全 文 ：经前三剂止痛方治疗原发性痛经的机制研究
方　玲1 ,朱新冰2 ,祝诚诚1 ,尹 　菊1 ,徐玉华3 ,张建伟1 ,郑晓昆1 ,张艳军1 3 ①
(11 天津中医药大学中药学院 ,天津 　300193 ; 21 天津中医药大学第二附属医院 ,天津 　300150 ;
31 天津红桥区中医院 ,天津 　300130)
摘 　要 :目的 　探讨临床经验方剂经前三剂止痛方 (J QF) 治疗原发性痛经的作用机制。方法 　以 sc 雌二醇和 ip
缩宫素的方法建立实验小鼠、大鼠痛经模型 ,阿司匹林作为对照 ,观察 J Q F 对小鼠扭体反应的影响 ,对大鼠血清、
子宫前列腺素 F2α ( P GF2α) 的影响 ;以耳廓涂抹二甲苯复制小鼠炎症模型 ,观察 J QF 对耳廓肿胀的影响 ;分离家兔
离体子宫 ,分别以重酒石酸去甲肾上腺素、甲磺酸倍他司汀、米非司酮促进子宫收缩 ,观察 J Q F 对离体子宫收缩的
抑制作用。结果 　J Q F 能够减少痛经模型小鼠的扭体次数 ,降低痛经大鼠血清、子宫 P GF2α水平 ,减轻二甲苯所致
小鼠耳廓肿胀程度 ,抑制家兔离体子宫收缩。结论 　J Q F 具有一定的镇痛、抗炎作用 ,其机制可能与降低血清
P GF2α水平 ,抑制子宫平滑肌收缩有关 ,是治疗原发性痛经的有效方剂。
关键词 :经前三剂止痛方 ; 原发性痛经 ; 镇痛 ; 抗炎 ; 子宫收缩
中图分类号 :R28515 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2010) 0420615203
　　原发性痛经是发病率较高的常见妇科疾病 ,其
在青少年期的发病率已经达到 50 % ,是影响妇女工
作和生活质量的重要影响因素之一。经前三剂止痛
方 (J Q F) 由益母草、当归、川芎等组成 ,具有活血化
瘀、温经止痛的功效 ,只需月经前 3 天使用 3 剂止痛
方本次月经无疼痛 ,连续使用 3 个月即可停药 ,是临
床上治疗原发性痛经的有效方药 ,有必要对其药效
机制进行深入探讨。本研究观察经前三剂止痛方对
不同痛经模型的影响 ,多角度探讨其治疗原发性痛
经的作用机制。
1 　材料
111 　实验动物 :健康昆明种小鼠 ,雌性 ,未孕 ,体质
量 18～22 g ,由中国医学科学院放射医学研究所动
物室提供。健康新西兰种家兔 ,雌性 ,未孕 ,体质量
118～2. 0 kg ,由天津中医药大学动物房提供。健康
SD 大鼠 ,雌性 ,未孕 ,体质量 180～220 g ,由中国医
学科学院放射医学研究所动物室提供。
112 　药物与试剂 :J Q F 制剂由天津中医药大学中
药制剂实验室制备 (2 100 g 生药材得浸膏干粉 520
g ,其出膏率为 2417 % ,本实验所指中药给药均为浸
膏干粉) ;苯甲酸雌二醇注射液 ,天津金耀氨基酸有
限公司生产 ,批号 0701041 ;缩宫素注射液 ,蚌埠市
宏业生化制药厂生产 ,批号 070310 ;阿司匹林片 ,广
东百澳药业有限公司生产 ,批号 20070501 ;重酒石
酸去甲肾上腺素 ,天津金耀氨基酸有限公司生产 ,批
号 0702081 ;甲磺酸倍他司汀 ,卫材中国药业有限公
司生产 ,批号 0800315 ;米非司酮片 ,北京紫竹药业
有限公司生产 ,批号 0711191 ;大鼠前列腺素 F2α
( P GF2α) 酶联免疫检测试剂盒 ,上海西唐生物科技
有限公司提供 ,批号 0808253。
113 　仪器 :RM6240C 型多道生理信号采集处理系
统 ,成都仪器厂 ;J Z100 型肌肉张力换能器 ,高碑店
市新航机电设备有限公司 ;电子分析天平 ;DL28R
冷冻离心机 (上海离心机械研究所) ; Flex Station3
多功能微孔分析仪 (美国 Molecular Devices ) ;
XH6020γ免疫计数器 (西安 262 厂) 。
2 　实验方法
211 　对实验性小鼠痛经模型的影响 :将小鼠随机分
为对照组 ,模型组 ,J Q F 高、低剂量 (1215、6125 g/
kg) 组 ,阿司匹林 (31125 mg/ kg) 组 ,每组 8 只 ,按
0125 mL/ 10 g ig 给药 ,1 次/ d ,连续 4 d。对照组、
模型组每天 ig 等体积生理盐水。
采用 sc 雌二醇和 ip 缩宫素的方法制备实验性
小鼠痛经模型[1 ] ,实验各组小鼠每天 sc 雌二醇
0. 05 mL/ 只 ,连续 4 d ,对照组 sc 等量生理盐水 ,末
次注射 1. 5 h 后 ,实验各组小鼠 ip 缩宫素 1 U/ 只 ,
对照组 ip 等量生理盐水。观察注射缩宫素后 20
min 内每只小鼠的扭体次数。
212 　对实验性痛经模型大鼠血清和子宫中 P GF2α
的影响 :实验分组同 211 项 ,按 4 mL/ kg ig 给药 ,1
·516·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
①收稿日期 :2009207212　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :天津市卫生局中医、中西医结合科研专项资金课题
作者简介 :方　玲 (1962 —) ,女 ,天津人 ,副教授 ,硕士生导师 ,主要从事中医妇科教学及临床研究工作。
E2mail : fangling @tjutcm. edu. cn3 通讯作者　张艳军　E2mail : zyjsunye @163. com
次/ d ,连续 10 d。J Q F 高、低剂量分别为 10、5 g/
kg ,阿司匹林剂量为 25 mg/ kg ,对照组、模型组 ig
等体积生理盐水。
采用 sc 雌二醇和 ip 缩宫素的方法建立实验性
大鼠痛经模型[ 1 ] ,实验各组均连续 10 d 给大鼠 sc
雌二醇[第 1、10 天 sc 雌二醇 0. 5 mg/ 只 ,其余时间
均为 012 mg/ 只) ,对照组 sc 等量生理盐水。末次
注射 40 h 后 ,ip 催产素 2 U/ 只。30 min 后 ,各组大
鼠眼眶取血 ,3 000 r/ min ,4 ℃离心 15 min ,分离血
清 ,置于 - 20 ℃保存。采用 EL ISA 法检测大鼠血
清、子宫中 P GF2α。
213 　对小鼠炎症模型的影响 :小鼠随机分为 3 组 ,
对照组 ,J Q F 高、低剂量组 ,给药剂量与方法同 211
项。采用二甲苯致炎方法复制小鼠炎症模型[2 ,3 ] ,
末次给药后将二甲苯 0102 mL/ 只均匀涂擦小鼠右
耳正反面 ,以左耳作为对照。将致炎 015 h 后小鼠
处死 ,用 9 mm 打孔器在左右耳廓相同部位打下耳
片 ,分别称质量 ,以左右耳片质量差作为肿胀度。
214 　对家兔离体子宫收缩的影响 :取家兔等段离体
子宫 ,分别浸入任氏液中 ,待标本平衡 40 min ,给予
J Q F ,实验分为 J Q F 高、低剂量 (0150、0125 g/ mL)
组和对照组 ,给药体积 2 mL ,分别同时给予重酒石
酸去甲肾上腺素 0103 mg 或甲磺酸倍他司汀 115
mg 或 米 非 司 酮 115 mg 使 子 宫 收 缩 , 采 用
RM6240C 型多道生理信号采集处理系统采集处理
数据 ,记录 40 min 子宫收缩曲线下面积。
215 　统计学方法 :应用 SPSS 1115 统计软件进行
数据处理 ,实验数据以 x ±s 表示 ,采用单因素方差
分析 L SD 方法统计 ,组间比较用 Dunnet t′t 检验。
3 　结果
311 　对实验性小鼠痛经模型的影响 :模型组与对照
组比较 ,小鼠扭体次数明显增加 ( P < 0101) ,说明小
鼠的痛经模型制备成功。J Q F 低、高剂量组与阿司
匹林组均能明显缓解由缩宫素引起的子宫剧烈收缩
而表现的扭体 ,与模型组比较差异显著 ( P < 0101) 。
结果见表 1。
312 　对实验性痛经模型大鼠血清 P GF2α水平的影
响 :与对照组比较 ,模型组大鼠血清中 P GF2α水平明
显升高 ( P < 0101) 。J Q F 低、高剂量组 ,阿司匹林
组 P GF2α水平均比模型组低 ( P < 0101) 。结果见表
2。
313 　对小鼠炎症模型的影响 :J Q F 低、高剂量组均
能减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀程度 ,与对照组
比较差异显著 ( P < 0101) 。结果见表 3。
表 1 　JQF 对实验性痛经小鼠扭体次数的影响 ( x ±s , n = 8)
Table 1 　Effect of JQF on writhing number
of dysmenorrheal mice ( x ±s , n = 8)
组　别 剂量/ (g ·kg - 1) 扭体次数/ (次·20 min - 1)
对照 - 013 ±017
模型 - 1011 ±318 3 3
J QF 6125 413 ±119 # #
1215 515 ±218 # #
阿司匹林 0103 125 515 ±119 # #
　　与对照组比较 : 3 3 P < 01 01 ; 　与模型组比较 : # # P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group ; 　# # P < 01 01 vs model group
表 2 　JQF 对实验性痛经模型大鼠血清 PGF2α水平的影响
( x ±s , n = 7)
Table 2 　Effect of JQF on PGF2α level of serum
in dysmenorrheal rats ( x ±s , n = 7)
组　别 剂量/ (g ·kg - 1) 血清 P GF2α/ (μg ·mL - 1)
对照 - 21 33 ±0151
模型 - 81 44 ±4165 3 3
J QF 5 51 27 ±3148
10 31 97 ±1135 # #
阿司匹林 01 025 41 21 ±1112 # #
　　与对照组比较 : 3 3 P < 01 01 ; 　与模型组比较 : # # P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group ; 　# # P < 01 01 vs model group
表 3 　JQF 对二甲苯所致耳廓肿胀的影响 ( x ±s , n = 8)
Table 3 　Effect of JQF on xylene2induced ear edema
in mice ( x ±s , n = 8)
组　别 剂量/ (g ·kg - 1) 耳廓肿胀度/ mg
对照 - 51 7 ±01 0
J QF 61 25 21 8 ±01 0 3 3
121 5 31 2 ±01 0 3 3
　　与对照组比较 : 3 3 P < 01 01
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group
314 　对家兔离体子宫收缩的影响 :家兔各离体子宫
收缩在给药前无差异。J Q F 能抑制重酒石酸去甲
肾上腺素、甲磺酸倍他司汀、米非司酮引起的子宫平
滑肌收缩 ( P < 0101) 。结果见表 4。
4 　讨论
　　近年来原发性痛经由于其发病率较高而备受关
注[4 ] 。J Q F 是临床治疗原发性痛经的有效方药 ,针
对该病主症之“疼痛”,主要病机之“瘀”,主要病因之
“气质寒凝”而设 ,具有活血化瘀、温经止痛之功。本
实验在中医理论的指导下 ,从整体2部分2受体多层
次 ,不同动物不同剂量等多角度客观地评价 J Q F 治
疗原发性痛经的作用机制。J Q F 可以明显抑制缩
宫素所致痛经小鼠的扭体反应频率 ,并与临床观察
相结合 ,说明 J Q F 与调节卵巢激素水平有关 ,通过
调节卵巢激素 ,缓解子宫肌痉挛 ,舒张子宫血管 ,改
善子宫血流 ,解除或缓解疼痛。家兔离体子宫再分
·616· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
表 4 　JQF 对家兔离体子宫收缩的影响 ( x ±s , n = 4)
Table 4 　Effect of JQF on in vivo uterine contraction of rabbit ( x ±s , n = 4)
组别 ρ/ (g ·mL - 1)
给药前子宫收缩
曲线下面积/ (mV ·s)
给药后 40 min 子宫收缩曲线下面积/ (mV ·s)
重酒石酸去甲肾上腺素 甲磺酸倍他司汀 米非司酮
对照 - 01 1 491 ±010 004 31 1 845 ±018 088 217 522 ±01 2 695 41 9 273 ±018 213
J QF 0150 01 1 473 ±010 005 01 8 686 ±010 845 3 3 013 287 ±01 0 043 3 3 01 2 894 ±010 016 3 3
0125 01 1 503 ±010 005 01 2 073 ±010 021 3 3 013 086 ±01 0 048 3 3 01 4 873 ±010 065 3 3
　　与对照组比较 : 3 3 P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs cont rol group
别给药肾上腺素α受体激动剂去甲肾上腺素、组胺
H1 受体激动剂甲磺酸倍他司汀、孕酮受体竞争性
拮抗剂米非司酮后 ,对子宫平滑肌均起到不同程度
的兴奋作用 ,J Q F 可抑制其兴奋 ,表明 J Q F 可作用
于受体 ,在受体水平调节子宫的收缩程度 ,以缓解子
宫强烈收缩所致的痛经。为进一步阐明 J Q F 治疗
痛经的作用机制 ,本实验同时进行了炎症模型试验 ,
结果显示 J Q F 能明显对抗二甲苯所致小鼠耳廓肿
胀 ,具有缓解炎症作用 ,从多角度阐述了 J Q F 治疗
痛经的作用机制。
现代医学认为原发性痛经的发生与前列腺素
( P Gs) 有着密切关系[5 ] ,前列腺素能促进子宫内膜
螺旋小动脉收缩 ,加速内膜缺血、坏死及血管的断裂
导致月经来潮。大量实验已经证实 ,痛经越严重的
妇女 ,其经血中 P GF2α水平就越高 ,在月经开始的最
初两天症状最严重时 , P GF2α水平亦达到最高峰。
高浓度的 P GF2α作用于螺旋小动脉上的 P GF2α受
体 ,引起子宫平滑肌痉挛性收缩 ,表现为能使子宫肌
张力增高、收缩幅度增加 ,导致子宫血流不足、子宫
肌组织缺血 ,酸性代谢产物堆积于肌层 ,刺激子宫自
主神经疼痛纤维而痛经[6 ] 。本实验考察 J Q F 对大
鼠痛经模型的 P GF2α水平的影响 ,J Q F 高、低剂量组
与阿司匹林组均可调节 P GF2α的量 ,显著降低痛经
大鼠 P GF2α水平 ,说明 J Q F 可直接对抗 P GF2α所致
的大鼠子宫痉挛 ,从而有效缓解痛经症状 ,达到标本
兼治痛经的效果。在上述实验中均设置了 J Q F 高、
低剂量组 ,实验显示 J Q F 存在剂量依赖性 ,但其并
不成倍数关系 ,这可能是因为受体饱和 ,表现为痛经
效果并不随着剂量的增加而增强。本实验从部分影
响因素考察 J Q F 治疗痛经的机制 ,J Q F 治疗痛经的
确切机制有待进一步研究。
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黄连解毒汤中栀子苷在正常及脑缺血大鼠体内药动学研究
曾明飞 ,潘林梅 3 ① ,朱华旭 ,张启春 ,郭立玮
(南京中医药大学 中药复方分离工程实验室 ,江苏 南京 　210029)
摘　要 :目的 　比较黄连解毒汤中栀子苷在正常和脑缺血大鼠体内的动力学过程。方法 　正常大鼠及脑缺血大鼠
ig 黄连解毒汤后不同时间采血 ,用 HPLC 法测定栀子苷的血药浓度 ,3P87 软件拟合药动学参数。结果 　脑缺血及
正常大鼠栀子苷药动学符合一室模型。脑缺血及正常状态下大鼠 ig 黄连解毒汤后 ,栀子苷在脑缺血及正常状态
下体内的 AUC 分别为 ( 151819 ±51228) 、( 111395 ±31111) μg ·h ·mL - 1 , t1/ 2 ke 分别为 ( 41704 ±11850) 、
·716·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
①收稿日期 :2009208210　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30873450) ; 江苏省教育厅自然科学基金项目 (07 KJB360087)
作者简介 :曾明飞 (1986 —) ,男 ,江西抚州人 ,南京中医药大学 2007 级硕士研究生。
Tel : (025) 86798399 　E2mail : xiaofei02 @gmail . com3 通讯作者　潘林梅　E2mail : linmeip @yahoo. com. cn