全 文 ：·研究报告·
胶束电动毛细管色谱法测定麻黄中的农药残留
赵燕燕１，王翠玲２，苏 芳２，王丽娟２，李月秋１，韩媛媛１，白 洁１，张向飞２
（１．河北大学 医学实验中心，河北 保定 ０７１０００；２．河北大学 药学院，河北 保定 ０７１００２）
［收稿日期］ ２００７１０１９
［基金项目］ 河北省科技攻关项目（０５２７６１０１Ｄ８８，４２７６１２２０）；
河北省中医药管理局项目（０５０１５）；河北大学人才引进项目（ｙ２００４
０３９）；河北大学自然科学基金项目（２００５４０８）
［通讯作者］ 赵燕燕，Ｔｅｌ／Ｆａｘ：（０３１２）５０７５６０２，Ｅｍａｉｌ：
ｚｈａｏｙａｎｙ６０６＠ｔｏｍ．ｃｏｍ
胶束毛细管电泳在分离科学中的应用已有广泛
报道，但因其检测灵敏度不高，故其在痕量分析中的
应用受到一定限制。为此发展了很多提高检测灵敏
度的方法［１３］，其中在线推扫富集技术因其具有较高
的检测灵敏度且操作简单、经济实用而有广泛的应
用前景。在线推扫富集技术中，样品带不含胶束相，
而背景带含有胶束相。当施加电压后，胶束定向移
动通过样品带时，胶束与样品相互作用带动样品一
起运动使样品带压缩从而实现富集。它的富集是基
于分配的原理，富集效果取决于分析物在假固定相
（胶束）分配能力的大小或者是分析物与假固定相
间相互作用的大小。分析物与假固定相的亲和力越
强，富集效果越好。
麻黄ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ是裸子植物门麻黄科麻黄
属草本状小灌木，以地上茎入药，具有发汗散寒、宣
肺平喘、利水消肿的功效。农药污染是影响中药质
量的重要因素，是影响中药现代化和中药出口的主
要障碍，建立一套灵敏、可靠、规范的农药残留检测
方法和标准，使其科学化，与国际接轨已势在必行。
啶虫眯（ａｃｅｔａｍｉｐｒｉｄ）和吡虫啉（ｉｍｉｄａｃｌａｐａｉｄ）是一种
新开发的吡啶类杀虫剂，具有高效、广谱、内吸、残效
期长等特点［４］，易于在生物体内蓄积，产生毒性。
对于农残的检测多采用高效液相色谱［５１０］、气相色
谱［１１１２］和毛细管电泳法［１３］等，前２种存在样品预处
理操作烦琐，有机溶剂使用多，易造成环境污染及测
定成本高，后者存在检测灵敏度低等缺点。
本研究利用胶束毛细管电泳在线推扫富集技术
检测麻黄中啶虫眯和吡虫啉的痕量残留，弥补了毛
细管电泳灵敏度低的缺点，克服了传统方法预处理
烦琐等弊端，为中药中残留的痕量农药检测提供了
一种新的简便可靠的方法。利用此技术进行中药中
痕量农药残留量的检测尚未见文献报道。
１ 材料和方法
１．１ 仪器与试剂
Ｇ１６００Ａ型毛细管电泳仪（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）：内
设恒温系统和二极管阵列检测器，数据采集和处理由
ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎＦａｍｉｌｙ色谱工作站
完成；ＰＨＳ－３Ｃ型酸度计（上海雷磁仪器厂）；ＲＴ－５
型中药粉碎机（浙江缙云县超力机械厂）；ＲＥ－５２
ＡＡＡ型旋转蒸发器（上海嘉鹏科技有限公司）；ＳＨＺ－
Ⅲ型循环水真空泵（上海亚东生化仪器厂）。
啶虫眯和吡虫啉（原料药，纯度均为９８％，沙隆
达郑州农药有限公司）；十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ，ｓｉｇｍａ
公司）；硼砂（天津市天大化工实验厂，分析纯）；其他
试剂均为分析纯，水为二次去离子水；麻黄（市售）。
１．２ 电泳条件与操作
未涂层弹性石英毛细管柱（河北永年光纤厂），
５０μｍ×４８５ｃｍ（有效柱长４０ｃｍ）；运行缓冲液：
２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１硼砂＋８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＳＤＳ（ｐＨ６９３）；
进样时间 １００ｓ；进样压力 ４５００Ｐａ；分离电压 １５
ｋＶ；紫外检测波长２６２ｎｍ。
实验前，毛细管柱分别用１０ｍｏｌ·Ｌ－１ＮａＯＨ
溶液、水、背景缓冲溶液（ＢＧＳ）冲洗１０ｍｉｎ，用 ＢＧＳ
平衡 １０ｍｉｎ。每次进样前分别用 １０ｍｏｌ·Ｌ－１
ＮａＯＨ溶液和水各冲洗３ｍｉｎ，ＢＧＳ冲洗５ｍｉｎ。
１．３ 样品处理
称取粉碎的麻黄５０ｇ置于１００ｍＬ具塞三角
瓶中，加入３ｍＬ的１ｍｏｌ·Ｌ－１ＨＣｌ，再用８０ｍＬ甲醇
超声提取２０ｍｉｎ，真空抽滤。将滤液转移至５００ｍＬ
分液漏斗中，加入１００ｍＬ５％ＮａＣｌ水溶液混匀，再
加入１００ｍＬ石油醚，振荡，静止分层。石油醚液用
５０ｍＬ５％ＮａＣｌ水溶液反萃取１次，弃去石油醚相，
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第３３卷第１９期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
合并水溶液。在水溶液中加入４０，４０，２０ｍＬ二氯甲
烷分３次萃取，合并萃取液，经无水硫酸钠过滤，在
旋转蒸发器上（４０℃）减压浓缩至干，残渣加缓冲液
振荡溶解，过０４５μｍ的滤膜，上机分析。
１．４ 线性范围和检出限
准确称取啶虫眯和吡虫啉标样适量，配成一系
列质量浓度不同的对照品溶液（１６０，１００，７５０，
２５０，０６２５，０４８０，０１５６ｍｇ·Ｌ－１），在已建立的电泳
条件下进行检测，以校正峰面积 Ｙ对其质量浓度 Ｘ
（ｍｇ·Ｌ－１）作图，按３倍信噪比计算检出限，见表１。
表１ 回归方程和检测限
农药
线性范围
／ｍｇ·Ｌ－１
回归方程 ｒ
检测限
／ｍｇ·Ｌ－１
啶虫眯 ０１５６～１００ Ｙ＝５２１Ｘ＋１５８ ０９９９６ ００４
吡虫啉 ０１５６～１６０ Ｙ＝３４７Ｘ＋１５６ ０９９９３ ００８
１．５ 精密度和回收率
称取粉碎麻黄３份，分别加入３种不同浓度的
混样对照品。按１．３实验方法处理，计算平均回收
率和精密度，见表２。
表２ 平均回收率和相对标准偏差（ｎ＝３）
农药
添加量
／ｍｇ·ｋｇ－１
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
啶虫眯 ５１８ ９５６ ９６５ １３３
２１６ ９６０
７２０ ９８０
吡虫啉 ５１８ ８９４ ９３８ ４２０
２１６ ９７０
７２０ ９５０
２ 结果与讨论
２．１ 实验条件的优化
２．１．１ 背景缓冲溶液 ｐＨ对富集效果的影响 在
固定分离电压、进样时间、ＳＤＳ浓度和样品浓度的条
件下，以硼砂缓冲体系测定不同 ｐＨ（６０５～９４０）
下样品的峰高。实验表明，随着背景缓冲溶液 ｐＨ
升高，样品峰高增加，分离度增加，当背景缓冲溶液
的ｐＨ为６９３时，样品峰达到基线分离，且峰形很
好。当 ｐＨ高于 ６９３时，分离度降低，因此选择
６９３为最佳ｐＨ。
２．１．２ ＳＤＳ浓度对富集效果的影响 固定其他实
验条件，考察不同 ＳＤＳ浓度对富集效果的影响。实
验结果表明，随着 ＳＤＳ浓度的增加，样品峰高随之
逐渐增高，在 ＳＤＳ浓度大于８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，增加
逐渐趋于平缓，而 ＳＤＳ浓度过高会导致电流过高，
不利于分离测定。因此选择８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１为最佳
ＳＤＳ浓度。
２．１．３ 进样时间对富集效果的影响 固定其他实
验条件，考察不同进样时间对富集倍数的影响。实
验表明，富集倍数随进样时间的增加而增加，当进样
时间为１５０ｓ时啶虫眯和吡虫啉的峰高分别为进样
１ｓ时峰高的２７０，２１０倍。在进样时间为１００ｓ时，
干扰最小，样品中各组分均可检测且与其他杂质峰
达到基线分离，因此选择进样时间为１００ｓ。在选定
的电泳条件下，进样时间对富集效果的影响见图１。
Ａ１０ｓ，５０ｍｇ·Ｌ－１；Ｂ１００ｓ，２０ｍｇ·Ｌ－１；
１吡虫啉；２啶虫眯
图１ 进样时间对富集效果的影响
２．１．４ 运行电压对富集效果的影响 在其他实验
条件不变的情况下，考察了不同运行电压对富集效
果的影响。结果表明，样品峰高随运行电压增加而
增高，但是随着运行电压的增大，样品保留时间减
小，分离度减小，不利于分离测定。当电压为１５ｋＶ
时，样品峰峰形较好，且与杂质峰完全分开。因此选
择１５ｋＶ为最佳运行电压。
２．１．５ 进样压力对富集效果的影响 实验中固定
其他条件，考察了不同进样压力对峰高的影响。实
验表明，随着进样压力的增加峰高增加，当进样压力
高于４５００Ｐａ时分离度降低，因此选择４５００Ｐａ为
最佳进样压力。
２．１．６ 样品预处理条件的选择 实验考察了不同
溶媒对啶虫眯和吡虫啉提取效果的影响，结果表明，
麻黄样品通过甲醇超声提取，二氯甲烷萃取的方法
处理，可以达到比较满意的提取效果，杂质干扰小，
达到基线分离。
２．２ 样品分析
对市售麻黄样品和添加啶虫眯和吡虫啉农药后
的麻黄样品分别按１．３实验方法处理，在确立的电
泳条件下上机分析得到的电泳谱图见图２。在市售
麻黄中啶虫眯和吡虫啉的残留量分别为 ００３５，
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第３３卷第１９期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
００５９ｍｇ·ｋｇ－１。
Ａ．麻黄样品；Ｂ．添加对照品后麻黄样品；１吡虫啉；２啶虫眯
图２ 市售麻黄样品和添加啶虫眯和吡虫啉农药后的
麻黄样品电泳谱图
３ 结论
实验表明，采用胶束毛细管电泳在线推扫富集
技术测定麻黄中痕量的农药残留，操作简单，采用简
单的萃取纯化方法即可直接上机检测，简化了样品
预处理的繁琐过程，同时提高了分析灵敏度，为检测
中药中痕量的农药残留提供了一种新的方法。
［参考文献］
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［１０］ ＡｌｆｏｎｓｏＤｉＭｕｃｃｉｏ，ＰａｏｌａＦｉｄｅｎｔｅ，ＤａｎｉｌｏＡｔａｒｄＢａｒｂｉｎｉ，ｅｔａｌ．
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｔｏｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｅｏｎｉｃｏｔｉｎｏｉｄｐｅｓｔｉｃｉｄｅ
ｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎｆｒｕｉｔａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ［Ｊ］．ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００６，１１０８：１．
［１１］ 李二虎，胡 敏，吴兵兵．气相色谱法测定黄瓜中啶虫脒农药
残留［Ｊ］．农药，２００６，４５（７）：４７９．
［１２］ ＴｏｋｉｅｄａＭ，ＯｚａｗａＭ，ＧｏｍｙｏＴ．Ｍｅｔｈｏｄｓｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ
ａｃｅｔａｍｉｐｒｉｄａｎｄｉｔｓｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓｉｎｓｏｉｌｂｙＧＣ［Ｊ］．
ＰｅｓｔｉｃｉｄｅＳｃｉ，１９９９，２４（４）：１８１．
［１３］ ＣａｃｈｏＪ，ＦｉｅｒｏＩ，ＤｅｂａｎＩ，ｅｔａｌ．Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｔｈｅ
ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｍｅｔａｍｉｔｒｏｎａｎｄｉｍｉｄａｃｌｏｐｒｉｄｂｙ
ｍｉｃｅｌａｒｅｌｅｃｔｒｏｋｉｎｅｔｉｃｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｐｕｌｓｅ
ｐｏｌａｒｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＰｅｓｔｉｃｉｄｅＳｃｉ，１９９９，５５：９４７．
［责任编辑 吕冬梅］
［收稿日期］ ２００８０５２１
［通讯作者］ 梁国刚，Ｔｅｌ：（０１０）８４０３３３７５，Ｅｍａｉｌ：ｌｇｕｏｇａｎｇ２００
＠１２６．ｃｏｍ
不同产地朱砂中可溶性汞、砷、铅、镉的含量测定
梁曜华１，２，梁国刚１，张宁宁１
（１中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００；
２澳门科技大学 药物及健康应用研究所，澳门）
目前国际上对药物中的有毒重金属含量限制极
为严格，我国中药出口时因重金属含量超标而遭抵
制的事件时有报道。朱砂等矿物药中可溶性重金属
含量较高，而且药典中含有朱砂的成方制剂较多，
本实验测定了不同产地朱砂中可溶性重金属汞
（Ｈｇ）、铅（Ｐｂ）、镉（Ｃｄ）、砷（Ａｓ）的含量，并与世界
卫生组织推荐的有害金属人体每日摄入量相比较，
供新版药典的修订及中药出口企业参考。
１ 材料
１．１ 仪器 北新海光ＡＦＳ２３０Ｅ全自动双道原子荧
光分光光度计；６６５Ｄｏｓｉｍａｔ（瑞士产）滴定仪（±１
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第３３卷第１９期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １９
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８