全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 14 期 2013 年 7 月

·1944·
当归-川芎药对超临界提取物配伍红花抗心肌缺血的谱效关系研究
张 静 1，杨义芳 1*，吴春珍 1，范思洋 1，萧 伟 2，王振中 2
1. 中国医药工业研究总院上海医药工业研究院 创新药物与制剂工艺国家重点实验室，上海 200040
2. 江苏省康缘药业股份有限公司，江苏 连云港 222001
摘 要：目的 研究当归-川芎药对超临界提取物（AC-SFE）配伍红花不同提取物的 HPLC 指纹图谱及其抗心肌缺血作用的
谱效关系。方法 采用结扎大鼠冠状动脉致急性心肌缺血的模型，运用双变量相关分析（BCA）和多元回归分析（MRA），
将 AC-SFE 与红花各配伍组合的药效数据与指纹图谱共有峰的相对峰面积相关联，并采用 LC-MS 指认色谱峰。结果 来自
AC-SFE 的 8 个色谱峰与大鼠心肌梗死面积比率及血清乳酸脱氢酶（LDH）呈负相关，其中 4 个呈显著负相关；来自红花中
的 8 号峰（槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）则与药效呈现显著正相关。强迫引入法回归分析显示有 4 个
峰进入回归曲线方程。LC-MS 共指认出 16 个色谱峰，其中 12 个是相关峰。结论 AC-SFE 中的阿魏酸（峰 13）、洋川芎内
酯 H（峰 15）、3-羟基丁基苯酞（峰 16）、洋川芎内酯 A（峰 18）、3-丁基苯酞（峰 19）、藁本内酯（峰 20）、二丁基苯酞（峰
21）、苯酞类化合物（峰 17）以及红花中的峰 1（4-methoxy-6-[3, 4, 5-trihydroxy-6-[[3, 4, 5-trihydroxy-6 (hydroxymethyl) tetra-
hydropyran-2-yl]oxymethyl]tetrahydropyran-2-yl]oxy-cyclohexane-1, 2, 3, 5-tetrol）和峰 2（3-{[6-O-(D-galactopyranosyl)-β-D-galac-
topyranosyl]oxy}-1, 2-propanediyl diacetate）可能是抗心肌缺血的药效物质；而峰 8 可能不能缓解心肌缺血。
关键词：当归-川芎；红花；配伍；抗心肌缺血；谱效关系
中图分类号：R282.710.5；R972 文献标志码：A 文章编号：0253-2670(2013)14 - 1944 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.14.015
Spectrum-activity relationship of Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma
supercritical fluid extraction with Carthami Flos against myocardial ischemia
ZHANG Jing1, YANG Yi-fang1, WU Chun-zhen1, FAN Si-yang1, XIAO Wei2, WANG Zhen-zhong2
1. State Key Laboratory of New Drug and Pharmaceutical Process, Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, China State
Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai 200040, China
2. Jiangsu Kanion Pharmceutical Co., Ltd., Lianyungang 222001, China
Abstract: Objective To study the spectrum-activity relationships between the anti-myocardial ischaemia activity and the HPLC
fingerprints of the formula, consisting of Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma supercritical fluid extraction (AC-SFE) and
Carthami Flos (CF) solvent-extracted extracts. Methods The rat model of acute myocardial ischemia was established by applying left
anterior descending coronary ligation, and bivariate correlation analysis (BCA) and multivariate regression analysis (MRA) were used to
investigate the spectrum-activity relationship between fingerprints and anti-myocardial ischaemia activity. LC-MS was used for peak
assignment. Results Eight peaks of AC-SFE were negatively correlated with the infarct size ratio (ISR) and the serum lactate dehydrogenase
(LDH), and four of them were significantly correlated. Peak 8 (quercetin-3-O-β-D-galactose glycosides-4′-O-β-D-pyranglucoside) from CF
was positively correlated with the efficacy. Study by regression analysis showed four peaks were in regression equations. LC-MS showed 16
peaks, among which 12 were correlated peaks. Conclusion Ferulic acid (peak 13), senkyunolide H (peak 15), 3-hydroxy butylphthalide
(peak 16), senkyunolide A (peak 18), 3-butylphthalide (peak 19), ligustilide (peak 20), dibutyl phthalide (peak 21), and phthalide ( peak 17 ) of
AC-SFE and peak 1 (4-methoxy-6-[3, 4, 5-trihydroxy-6-[[3, 4, 5-trihydroxy-6 (hydroxymethyl) tetra-hydropyran-2-yl]oxymethyl]
tetrahydropyran-2-yl]oxy-cyclohexane-1, 2, 3, 5-tetrol) and peak 2 (3-{[6-O-(D-Galactopyranosyl)-β-D-galacto-pyrano-syl]oxy}-
1,2-propanediyl diacetate) of CF might be the material foundation for the anti-myocardial ischaemia activity. Peak 8 might not be able

收稿日期：2013-03-26
基金项目：国家“重大新药创制”科技重大专项“十一五”计划资助项目（20092x09301-007）
作者简介：张 静（1985—），女，山东临沂人，硕士研究生，研究方向为中药药效物质基础。
Tel: (021)624798908-721 E-mail: xiaojingzi1020@163.com
*通信作者 杨义芳 Tel:(021)62473018 E-mail: yangyf4912@163.com
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to relieve myocardial ischaemia.
Key words: Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma; Carthami Flos; compatibility; anti-acute myocardial ischemia; spectrum-
activity relationship

当归、川芎伍用又称佛手散，出自《普济本事
方》，主要功效为补血活血。现代中医将此方归为活
血化瘀、止血、止痛类药对，在临床上广泛用于心
脑血管疾病及妇女调经等[1-2]。本实验室对当归-川
芎药对超临界提取物抗心肌缺血的药效物质基础进
行研究，发现 3 个提取部位（总苯酞、总有机酸和
总生物碱）是此药对抗心肌缺血的有效部位，且总
提取物的药效优于其他各部位[3]。红花有活血通经、
散瘀止痛、降血压和调血脂的功效，用于治疗痛经、
跌打损伤、冠心病、心绞痛和高血压等疾病[4]。在
活血化瘀经典方中，当归、川芎和红花常常一起配
伍使用，且红花用于复方均采用水煎入药。故本实
验分别用水煎煮和 95%乙醇回流制得红花提取物，
将其与当归-川芎药对超临界提取物（AC-SFE）配
伍，建立配伍前后的 HPLC 指纹图谱；采用大鼠冠
状动脉结扎模型考察各配伍组合的抗心肌缺血作
用，将指纹图谱获得的色谱峰信息（给药前）与药
效数据相关，得到相关的色谱峰，LC-MS 对峰进行
指认，以确定相关的药效物质。以期为 AC-SFE 的
新复方配伍研究提供实验依据。
1 材料
1.1 药材与试剂
当归为伞形科植物 Angelica sinensis (Oliv.)
Diels 的干燥根，购自甘肃省岷县玉良药材有限公
司，批号 20110815；川芎为伞形科植物 Ligusticum
chuanxiong Hort. 的干燥根茎，购自四川省天奇药业
有限公司，批号 20110822；红花为菊科植物
Carthamus tinctorius L. 的干燥花，购自新疆生产建
设兵团农六师红旗中心团场，批号 20110815。以上
药材均经过本实验室范思洋博士的鉴定。普萘洛尔，
江苏省金坛市江南化工厂，批号 20021013；乳酸脱
氢酶试剂盒，日本世诺临床诊断制品株式会社；氯
化硝基四氮唑蓝（NBT）染色剂，国药集团化学试
剂有限公司；对照品羟基红花黄色素 A，购自中国
药品生物制品检定所，批号 111637-200502，质量
分数＞99%；对照品阿魏酸[5]、藁本内酯[6]、洋川芎
内酯 A[7]、洋川芎内酯 H[8]为本实验室制备，通过
1H-NMR，13C-NMR 和质谱实验数据与文献数据比
对确定结构，HPLC 法定量，确认质量分数依次为
99.23%、94.36%、97.85%、96.48%。甲醇、乙腈
（色谱纯），磷酸、甲酸、乙酸（分析纯），中国医药
集团；水为重蒸水。
1.2 仪器
Agilent 1260 Infinity 液相色谱仪（包括 Agilent
1260 四元泵、DAD 检测器、Agilent 1260 自动进
样器、Agilent Chemstation 软件）；Inova—400 型
核磁共振仪，Varian 公司；Q-TOF micro YA019 型
四极杆飞行时间质谱仪、Synapt G2-S HDMS，
Waters 公司；7080 自动生化分析仪，日本日立科
学系统公司。
1.3 动物
SD 大鼠，雄性，体质量 180～220 g，由上海
斯莱克动物科技公司提供，许可证号：SCXK（沪）
20070005。
2 方法与结果
2.1 提取物制备
按《中国药典》2010 年版当归、川芎和红花 3
味药材常用量以及心舒口服液[9]中三者用药比例，选
定 3 味药材的用药量均为 9 g。AC-SFE：当归和川
芎粉末以 1∶1 混合，采用超临界 CO2梯度萃取[10]。
红花水提取物（HHS）：红花药材依次加 10、8、6
倍的水，分别煎提 3 次，回收溶剂，冷冻干燥得粉
末。红花 95%乙醇提物（HHC）：向红花药材依次加
10、8、6 倍的 95%乙醇，分别加热回流提取 3 次，
回收溶剂，冷冻干燥得粉末。
2.2 供试品溶液制备
精密称取 AC-SFE 4.1 mg（相当于生药 74.41
mg）、HHS 14.1 mg（相当于生药 37.77 mg）、HHC
14.6 mg（相当于生药 37.77 mg），分别加甲醇溶解
至 10 mL，AC-SFE＋HHS 样品溶液为二者以 1∶1
混合溶液，AC-SFE＋HHC 溶液亦为二者 1∶1 混合
溶液。AC-SFE、HHS、HHC 溶液分别用甲醇稀释
1 倍。各样品用 0.45 μm 微孔及滤膜滤过，即得。
2.3 对照品溶液制备
精密称取羟基红花黄色素 A、阿魏酸、洋川芎
内酯 A、洋川芎内酯 H、藁本内酯对照品适量，加
甲醇制成质量浓度分别为 135.0、12.0、10.0、12.0、
63.6 μg/mL 的混合对照品溶液。
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2.4 LC-MS 分析
2.4.1 色谱条件 色谱柱为 BEH C18 柱（100 mm×
2.1 mm，1.7 μm）；流动相 A 相为 0.1%甲酸水溶液，
B 相为 0.1%甲酸-乙腈溶液，梯度洗脱（0～1 min，
5%～10% B；7～10 min，30%～90% B，10～12 min，
90% B）；体积流量 0.65 mL/min；进样量 2 μL。
2.4.2 质谱条件 ESI 模式，正离子电压 3 kV，锥
孔电压 60 V，源温 120 ℃，脱溶剂气温度 500 ℃，
脱溶剂气体积流量 800 L/h；负离子电压 2.5 kV，锥
孔电压 40 V，源温 120 ℃，脱溶剂气温度 500 ℃，
脱溶剂气体积流量 800 L/h。
2.5 HPLC 分析
色谱柱为 XBridge C18 柱（250 mm×4.6 mm，5
μm）；流动相 A 为 0.1%甲酸水溶液，B 为 0.1%甲
酸-乙腈溶液，梯度洗脱（0～7.35 min，5%～10%B；
7.35～51.47 min，10%～30%B；51.47～73.55 min，
30%～90%B；73.55～88.23 min，90%B）；体积流
量 0.65 mL/min；柱温 30 ℃；检测波长 286 nm；
进样量 15 μL。
2.6 方法学考察
选用 AC-SFE＋HHC＋HHS（1∶1∶1）作为样
品溶液。
2.6.1 精密度试验 取 AC-SFE＋HHS＋HHC 供试
品溶液 75 μL，连续进样 5 次，按“2.5”项下色谱
条件测定，测得各色谱峰的相对保留时间 RSD 为
0～0.03%，相对峰面积 RSD 为 1.04%～2.78%，表
明仪器的精密度良好。
2.6.2 重复性试验 取 AC-SFE＋HHS＋HHC 供试
品，精密称定，按“2.2”项下方法制备供试品溶液
6 份，在“2.5”项下色谱条件分别进样，测得各色
谱峰的相对保留时间 RSD 为 0～0.19%，相对峰面
积 RSD 为 1.20%～2.61%，表明方法重复性良好。
2.6.3 稳定性试验 取供试品溶液，在“2.5”项下
色谱条件，分别在 0、1.3、2.5、3.8、5.1、7.7、10.2、
12.8、26.9 h 进样，测得各色谱峰的相对保留时间
RSD 为 0～0.41%，相对峰面积 RSD 为 1.16%～
2.81%，表明供试品溶液在 26.9 h 内稳定。
2.6.4 指纹图谱建立 分别吸取“2.2”项下供试品
溶液和“2.3”项下对照品溶液各 15 μL，注入 HPLC
仪，色谱图见图 1。根据各供试品的出峰情况，确
定 21 个共有峰。通过与混合对照品图谱比对，确定
了 5 个峰所代表的化合物。


图 1 AC-SFE 及其与红花不同提取物各配伍组合的 HPLC 指纹图谱
Fig. 1 HPLC fingerprint for AC-SFE and different combinations with CF
2.7 样品化合物信息
AC-SFE＋HHS＋HHC 样品的 UPLC 色谱图
和 TIC 图如图 2 所示，经分析 LC-MS 碎片信息，
峰的紫外吸收情况并与文献数据比对，得到的样品
的化合物信息。结果见表 1。
根据 Waters Masslynx 4.1 软件给出的峰分子式
信息以及 MS2 的碎片信息，推测来自 HHS 的峰 1
可能为（4-methoxy-6-[3, 4, 5-trihydroxy-6-[[3, 4, 5-
trihydroxy-6-(hydroxymethyl) tetrahydropyran-2-yl]
oxymethyl]tetrahydropyran-2-yl] oxy-cyclohexane-1, 2,
3, 5- tetrol），峰 2 可能为 3-{[6-O-(D- galactopyranosyl)-
β- D-galactopyranosyl]oxy}-1, 2-propanediyl diacetate。
这 2 个化合物可能的结构和碎片解析见图 3。对这 2
个峰代表的化合物仍需进一步研究与核实。
2.8 各配伍组合抗心肌缺血实验
采用结扎冠状动脉方法[18]制备急性心肌缺血
大鼠模型。将大鼠随机分为 8 组（每组 10 只），即
模型组、普萘洛尔（1 mg/kg）阳性药对照组、AC-SFE

0 10 20 30 40 50 60 70 80
t / min
1 2
3
4
6
7
8
9
101112
13
14
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16 17
18
19
20
21 混合对照品
AC-SFE＋HHC
AC-SFE＋HHS
AC-SFE
HHC
HHS
5
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图 2 AC-SFE＋HHS＋HHC 的 UPLC 色谱图、TIC (ESI＋/－模式) 图
Fig. 2 UPLC and TIC (ESI +/− models) chromatograms of AC-SFE + HHS + HHC
表 1 AC-SFE＋HHS＋HHC 样品的化合物信息
Table 1 Compounds in AC-SFE + HHS + HHC
峰号 t / min 分子离子峰
(m/z)
主要 MS 碎片 (m/z) 推测化合物 参考文献
* 4.01 451.124 5 (+) 415.102 8, 397.091 9, 301.071 4 红花苷 11
* 6.11 303.050 4 (+) 169.013 6, 155.049 6, 121.029 0 槲皮素 12
* 7.00 287.055 8 (+) 185.060 1, 153.018 8, 137.023 7 山柰酚 12
* 7.64 265.097 4 (+) 247.086 8, 219.092 0, 206.084 2, 167.060 9 川芎哚 13
1 0.94 517.178 2 (−) 499.167 3, 385.139 5, 253.100 8, 161.054 0 (4-methoxy-6-[3, 4, 5-trihydroxy-6-[[3, 4, 5-trihydroxy-
6-(hydroxymethyl) tetrahydropyran-2-yl] oxymethyl]
tetrahydropyran-2-yl] oxy-cyclohexane-1, 2, 3, 5-tetrol)
—
2 1.21 499.171 6 (−) 191.065 4, 173.054 6 3-{[6-O-(D-galactopyranosyl)-β-D-galactopyranosyl]
oxy}-1, 2-propanediyl diacetate
—
5 3.95 611.161 2 (−) 491.121 6, 473.111 5, 403.108 5, 325.078 5 羟基红花黄色素 A —
8 5.35 627.156 1 (+) 463.234 8, 462.459 5, 449.105 2, 419.191 6 槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 —
13 6.54 193.050 1 (−) 177.921 6, 133.907 8 阿魏酸 —
14 6.94 593.150 6 (−) 433.091 5, 313.057 3, 301.059 9, 181.902 2 红花黄色素 A 14
15 8.44 225.112 7 (+) 207.101 1, 189.090 7, 179.105 6 洋川芎内酯 H —
16 8.61 207.101 7 (+) 189.091 1, 171.078 8, 161.096 9, 153.976 1 3-羟基丁基苯酞 15
18 10.20 193.122 9 (+) 175.111 1, 147.116 1 洋川芎内酯 A —
19 10.49 191.107 2 (+) 213.365 2, 173.096 8, 145.101 9 3-丁基苯酞 16
20 10.58 191.107 3 (+) 173.096 4, 163.112 0, 155.085 6 藁本内酯 —
21 11.12 279.159 6 (+) 235.087 6, 201.037 4, 179.058 7 二丁基苯酞 17
*-非共有峰
*- respresents non-common peaks








5
0 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00
0 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00
0 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00
0 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00
t / min
1
2 8 13 14
15
16 18
19
20
1
2 5 8 13 14
15
16 1819
20
1. TOF ESI MS+
1. TOF ESI MS
−

21
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图 3 峰 1 (A) 和峰 2 (B) 结构和碎片解析图
Fig. 3 Structures and fragments of peaks 1 (A) and 2 (B)
（165 mg/kg）组、HHS（580 mg/kg）组、AC-SFE＋
HHS（165 mg/kg＋580 mg/kg）组、HHC（560 mg/kg）
组、AC-SFE＋HHC（165 mg/kg＋560 mg/kg）组和
假手术组。各给药组大鼠每天 ig 给药 1 次，连续给
药 7 d，假手术组大鼠 ig 水。给药 7 d 后，大鼠行
结扎冠状动脉左前降支手术，术后 4 h 采血，并取
心脏，计算心肌梗死率（心肌梗死率＝梗死心肌质
量/全心质量），测定血清中乳酸脱氢酶（LDH）水
平。结果显示，AC-SFE、AC-SFE 配伍 HHC 组均
明显降低大鼠心肌梗死率（P＜0.05）和降低血清
LDH 水平（P＜0.05）。结果见表 2。
2.9 谱效关系分析
2.9.1 双变量相关分析 将“2.6.4”项所获得的各
样品 21 个共有峰的相对峰面积数据和“2.8”项中
药理数据输入 SPSS17.0 软件，进行双变量相关分
析，结果见表 3。可见有 8 个共有峰与药效数据呈
表 2 AC-SFE 及其与红花不同提取物各配伍组合对急性缺血大鼠心肌梗死率和血清 LDH 水平的影响 ( ± = 10x s , n )
Table 2 Effects of AC-SFE and different combinations with CF on ISR and serum LDH level
in rats with acute myocardial ischemia ( ± = 10x s , n )
组 别 剂量 / (mg·kg−1) 心肌梗死率 / % LDH / (U·L−1)
假手术 — 0 1 302±429.7
模型 — 34.69± 5.81▲▲ 2 046±530.8▲
AC-SFE 165 26.96± 7.38* 1 390±498.5*
HHS 580 30.53± 8.27 2 253±533.6
AC-SFE＋HHS 165＋580 36.27± 7.53 1 666±552.0
HHC 560 36.59± 5.76 2 094±479.8
AC-SFE＋HHC 165＋560 27.33±11.13* 1 497±294.2*
普萘洛尔 1 25.15± 9.20* 1 340±499.4*
与假手术组比较：▲P＜0.05 ▲▲P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05
▲P < 0.05 ▲▲P < 0.01 vs Sham group; *P < 0.05 vs model group
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517.177 2 385.139 5 253.100 8 499.167 3 161.054 0 167.027 8
499.171 6 173.054 6 191.065 4
517.167 3 385.134 6 253.092 3 499.166 3 161.046 0 167.034 4
C19H33O16 (-none) C14H25O12 (-C5H8O4) C9H17O8 (-C10H16O8) C19H31O15 (-H2O) C6H9O5 (-C13H24O11) C8H7O4 (-C11H26O12)
499.166 3 173.045 0 191.055 6
C19H31O15 (-none) C7H9O5 (-C12H22O10) C7H11O6 (-C7H20O9)
A
B
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表 3 共有峰相对峰面积与药理数据的双变量相关分析
Table 3 Relative peak areas of common peak and BCA
analysis on pharmacological data
与心肌梗死率 与 LDH 水平 峰 号
相关系数 P 值 相关系数 P 值
13 −0.267 0.664 −0.786 0.099
15 −0.548 0.338 −0.986 0.003
16 −0.086 0.891 −0.655 0.204
17 −0.576 0.310 −0.854 0.078
18 −0.841 0.074 −0.862 0.074
19 −0.522 0.367 −0.984 0.003
20 −0.545 0.343 −0.987 0.002
21 −0.536 0.352 −0.982 0.004

现负相关，其中 4 个峰呈显著的负相关，且 AC-SFE
均有这 4 个峰出现，表明当归-川芎药对中相应色谱
峰代表的化学成分能降低大鼠心肌梗死率和血清
LDH 水平，且这些成分是协同作用的，这与表 2 的
结果相一致。
在呈现正相关的共有峰中，峰 8 与 LDH 值的
相关系数为 0.9，是显著正相关，故此峰代表的化学
成分槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷-4′-O-β-D-吡喃葡萄
糖苷可能不利于改善大鼠心肌缺血症状。HHS 和
HHC 以相同生药量给药，HPLC 检测发现峰 8 在这
二者中的峰面积比约为 3∶1。
2.9.2 多元回归分析 利用 SPSS17.0 软件中多元
线性回归分析中的强迫引入法（保留 P＜0.05 的各
因素），计算各色谱峰相对峰面积与心肌梗死面积比
率及血清 LDH 水平的标准化回归系数（表 4）。
可见峰 1、2、16、21 对冠脉结扎大鼠心肌梗死
率和血清 LDH 值影响较大（P＜0.05）。峰 1、2 出
自 HHS，峰 16、21 出自 AC-SFE。
逐步回归分析得到 LDH 值与色谱峰相对峰面
积的回归曲线方程为 Y＝0.9 X＋1 430.979，与双变
量相关的结果一致。
表 4 强迫引入多元回归分析结果
Table 4 Regression analysis by MRA
标准化回归系数 峰号
与梗死面积比率的回归 与 LDH 值的回归
1 0.747 0.154
2 0.802 0.205
16 −0.087 −0.161
21 −0.062 −0.773
3 讨论
本实验双变量相关分析的结果与药效实验结果
基本一致，来自于 AC-SFE 的 8 个峰，即峰 13（阿
魏酸）、15（洋川芎内酯 H）、16（3-羟基丁基苯酞）、
17（苯酞类）、18（洋川芎内酯 A）、19（3-丁基苯
酞）、20（藁本内酯）、21（二丁基苯酞）都与药理
活性呈现负相关，其中峰 15、19、20、21 呈显著相
关，推测相应峰代表的化合物能抑制冠状动脉结扎
引起的心肌缺血，苯酞类化合物对抗心肌缺血作用
有较大贡献，这与前期研究结果相符[3]。阿魏酸也
具有抗心肌缺血的药理作用[19-21]。本实验强迫引入
回归分析法分析结果表明，来自 HHS 的峰 1、2 和
来自 AC-SFE 的峰 16、21 进入回归方程，即对大鼠
心肌梗死率和血清 LDH 水平有显著影响。分析还
发现，峰 8 与大鼠心肌梗死率和血清 LDH 水平呈
显著正相关，是与其他 8 个成分相拮抗的成分。由
此可以认为，双变量分析及多元回归分析是研究多
变量相关性的有效手段，通过将色谱峰所代表的化
学成分信息与药效结果信息相关联，能够发现中药
复方的药效物质基础。
本研究发现，红花提取物对冠状动脉结扎所致
心肌缺血无明显药效，即使与药效显著的 AC-SFE
配伍也并没起到增效作用，且通过谱效相关分析发
现红花提取物的 8 号峰与其他成分的抗心肌缺血作
用相拮抗，而有文献报道红花制剂、红花黄色素具
有缓解心肌缺血、治疗冠心病的作用[22-24]。经分析
可能与下列原因有关：（1）现有研究中红花制剂均
为注射给药，而本实验采用 ig 给药，一些成分未被
吸收入血；（2）中药复方中成分复杂，成分间的配
伍比例及相互作用均可能影响药效；（3）红花黄色
素虽可减慢结扎冠脉大鼠的心率，减少梗死，但与
剂量相关[22]；（4）峰 8 的正向抵抗作用，HHS 中
峰 8 的峰面积比值是 HHC 中的 3 倍，可能是
AC-SFE＋HHS 没有药效，而 AC-SFE＋HHC 有药
效的主要原因；（5）AC-SFE 与 HHS 配伍，可能使
红花中的一些成分难以发挥药效，且本实验采用 ig
给药，不同于“复方当归注射液”的注射给药方式。
综上所述，借助谱效相关的研究手段，可以发
现复方配伍的机制和药效物质基础，为复方配伍提
供依据。但本实验中仅以紫外吸收强度变化推断物
质量的变化，有可能得到假阳性结论，今后还需借
助其他检测手段来提高结论的准确度，而由数学模
型得到的药效物质仍需进一步的药效验证。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 14 期 2013 年 7 月

·1950·
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