全 文 ：·3124· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45卷 第 21期 2014年 11月

海藻玉壶汤中海藻与甘草不同比例配伍对甲状腺肿大模型大鼠药效及其机
制探讨
李怡文，于 雪，钟赣生*，柳海艳，刘云翔，高 源，欧丽娜
北京中医药大学基础医学院，北京 100029
摘 要：目的 通过观察海藻与甘草不同比例配伍的海藻玉壶汤对丙硫氧嘧啶造成的甲状腺肿大大鼠模型生物效应的影响，
筛选出海藻与甘草配比起效的适宜条件，并对其作用机制进行初步探讨。方法 将海藻与甘草按照 2因素 7水平的均匀设计
实验原则设置不同配伍比例的海藻玉壶汤，Wistar大鼠 120只，随机分为 10组，采用 ig 丙硫氧嘧啶 14 d复制动物模型，
造模后各组 ig给药 28 d，实验结束后测定大鼠甲状腺质量，测定血清中三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）、促
甲状腺激素（TSH）等甲状腺激素水平，RT-PCR 法测定大鼠甲状腺中甲状腺过氧化物酶（TPO）和甲状腺球蛋白（Tg）的
mRNA 表达。结果 海藻玉壶汤中海藻与甘草不同配比在不同程度上均有调节甲状腺激素水平、改善丙硫氧嘧啶所致的甲
状腺肿大作用。与模型组比较，配比 5组（0.135∶8.32）较模型组 TPO mRNA的表达显著升高。海藻玉壶汤配比 1组（14.522∶
6.24）、5组、6组（29.040∶4.16）的 Tg mRNA水平较对照组显著升高。结论 海藻玉壶汤中海藻与甘草不同配比在不同程
度上均能抑制丙硫氧嘧啶所导致的甲状腺肿大，以配比 1组、3组（19.363∶0.54）、6组表现最为明显，其作用机制可能涉
及刺激 TPO与 Tg基因转录的增强。配比 1组与配比 5组具有促进这种代偿增强的作用，在某种程度上对甲状腺激素水平的
恢复起到积极的作用。
关键词：海藻玉壶汤；甲状腺肿大；丙硫氧嘧啶；甲状腺激素；甲状腺过氧化物酶；甲状腺球蛋白
中图分类号：R285.51 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)21 - 3124 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.21.016
Effect of different compatibility of Sargassum and Glycyrrhizae Radix in Haizao
Yuhu Decoction on goiter model rats and its mechanism
LI Yi-wen, YU Xue, ZHONG Gan-sheng, LIU Hai-yan, LIU Yun-xiang, GAO Yuan, OU Li-na
College of Preclinical Medicine, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China
Abstract: Objective To explore the mechanism and compensation proceeding of Haizao Yuhu Decoction (HYD) with different
compatibility of Sargassum and Glycyrrhizae Radix in goiter model rats caused by propylthiouracil (PTU). Methods HYD with
different compatibility of Sargassum and Glycyrrhizae Radix was set up according to the principle uniform design (two factors,
seven levels), and 120 Wistar rats were randomly divided into 10 groups. PTU was ig given to rats for 14 d to establish the goiter
model, and then the rats were ig administered with HYD for 28 d. All animals were sacrificed after the last dosage, the thyroid
weight and changes of thyroid hormone levels of triiodothyronine (T3), thyroxine (T4), and thyroid stimulating hormone (TSH) in
serum were determined, and the mRNA expression of thyroid peroxidase (TPO) and thyroglobulin (Tg) was detected by RT-PCR.
Results HYD with different compatibility of Sargassum and Glycyrrhizae Radix could regulate thyroid hormone levels and inhibit
thyroid enlargement induced by PTU in some degree. Compared with the model group, the TPO mRNA expression of group 5
(0.135∶8.32) was significantly increased, and groups 1 (14.522∶6.24), 5, and 6 (29.040∶4.16) could also increase the Tg mRNA
level significantly. Conclusion HYD with different compatibility could inhibit thyroid enlargement induced by PTU in some
extent, the effects in groups 1 (14.522∶6.24), 3 (19.363∶0.54), and 6 (29.040∶4.16) are the most obvious, and the mechanism
may be related to the activation of gene transcription of TPO and Tg. The groups 1 and 5 could enhance the compensatory action to
a certain degree.
Key words: Haizao Yuhu Decoction; goiter; propylthiouracil; thyroid hormone; thyroid peroxidase; thyroglobulin


收稿日期：2014-01-23
基金项目：国家重点基础研究发展计划（“973”计划）项目（2011CB505300，2011CB505306）
作者简介：李怡文（1984—），女，博士研究生，研究方向为中药药性理论。Tel: (010)64287006 E-mail: liyiwenjackie@sina.cn
*通信作者 钟赣生 Tel: (010)64287006 E-mail: zhonggansheng@sohu.com
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海藻与甘草配伍属中药“十八反”配伍禁忌范
畴。作为中药配伍禁忌的代名词，“十八反”从金
元时期沿用至今已有近千年的历史。传统中医认为
反药同时应用会产生剧烈的毒副作用，因此限制了
反药组合的临床应用，然而从诸多文献及临床实践
看，持不同意见者亦不乏其人，海藻和甘草配伍屡
见不鲜。纵观古代医籍，同用海藻、甘草的方剂达
30余首之多，如孙思邈《备急千金要方》之“大补
气方”，李东垣《兰室秘藏》之“散肿溃坚汤”，王
肯堂《证治准绳》之“防风羌活汤”，陈实功《外
科正宗》之“海藻玉壶汤”、“通气散坚丸”，就连
政府组织编写的医籍中也有此类方剂，如《太平圣
惠方》之“内消昆布散”，《圣济总录》之“茯苓汤”，
《医宗金鉴》之“消核散”等。从现代临床应用角
度看，亦有海藻、甘草配伍治疗内分泌科（甲状腺）、
妇科、男科、皮肤科等多种疾病[1]。
以往对于反药组合的研究，多是考察了海藻和
甘草在生理状态下，单独应用 2味中药所产生的毒
性[2]。然而，临床上“相反”药物配伍使用多于特
定的病理条件下，且是在复方中应用的。因此，本
课题组以明代《外科正宗》中经典方剂海藻玉壶汤
为切入点，大鼠甲状腺肿大病理模型为载体，基于
“973”项目组均匀设计要求，从方药结合的角度，
探讨方中海藻与甘草反药药对不同配比对甲状腺
肿大大鼠模型的生物学效应的影响。通过放射免疫
方法测定血清中甲状腺激素水平、分子生物学手段
考察海藻甘草不同比例配伍治疗甲状腺肿大的作
用机制。本实验主要针对海藻玉壶汤的消瘿散结作
用以及甲状腺肿大病理模型的特点，从甲状腺模型
激素水平和分子生物学水平考察其药效并对其机
制进行初步探讨。
1 材料
1.1 药品与试剂
生甘草产自宁夏灵武，批号为 100710；炙甘草
产地、批号同生甘草，按照 2010 版《中国药典》
炮制标准，由北京中医药大学中药学院炮制教研室
杨蕾副教授指导完成，其中蜂蜜选用北京百花蜂
蜜，批号为 20100802，北京百花蜂蜜有限公司；海
藻产自山东烟台，批号为皖 Y20050202；法半夏产
自贵州长顺，批号为 100701；贝母产自浙江潘安，
100701；连翘产自山西，批号为 1104047；川芎产
自四川，批号为 1101017；独活产自四川，批号为
1012001；昆布产自沿海，批号为 1104062；醋青皮
产自四川，批号为 1102015；陈皮产自四川，批号
为 1104063；当归产自甘肃，批号为 1012052；海
带产自山东青岛；以上药物均购自北京双桥燕京中
药饮片厂，经北京中医药大学基础医学院李伟实验
员鉴定均为合格的中药饮片。由于法半夏、贝母、
连翘、川芎、独活、昆布、醋青皮、陈皮、当归、
海带这几味中药饮片在《中国药典》2010年版中的
服用剂量范围不尽相同，因此本实验选取其剂量范
围中共同的剂量 9 g为入药剂量（成人 70 kg/d），
按动物体表系数算法得大鼠给药的等效剂量为 0.9
g/(kg·d)。海藻与甘草的剂量按实验设计设置不同的
配比。各药材按比例组方，加水煎煮 2次，配制成
海藻玉壶汤，浓缩至所需浓度。
丙硫氧嘧啶片，广东华南药业集团有限公司，
批号 1007041，使用时配制为 1 mg/mL溶液；阳性
药为优甲乐，由默克雪兰诺有限公司提供，批号
133117，使用时配制为 2 μg/mL药液。
三碘甲腺原氨酸（T3），批号 20111125；四碘
甲腺原胺酸（T4），批号 20111128；促甲状腺激素
（TSH），批号 20111124；血清游离三碘甲腺原氨酸
（FT3），批号 20111123；血清游离四碘甲腺原氨酸
（FT4），批号 20111127；促甲状腺激素释放激素
（TRH），批号 20111221；甲状腺素结合球蛋白
（TBG），批号 20111228；甲状旁腺素（PTH），批
号 20111225；以上试剂盒均由北京利德曼生化股份
有限公司提供。
Trizol RNA 提取试剂（ Invitrogen 公司），
M-MLV 逆转录酶、dNTP（10 mmol/L）、Tag 酶
（Promega公司），无 RNA酶水（DEPC）原液、RNA
酶抑制剂（Amresco公司），Loading 缓冲液（CWBIO
公司），琼脂糖（Biowest agrose产品），Oligo（dT）
（Amersham 公司），超纯水（WelGENE 公司），以
上试剂由北京康为世纪生物科技有限公司提供。异
丙醇（分析纯）、无水乙醇（分析纯）、氯仿（分析
纯）、氯化钠溶液均由北京化学试剂公司提供。
1.2 动物
清洁级Wistar大鼠 120只，雌雄各半，体质量
160～180 g，由北京维通利华实验动物技术有限公
司提供，许可证号 SCXK（京）2006-0009。
1.3 仪器
R—911全自动放免计数仪（中国科技大学实业
总公司），System electrophoresis Mupid（2plus）电
泳槽（日本 TAKARA公司），紫外分光光度计（美
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国 Spectronic Unicam公司），漩涡混合器 Voltex—
Genie2（美国 SI公司），高速冷冻离心机（德国 Sigma
公司），凝胶成像系统（美国 Alpha Inn tech公司）。
2 方法
2.1 模型制备
选取Wistar大鼠，体质量 180～200 g，120只，
雌雄各半，除对照组外，其余各组 ig 丙硫氧嘧啶
10 mg/kg，每天 1次，连续 14 d。预试验结果表明
造模大鼠甲状腺较对照组明显增大。在给药期间，
为了稳定模型，每隔 2 d 各造模动物组 ig丙硫氧嘧
啶 10 mg/kg。
2.2 海藻、甘草配比剂量的选择
根据急性毒性实验结果[3]，生甘草小鼠 LD50(19)
为 82.98 g/kg，海藻的 LD50为 35.67 g/kg。《中国药
典》2010 年版生甘草临床用量为 1.5～10 g，海藻
剂量为 6～15 g，确定给药的剂量范围：高限为 1/2
LD50，低限为药典剂量的低限。按动物体表系数算
法得大鼠给药的等效剂量，海藻剂量 0.54～12.49
g/kg，生甘草剂量 0.135～29.040 g/kg。按照本课题
组SOP均匀设计法，将海藻和生甘草视为2个因素，
每个因素分为 7水平，考察因素及水平和具体分组
剂量见表 1。
表 1 U7(72) 不同配比及剂量分组
Table 1 U7(72) ratio of different dose groups
配伍组编号 生甘草 / (g·kg−1) 海藻 / (g·kg−1)
配比 1 14.522 6.24
配比 2 9.681 12.49
配比 3 19.363 0.54
配比 4 4.841 2.08
配比 5 0.135 8.32
配比 6 29.040 4.16
配比 7 24.200 10.40

2.3 分组给药
将大鼠按体质量随机分为对照组、模型组、阳
性药组（优甲乐）、海藻、甘草不同配比的海藻玉
壶汤 1～7 组，共计 10 组，每组 12 只。其中对照
组与模型组 ig 给予生理盐水，其余各给药组 ig 给
予相应药液，给药体积 1 mL/100 g，各组于造模后
连续给药 28 d。每周称体质量 1次，自由进食饮水。
2.4 样本采集与处理
末次给药后 1 h，10%水合氯醛麻醉，大鼠腹主
动脉取血，雄性大鼠约 8 mL，雌性大鼠约 6 mL，
4 ℃，3 000 r/min，离心 15 min，留取上清，分装，
−70 ℃冰箱保存，待检相关指标；腹主动脉取血后，
迅速剥离气管，快速取双侧甲状腺，选取右侧甲状
腺置于冻存管中，液氮冻存。
2.5 指标检测
2.5.1 血液指标检测 取冻存血清，按T3、T4、TSH、
FT3、FT4、TRH、TBG、PTH试剂盒说明书方法，
检测各项指标。
2.5.2 RT-PCR 法检测甲状腺组织甲状腺球蛋白
（Tg）、甲状腺过氧化物酶（TPO）mRNA表达 取
甲状腺组织，样本总 RNA 的提取按说明书进行操
作，采用紫外分光光度法对提取的 RNA进行定量。
每个样本中取总 RNA 1 μL，按照逆转录试剂盒说
明书进行操作将 RNA 逆转录成 cDNA。按试剂盒
说明，在超净台中，取 3 μg总 RNA样品为模板，
Oligo（DT）2 μL作为引物，使用 1 μL M-MLV逆
转录酶，RNA酶抑制剂 1 μL，dNTP 2 μL，5×逆
转录酶缓冲液 4 μL，配制反应体系为 20 μL。PCR
反应体系：10×缓冲液 2 μL，Taq酶 0.5 μL，dntp 1
μL，TPO（Tg）上、下游引物各 0.5 μL，GAPDH
上、下游引物各 0.5 μL，cDNA样本 2.0 μL，总反
应体系为 20 μL。PCR的循环条件：94 ℃预变性 3
min，94 ℃、30 s，53 ℃、30 s，72 ℃、1 min，72 ℃
中延伸 8 min。TPO、Tg及 GAPDH上下游引物序
列及退火温度见表 2。
表 2 TPO、Tg 及 GAPDH 上下游引物序列、片段长度及
退火温度
Table 2 Primer sequences, segment sizes, and annealing
temperature of TPO, Tg, and GAPDH
名称 序列 (5’→3’)
产物长
度 / bp
退火温
度 / ℃
TPO 正向：CTCCACGGATGCACTATCAG 180 65
反向：TTCTACCGA CGGAGGACAGA
Tg 正向：GTGAACGCCTCTGTGACAGA 280 62
反向：ACGAAACCTGAGGACCGTCT
GAPDH 正向：TTCACCACCATGGAGAAGGC 430 62
反向：ACTGTACGGCGGACCTCTTT

取 PCR反应液 5 μL进行琼脂糖凝胶电泳，进
行 0.8%琼脂糖凝胶电泳，取各个 RNA样品 5 μL，
加入 6×Lording 缓冲液 1 μL，混匀，将所有液体
加入凝胶加样孔中。以 100 bp DNA Ladder marker
作为参照，80 V 电压下电泳 25 min。应用 BIO
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IMAGING SYSTEM（Gene Snap）照像，Gene Tools
收集数据，以GAPDH作为内标，以目的基因/GAPDH
的值为目的基因相对表达值。
2.6 统计分析
采用 SPSS 13软件包进行分析，数据均用 ±x s
表示，组间比较采用单因素 ANOVA（方差分析）
进行显著性检验。
3 结果
3.1 对甲状腺肿大模型大鼠甲状腺激素水平的影响
就甲状腺质量而言，模型组甲状腺系数较对照
组显著增加（P＜0.05），阳性药组及配比 2、4、5、
7 组大鼠的甲状腺系数较模型组显著降低（P＜
0.05），表明配比 2、4、5、7 组与阳性药组具有明
显恢复甲状腺肿大的作用。
与对照组相比，模型组大鼠血清激素水平 T3、
T4未出现降低反而有一定的升高，究其原因可能与
模型复制方法有关。总体观察激素水平相关指标，
海藻玉壶汤配比 1、4 组具有回调这种反跳引起的
T3、T4水平增高的作用，并对大鼠血清中 TSH 水
平的升高有一定的抑制作用，在某种程度上对丙硫
氧嘧啶引起的血清中甲状腺激素水平失调具有一
定的恢复作用。具体结果见表 3、4。
3.2 对甲状腺肿大大鼠模型甲状腺组织TPO和Tg
mRNA 表达的影响
实验结果表明，配比 1、5组 TPO mRNA的表
达较对照组显著上升，具有统计学意义（P＜0.05），
其他各个给药组都有升高的趋势，但无显著性差
异；与模型组比较，配比 5组 TPO mRNA的表达
表 3 甘草海藻不同配比海藻玉壶汤对甲状腺肿大模型大鼠血清中 T3、T4、FT3、FT4 水平的影响 ( ±x s )
Table 3 Effects of HYD with different compatibility of Sargassum and Glycyrrhizae Radix on levels of T3, T4, FT3, and FT4
in serum of goiter rats ( ±x s )
组别 动物 / 只 甲状腺系数 T3 / (ng·mL−1) T4 / (ng·mL−1) FT3 / (pg·mL−1) FT4 / (pg·mL−1)
对照 10 0.033±0.012 0.87±0.23 74.64± 8.63 5.69±1.15 14.84±1.28
模型 11 0.042±0.008# 1.31±0.23# 80.85± 9.13 6.34±1.39 15.06±1.97
阳性药 12 0.033±0.008* 0.97±0.20* 92.11± 5.93#* 6.19±1.37 18.93±0.53#*
配比 1 12 0.035±0.008 1.25±0.31# 76.44± 8.70 7.42±1.62# 13.39±2.21#*
配比 2 11 0.034±0.007* 1.56±0.06#* 86.93± 9.77 8.71±1.21#* 14.72±2.28
配比 3 12 0.035±0.012 1.23±0.35# 75.71±12.91 7.13±2.11# 14.40±2.26
配比 4 12 0.032±0.005* 1.26±0.26# 68.68± 6.89* 7.42±1.65 13.36±1.01#*
配比 5 12 0.031±0.005* 1.24±0.24# 71.21±10.63* 7.53±1.81# 12.89±1.45#*
配比 6 11 0.038±0.008 1.14±0.16# 65.34±13.58#* 7.03±1.31# 13.22±0.97#*
配比 7 9 0.034±0.009* 1.22±0.25# 69.66± 8.15#* 6.65±1.48 13.29±0.72#*
与对照组比较：#P＜0.05；与模型组比较：*P＜0.05，下同
#P < 0.05 vs control group; *P < 0.05 vs model group, same as below
表 4 甘草海藻不同配比海藻玉壶汤对甲状腺肿大模型大鼠血清中 TSH、TRH、TBG、PTH 水平的影响 ( ±x s )
Table 4 Effects of HYD with different compatibility of Sargassum and Glycyrrhizae Radix on levels of TSH, TRH, TBG, and
PTH in serum of goiter rats ( ±x s )
组别 动物 / 只 TSH / (μU·mL−1) TRH / (pg·mL−1) TBG / (ng·mL−1) PTH / (ng·mL−1)
对照 10 4.02±0.69 17.95±0.71 10.50±1.26 71.81±13.48
模型 11 4.81±0.62# 18.52±0.89 11.72±1.33# 65.98± 9.38
阳性药 12 4.79±0.77# 18.84±1.18# 11.31±1.53 78.32±18.68*
配比 1 12 4.31±0.53 18.16±0.99 11.13±1.35 93.25±13.07#*
配比 2 11 4.70±0.61# 18.65±1.06 11.77±1.26# 71.47± 8.58
配比 3 12 5.35±0.98#* 19.13±0.88# 11.58±1.20# 90.32±10.98#*
配比 4 12 4.73±0.89# 18.49±0.86 10.64±0.85* 84.99±10.16#*
配比 5 12 4.46±0.57 18.34±0.79 11.41±1.24 80.83±10.47*
配比 6 11 5.12±0.79# 18.99±0.87# 11.38±1.23 93.35± 5.73#*
配比 7 9 5.01±1.01# 18.55±1.30 11.18±0.83 101.94± 7.34#*
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显著升高（P＜0.05）。配比 1、5、6组的 Tg mRNA
水平较对照组显著升高（P＜0.05），其余给药各组
都有升高的趋势，但无显著性差异；与模型组比较，
除阳性药组 Tg mRNA 水平较模型组有降低趋势
外，其余各组较模型组 Tg mRNA的表达无显著性
差异，结果见表 5。电泳结果见图 1、2。
4 讨论
丙硫氧嘧啶导致的甲状腺功能减退，其主要表
现为甲状腺激素合成、分泌或生物效应不足等方
面。碘是机体必要的微量元素，是甲状腺合成甲状
腺素的基本物质基础[4]。当机体对碘的合成功能减
退时，机体即会出现以碘摄入不足为表现的甲状腺
激素合成不足的病理表现。
甲状腺功能减退动物模型复制是以 T3、T4显著
降低，TSH显著升高为成功标志[5]。而本实验中出
现的现象为 TSH显著升高，但 T3水平亦显著升高，
表 5 甘草与海藻不同配比海藻玉壶汤对甲状腺肿大模型大鼠
甲状腺组织TPO 和 Tg mRNA 表达的影响 ( ±x s )
Table 5 Effects of HYD with different compatibility of
Sargassum and Glycyrrhizae Radix on subtype
mRNA expression of TPO and Tg ( ±x s )
组别 TPO/GAPDH Tg/GAPDH
对照 0.596±0.121 (n=7) 0.825±0.259 (n=7)
模型 0.656±0.144 (n=8) 1.063±0.341 (n=8)
阳性药 0.631±0.122 (n=8) 0.960±0.393 (n=8)
配比 1 0.789±0.123# (n=8) 1.245±0.302# (n=8)
配比 2 0.737±0.226 (n=7) 1.150±0.402 (n=7)
配比 3 0.737±0.132 (n=8) 1.085±0.363 (n=8)
配比 4 0.706±0.170 (n=7) 1.071±0.220 (n=7)
配比 5 0.862±0.229#* (n=8) 1.206±0.236# (n=6)
配比 6 0.745±0.171 (n=7) 1.201±0.269# (n=6)
配比 7 0.657±0.194 (n=6) 1.044±0.327 (n=6)



对照 模型 阳性药 配比 1 配比 2

配比 3 配比 4 配比 5 配比 6 配比 7
图 1 各组大鼠甲状腺组织 TPO mRNA 表达电泳结果
Fig. 1 Electrophoresis results of TPO mRNA expression of thyroid tissue of rats in each group

对照 模型 阳性药 配比 1 配比 2

配比 3 配比 4 配比 5 配比 6 配比 7
图 2 各组大鼠甲状腺组织 Tg mRNA 表达电泳结果
Fig. 2 Electrophoresis results of Tg mRNA expression of thyroid tissue of rats in each group
究其原因可能与造模方式有关。本实验采取造模 2
周后，在给药 28 d期间，每隔 2 d ig给予丙硫氧嘧
啶稳定模型，可能是由于没有连续给药的原因，或
给药间隔时间稍长等原因使 T3、T4代偿性增高，需
在后续实验中改进造模方法后再对实验结果加以
验证。
亚临床甲状腺功能减退症简称亚临床甲减，又
称轻度甲状腺功能衰竭（mildthyridfailure，MTF），
其表现是以 TSH 水平升高和血清 T4水平正常为特
征的甲状腺疾病。垂体分泌 TSH受 2方面的影响，
其一为下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素
（TRH）的促进性影响，其二受到 T3、T4反馈性的
抑制性影响，二者互相拮抗，它们组成下丘脑-腺垂
体-甲状腺轴。正常情况下，机体下丘脑分泌的 TRH
量与腺垂体甲状腺轴的反馈调节密切相关。TRH分
泌增多，则血中 T3、T4水平较高，当血中 T3、T4
超过一定水平后就会反馈性地抑制腺垂体分泌
TSH，从而降低垂体对 TRH 的敏感性，保持血中
T3、T4水平相对恒定。
本实验中模型组及给药组大鼠血清中 TRH 的
GAPDH
TPO
GAPDH
TPO
GAPDH
Tg
GAPDH
Tg
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45卷 第 21期 2014年 11月 ·3129·

量均较对照组升高，其进而促进垂体分泌相应的
TSH，从数值上看 TRH的升高与 TSH的升高幅度
基本平行，但 TSH的升高未受到 T3的反馈性抑制，
其原因可能与反馈机制尚未启动，大鼠血清中 TSH
水平下降较慢，从而使 T3处于较高的水平。此外还
有文献表明，碘缺乏时，甲状腺内甲状腺激素合成
前体一碘酪氨酸（MIT）、二碘酪氨酸（DIT）合成
明显减少，同时甲状腺 I型脱碘酶（Dl）mRNA表
达有所增高，活性增强，其作用为促进 T4 转变为
T3，因此甲状腺组织内 T3、T4水平均明显下降。在
机体碘供应不足的条件下优先合成 T3 以满足大多
数组织代谢的需要，避免周围组织甲减的发生。此
为一种经济有效的代偿机制。在碘缺乏早期，T3及
FT3 会呈代偿性增高，但长期处于碘缺乏状态则使
机体失去代偿能力，机体会呈现出明显甲减症状[6]。
推测在实验期间，由于间断性 ig丙硫氧嘧啶，造成
碘缺乏症早期症状，进而出现 T3与 TSH 同时升高
的现象。后续实验过程中将考虑在给药期间连续补
充丙硫氧嘧啶以稳定模型的方法进行实验。
甲状腺滤泡细胞的功能在于合成对人体代谢
极为重要的甲状腺激素。该过程需要碘、Tg、TPO、
H2O2等 4 种重要成分并依赖 TSH-cAMP 系统的调
节。由此可见，Tg 和 TPO 是甲状腺激素合成过程
中 2个至关重要的因素。TPO在碘氧化、铬氨酸碘
化以及碘化铬氨酸偶联至甲状腺球蛋白上等甲状
腺激素合成过程中起重要的催化作用。对于丙硫氧
嘧啶引起甲状腺激素水平的下降，国内外学者通常
认为与其抑制 TPO 的活性有关[7-8]，也有学者认为
其过程还涉及到丙硫氧嘧啶对 Tg 合成的抑制，与
丙硫氧嘧啶造成甲状腺滤泡细胞粗面内质网损伤
有关[9-10]。丙硫氧嘧啶引起的甲减导致 TSH反馈性
升高，又可通过信号转导途径促进 TPO、Tg 等基
因的转录而具有代偿意义[11]。
本研究结果表明，模型组及给药各组的 TPO
mRNA 均高于对照组，且配比 1、5 组显著高于对
照组（P＜0.05）。由此可见，丙硫氧嘧啶对 TPO的
抑制不是发生在转录阶段。相反，TPO在转录水平
的表达增高，对于丙硫氧嘧啶导致的甲减具有一定
的代偿意义。如果这一代偿机制足够充分的话，血
清甲状腺激素水平将会趋于正常[12]。结合血清甲状
腺激素结果可以看到，血清中 T3、T4的量较对照组
升高，但血清中 TSH的量并未有所降低，依然位于
高位。上述研究提示，本实验中丙硫氧嘧啶所致的
TPO 转录增强，可能与 TSH 的反馈性升高有关，
TPO转录增强所起到的代偿作用并不充分。海藻玉
壶汤配比 1、5 组使这种代偿作用增强，提示激素
合成功能增强，这是甲状腺对缺碘的代偿性适应，
这种代偿作用与海藻玉壶汤中海藻和甘草的比例
暂无明显的线性关系。有文献表明，TSH的升高，
可以刺激 Tg 的转录，从本实验结果来看，与文献
报道基本一致，Tg的转录水平未受到丙硫氧嘧啶的
抑制，配比 1、5、6 组具有促进 Tg 转录的作用，
在某种程度上具有恢复甲状腺激素达到正常水平
的作用。
综上所述，通过丙硫氧嘧啶致甲状腺肿大动物
模型研究，除了通常认为的抑制 TPO的活性，还可
能涉及 Tg 在转录和翻译水平的抑制。TSH水平增
高对 TPO 基因的转录刺激作用不能起到充分的代
偿作用，海藻玉壶汤的配比 1、5 组具有促进这种
代偿增强的作用，在某种程度上对甲状腺激素水平
的恢复起到积极的作用，但还需结合甲状腺激素合
成相关基因，如钠碘转运体（NIS）、Dl表达的变化
进行了深入分析。此外，实验结果并未显示出由于
海藻、甘草配伍比例的改变使相关基因 TPO、Tg
mRNA表达发生改变的线性关系。有文献表明，非
富碘中药复方对于大鼠甲状腺功能与形态的改变
亦有一定疗效，这就说明富碘中药复方不单纯靠含
碘的成分发挥作用，在复方中，各药物之间亦有相
互作用，既有协同作用，也有拮抗作用[13]。因此，
在今后的实验研究中，可以考虑去除相应的富碘中
药，进行海藻玉壶汤的拆方研究，以期为阐明海藻
玉壶汤对甲减大鼠甲状腺功能恢复的调控机制提
供实验依据。
参考文献
[1] 李怡文, 钟赣生, 王 茜, 等. 含反药配伍的海藻玉壶
汤临床应用分析 [J]. 南京中医药大学学报 , 2011,
27(4): 317-321.
[2] 丁选胜, 李 欧, 阚毓铭. 海藻、甘草及其不同比例配
伍后的水提取物的肝毒性研究-对离体大鼠肝灌流液
中 AST、ALT的影响 [J]. 南京中医药大学学报, 2003,
19(1): 28-31.
[3] 李怡文, 钟赣生, 柳海艳, 等. 海藻、甘草配伍组合及
其复方海藻玉壶汤的急性毒性实验比较研究 [J]. 科
技导报, 2012(34): 18-23.
[4] 郭若霖, 左爱军, 赵学勤, 等. 缺碘对发育期大鼠甲状
腺激素水平的影响 [J]. 中国地方病学杂志 , 2003,
22(3): 280-281.
·3130· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45卷 第 21期 2014年 11月

[5] Baksi S N. Effect of propylthiouracil-induced hypo-
thyroidism on serum levels of luteinizing hormone and
follicle-stimulating hormone in the rat [J]. J Endocriol,
1973, 59: 655-656.
[6] 陈祖培, 阎玉芹, 项建梅, 等. 碘缺乏和碘过量大鼠动
物模型的复制及其碘代谢的对比观察 [J]. 中国地方
病学杂志, 2005, 24(3): 242-244.
[7] Degroot L J, Niepomniszcze H. Biosynthesis of thyroid
hormone: basic and clinical aspects [J]. Metabolism,
1977, 26(6): 665-718.
[8] Vickers A E, Heale J, Sinclair J R, et al. Thyroid
organotypic rat and human cultures used to investigate
drug effects on thyroid function, hormone synthesis and
release pathways [J]. Toxicol Appl Pharmacol, 2012,
260(1): 81-88.
[9] 孙 丁, 王津涛, 潘红梅, 等. 甲状腺素干扰物对甲状
腺滤泡细胞分泌甲状腺球蛋白的影响 [J]. 环境与健
康杂志, 2003, 20(4): 210-212.
[10] 商维维 , 罗 建 , 程薇波 , 等 . PTU 对大鼠甲状腺
TPO、Tg mRNA表达的影响 [J]. 四川大学学报: 医学
版, 2010 , 41(3): 428-431.
[11] Braverman L E, Ut iger R D. Werner and Ingbar’s the
thyroid. A Fundamental and Clinical Text [M]. The 8th
ed. Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins, 2000.
[12] McClain R M. Mechanistic consideration for the
relevance of animal data on thyroid neoplasia to human
risk assessment [J]. Mutat Res, 1995, 333(1): 131-148.
[13] 时 杨, 高天舒, 杨 柳. 富碘中药复方对甲亢大鼠甲
状腺功能和形态的影响 [J]. 辽宁中医药大学学报 ,
2009, 11(9): 186-188.