全 文 ：采用色谱指纹图谱技术考察醋制对青皮的影响
王耀丽u o张永欣t o毛淑杰t o张启伟t 3
kt1 中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszss ~
u1 太原市第二人民医院 o山西 太原 svsssul
≈摘要 目的 }建立醋制青皮的指纹图谱测定条件 o考察醋制对青皮的影响和工艺的稳定性 ∀方法 }采用
°≤ o≤«µ²°¤¶¬¯ ≤t{柱kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l o柱温 vs ε ~流动相 水2vy h醋酸kussΒtl o
甲醇2vy h醋酸kussΒtl o
线性梯度洗脱 o流速 t °#°¬±p t ~检测波长 u{s ±° ∀结果 }精密度 !重复性和稳定性试验结果符合指纹图谱测定的
要求 ∀结论 }醋制饮片与生品 o同一批生品醋制的不同批次饮片 °≤ 指纹图谱差异不大 o说明醋制对青皮 xs h乙
醇提取物影响不大 o且在此醋制工艺条件下生产的饮片比较稳定 ∀个青皮和四花青皮指纹图谱有差别 o但尚需做
进一步研究 ∀
≈关键词 醋制青皮 ~个青皮 ~四花青皮 ~指纹图谱 ~°≤
≈中图分类号 u{v1t ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylsy2swys2sv
≈收稿日期 ussx2s|2s|
≈基金项目 国家/十五0科技攻关项目kusst
zstttl
≈通讯作者 3 张启伟 oר¯ }kstslywstwwtt2u{w{ o∞2°¤¬¯}½«¤±ª2
º´t|xx ¶²«∏q¦²°
青皮为芸香科植物橘 Χιτρυσ ρετιχυλατα ¥¯¤±¦²及
其栽培变种的干燥幼果或未成熟果实的果皮 ∀自落
的幼果 o习称/个青皮0 o未成熟的果实纵剖成四瓣至
基部 o除尽瓤瓣 o习称/四花青皮0 ∀具有舒肝破气 o
消积化滞的功效 o用于胸胁胀痛 !疝气 !乳核 !乳痈和
食积腹痛等 ∀青皮不但以生品入药 o还以多种炮制
品入药 ∀目前 ussx年版5中国药典6一部收载青皮
的炮制品为醋制青皮 ∀全国大部分省市炮制规范也
收载为醋制青皮 ∀醋青皮能引药入肝 o增强舒肝止
痛 o消积化滞的作用 o同时缓和辛烈之性 o消除发汗
作用 o以免伤伐正气≈t ∀
青皮现代研究如化学成分 !药理作用等方面有
较深研究报道≈u ∀炮制研究见有炮制对橙皮苷和挥
发油的影响等≈v ow ∀但醋制对青皮k个青皮 !四花青
皮l指纹图谱有何影响 o该炮制工艺是否稳定 o未见
研究报道 ∀本研究初步建立了青皮色谱指纹图谱的
测定条件 o并测定了 z批药材k个青皮 v批 o四花青
皮 w批l和 tt批醋制品的 °≤指纹图谱 o为今后炮
制工艺的研究和质量标准的制定打下一定的基础 ∀
1 仪器 !试剂和材料
°ttss色谱系统 o包括四元泵 !脱气机 !二极管
阵列检测器 !色谱工作站 ~甲醇k色谱级l o纯水 o其他
试剂均为分析纯 ∀柚皮苷对照品k中国药品生物制
品检定所l ∀z批青皮饮片k生l经本所谢宗万研究
员鉴定 ott批醋制品分别由上述 z批饮片按拟定的
醋制工艺在安徽沪谯中药饮片厂炒制 o每批 { ®ª∀
2 方法和结果
211 色谱条件
≤«µ²°¤¶¬¯ ≤t{柱kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l o柱温
vs ε ~流动相 水2vy h醋酸kussΒtl o
甲醇2vy h
醋酸kussΒtl o线性梯度程序见表 t o流速 t °#
°¬±pt ~检测波长 u{s ±°∀
表 t 线性梯度洗脱程序
τr°¬± 流动相 r h
s ∗ x vs
x1st ∗ vx |s
vx1st ∗ wx |s
wx1st ∗ xs vs
xs1st ∗ yx vs
212 样品溶液的制备
取样品粉末 s1ux ªo精密称定 o加 xs h乙醇水溶
液 ts °o超声处理 us °¬±o滤过 o取续滤液供分析测
试用 ∀
213 样品指纹图谱的测试
精密吸取样品溶液 ts °o注入液相色谱仪 o记
录色谱图 ∀ °≤指纹图谱见图 t ∗ v ∀
214 方法的建立
#syw#
第 vt卷第 y期
ussy年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ y
¤µ¦«oussy
图 t 浙江个青皮生品与醋制品的 °≤指纹图谱
1 生品 ~
1 醋制品 ~t1橙皮苷
图 u 四川四花青皮生品与醋制品的 °≤ 指纹图谱
1 生品 ~
1 醋制品 ~t1橙皮苷
图 v 青皮生品 °≤ 指纹图谱
1 生品 t组 ~
1生品 u组 ~t1 橙皮苷
21411 提取条件的选择 采用 vs h oxs h ozs h
乙醇对个青皮 !四花青皮超声提取 ∀经比较四花
青皮 zs h乙醇提取液虽峰面积稍大一些 o但对保
留时间较短的峰分离有不良影响 o故选用 xs h 乙
醇提取 ∀
21412 色谱条件的选择 比较了甲醇2水 o甲醇2水2
醋酸 u个系统 o以后者峰形和分离较好 ∀并比较了
不同的梯度程序 o最后确定采用的梯度程序 ∀
比较了 uux ouxw ou{s ±°等测定波长和 wss oxss
±°等参比波长及不设参比波长的条件 o确定了采用
的测定波长 ∀
215 方法学考察
21511 精密度试验 取样品溶液 o连续进样 y次 o
每次 ts Λo测定指纹图谱 ∀计算主要色谱峰保留时
间和峰面积的相对标准偏差 o并以橙皮苷峰为参比
峰k进橙皮苷甲醇溶液以确定l o计算相对保留时间
和相对峰面积 o及其相对标准偏差 ∀结果保留时间
的 ≥⁄均小于 s1tv h o峰面积的 ≥⁄在 t1x h ∗
v1v h ~相对保留时间和相对峰面积的 ≥⁄分别小
于 s1t h和小于 w1s h ∀
21512 稳定性试验 取样品溶液 o分别于 s ot ou ov o
w ox oy oz ouv «进样分析 o结果保留时间稳定 o ≥⁄均
小于 s1vx h o峰面积基本稳定 ouv «内未见下降 o
≥⁄均小于 x1s h ∀
21513 重复性试验 精密称取 x份样品 o约 s1ux ªo
分别制备样品溶液 o进样分析 ∀峰面积的 ≥⁄均小
于 v1s h o相对峰面积的 ≥⁄均小于 u1{ h ∀
3 讨论
311 从 z批生品和其相对应的醋制品的指纹图谱
看 o炮制过程对 xs h 乙醇提取的成分影响不明显
k图 t oul ∀v批峰面积略有上升 ow批略有下降 o但
相对峰面积比值变化不大 o ≥⁄平均为 x1x h ∀
312 从 u批生品的各 v批中试生产醋制品的指纹
图谱看 o批与批的差异不大 o相对峰面积比值的 ≥⁄
w1u h ∗ y1{ h o说明此工艺生产的饮片是稳定的 ∀
313 青皮的指纹图谱可分为 u种类型k图 v o
l o
图中保留时间为 ty1x °¬±的峰为橙皮苷 ∀前 t种
kl以个青皮为主kv个个青皮 ot个四花青皮l ~后 t
种k
l以四花青皮为主kv个四花青皮l ∀其中与个
青皮指纹图谱相同的四花青皮样品为江西产 o外观
看果皮很厚 o是采收期还是产地或品种的原因 o有待
进一步深入研究 ∀
≈参考文献
≈t 原思通 1医用中药饮片学 1 北京 }人民卫生出版社 ousst1vsu1
≈u 陈 红 o刘传玉 o李承晏 1 青皮的化学及药理作用研究进展 1
中草药 ousst ovukttl }tsxs1
≈v 李先端 o顾雪竹 o林 生 o等 1°≤ 测定青皮生品及炮制品中
橙皮苷的含量 1中成药 oussw ouyk|l }zuw1
≈w 陈维深 o黄培良 o陈 1 气质联用法分析炮制对青皮挥发油
成分的影响 1中国中药杂志 oussx ovsktzl }tv{{1
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第 vt卷第 y期
ussy年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Εϖαλυατιον οφ γρεεν τανγερινε πεελ προχεσσεδ ωιτη ϖινεγαρ
υσινγ ΗΠΛΧ φινγερπριντ τεχηνιθυε
• ≠¤²2¯¬u o ≠²±ª2¬¬±t o ≥«∏2¬¨t o ±¬2º ¬¨t
(t1 Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Χηινα Αχαδεµψ οφ Χηινεσε Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Βειϕινγ tsszss , Χηινα ;
u1 Τηε Ταιψυαν Σεχονδ Πεοπλε. σ Ηοσπιταλ, Ταιψυαν svsssu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³ ¤± °≤ ° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©©¬±ª¨µ³µ¬±·¶¤±§ √¨¤¯∏¤·¨ ªµ¨ ±¨ ·¤±ª¨µ¬±¨ ³¨ ¨¯k×°l ³µ²2
¦¨¶¶¨§ º¬·«√¬±¨ ª¤µ1 Μετηοδ : ׫¨ ¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¬¨·µ¤¦·¨§º¬·«xs h ·¨«¤±²¯ ∏¶¬±ª∏¯·µ¤¶²±¬¦¥¤·«¤±§¤±¤¯¼½¨ §²± ¤ ≤«µ²°¤¶¬¯ ≤t{ ¦²¯∏°± 2¨
∏¯·¨§º¬·« ° ·¨«¤±²¯ ¤±§º¤·¨µ¦²±·¤¬±¬±ªs1u h ¤¦¨·¬¦¤¦¬§¬± ¤ ¬¯±¨ ¤µªµ¤§¬¨±·³µ²ªµ¤°1 ׫¨ ©¯²º µ¤·¨ º¤¶t1s °#°¬±p t o¤±§ §¨·¨¦·¬²±
º¤√¨¯ ±¨ª·« º¤¶¶¨·¤·u{s ±°1 Ρεσυλτ : ׫¨ ≥⁄ √¤¯∏¨¶²©µ¨ ¤¯·¬√¨µ¨·¨±·¬²±·¬° ¶¨¤±§³¨ ¤®¤µ¨¤¶²© °¤¬± ³¨ ¤®¶º µ¨¨ ¤¯¯¯¨ ¶¶·«¤± x h 1 ׫¨
©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© ¨ ¬´±ª³¬¤±§≥¬«∏¤´¬±ª³¬º µ¨¨ §¬©©¨µ¨±·1 ׫¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²©·«¨ ³µ²¦¨¶¶¨§¤±§·«¨ ∏±³µ²¦¨¶¶¨§º µ¨¨ ¤¯°²¶·¶¤°¨o¤±§·«¨ ©¬±2
ª¨µ³µ¬±·§¬©©¨µ¨±¦¨¶¤°²±ª·«¨ §¬©©¨µ¨±·¥¤·¦«¨¶³µ²¦¨¶¶¨§º¬·«·«¨ ¶¤°¨·¨¦«±²¯²ª¼©µ²°·«¨ ¶¤°¨∏±³µ²¦¨¶¶¨§×° º µ¨¨ ±²·²¥√¬²∏¶1 Χονχλυ2
σιον : ׫¨ ¬±©¯∏¨ ±¦¨ ²©³µ²¦¨¶¶¬±ªº¬·«√¬±¨ ª¤µ²± xs h ·¨«¤±²¯ ¬¨·µ¤¦·¶º µ¨¨ ±²·¨ √¬§¨±·o¤±§·«¨ ·¨¦«±²¯²ª¬¦¤¯ ³µ²¶¶º¤¶¶·¤¥¯ 1¨ ·º¤¶©²∏±§
·«¤··«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© ¨ ¬´±ª³¬¤±§≥¬«∏¤´¬±ª³¬º µ¨¨ §¬©©¨µ¨±·o¥∏·¬·¶«²∏¯§¥¨ ¶·∏§¼©∏µ·«¨µ1
[ Κεψ ωορδσ] µ¨ ±¨ פ±ª¨µ¬±¨ °¨ ¨¯ ³µ²¦¨¶¶¨§º¬·«√¬±¨ ª¤µ~ ¨ ¬´±ª³¬~≥¬«∏¤´¬±ª³¬~©¬±ª¨µ³µ¬±·¶~ °≤
≈责任编辑 刘
≈收稿日期 ussx2st2us
≈通讯作者 3 许明旺 oר¯ }ksuzl{yz|vswy o∞2°¤¬¯ }¯¬ª¨ ±¯∏²¬¬
¼¤«²²1¦²°1¦±
°≤测定复方龟鹿颗粒中甜菜碱的含量
许明旺t 3 o袁秀枝t o刘焱文u o孙绪举t
kt1 华中科技大学 同济医学院 附属梨园医院 o湖北 武汉 wvsszz ~
u1 湖北中医学院 o湖北 武汉 wvssytl
≈摘要 目的 }建立测定复方龟鹿颗粒中甜菜碱含量的方法 ∀方法 }采用 °≤ 柱前衍生化来测定复方中的甜
菜碱 o¶«¬°2³¤¦® ≤≤2⁄≥色谱柱ky1s °° ≅ txs °° ox Λ°l o流动相乙腈2水kvxΒyx o其中含有 s1t °²¯#pt¤≤¯ wl o流
速 t °#°¬±p t o检测波长 uxw ±° ∀结果 }甜菜碱在 s1s|s ∗ s1x{x Λª线性关系良好kρ s1||| zl o平均回收率 |{1w h o
≥⁄u1x h k ν xl ∀结论 }本法准确可靠 o可用于复方龟鹿颗粒的质量控制 ∀
≈关键词 复方龟鹿颗粒 ~甜菜碱 ~ °≤
≈中图分类号 u{v ~ u{w1t ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussylsy2swyu2sv
复方龟鹿颗粒为四类新药 o是由龟甲 !鹿角 !枸
杞子和党参等组成的复方制剂 o方中枸杞子的用量
是党参的 u倍 o具有益精生血之功 o临床用其防治衰
老 !增强免疫力 o而甜菜碱是它的主要有效成分之
一 ∀有文献报道用薄层扫描法≈t !比色法≈u 测定其
含量 o也有用气相色谱法≈v 对其酯的降级产物进行
测定 ∀国外学者采用核磁共振k l≈w 对甜菜碱进
行含量测定 ∀本研究采用 °≤ 测定甜菜碱衍生物
的含量来控制该制剂的质量 o结果满意 ∀
1 仪器与试药
≤ p ts⁄高效液相色谱仪k日本岛津l o⁄× p
tss型电子分析天平k上海天平仪器厂l o超声波清
洗器k上海超声波仪器厂l o{s p t电动离心机k上海
手术器械厂l ∀对照品甜菜碱k中国药品生物制品检
#uyw#
第 vt卷第 y期
ussy年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ y
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