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Influence of Hovenia dulcis on alcohol concentration in blood and activity of alcohol dehydrogenase (ADH) of animals after drinking

枳椇子对酒后血中乙醇质量浓度和肝中乙醇脱氢酶活性的影响



全 文 :枳 子对酒后血中乙醇质量浓度和肝中
乙醇脱氢酶活性的影响
陈绍红 o钟赣生 3 o李爱里 o李少华 o吴立坤
k北京中医药大学 o北京 tsssu|l
≈摘要  目的 }探讨枳 子对急性乙醇中毒的防治作用 ∀方法 }雄性小鼠随机分为空白组 !模型组 !枳 子提
取物组 o给药 vs °¬±后 o模型组与枳 子组灌酒 s1stx °#ªp t o在灌酒后 s1x ot ot1x ou ou1x ov «分别摘眼球取血和取
肝组织 ∀采用生化酶法 o测定小鼠酒后不同时间内血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶k„⁄‹l活性 ∀结果 }小鼠血中
乙醇浓度在酒后 s1x ∗ t1x «达到高峰 o与模型组相比 o枳 子提取物组 s1x ∗ v «内的血中乙醇浓度数值降低 ∀枳
子提取物组对小鼠酒后 t ∗ t1x «肝中 „⁄‹的影响较为明显 o使其活性增加 ~酒后 u ∗ v «肝中 „⁄‹活性虽然也增
强 o但与模型组比较无显著差异 ∀结论 }枳 子提取物可降低酒后血中乙醇浓度 o增强肝中 „⁄‹ 活性 o其机制可能
是通过抑制消化道对乙醇的吸收 o从而起到有效的降醇解酒作用 ∀
≈关键词  枳 子 ~乙醇中毒 ~解酒 ~乙醇浓度 ~乙醇脱氢酶
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltv2ts|w2sv
≈收稿日期  ussx2s|2s{
≈通讯作者  3钟赣生 oר¯ }kstslywu{zssy o∞2°¤¬¯}½«²±ªª¤±¶«¨ ±ª
ƒ «²·°¤¬¯q¦²°
有文献报道枳 子对小鼠急性乙醇中毒有治疗
作用 o它能降低体内乙醇浓度 o缩短醒酒时间 o并能
拮抗乙醇所致的小鼠肝脏脂质过氧化≈t  o对急性乙
醇中毒所致小鼠肝损伤有预防作用≈u  o并能显著提
高小鼠肝脏乙醇脱氢酶的活性≈v  ∀而本实验采用动
态连续观察的方法 o进一步研究枳 子对乙醇在体
内吸收和分解过程的影响 o探讨枳 子解酒的药效
及作用机制 o便于枳 子的进一步开发利用 o以及为
中医药治疗急性乙醇中毒提供可信依据 ∀
1 材料
111 动物
Œ≤• 雄性小鼠 o体重 t{ ∗ uu ªo由北京维通利华
实验动物技术有限公司提供 ∀
112 药材制备
枳 子 o购自北京市志成中药饮片厂 o生产批号
ussus{uy o产地为河北省 o经北京中医药大学基础医
学院中药教研室鉴定为鼠李科植物枳 Ηοϖενια
δυλχισ ׫∏±¥的干燥成熟种子 ∀
药材加水浸泡 o再加水煎煮 o滤过 o浓缩至相对
密度为 t1swkys ε l的浸膏 o加乙醇静置过夜 ∀取上
清液回收乙醇 o浓缩 o干燥 o研细 o置阴凉处保存 ∀使
用时 o枳 子提取物加蒸馏水配制成所需浓度的溶
液 o其中高 !中 !低剂量制剂含生药分别为 s1x os1ux o
s1tux ª#°pt o相当于成人用量的 us ots ox倍 ∀
2 方法
211 对急性乙醇中毒小鼠血中乙醇的影响≈w 
21111 制作标准曲线≈x  ≠小鼠摘眼球取血 o放入
用肝素钠抗凝的试管内 ∀从每管中取出 s1ux °o
配成分别为 uxs oxss ozxs ot sss ot xss °ª#pt的乙
醇溶液 ∀ 上述每管各加 v1w h高氯酸 w °o混匀 o
于 v sss µ#°¬±pt离心 x °¬±o上清液作为标准液 ∀ ≈
取 y只试管 o分别加入乙醇脱氢酶k„⁄‹l ) ) ) 氧化
型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸k‘„⁄l液 w1| °~继续往
其中一支加蒸馏水 s1t °o作为对照 o其余 x只各加
s1t °对照液 o室温放置 ys °¬±∀用 zxu p ≤ 紫外2
可见分光光度计k上海第三分析仪器厂l于 vws ±°
测上述各管吸光度 o绘制标准曲线 ∀回归方程为
Α€ s1ssy vΧn s1suw v , ρ€ s1||z ∀
21112 样品测试 小鼠 vss只 o随机分为 y大组
k按时间段动态观察组l o每组 xs只 o再均分为空白
组 !模型组 !枳 子高 !中 !低剂量组 ∀实验前 tu «
禁食不禁水 ∀实验时 o空白组按 s1sux °#ªpt给予
生理盐水 o模型组给予等量生理盐水 o枳 子高 !中 !
低剂量组按 s1t °#ts ªpt分别给予不同浓度枳
#w|st#
第 vt卷第 tv期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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子提取物 ∀vs °¬±后 o模型组与枳 子组分别灌酒
s1stx °#ªpt ∀y 大组小鼠分别在灌酒后 s1x ot o
t1x ou ou1x ov «摘眼球取血 ∀在取血同时另取左肝
叶边缘肝脏组织备用 o大小为 u °° ≅ u °° ≅ u °°∀
k空白组小鼠只摘取肝脏组织备用l ∀
从每管抗凝血中取出 s1ux °o加生理盐水
s1zx °o以后各步骤同制作标准曲线的  ∗ ≈ 步
骤 ∀根据吸光度 o用标准曲线求出各样品的乙醇质
量浓度k°ª#§ptl ∀
212 对急性乙醇中毒小鼠肝中乙醇脱氢酶活性的
影响
用生理盐水冲洗上述实验取出的肝脏 o滤纸吸
净后称重 o在冰浴中用玻璃匀浆器制备匀浆 ov sss µ
#°¬±pt低温离心 x °¬±o上清液备检测 ∀在 t ¦°比
色杯内加 s1ssu t °²¯#pt ‘„⁄u1{ °o空白管加蒸
馏水 s1u °o样品管加 s1v °²¯#pt乙醇和上清液各
s1t °o混匀后于 vws ±°测上述各管吸光度 o观测
其 x °¬±内每分钟变化率 ϖ Α∀计算公式≈y  }
„⁄‹活性k˜#ªp tl € ϖ Α¤°#t ≅
v
s1t ≅ ts
yr肝重克数匀浆体积 ≅ ts
v
式中 ¤°为摩尔消光系数 o‘„⁄‹ 的 ¤° € y1uu ≅
tsv ot为比色杯厚度kt ¦°l ∀
213 数据处理
数据用 cξ ? σ表示 o应用 ≥°≥≥ tt1s统计软件进
行方差分析 ∀
3 结果
311 对急性乙醇中毒小鼠血中乙醇质量浓度的影

与模型组相比 o酒后 s1x «o低剂量组无显著性
差异 ~中 !高剂量组降低 o有显著性差异k Π s1sxl ∀
酒后 t «o低 !中 !高剂量组均降低 o有显著性差异k Π
 s1sx oΠ s1sst oΠ s1sstl ∀酒后 t1x «o低剂量
组无显著性差异 ~中 !高剂量组降低 o有显著性差异
k Π s1sx oΠ s1sstl ∀
酒后 u «o低 !中 !高剂量组均降低 o有显著性差
异k Π s1sx oΠ s1sst oΠ s1sstl ∀酒后 u1x «o低
剂量组无显著性差异 ~中 !高剂量组降低 o有显著性
差异k Π s1sx oΠ s1sstl ∀酒后 v «o低剂量组无
显著性差异 ~中 !高剂量组降低 o有显著性差异k Π
s1st oΠ s1sstlk图 tl ∀
312 对急性乙醇中毒小鼠肝中乙醇脱氢酶活性的
影响
图 t 急性乙醇中毒小鼠血中乙醇质量浓度2时间曲线
酒后 s1x «o与空白组比较 o模型组肝中 „⁄‹ 活
性增强 o有显著性差异kΠ s1sxl ~与模型组比较 o不
同浓度枳 子提取物组肝中 „⁄‹活性增强 o低剂量
组组有显著性差异kΠ s1sxl o中 !高剂量组有显著性
差异kΠ s1st oΠ s1sstl∀酒后 t «o与空白组比较 o
模型组肝中 „⁄‹ 活性明显增强 o有极显著性差异
kΠ s1stl ~与模型组比较 o不同浓度枳 子提取物组
肝中 „⁄‹活性增强 o低剂量组差异k Π s1sstl o中 !
高剂量组有显著性差异kΠ s1st oΠ s1sstl∀酒后
t1x «o与空白组比较 o模型组肝中 „⁄‹ 活性明显增
强 o有极显著性差异kΠ s1stl ~与模型组比较 o不同
浓度枳 子提取物组肝中 „⁄‹ 活性增强 o低 !中 !高
剂量组有著性差异k Π s1sx oΠ s1st oΠ s1sstl∀
酒后 u «o与空白组比较 o模型组肝中 „⁄‹活性明显
增强 o有显著性差异kΠ s1stl ~与模型组比较 o不同
浓度枳 子提取物组肝中 „⁄‹活性增强 o低剂量组
无著性差异 o中 !高剂量组有著性差异kΠ s1sx oΠ
s1stl∀酒后 u1x ∗ v «o与空白组比较 o模型组肝中
„⁄‹活性明显增强 o有显著性差异k Π s1stl ~与模
型组比较 o不同浓度枳 子提取物组肝中 „⁄‹虽然
有所增强 o但无著性差异k图 ul∀
图 u 急性乙醇中毒小鼠肝中乙醇脱氢酶活性变化曲线
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第 vt卷第 tv期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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3 讨论
人体摄入乙醇后 o通过胃肠道吸收 o|s h ∗ |{ h
在肝脏代谢 ∀其中 „⁄‹ 乙醇氧化体系在乙醇代谢
中起重要作用 ∀ „⁄‹ 对乙醇的代谢过程中需要
‘„⁄的参与 o在乙醇转化为乙醛的同时 o‘„⁄转化
为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸k‘„⁄‹l ∀ ‘„⁄‹
在 vws ±°有吸收峰 o故本实验采取测定单位时间内
生成的 ‘„⁄‹ 引起的吸收度变化率的方法 o测定
„⁄‹活性的变化 ∀
本实验观察了枳 子提取物对酒后不同时间小
鼠血中乙醇质量浓度和肝中 „⁄‹活性的影响 o试验
结果显示小鼠血中乙醇质量浓度在酒后 s1x ∗ t1x «
达到高峰 o给药后 o酒后 s1x ∗ v «内 o不同浓度枳 子
提取物组与模型组相比 o时间2质量浓度曲线峰值降
低 o曲线的上升支斜率减小 o尤其是高剂量组曲线坡
度变化明显 o低剂量组虽然有一定的降低血中乙醇浓
度的作用 o但酒后 s1x ot1x ou1x ov «后的乙醇浓度与
模型组比较无显著性差异 ∀另一部分结果显示 o枳
子提取物对小鼠酒后 t ∗ t1x «肝中 „⁄‹产生的影响
较为明显 o使肝中 „⁄‹活性增强 o虽然也可增强小鼠
酒后 u ∗ v «肝中 „⁄‹ o但统计学无意义 ∀
结合小鼠酒后血中乙醇浓度和肝中 „⁄‹ 活性
的改变 o可以看出 o酒后 s1x ∗ t «内 o随血中乙醇浓
度的增高 o肝中 „⁄‹活性增强 o当酒后 t1x «血中乙
醇浓度达峰值时 o肝中 „⁄‹活性开始下降 o从 t1x «
后 o血中乙醇浓度与 „⁄‹ 活性同步降低 ∀即肝中
„⁄‹在乙醇的吸收阶段 o活性较高 o而在乙醇的分
解代谢阶段 o活性降低 o提示对乙醇的分解代谢作用
不明显 ∀可见 o乙醇对肝中 „⁄‹的影响是伴随乙醇
在体内代谢的变化而改变化的 ∀整个实验提示枳
子提取物可降低酒后血中乙醇浓度 o推测其作用机
制可能是抑制了消化道对乙醇的吸收 o加强乙醇在
胃肠道的首过效应 o从而降低血中乙醇浓度 o减轻乙
醇对人体神经系统 !消化系统等损害 o起到有效的降
醇解酒作用 ∀
≈参考文献 
≈t  嵇 扬 o陆 红 o杨 平 q枳 子酒与枳 子水提取液解酒毒
作用比较研究 q时珍国医国药 ousst otukyl }w{t1
≈u  嵇 杨 o杨 平 o李 俊 q枳 子对乙醇所致小鼠肝脏损伤的
预防作用 q中药药理与临床 ousss otykvl }t|1
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药药理与临床 oussw ouskul }uw1
≈w  刘连起 o钟赣生 o高 伟 o等 q醉酒灵对急性乙醇中毒作用的
实验研究 q北京中医药大学学报 ot||{ outkvl }uw1
≈x  Š Š吉尔鲍特 q酶法分析手册 q缪南辉 o陈石根译 q上海 }上海
科学技术出版社 ot|{v }xt1
≈y  ‹ Œq西格尔 q生物化学计算 q吴经才译 q北京 }科学出版社 o
t|{w }uv|
Ινφλυενχε οφ Ηοϖενια δυλχισ ον αλχοηολ χονχεντρατιον ιν βλοοδ ανδ
αχτιϖιτψ οφ αλχοηολ δεηψδρογενασε (Α∆Η) οφ ανιµαλσ αφτερ δρινκινγ
≤‹∞‘≥«¤²2«²±ªo‹’‘Š Š¤±2¶«¨ ±ªoŒ „¬2¯¬oŒ ≥«¤²2«∏¤o • ˜ ¬2®∏±
( Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsssu| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·¶²© Η . δυλχισ ²± µ¨ ¬¯¨√¬±ª¤¯¦²«²¯ ·²¬¬¦¬·¼ ¥¼ ¤±¬°¤¯ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¶q Μετηοδ : ¤¯¨®∏±2
°¬±ª °¬¦¨ º µ¨¨ ²√µ¤¬¨¦·²°¬½¨ §¤±§µ¤±§²°¯ ¼ §¬√¬§¨§¬±·²x ªµ²∏³¶}¦²±·µ²¯ ªµ²∏³o°²§¨¯ªµ²∏³o¤±§¤´ ∏¨²∏¶ ¬¨·µ¤¦·¶²© Η . δυλχι󪵲∏³¤·
s1x os1ux os1tux ª#°pt q׫¨ ¤¦∏·¨ ¤¯¦²«¯¬¶° ¤±¬°¤¯¶¬±§∏¦¨§¥¼ ª¤¶·µ¤¯ ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± º¬·«/ ∞µŠ∏²×²∏0 ¤±§·«¨ ¤¯¦«²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶¬±
¶¨µ∏° º µ¨¨ §¨·¨¦·¨§¤©·¨µ·µ¨¤·¨§º¬·«·«¨ ¬¨·µ¤¦·¶º¬·«¬± s qx2v «¥¼ ¥¬²¦«¨ °¬¦¤¯ ±¨½¼° ¶¨q Ρεσυλτ : ׫¨ ¤¯¦²«²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬± ¥¯²²§º¤¶∏³
·²·«¨ °¤¬¬°∏°¬± s1x2t1x «q ‹²º √¨ µ¨o·«¨ ¤¯¦²«²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶¬± ¥¯²²§²©¤´ ∏¨²∏¶ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Η . δυλχι󪵲∏³º µ¨¨ §¨¦µ¨¤¶¨§¬± s1x2
v «q׫¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© „⁄‹ ¬±·«¨ ¬¯√ µ¨¬± ¤´ ∏¨²∏¶ ¬¨·µ¤¦·²© Η . δυλχι󪵲∏³º¤¶¬±¦µ¨¤¶¨§¬± u2v «oº«¬¯¨ ¬·º¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼¬±¦µ¨¤¶¨§¬± t2
t1x «k Π s1sxl q Χονχλυσιον : ׫¨ ¤´ ∏¨²∏¶ ¬¨·µ¤¦·²© Η . δυλχισ¦²∏¯§µ¨§∏¦¨ ·«¨ ¤¯¦«²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬± ¥¯²²§²©¤±¬°¤¯¶¤±§¬±µ¨¤¶¨ ·«¨
¤¦·¬√¬·¼ ²©„⁄‹ ¤©·¨µª¬√ ±¨ ¤¯¦²«²¯ qŒ·° ¤¨±¶·«¨ ¬¨·µ¤¦·«¤¶·«¨ ©¨©¨¦·²©µ¨ ¬¯¨√¬±ª¤¯¦²«²¯ ·²¬¬¦¬·¼ ¤±§³µ¨√ ±¨·¬±ª§µ∏±®¨ ±±¨ ¶¶·«µ²∏ª«µ¨¶·µ¤¬±2
¬±ª·«¨ ¤¥¶²µ³·¬²± ²©¤¯¦²«²¯ ¬±·«¨ ª¤¶·µ²¬±·¨¶·¬±¤¯ ·µ¤¦·¤±§³µ²°²·¬±ª·«¨ ° ·¨¤¥²¯¬¶° ²©¤¯¦²«²¯ ¬±·«¨ ¬¯√ µ¨q
[ Κεψ ωορδσ] Ηοϖενια δυλχισ~¤¯¦²«²¯¬¶° ~³µ¨√ ±¨·¤¯¦²«²¯¬¶° ~¤¯¦²«²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±~¤¯¦²«²¯ §¨«¼§µ²ª¨ ±¤¶¨ k„⁄‹l
≈责任编辑 刘  
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