全 文 ：14(4):256-257.
[ 3] 　陆　彬.药物新剂型与新技术 [ M ].北京:人民卫生出版社 ,
2005.
[ 4] 　Takeu chi H , Nagi ra S , Yamam oto H. Solid dispersionpart i-
cles of amorphous indometh acin w ith f ine porous sili capart i-
cles by u sing sp ray-drying method [ J ] . P harmaceut ics ,
2005 , 293(1-2):155-164.
[ 5] 　Barker S A , Yap S P , Yuen K H.An inves tigat ion in-t o th e
st ructure and bioavailabilit y of alpha-tocoph erol dispersion sin
Geluci re 44/14 [ J] . J Con trol led Release , 2003 , 91(3):
477-488.[ 6] 　C hauhan B , Shimpi S , Paradkar A. Preparation and evalu-
at ion of glibenclamide-polyglycoli zed glycerides solid disper-
sion s w i th sili con dioxide by spray d ryin g technique [ J].E ur
J P harm Sci , 2005 , 26(2):219-230.
[ 7] 　Ozeki T , Yuasa H , Kanaya Y.Con trolled release f rom solid-
dispersion composed of poly(ethylene oxide)carbopol inter-
polymer complex w ith vayiou s cross-linking degrees of Car-
bopoly [ J].J Contro lled Release , 2000 , 63(3):287-295.[ 8] 　T akeuchi H , Nagira S , Yam am oto H.S olid dispersion parti-
cles of tolbu tamide prepared w ith f ine si lica particles b y the
sp ray-drying method [ J].Powder Technol , 2004 , 141:187-
195.
[ 9] 　孙考祥 ,吕会芳 ,梁容才 ,等.人参皂苷 Rg3 固体分散体的制备与体外特性研究[ J].中草药 , 2008 , 39(1):48-50.
[ 10] 　王曙宾 ,黄兰芷.葛根素固体分散体的分散状态及其体外评价[ J].中草药 , 2007 , 38(11):1632-1634.
[ 11] 　翁水旺 ,周继斌.紫外分光光度法测定醋柳黄酮片总黄酮甙元的含量 [ J].光谱仪器与分析 , 2000(2):33-34.
HPLC法测定调经促孕丸中仙茅苷 、淫羊藿苷 、隐丹参酮和丹参酮ⅡA
朱艳琴1 ,殷勤红2 ,王文辉1 ,杨　俊1 ,杨朝芬1＊
(1.昆明理工大学 分析测试研究中心 , 云南 昆明　650093;2.昆明积大制药有限公司 , 云南 昆明　650106)
摘　要:目的　建立测定调经促孕丸中仙茅苷 、淫羊藿苷 、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ A 的方法。方法　采用 HPLC 法测
定 ,H ypersil ODS 色谱柱(250 mm ×4.6 mm , 5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液 , 梯度洗脱 , 检测波长 270
nm;体积流量为 1.0 mL/ min;柱温 35 ℃。结果　4 个成分线性关系良好 , 各成分的平均回收率为 97.3%～
99.4%。结论　本方法简便 、快速 , 结果准确 ,可用于调经促孕丸的质量控制。
关键词:调经促孕丸;仙茅苷;淫羊藿苷;隐丹参酮;丹参酮Ⅱ A
中图分类号:R286.02　　　文献标识码:B　　　文章编号:0253-2670(2010)09-1473-03
　　调经促孕丸是由鹿茸 、淫羊藿 、仙茅 、丹参等 18
味中药组成的复方制剂 ,具有温肾健脾 ,活血调经的
功效 ,临床用于脾肾阳虚 、瘀血阻滞所致的月经不
调 、闭经 、痛经等症的治疗[ 1] 。该制剂原质量标准中
采用 HPLC 法测定白芍和赤芍中芍药苷 。然而复
方中药药效的发挥是多组分共同作用的结果 ,各指
标成分的量及其比例均会影响药效 。淫羊藿和仙茅
为方中君药 ,具有补肾阳强筋骨之功效 ,而丹参又能
活血通经 ,因此参考相关文献报道[ 2-5] ,本实验建立
了同时测定调经促孕丸中仙茅苷 、淫羊藿苷 、隐丹参
酮和丹参酮 ⅡA 的方法 ,为完善该制剂质量标准提
供依据。
1　仪器与试药
岛津 Prominence LC —20A 液相色谱仪(日本
S himadzu公司);SB3200 型超声波清洗器(上海必
能信超声有限公司);BP211D电子天平(德国 Sar-
to rius公司)。
仙茅苷(批号 110771-200904)、淫羊藿苷(批号
110737-200415)、隐丹参酮(批号 110852-200305)、
丹参酮 ⅡA(批号 110766-200518)对照品均由中国
药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯 ,磷酸为分
析纯 ,水为重蒸水;调经促孕丸由北京同仁堂股份有
限公司同仁堂制药厂提供。
2　方法与结果
2.1　色谱条件:Hypersil ODS 色谱柱(250 mm ×
4.6 mm ,5 μm);流动相:A 相为乙腈 , B相为 0.1%
磷酸水溶液 ,梯度洗脱 , 0 ～ 10 min , A 25%～ 40%;
10 ～ 20 min ,A 40%～ 60%;20 ～ 50 min , A 60%～
90%;检测波长 270 nm;体积流量为 1.0 mL/min;
柱温 35 ℃。
2.2　对照品溶液的制备:分别精密称取仙茅苷 、淫
羊藿苷 、隐丹参酮和丹参酮 ⅡA 对照品适量 ,分别加
甲醇制成 371 μg/mL 仙茅苷 、102 μg/mL 淫羊藿
苷 、26.5μg/mL 隐丹参酮 、40 μg/mL丹参酮 ⅡA 对
照品贮备液 。再精密吸取贮备液适量 ,加甲醇制成
含仙茅苷37.1μg/mL 、淫羊藿苷 10.2μg/mL 、隐丹
参酮 2.65 μg/mL 和丹参酮 ⅡA4.0 μg/mL 的混合
对照品溶液 。
2.3　供试品溶液的制备:取本品 ,研碎 ,精密称定
5 g ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇溶液 50 mL ,密
·1473·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
＊ 收稿日期:2009-11-24　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　作者简介:朱艳琴 ,女 ,贵州都匀市人 ,硕士 ,从事天然产物研究。 Tel:(0871)5119674　E-mail:zyq23788@sohu.com
塞 ,称定质量 ,超声处理 1 h ,放冷 ,称定质量 ,用甲醇
溶液补足减失的质量 ,摇匀 ,滤过 ,即为供试品溶液。
2.4　阴性对照溶液的制备:分别取缺仙茅 、淫羊藿
和丹参的阴性样品 ,按供试品溶液的制备方法制备
各阴性对照溶液。结果阴性对照在与仙茅苷 、淫羊
藿苷 、隐丹参酮和丹参酮 ⅡA 对照品溶液相同保留
时间处无干扰峰出现 ,表明处方中其他药味对测定
结果无影响。HPLC图谱见图 1。
1-仙茅苷　2-淫羊藿苷　3-隐丹参酮　4-丹参酮ⅡA
1-curcu ligoside　2- i cariin　3-cryptonshin on e　4-tanshinone ⅡA
图 1　混合对照品(A)、调经促孕丸(B)、缺仙茅的阴性样
品(C)、缺淫羊藿的阴性样品(D)和缺丹参的阴性
样品(E)HPLC色谱图
Fig.1 　HPLC Chromatograms of mixed reference sub-
stances(A), Tiaojing Cuyun Pills(B), negative
sample without Curculiginis Rhizoma (C), nega-
tive sample without Epimedii Herba (D), and
negative sample without Salviae Miltiorrhizae
Radix et Rhizoma (E)
2.5　线性关系考察:分别精密吸取仙茅苷 、淫羊藿
苷 、隐丹参酮和丹参酮 ⅡA 贮备液各 1 、2 、5 、10 、20
mL ,分别置于 100 mL 量瓶中 ,加甲醇定容制成不
同质量浓度的混合对照品溶液 。以峰面积为纵坐
标 ,进样量为横坐标绘制标准曲线 ,进行线性回归 ,
结果仙茅苷的回归方程为 Y =3.132 ×105 X +
1.798×103 , r=0.999 8 ,在 0.074 2 ～ 1.484 μg 峰
面积与进样量呈良好的线性关系;淫羊藿苷的回归方
程为Y =2.460×106 X +6.710×103 , r=0.999 7 ,在
0.020 4 ～ 0.408μg 峰面积与进样量呈良好的线性关
系;隐丹参酮的回归方程为 Y =6.369×106 X -
5.459×103 , r=0.999 8 ,在 0.005 3 ～ 0.106 μg 峰
面积与进样量呈良好的线性关系;丹参酮ⅡA 的回归
方程为Y =5.465×106 X-3.378×103 , r=0.999 9 ,在
0.008～ 0.16μg峰面积与进样量呈良好的线性关系。
2.6　精密度试验:分别吸取混合对照品溶液 ,连续
进样 6次 ,测定峰面积 ,计算得 RSD分别为:仙茅苷
0.10%,淫羊藿苷 0.13%,隐丹参酮 0.16%,丹参酮
ⅡA0.33%。
2.7　稳定性试验:取批号 9035124供试品溶液 ,照
上述色谱条件 ,分别于 0 、2 、4 、6 h测定峰面积 , RSD
分别为:仙茅苷 0.67%,淫羊藿苷 0.99%,隐丹参酮
0.81%,丹参酮ⅡA0.35%,表明样品中 4种成分在
6 h内稳定 。
2.8　重现性试验:平行取 6份批号 9035124样品 ,
制备供试品溶液 ,照上述色谱条件 ,分别测定 4种成
分的质量分数 ,结果 RSD 分别为:仙茅苷 0.58%,
淫羊 藿苷 1.09%, 隐丹 参酮 1.01%, 丹 参酮
ⅡA0.75%。
2.9　加样回收率试验:分别精密称取仙茅苷 、淫羊
藿苷 、隐丹参酮和丹参酮 ⅡA 对照品各 6.3 、5.4 、
9.6 、7.2 mg 置 100 mL 量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释
至刻度 ,再分别精密量取 10 、10 、2 、5 mL 置 100 mL
量瓶 ,并用甲醇定容 ,作为加样对照品溶液 。称取批
号 9035124样品各 2.0 、2.5 、3.0 g ,每 3 份为一组 ,
分别精密加入加样对照品溶液各 4 、5 、6 mL ,制备供
试品溶液 ,在上述色谱条件下进样分析 ,计算回收
率 。结果仙茅苷平均回收率为 97.3%, RSD 为
1.26%;淫羊藿苷平均回收率为 99.4%, RSD 为
0.78%;隐丹参酮平均回收率为 98.2%, RSD 为
2.07%;丹参酮 ⅡA 平均回收率为 98.7%, RSD 为
1.49%。
2.10　样品测定:精密吸取对照品溶液和供试品溶
液按上述色谱条件 ,注入液相色谱仪 ,记录峰面积 ,
用外标法计算样品中仙茅苷 、淫羊藿苷 、隐丹参酮和
丹参酮 ⅡA 的质量分数 。结果见表 1。
3　讨论
　　参考相关文献 ,淫羊藿苷 、隐丹参酮和丹参酮
ⅡA 的检测波长为 270 nm ,而仙茅苷在 285 nm 处
也有较强吸收 ,故最终选择 270 nm 作为检测波长 。
　　实验中参考《中国药典》2005年版一部中3味
·1474· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
表 1　调经促孕丸中有效成分的测定结果(n=3)
Table 1　Determination of active components
in Tiaojing Cuyun Pills(n=3)
批号 仙茅苷/(μg· g -1)
淫羊藿苷/
(μg· g -1)
隐丹参酮/
(μg· g -1)
丹参酮ⅡA/
(μg· g -1)
9035124 12.5 10.8 3.8 7.2
9035125 10.4 11.2 5.0 6.9
9035126 11.7 12.5 4.6 5.8
中药的流动相 ,选择乙腈-水为溶剂系统。考虑到各
峰的峰形较差 ,需在水相中加入一定量的磷酸 ,可使
各峰得到较好分离且峰形尖锐 ,因此选用乙腈和
0.1%磷酸的梯度洗脱。
　　对比 3批样品的检测结果 ,各成分之间略有差
别 ,这可能是由各批产品的生药的来源和炮制 、生产
工艺 、贮藏条件等诸多因素所引起的 ,这也表明中成
药活性成分存在一定的差异性。
参考文献:
[ 1] 　中国药典[ S] .一部.2005.
[ 2] 　许　勇 ,夏　晶 ,王　柯,等.高效液相色谱法测定健骨颗粒中
仙茅苷的含量[ J].药物分析杂志 , 2008 , 28(10):1722-1724.
[ 3] 　史万忠 ,朱　兰 ,孔德云 ,等.HPLC法测定密骨胶囊中淫羊藿
苷含量[ J].中草药 , 2000 , 31(5):341-342.
[ 4] 　王旭东 , 姚　晨, 鲁方平.淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量的
HPLC测定[ J].中草药 , 2003 , 34(8):717-718.
[ 5] 　李晓莉 ,李晓蓉 ,王丽娟 ,等.RP-HPLC 测定丹芎方中丹参素 、
阿魏酸 、隐丹参酮和丹参酮ⅡA 的含量[ J].中成药 , 2008 , 30(1):77-80.
白茅根炒炭前后 5-羟甲基糠醛的变化研究
曹雨诞 ,和颖颖 ,张　丽 ,陈佩东 ,丁安伟＊(南京中医药大学 , 江苏 南京　210046)
摘　要:目的　考察白茅根炒炭前后 5-羟甲基糠醛的变化。方法　采用 RP-HPLC 法 , Lichro spher5-C18色谱柱
(150 mm×4.6 mm , 5 μm);流动相:甲醇-0.005%醋酸水溶液;梯度洗脱;柱温:30 ℃;体积流量:1 mL/min。结果
5-羟甲基糠醛在10.84 ～ 346.8 ng 线性关系良好 , r=0.999 9 ,平均回收率为 99.39%, RSD为 1.72%(n=6)。经炒
炭后 ,炮制品中 5-羟甲基糠醛增大了32 倍。结论　白茅根经炒炭后 , 5-羟甲基糠醛的量显著提高 , 为进一步研究茅
根炭的质量控制和止血机制提供了依据。
关键词:白茅根;炒炭;5-羟甲基糠醛;炮制品;高效液相色谱
中图分类号:R286.02　　　文献标识码:B　　　文章编号:0253-2670(2010)09-1475-03
　　白茅根为禾本科植物白茅 Imperata cy lindri-
ca Beauv.var.major (Nees)C.E.Hubb.的干燥
根茎 ,又名兰根 、地筋 、白花茅根 、茅草根 、甜草根等 ,
广泛分布于全国各地 ,为中医传统常用止血药 。白
茅根始载于《神农本草经》 ,并列为草部中品 ,味甘 ,
性寒 ,主劳伤虚嬴 ,补中益气 ,除瘀血 ,血闭寒热 ,利
小便 ,用于治疗吐血 、淋病 、小便不利 、水肿和黄疸
等[ 1] 。目前对白茅根的研究主要集中在生品[ 2-3] 。
本课题组前期的实验结果表明白茅根经炒炭后 5-
羟甲基糠醛变化较大 。以前普遍认为 5-羟甲基糠
醛有一定的不良反应 ,在葡萄糖注射剂的储存 、加热
灭菌过程中需严格控制 。但近几年来研究表明 5-
羟甲基糠醛还具有抗炎 、改善血液流变学等对人体
有利的作用 ,杜伟锋等[ 4-5]将 5-羟甲基糠醛作为山茱
萸保肝作用的指标活性成分。因此本实验以 5-羟
甲基糠醛为指标 ,考察了白茅根炒炭前后该指标的
变化 ,以期为揭示白茅根炮制机制及饮片的质量标
准研究提供依据。
1　仪器与试药
高效 液 相 色 谱 (Water s515), Water s2996
(PDA)全波长紫外检测器 , YXJ-Ⅱ高速离心机(江
苏金坛市金城国胜实验仪器厂), BP211D电子天平
(0.01 mg ,德国赛多利斯), FA1104N 电子天平(0.1
mg ,上海精密科学仪器有限公司),Model8868红外
测温仪(上海壹琦仪器仪表有限公司)。
白茅根饮片购买于南京药业股份有限公司 ,经
南京中医药大学吴启南教授鉴定为禾本科植物白茅
Imperata cy lindrica Beauv.va r.major (Nees)
C.E.Hubb.的干燥根茎(批号 080214)。5-羟甲基
糠醛对照品购自中国药品生物制品检定所(质量分
数≥99%,批号 111626-200503);甲醇 、醋酸为色谱
纯;水为重蒸水。
2　方法与结果
2.1　茅根炭的制备:茅根炭是取白茅根经 310 ℃炒
·1475·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 41 卷第 9 期 2010 年 9 月
＊ 收稿日期:2010-01-25　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　基金项目:国家“十一五”科技攻关项目(2006BAIO9B006-02)作者简介:曹雨诞(1977—),女 ,江苏省无锡人 ,博士在读 , 2002年毕业于南京师范大学化学与环境科学学院 ,获硕士学位 , 研究方向为中药炮制与质量控制。 Tel:(025)51997238　E-mail:raind c@163.com＊通讯作者　丁安伟　E-mai l:aw ding105@163.com