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Steroids from Monascus purpureus metabolite

紫红曲代谢产物中的甾体成分



全 文 :紫红曲代谢产物中的甾体成分
尚小雅,王若兰,尹素琴,李金杰,金宗濂
(北京联合大学 生物活性物质与功能食品北京市重点实验室,北京100083)
[摘要] 目的:研究药食两用紫红曲Monascuspurpureus的化学成分。方法:应用各种色谱技术分离纯化,用MS和NMR分
析确定化合物结构。结果:从紫红曲乙醇提取物的石油醚部分分离得到8个化合物,分别鉴定为:豆甾4烯3酮(1),3oxo24
methylenecycloarane(2),豆甾醇(3),7β羟基豆甾醇(4),3β羟基豆甾5烯7酮(5),3β羟基豆甾5,22二烯7酮(6),5α,8α过
氧麦角甾6,22二烯3β醇(7),β谷甾醇(8)。结论:以上8个化合物除化合物3和7外,其余均为首次从红曲菌属代谢产物中分
离得到。
[关键词] 红曲菌代谢产物;紫红曲;化学成分;甾体
[收稿日期] 20081118
[基金项目] 北京市教委面上项目(KM200811417009);北京市优秀
人才培养项目(20061D0501600234);北京联合大学生物活性物质与功
能食品北京市重点实验室项目(LDKZ0605)
[通信作者] 尚小雅,Tel:(010)62004533,Fax:(010)62388927,E
mail:shangxiaoya@ygi.edu.cn
  紫红曲霉Monascuspurpureus是曲霉科红曲霉属
一种小型丝状腐生真菌;红曲是用红曲霉属真菌接种
于大米上经发酵制备而成的一种紫红色米曲;在中国
的使用已有1000多年的历史,被广泛应用于酿酒、食
品着色、食品发酵、中药等方面。《本草纲目》和《本
草从新》中均记载红曲味甘、性温,具有活血化瘀、健
脾消食之功效;主治产后恶露不净、瘀滞腹痛、赤白下
痢、跌打损伤等症[1]。红曲代谢产物的化学成分已有
报道,主要为红曲色素和洛伐他汀类降血脂活性成
分[26]。1992年日本学者Keisuke报道了红曲的降压
作用[7],近年来作者实验室用4种不同的高血压动物
模型(肾血管型、DOCA盐型、L硝基精氨酸型和原发
型)确证了紫红曲的降压效果[89],并确定了紫红曲中
的降压活性部位,为进一步确定其药效活性成分,作
者对紫红曲中显示降压活性的部位进行化学成分进
行研究。本研究报道从紫红曲降压活性部位的低极
性组分分离得到的8个代谢产物,其中有6个为首次
从该属真菌代谢产物中分离得到。
1 材料
Inova400和500核磁共振仪;Agilent1100LC
MSDTrapSL型质谱仪,MicromassAutospecUltima
ETOF型质谱仪(EI离子源);Waters600高效液相色
谱仪(Altech公司 AltimaC18制备柱,22mm×250
mm,5μm,Waters2996型检测器);CombiFlashCom
panion快速分离仪(正反相硅胶(43~60μm)制备
柱,ISCO公司产品);SephadexLH20(Pharmacia公司
产品);柱色谱硅胶(160~200目)和薄层色谱硅胶
GF254均为青岛海洋化工厂产品;溶剂均为分析纯,
由北京化学试剂厂生产。
2 提取分离
紫红曲粉末45kg(购于中国空间技术研究院),
依次用95%,80%和60%乙醇超声提取,每次2h,
提取液减压浓缩成浸膏(850g)。将浸膏分散于水
中,分别用石油醚、醋酸乙酯萃取,分为3个部分。
石油醚部分(38g)进行硅胶柱色谱,用石油醚
丙酮(100∶1~0∶100)梯度洗脱,薄层色谱检识,合并
相似洗脱流分,得到12个组分(Sh1Sh12)。Sh2组分
先经SephadexLH20柱色谱,流动相为石油醚氯仿
甲醇(5∶5∶1)洗脱,再经快速分离仪正相flash柱(40
g)色谱,流动相为石油醚丙酮(20∶1~0∶100)梯度洗
脱,得到化合物1(20mg),2(29mg);Sh3组分先经
SephadexLH20柱色谱,流动相为石油醚氯仿甲醇
(5∶5∶1)洗脱,再经快速分离仪正相flash柱(40g)色
谱,流动相为石油醚丙酮(20∶1~0∶100)梯度洗脱,
最后经过HPLC反相硅胶柱色谱,甲醇水(90∶10)洗
脱得到化合物3(15mg),4(11mg),5(20mg),6(18
mg);Sh4组分和Sh6组分放置有大量白色沉淀析出,
再分别经SephadexLH20柱色谱,流动相为石油醚
氯仿甲醇(5∶5∶1)洗脱,得到化合物7(35mg),8(180
mg)。
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第34卷第14期
2009年7月
                           
Vol.34,Issue 14
 July,2009
3 结构鉴定
化合物 1 白色针状结晶(丙酮),EIMSm/z
412[M]+。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:572(1H,
s,H4),118(3H,s,H19),092(3H,d,J=64Hz,
H21),085(3H,t,J=72Hz,H29),083(3H,d,
J=76Hz,H26),080(3H,d,J=64Hz,H27),
071(3H,s,H18);13CNMR(CDCl3,100MHz)δ:
357(C1),339(C2),1996(C3),1237(C4),
1717(C5),329(C6),320(C7),356(C8),
538(C9),386(C10),210(C11),396(C12),
424(C13),559(C14),242(C15),282(C
16),560(C17),119(C18),174(C19),361
(C20),187(C21),340(C22),260(C23),
458(C24),291(C25),198(C26),190(C
27),230(C28),119(C29)。以上数据与文献
[10]中豆甾4烯3酮的数据一致。
化合物2 白色粉末,EIMSm/z412[M]+。1H
NMR(CDCl3,400MHz)δ:472(1H,brs,H31a),
467(1H,brs,H31b),271(1H,td,J=64,140
Hz,H2a),230(1H,m,H2b),224(1H,m,H
25),212(1H,m,H23a),189(1H,m,H23b),
110(3H,s,H28),105(3H,s,H18),105(3H,s,
H30),102(3H,d,J=52Hz,H27),100(3H,d,
J=52Hz,H26),093(3H,s,H29),091(3H,d,
J=56Hz,H21);13CNMR(CDCl3,100MHz)δ:
334(C1),375(C2),2166(C3),502(C4),
484(C5),215(C6),281(C7),479(C8),
211(C9),260(C10),267(C11),328(C12),
453(C13),487(C14),350(C15),259(C
16),523(C17),181(C18),296(C19),361
(C20),183(C21),356(C22),313(C23),
1569(C24),338(C25),220(C26),219(C
27),208(C28),222(C29),193(C30),1060
(C31)。以上数据与文献[11]中3oxo24methyle
necycloarane的数据一致。
化合物 3 白色粉末,EIMSm/z412[M]+。
NMR(CDCl3)数据与文献[12]中报道的豆甾醇数据
一致。
化合物4 白色粉末,EIMSm/z428[M]+。1H
NMR(CDCl3,500MHz)δ:529(1H,m,H6),516
(1H,dd,J=150,85Hz,Ha22),503(1H,dd,J=
150,85Hz,Ha23),355(1H,m,H3),105(3H,
s,H19),095(3H,d,J=70Hz,H21),085(3H,
t,J=60Hz,H29),083(3H,d,J=55Hz,H26),
080(3H,d,J=75Hz,H27),070(3H,s,H
18);13CNMR(CDCl3,100MHz)δ:369(C1),316
(C2),714(C3),417(C4),1434(C5),1254
(C6),733(C7),408(C8),482(C9),364(C
10),210(C11),394(C12),428(C13),552
(C14),263(C15),291(C16),559(C17),
120(C18),191(C19),403(C20),190(C
21),1381(C22),1294(C23),512(C24),339
(C25),213(C26),210(C27),254(C28),
122(C29)。以上数据与文献[13]中7β羟基豆甾
醇的数据一致。
化合物5 白色粉末,EIMSm/z428[M]+。1H
NMR(CDCl3,500MHz)δ:569(1H,s,H6),366
(1H,m,H3),120(3H,s,H19),093(3H,d,J=
75Hz,H21),085(3H,t,J=75Hz,H29),083
(3H,d,J=70Hz,H26),081(3H,d,J=70Hz,
H27),068(3H,s,H18);13CNMR(CDCl3,100
MHz)δ:363(C1),312(C2),705(C3),418
(C4),1651(C5),1261(C6),2024(C7),454
(C8),499(C9),387(C10),212(C11),383
(C12),431(C13),499(C14),263(C15),
285(C16),547(C17),120(C18),173(C
19),361(C20),189(C21),339(C22),261
(C23),458(C24),291(C25),198(C26),
190(C27),230(C28),120(C29)。以上数据
与文献[14]中3β羟基豆甾5烯7酮的数据一致。
化合物6 白色粉末,EIMSm/z426[M]+。1H
NMR(CDCl3,500MHz)δ:569(1H,s,H6),517
(1H,dd,J=150,85Hz,Ha22),503(1H,dd,J=
150,85Hz,Ha23),368(1H,m,H3),120(3H,
s,H19),093(3H,d,J=70Hz,H21),085(3H,
t,J=75Hz,H29),083(3H,d,J=70Hz,H26),
081(3H,d,J=70Hz,H27),068(3H,s,H
18);13CNMR(CDCl3,100MHz)δ:363(C1),312
(C2),705(C3),418(C4),1651(C5),1261
(C6),2022(C7),454(C8),499(C9),387
(C10),210(C11),383(C12),431(C13),
499(C14),264(C15),285(C16),547(C
17),120(C18),173(C19),402(C20),190
(C21),1381(C22),1295(C23),512(C24),
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第34卷第14期
2009年7月
                           
Vol.34,Issue 14
 July,2009
319(C25),214(C26),212(C27),253(C
28),122(C29)。以上数据与文献[15]中3β羟基
豆甾5,22二烯7酮的数据一致。
化合物7 白色针状结晶(丙酮),ESIMSm/z
429[M+H]+。1HNMR(CDCl3,500MHz)δ:650
(1H,d,J=85Hz,H6),624(1H,d,J=85Hz,H
7),522(1H,dd,J=80,165Hz,H22),514
(1H,dd,J=80,165Hz,H23),100(3H,d,J=
65Hz,H28),091(3H,d,J=65Hz,H21),088
(3H,s,H19),083(3H,d,J=70Hz,H27),081
(3H,s,H18),081(3H,m,H26);13CNMR
(CDCl3,125MHz)数据与文献[16]中5α,8α过氧
麦角甾6,22二烯3β醇的数据一致。
化合物 8 白色针状结晶(丙酮),EIMSm/z
414[M]+。NMR数据与文献[12]中 β谷甾醇的数
据一致。
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SteroidsfromMonascuspurpureusmetabolite
SHANGXiaoya,WANGRuolan,YINSuqin,LIJinjie,JINZonglian
(BeijingKeyLaboratoryofBioactiveSubstancesandFunctionalFoods,BeijingUnionUniversity,Beijing100083,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsofMonascuspurpureusmetabolite.Method:Thecompoundswere
isolatedbycolumnchromatographymethods,andtheirstructuresweredeterminedbyspectroscopicmethods.Result:Eightcompounds
wereisolatedfromthepetroleumetherfractionofethanolicextractandelucidatedasstigmast4en3one(1),3oxo24methylenecy
cloarane(2),stigmasterol(3),7βhydroxystigmasterol(4),3βhydroxystigmast5en7one(5),3βhydroxystigmast5,22dien7
one(6),5α,8αepidioxyergosta6,22dien3βol(7),sitosterol(8).Conclusion:Alofthecompoundswereisolatedfromthis
genuforthefirsttimeexceptcompound3and7.
[Keywords] metabolitesofMonascus;Monascuspurpureus;chemicalconstituents;steroid
[责任编辑 王亚君]
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