全 文 ：不同生长季节枇杷叶中三萜酸成分的含量变化
吕寒１，习超鹏２，陈剑１，李维林１
（１．江苏省中国科学院植物研究所，江苏 南京 ２１００１４；
２．山东省药品检验所，山东 济南 ２５００１２）
［摘要］ 目的：观察不同采收季枇杷叶药材中４种三萜酸成分的变化规律。方法：采用高效液相法对不同季节采收的枇
杷叶中４种三萜成分的含量进行检测。结果：科罗索酸、齐墩果酸、熊果酸的含量随月份的变化较小，齐墩果酸和熊果酸含量
最高月份为４月，科罗索酸含量最高月份为７月，山楂酸含量变化较大，最高在１１月。结论：不同季节采收的枇杷叶中三萜酸
类成分的含量变化有一定的规律。
［关键词］ 枇杷叶；齐墩果酸；熊果酸；科罗索酸；山楂酸；动态变化
［收稿日期］ ２００９０１１９
［基金项目］ 南京市科技计划项目（２００７０２０７１）
［通信作者］ 李维林，Ｔｅｌ：（０２５）８４３４７００２，Ｅｍａｉｌ：ｌｗｌｃｎｂｇ＠ｍａｉｌ．
ｃｎｂｇ．ｎｅｔ
［作者简介］ 吕寒，硕士研究生，研究方向为植物化学
枇杷叶为蔷薇科枇杷属植物枇杷 Ｅｒｉｏｂｏｔｒｙａｊａ
ｐｏｎｉｃａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｌｉｎｄｌ．的干燥叶，是一味常用中药，
具有清肺止咳、降逆止呕的作用，用于治疗肺热咳
嗽、气逆喘气、胃热呕逆、烦热口渴等症状［１］。枇杷
叶药效主要集中在三萜类成分的抗炎、降血糖和抗
病毒活性方面，其中齐墩果酸、熊果酸、科罗索酸
（ｃｏｒｏｓｏｌｉｃａｃｉｄ）、山楂酸（ｍａｓｌｉｎｉｃａｃｉｄ）含量较高，也
是主要的活性成分［２］。枇杷叶全年皆可采收，有关
枇杷叶的采收季节没有严格标准。本研究建立了高
效液相色谱法测定枇杷叶中４种三萜酸类成分的方
法，并对不同采收季枇杷叶中的４种三萜酸含量进
行了比较，可以为合理选择采收时间提供依据。
１ 材料
Ａｇｉｌｅｎｔ１２００高效液相色谱仪，ＤＡＤ检测器；
ＭｅｔｌｅｒＡＥ２４０电子天平。齐墩果酸（０７０９９８０３）和
熊果酸（１１０７４２２００５１６）对照品由中国药品生物制
品检定所提供，科罗索酸（ｃｏｒｏｓｏｌｉｃａｃｉｄ）及山楂酸
（ｍａｓｌｉｎｉｃａｃｉｄ）对照品由本所从枇杷叶中提取，经高
效液相色谱法测定，纯度均≥９８０％，甲醇为色谱
纯，水为纯净水，其余试剂均为分析纯。
不同时期枇杷叶药材采于本所，采集时间为每
月９日。由本所李维林研究员鉴定为蔷薇科植物枇
杷Ｅ．ｊａｐｏｎｉｃａ的叶。药材于６０℃烘１ｈ后粉碎过
６０目筛。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＡｉｃｈｒｏｍＢｏｎｄＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ）。以甲醇０４％磷酸水溶液（９０∶１０）
作为流动相，流速 １０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长 ２０８
ｎｍ，柱温３５℃。理论板数按熊果酸峰计算不低于
２０００。
２．２ 对照品溶液的制备 分别精密称取齐墩果酸、
熊果酸、科罗索酸及山楂酸对照品适量，用甲醇配制
成含齐墩果酸００１００３ｇ·Ｌ－１，熊果酸００４２６ｇ·
Ｌ－１，科罗索酸００２４２ｇ·Ｌ－１及山楂酸００２５２ｇ·
Ｌ－１的对照品混合溶液。
２．３ 供试品溶液的制备 取枇杷叶粉末，精密称取
０１ｇ，置圆底烧瓶中，精密加入甲醇５０ｍＬ，称重，加
热回流提取３０ｍｉｎ，用甲醇补足失重，过滤，滤液以
０４５μｍ微孔滤膜过滤，即得。
２．４ 线性关系考察 取混合对照品溶液２，４，６，８，
１０μＬ，分别进样，按上述色谱条件测定峰面积积分
值，以峰面积积分值为纵坐标，对照品进样量为横坐
标绘制标准曲线，计算回归方程得：齐墩果酸，Ｙ＝
８７１６６Ｘ－０４４８８，ｒ＝０９９９９；熊果酸，Ｙ＝
８２０５２Ｘ－４９３０８，ｒ＝０９９９７；科罗索酸，Ｙ＝
４７９８１Ｘ－１９１９７，ｒ＝０９９９９；山楂酸，Ｙ＝
５４５０５Ｘ－５７８４８，ｒ＝０９９９７。结果表明齐墩果酸
进样量在 ００２０～０１００μｇ，熊果酸进样量在
００８５～０４２６μｇ，科罗索酸进样量在００４８～０２４２
μｇ，山楂酸进样量在００５０～０２５２μｇ线性关系良
好。
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２．５ 精密度试验 取２．２项下混合对照品溶液，在
上述色谱条件下重复进样６次，每次５μＬ，齐墩果
酸、熊果酸、科罗索酸、山楂酸的峰面积ＲＳＤ分别为
１１％，０９５％，０９５％，１１％（ｎ＝６），表明精密度
良好。
２．６ 重复性试验 取 １月份采收的枇杷叶样品
０１ｇ，共６份，分别按２．３项下样品溶液制备方法
和２．１项下色谱条件操作，计算含量。齐墩果酸的
平均质量分数０１３５％，ＲＳＤ１５％；熊果酸的平均
质量分数０５６８％，ＲＳＤ１２％；科罗索酸的平均质
量分数为０３４２％，ＲＳＤ１４％；山楂酸的平均质量
分数０４５９％，ＲＳＤ１３％。表明重复性良好。
２．７ 加样回收率试验 精密称取１月份采收的枇
杷叶样品（齐墩果酸０１３５％，熊果酸０５６８％，科罗
索酸０３４２％，山楂酸０４５９％）粉末５份，每份００５
ｇ，分别精密加入齐墩果酸对照品溶液 ７ｍＬ
（００１００３２ｇ·Ｌ－１），熊果酸对照品溶液 ７ｍＬ
（００４２６ｇ·Ｌ－１），科罗索酸对照品溶液 １５ｍＬ
（００１２１ｇ·Ｌ－１），山楂酸对照品溶液８ｍＬ（００２５
２ｇ·Ｌ－１），再精密加入甲醇至５０ｍＬ，按２．３项下制
备与测定方法，进行含量测定。结果显示齐墩果酸
平均回收率为９７１％，ＲＳＤ１７％；熊果酸平均回收
率为９６９％，ＲＳＤ０７８％；科罗索酸平均回收率为
９７０％，ＲＳＤ１３％；山楂酸平均回收率为 ９７４％，
ＲＳＤ０９２％。
２．８ 样品测定 分别精密称取不同采收时期枇杷
叶样品粉末各３份，按２．３项下样品溶液制备方法
及２．１项下色谱条件操作，测定峰面积，外标法计算
含量。高效液相图谱见图１，含量测定结果见表１。
３ 讨论
本实验曾分别采用甲醇１％醋酸水溶液（９０∶
１０）和甲醇０４％磷酸水溶液（９０∶１０）作为流动相，
结果发现在流动相中加入无机酸可以增加样品分离
度，加入磷酸的分离效果好于醋酸，且加入醋酸会降
低三萜酸类的紫外吸收强度，故最终选择甲醇
０４％磷酸水溶液（９０∶１０）作为流动相，使４种三萜
酸类成分得到有效分离。
从表１和图１可以看出，枇杷叶中４种三萜酸
的含量随季节变化而不同，其中科罗索酸、齐墩果
酸、熊果酸的含量在一年当中变化较小，齐墩果酸和
１．山楂酸；２．科罗索酸；３．齐墩果酸；４．熊果酸。
图１ 对照品（Ａ）和枇杷叶样品（Ｂ）的高效液相色谱图
表１ 不同采收时期枇杷叶中４种三萜酸类成分的
质量分数（ｎ＝３） ％
月份 山楂酸 科罗索酸 齐墩果酸 熊果酸
１ ０４５９ ０３４２ ０１３５ ０５６８
２ ０４１０ ０３１８ ０１４１ ０５７８
３ ０３６７ ０２８７ ０１１４ ０５６６
４ ０４２２ ０３３９ ０１６５ ０７２０
５ ０４３９ ０３２４ ０１６１ ０６２９
６ ０３１２ ０２６７ ０１４１ ０６５３
７ ０２９０ ０４３０ ０１２３ ０５３９
８ ０１１４ ０３２９ ０１５３ ０７０６
９ ０５５８ ０２９１ ０１３８ ０５５５
１０ ０６８２ ０３８２ ０１５５ ０６８０
１１ ０９９７ ０３５３ ０１４５ ０６４２
１２ ０８４６ ０３２５ ０１１８ ０５９５
熊果酸含量最高月份为４月，科罗索酸含量最高月
份为７月，但差异不显著。山楂酸含量变化较大，其
中１－５月含量变化不大，６－８月份急剧下降，９月
份后急剧升高，至１１月达到最高，１１月后又呈下降
趋势。枇杷的花期在 １０－１２月［３］，而山楂酸在
１０１２月的含量较高，说明花期与含量间可能存在一
定的相关性。
［参考文献］
［１］ 中国药典．一部［Ｓ］．２００５：１４２．
［２］ 沙娜，梁敬钰．枇杷叶研究进展［Ｊ］．海峡药学，２００６，１８（１）：６．
［３］ 中国科学院中国植物志编委会．中国植物志．第３６卷［Ｍ］．北
京：科学出版社，１９７４：２６２．
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Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９
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ｃｏｌｅｃｔｅｄａｔｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｓｅａｓｏｎｓ
ＬＵＨａｎ１，ＸＩＣｈａｏｐｅｎｇ２，ＣＨＥＮＪｉａｎ１，ＬＩＷｅｉｌｉｎ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ，ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅａｎｄＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｊｉ＇ｎａｎ２５００１２，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｆｉｎｄｏｕｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｏｆｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄａｃｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔｉｎｌｅａｖｅｓｏｆＥｒｉｏｂｏｔｒｙａｊａｐｏｎｉｃａ．（Ｆｏｌｉｕｍ
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