全 文 ：ＨＰＬＣ测定不同采收期水红花子中的槲皮素
郑宗建，翟延君，初正云，康廷国
（辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 １１６０００）
［收稿日期］　２００８０６１６
［基金项目］　辽宁省教育厅课题（２００４Ｄ２６３）
［通讯作者］　翟延君，Ｔｅｌ：（０４１１）８７５８６００３，Ｅｍａｉｌ：ｌｎｚｙｚｙｊ＠ｓｏｈｕ．
ｃｏｍ
　　水红花子为蓼科植物红蓼 Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｏｒｉｅｎｔａｌｅ
Ｌ．的干燥成熟果实，分布几乎遍及全国。１９７７年版
《中国药典》开始收载，具有散血消，消积止痛的
功效，主治瘕痞块、瘿瘤肿痛，食积不消，胃脘胀痛
等症［１］。有文献记载水红花子具有抗肿瘤、抑菌、
利尿作用，现代临床新用治疗肝硬化、乙型肝炎、抗
凝血。对原发性肝癌［２］及子宫肌瘤的治疗均有较
好效果［３］。本品主含黄酮类化合物［４］，有关研究表
明槲皮素具有抗氧化及清除自由基作用、能降低血
压，保护心肌缺血再灌注损伤，有免疫增强功能及抗
癌、抗菌、抗病毒和镇痛及影响多种酶的活性等作
用［５］，是水红花子的有效成分和衡量药材质量的重
要指标［６］，本实验采用ＨＰＬＣ对１０个不同采收期水
红花子中的槲皮素进行含量分析，为确定最佳采收
期，提高药材质量提供依据。
１　材料
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪，ＤＡＤ检测器，
Ａｇｉｌｅｎｔ色谱工作站。ＡＬＣ１１０４电子天平，ＡＳ
３１２０Ａ超声波清洗器。甲醇为色谱纯，水为重蒸水，
其他试剂为分析纯。槲皮素对照品由中国药品生物
制品检定所提供（批号０８１９００３）。水红花子药材
采于大连南关岭（２００７年８月３日 －１１月４日，共
１０份样品），由本院中药鉴定教研室翟延君教授
鉴定。
２　方法与结果
２．１　色谱条件
色谱柱 ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＣ１８（４６ｍｍ×２００ｍｍ，５
μｍ）；流动相 甲醇０１％磷酸水（５５∶４５）；流速１０
ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长３７５ｎｍ；柱温 ２５℃；进样量
１０μＬ，见图１。
Ａ．对照品；Ｂ．供试品；１．槲皮素。
图１　水红花子对照品及样品ＨＰＬＣ图
２．２　溶液的制备
２．２．１　对照品溶液的制备　精密称量槲皮素对照
品１８８ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶中，加甲醇定容至刻度，
精密吸取 １０ｍＬ，定容至 １００ｍＬ，制成每 １ｍＬ含
００１８８ｍｇ的溶液，即得。
２．２．２　供试品溶液的制备　取不同采收期水红花
子药材粉末（６０目）约 １ｇ，精密称定，加石油醚
（６０～９０℃）１００ｍＬ，索氏提取４ｈ，挥干溶剂，粉末
加甲醇２５％盐酸（４∶１）５０ｍＬ，回流提取３ｈ，过滤，
用甲醇定容至刻度，再用０４５μｍ滤膜过滤，即得。
２．３　线性关系考察
精密吸取对照品溶液１，２，４，６，８，１０μＬ，按上
述色谱条件测定峰面积。以槲皮素峰面积（Ｙ）积分
值为纵坐标，槲皮素进样量（Ｘ）为横坐标计算，得回
归方程：Ｙ＝７７３４１Ｘ－４４７１６（ｒ＝０９９９８），线性
范围为００１８８～０１８８０μｇ。
２．４　精密度试验
精密吸取槲皮素对照品溶液５μＬ，按上述色谱
条件重复进样 ５次，测定各自峰面积，ＲＳＤ为
０９５％，结果表明精密度良好。
２．５　重复性试验
取同一采收期样品约１ｇ，精密称定，共５份，制
备供试品溶液，精密吸取５μＬ，测定峰面积，槲皮素
为０３１０２ｍｇ·ｇ－１，ＲＳＤ为１８２％，表明本方法重
复性良好。
２．６　稳定性试验
取供试品溶液，精密吸取５μＬ，分别于０，２，４，
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第３４卷第６期
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６，８ｈ测定，比较峰面积，ＲＳＤ为１１３％，供试品溶
液在８ｈ内稳定。
２．７　加样回收率试验
精密称取已知槲皮素含量（０６９７ｍｇ·ｇ－１）的
水红花子样品１ｇ６份，分别精密加入槲皮素对照品
溶液１ｍＬ（０７２ｇ·Ｌ－１），按供试品制备方法制备
供试品溶液，精密吸取１０μＬ，注入液相色谱仪，测
定峰面积，见表１。
表１　水红花子中槲皮素的加样回收率（ｎ＝６）
样品中含量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０６９８３ １４３２７ １０１０ 　 　
０６９８６ １４０８２ ９９３ 　 　
０６９７６ １３９８９ ９８７
９９１ １４８
０６９９２ １３８７５ ９７８ 　 　
０６９８５ １４２５８ １００５ 　 　
０６９８１ １３８０６ ９７４ 　 　
　　注：加入量均为０７２ｍｇ。
２．８　样品含量测定
分别将对照品溶液（００１８８ｇ·Ｌ－１）与供试品
溶液１０μＬ，按上述色谱条件测定，采用外标一点法
计算含量，见表２。
表２　不同采收期水红花子中槲皮素含量（ｎ＝３）
Ｎｏ 采集日期 质量浓度／ｇ·Ｌ－１ ＲＳＤ／％
１ ２００７０８０３ ０１０８９ ０８７
２ ２００７０８１３ ０１１４９ １１６
３ ２００７０８２３ ０１７２６ １３４
４ ２００７０９０２ ０３０９９ １５５
５ ２００７０９１６ ０３４４７ ０９２
６ ２００７０９２８ ０５１８４ １７３
７ ２００７１００７ ０５９３５ １５１
８ ２００７１０１４ ０６９７０ １６５
９ ２００７１０２１ ０５７６４ １１２
１０ ２００７１１０４ ０４２９６ １８２
３　小结与讨论
测定结果表明槲皮素含量从８月初开始逐渐
增高，至１０月中旬达到最高点，然后又呈下降趋
势，总体分析 １０月份槲皮素的含量高于其他月
份，１０月中旬应为水红花子的最佳采收期，槲皮素
为０６９７ｍｇ·ｇ－１。有文献报道［６］，不同商品药材
水红花子的槲皮素在０１０７６～０５８６４ｍｇ·ｇ－１。
１１月份果实已基本脱落，因此本实验１１月样品仅
采集１份。
样品是否脱脂处理对花旗松素的含量测定影响
很大，脱脂后槲皮素含量高约１０倍，因此药材用石
油醚（６０～９０℃）脱脂处理。
检测波长的选择：取槲皮素对照品适量，加甲醇
溶解，在２００～４００ｎｍ进行波长扫描，槲皮素在３７５
ｎｍ处有最大吸收，故检测波长为３７５ｎｍ。该测定
方法简便准确，重现性好，可以很好地控制水红花子
的药材质量。
［参考文献］
［１］　中国药典．一部［Ｓ］．２００５：５７．
［２］　郑占虎，董泽宏，佘　靖．中药现代研究与应用．第６卷［Ｍ］．
北京：学苑出版社，１９９９：５５７４．
［３］　包明蕙，沈仲理．治疗子宫肌瘤选药经验录［Ｊ］．中医文献杂
志，１９９７，５２（４）：３２．
［４］　郑尚珍．红蓼籽中的黄酮类化合物［Ｊ］．西北师范大学学报：自
然科学版，１９９９，３５（４）：４２．
［５］　宋玉乔，姚凌云，曹　蔚，等．槲皮素的药理作用研究近况［Ｊ］．
西北药学杂志，２００２，１７（１）：４０．
［６］　张元桐，翟延君，曲　静，等．ＨＰＬＣ测定水红花子中槲皮素的
含量［Ｊ］．中成药，２００６，２８（２）：２３６．
［责任编辑　吕冬梅］
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第３４卷第６期
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