稿中“非
无菌产品微生物限度检查：微生物计数法（1105）”
检查需氧菌总数计数（TAMC）与霉菌和酵母菌总
数计数（TYMC）。其中，TAMC 检查采用 1∶10
供试液及其之后的 5 个连续的 10 倍梯度稀释液，
TYMC（培养基中含庆大霉素 0.1 g/L）检查采用 1∶
10 供试液及其之后的 4 个连续 10 倍梯度稀释液。
另取上述 1∶10 供试液 10 mL，立即放入沸水浴中
处理 30 min，迅速冷却至室温。取经加热处理后的
供试液，按 TAMC 检查方法测定耐热菌数。
2.2.2 需氧菌总数计数 中药饮片是非无菌产品，
在生产加工过程中微生物控制措施不严格，因此在
全部样品中均检出需氧性微生物（表 2）。样品的
TAMC 结果介于 10～108 CFU/g（图 1）。样品连翘
和山慈菇的 TAMC 计数结果要高于其他饮片品种，
平均污染量大于 105 CFU/g。川楝子（炒）的 TAMC
结果是所有中药饮片中最低的，平均污染量为 100
CFU/g。在川芎、甘草和山慈菇中，不同批次样品
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表 2 中药饮片样品微生物项目检验结果
Table 2 Microbial results of processed pieces of CMM
检出阳性的批数
品种
TAMC TYMC 耐热菌
耐胆盐革
兰阴性菌
其他控
制菌
山药 10 7 8 0 0
炙甘草 10 5 6 2 0
玄参 10 10 10 5 0
川芎 10 10 10 6 0
连翘 10 10 10 10 0
赤芍 10 10 9 4 0
醋延胡索 10 9 9 0 0
甘草 10 10 2 5 0
山慈菇 4 4 3 1 1
川楝子（炒） 10 10 5 3 0
a-山药 b-炙甘草 c-玄参 d-川芎 e-连翘 f-赤芍 g-醋延胡
索 h-甘草 i-山慈菇 j-川楝子 ○-代表离群数值 *-代表极端
离群数值，下图同
a-Dioscoreae Rhizoma b-Glycyrrhizae Radix et Rhizoma
Praeparata cum Melle c-Scrophulariae Radix d-Chuanxiong
Rhizoma e-Forsythiae Fructus f-Paeoniae Radix Rubra
g-vinegar processed Corydalis Rhizoma h-Glycyrrhizae Radix et
Rhizoma i-Cremastrae Pseudobulbus j-Toosendan Fructus
○-mild outlier *-extreme outlier, same as following figures
图 1 中药饮片样品需氧菌总数计数结果
Fig. 1 TAMC results of processed pieces of CMM
间的 TAMC 结果差异可达到 4 个数量级以上。
2.2.3 霉菌和酵母菌总数计数 中药饮片中霉菌和
酵母菌也是常见的微生物污染源[3]。本实验中除山
药、炙甘草和醋延胡索有部分批次样品未检出霉菌
和酵母菌外，其余 7 种饮片均检出霉菌或酵母菌（表
2），总体检出率为 90.4%（85/94）。样品的 TYMC
污染程度介于 10～107 CFU/g。连翘中的 TYMC 结
果最高，平均污染量接近 105 CFU/g。不同批次山
慈菇样品之间的差异较大，最低污染量为 10
CFU/g，而最高可以达到 107 CFU/g（图 2）。
2.2.4 耐热菌计数 本实验中所有种类的中药饮片
均经 100 ℃煮沸处理 30 min 后均能检出活性微生
物，耐热菌总体检出率为 76.6%（72/94），耐热菌
污染程度介于 1～104 CFU/g（图 3）。耐热菌的存活
是中药饮片加工成中成药或煎煮汤药后产品变质腐
败、导致药效下降的主要原因。微生物在药物中生
长产生的代谢产物也会对患者健康产生未知的安全
隐患。
图 2 中药饮片样品中霉菌和酵母菌总数计数结果
Fig. 2 TYMC results of processed pieces of CMM
图 3 中药饮片样品中耐热菌计数结果
Fig. 3 Heat-resistant strains enumeration results of
processed pieces of CMM
2.3 控制菌检查
2.3.1 检查方法 按“2.2.1”中方法制备供试液，
其余步骤按《中国药典》2015 年版第 3 公示稿“非
无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法（1203）”
的规定进行沙门菌、大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性
8
6
4
2
需
氧
菌
总
数
lg
(C
FU
/g
)
8
6
4
2
0
霉
菌
和
酵
母
菌
总
数
计
数
lg
(C
FU
/g
)
5
4
3
2
1
耐
热
菌
菌
数
计
数
lg
(C
FU
/g
)
a b c d e f g h i j
a b c d e f g h i j
a b c d e f g h i j
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菌（MPN 法）、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和
白色念珠菌的检查。其中，对检出大肠埃希菌阳性
的样品按 EP 8.0 中大肠埃希菌 MPN 定量方法重新
检查。分别按照食品安全国家标准 GB 4789.5-2012
和 GB 4789.11（2010 年征求意见稿）进行志贺氏菌
和溶血性链球菌的检查。
2.3.2 耐胆盐革兰阴性菌检查 对耐胆盐革兰阴性
菌采用 MPN 定量方法进行检查，有 21 批样品检出
阳性结果（表 3），占全部样品的 22.3%（21/94）。
其中，最高污染量可到达 106＜N＜107 MPN/g。耐
胆盐革兰阴性菌在 103～106 MPN/g 检出的样品占
全部耐胆盐革兰阴性菌阳性样品的 76.2%（16/21）。
2.3.3 其他控制菌检查 全部 94 批样品中仅有 1
批山慈菇样品检出大肠埃希氏菌阳性，经 MPN 定
量方法检测结果为 100 MPN/g＜N＜103 MPN/g。所
有样品均未检出沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假
表 3 中药饮片样品中耐胆盐革兰阴性菌计数结果
Table 3 Bile-tolerant Gram-negative bacteria results of
processed pieces of CMM
耐胆盐革兰阴性菌
计数/(MPN·g−1)
批数
占全部样品数
百分比/%
N＜10 73 77.7
100＜N＜103 3 3.2
100＜N＜103 1 1.1
103＜N＜104 8 8.5
104＜N＜105 4 4.3
105＜N＜106 4 4.3
106＜N＜107 1 1.1
单胞菌、白色念珠菌、志贺氏菌和溶血性链球菌。
2.4 微生物限度标准判断
将 94 批中药饮片微生物检验结果分别与 EP
8.0、JP 16 和 USP 37 中相关的微生物限度标准进行
比较。其中，EP 8.0“5.1.8”的 A 类产品（用于沸
水浸出和煎煮的含有草药成分和含（或不含）有辅
料的草药产品）、JP 16“G4 Microorganisms”中 I
类产品（需经沸水处理的产品）和 USP 37 膳食补
充剂“2023”的“含植物成分及其制品”（使用前用
沸水处理的植物）中对饮片微生物限度标准进行了
规定。
按EP 8.0标准判断本次中药饮片样品的不合格
率为 5.3%（5/94）；按 JP 16 标准判断不合格率为
18.1%（17/94）；按 USP 37 标准判断不合格率为
23.4%（22/94）（表 4）。上述 3 个国家和地区的药
典对中药类品种判断标准各不相同，但都对中药相
关产品的微生物限度标准提出了要求。与化学药品
的生产实施严格的 GMP 审查和监管不同，我国中
药饮片的加工水平低，过程控制和风险控制体系目
前无法有效达到外国药典的限度要求，也是我国药
典迟迟无法推进中药饮片微生物限度标准制定的现
实原因。
2.5 加热处理对饮片中微生物负载的影响
根据炮制工艺中是否涉及加热处理步骤，将 10
种饮片分成 2 类。第 I 类为炮制工艺不涉及加热处
理的中药饮片；第 II 类为炮制工艺涉及加热处理的
中药饮片，包括蜜炙、醋制、清炒、炒制、蜜炒、
醋炒、盐炒和蒸制等。本实验中，采用 IBM SPSS
Statistics 19 统计学软件对 I 类和 II 类炮制工艺样品
表 4 欧洲、日本和美国药典中草药 (天然药物) 相关微生物限度标准比较
Table 4 Comparison on microbial limit standards related to herbal drug (natural drug) in EP, JP, and USP
标准 分类 标准限值 不合格批数 不合格率/%
EP 8.0
“2.6.31”
A 类 TAMC≤107 CFU/g
TYMC≤105 CFU/g
沙门氏菌不得检出（25 g）
大肠埃希氏菌≤103 MPN/g
5 5.3
JP 16
“G4”
I 类 TAMC≤107 CFU/g
TYMC≤104 CFU/g
沙门氏菌不得检出（10 g）
大肠埃希氏菌≤100 MPN/g
17 18.1
USP 37
“2023”
使用前用沸水处理的植物 TAMC≤105 CFU/g
TYMC≤103 CFU/g
大肠埃希菌不得检出（10 g）
22 23.4
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的微生物计数进行配对 t 检验。其中，TAMC 和耐
热菌计数在 I 类和 II 类炮制工艺样品之间有极显著
差异（P＜0.01）（表 5），说明第 II 类中药饮片［炙
甘草、醋延胡索和川楝子（炒）］的 TAMC 和耐热
菌计数均整体低于第 I 类产品。涉及加温处理的炮
制工艺能够有效降低中药饮片中细菌类污染。但是，
经过第 II类工艺处理的饮片也存在高微生物污染的
情况，可能的原因是加热工艺不能有效杀灭微生物
（尤其是霉菌和酵母菌）；饮片中耐热菌的存在和繁
殖；贮存和运输等过程中引入的外源性污染。
表 5 I 类和 II 类炮制工艺微生物负载配对 t 检验
Table 5 Statistical analysis on bio-burden of Type I and II
process by t-test
配对组 t 值 自由度 显著性
TAMC I-TAMC II 4.061 29 0.000**
TYMC I-TYMC II 1.274 29 0.213
耐热菌 I-耐热菌 II 3.148 29 0.004**
**极显著差异（P＜0.01）
**extremely significant difference (P < 0.01)
3 讨论
与中药材和中成药质量标准相比，中药饮片的
微生物质量控制被长期忽视[12]。许多研究表明中药
饮片普遍受到多种微生物的污染[2,13]，由于缺少监
控和调查，其微生物污染程度已经十分严重[14]。在
对临床袋装饮片进行调查的结果显示，有 10%以上的
产品含有超过 103 CFU/g 的存活微生物污染[15-16]。
在实际污染中，有大量耐热微生物及多种耐热毒素
（如：金黄色葡萄球菌肠毒素和黄曲霉素等）可以在
饮片炮制和煎煮后保存活性，是患者用药的巨大隐
患[9-11]。有研究表明，中药饮片在制作成袋装煎煮
液后仍有不同程度的微生物污染，是导致饮片汤剂
保质期缩短的主要原因[17]。中药饮片作为中成药和
中药汤剂等的最主要中间体需要国家层面制定更有
效的控制标准进行规范。
中药在日本和欧盟都被视为药品进行管理，但
在美国仅作为营养和膳食补充剂进行管理，即保健
品。但上述 3 个国家或地区的药典标准中，结合了
中药的加工过程和使用方法，虽未明确说明适用于
中药饮片，但标准规定的范畴已将其涵盖。这些标
准中均有对 TAMC、TYMC 和相关控制菌的检查项
目，给生产和加工过程提出了较为严格的要求。由
于缺少对中药饮片中微生物污染负载的全国性、系
统性的统计数据和研究，同时考虑到中国中药产业
的发展水平和生产现状，《中国药典》还无法向外国
药典一样对中药饮片中 TAMC 和 TYMC 的限度做
出统一规定。但在中药饮片中增加对微生物限度的
规定是规范中药产业生产安全性的必然趋势。目前，
在《中国药典》2015 版公示稿中已经对沙门菌和耐
胆盐革兰阴性菌进行了规定。在《中国药典》增加
中药饮片微生物污染限度标准仍然需要经历一段时
间的数据积累和分析的过程。
目前，我国在饮片加工企业生产车间内还未形
成有效的微生物污染控制体系，无论是原料控制、
厂房环境和人员操作都极有可能引入各种微生物污
染。虽然，我国有 GMP 对中药饮片厂的环境和条
件进行约束，但要求过于宽泛，无法有效控制外源
性污染物的混入。我国的饮片加工企业整体生产卫
生条件较差，缺乏对环境的有效控制，一旦外源性
致病因子混入，会造成无法控制的潜在隐患。因此，
采用卫生指示菌计数（TAMC、TYMC 和耐胆盐革
兰阳性菌）作为评价样品加工过程中受微生物污染
程度的重要指标，能够真实、有效地反映目前中药
饮片在各个环节的卫生状况，是对中药饮片产品卫
生水平的初步评估。
此外，本实验虽未检出沙门氏菌和金黄色葡萄
球菌等致病微生物，但并不代表此类致病菌不会存
在于中药饮片样品中。目前，《中国药典》规定采用
TSB肉汤培养基进行第一步增菌是为了让受损伤的
微生物恢复活力，但在较高的微生物污染背景下，
非选择性的增菌也增加了对目标致病微生物生长的
干扰，降低了检出率。本实验对 10 种中药饮片的致
病菌项目都按《中国药典》2015 年版公示稿进行了
方法适用性检查，发现在选择性平板上虽有目标控
制菌的典型菌落出现，但背景干扰十分严重，建议
《中国药典》在中药饮片控制菌检查过程中适当增加
培养基的选择性，以减少背景菌的干扰，提高目标
控制菌的检出率。
本研究对上海地区生产的 10 种中药饮片进行
微生物项目的检查，发现我国中药饮片整体卫生水
平较低，微生物负载较高，即使经加热炮制处理，
仍有大量残留微生物存活，是中药饮片使用中的一
大安全隐患。建议进一步开展中药饮片微生物危害
的风险评估工作，完善中药饮片微生物相关标准的
制定，强化中药饮片生产过程管理和控制，保障中
药饮片的使用安全。
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