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Study of chemical constituents in stem rind of Daphne giraldii

祖师麻活性化学成分研究



全 文 :祖师麻活性化学成分研究
周光雄1,杨永春2,石建功2
(1暨南大学 药学院,广东 广州 510632;
2中国医学科学院 中国协和医科大学药物研究所,北京 100050)
[摘要] 目的:研究黄瑞香 Daphnegiraldi茎皮(即祖师麻)的镇痛活性成分。方法:在药理活性跟踪下进行植
物乙醇提取物的萃取、色谱分离,利用核磁、质谱等鉴定化合物结构。结果:从具有强镇痛活性的提取物中分离得
到了4个化合物,其中3个被鉴定为二萜原酸酯类化合物gniditrin(1),gnidicin(2)和瑞香毒素(daphnetoxin,3),4被鉴
定为 Z咖啡酸硬脂醇酯。结论:化合物1,2和4均为首次从该种植物中分离得到。
[关键词] 黄瑞香;茎皮;化学成分
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)03055503
[收稿日期] 20050105
[通讯作者] 周光雄,Tel:(020)85221469
祖师麻为瑞香科瑞香属植物黄瑞香 Daphnegi
raldiNitsch的茎皮,具疏风通络、祛瘀止痛之功效,
主用于头痛、牙痛、风湿关节痛,跌打损伤,肝区痛等
诸多痛症。西北地区民间常用其作止痛抗炎药物,
用于风湿性关节炎的治疗[1]。我国卫生部颁布的国
家中药保护品种中“祖师麻关节止痛膏”、“祖师麻
片”、“黄瑞香注射液”等都以黄瑞香作为制药原料。
香豆素类为黄瑞香的抗炎活性成分,其中瑞香素
(daphnetin)为其主要成分之一。为了进一步探讨黄
瑞香中抗炎镇痛作用的活性化学成分,作者对黄瑞
香茎皮提取物进行了进一步的研究。活性跟踪发
现,取自石油醚萃取层的提取物具有强镇痛活性。
将此活性部位经硅胶柱色谱处理,活性流分进一步
分离得到了3个二萜原酸酯类化合物 gniditrin(1),
gnidicin(2),瑞香毒素(daphnetoxin,3),以及 Z咖啡
酸硬脂醇酯(4)。对纯化合物的镇痛实验表明 3个
二萜原酸酯类具有较强的镇痛活性。利用单体化合
物进行体外抗肿瘤活性研究,结果显示 3个二萜原
酸酯化合物都具有强抗肿瘤活性。
1 材料和仪器
熔点用显微熔点测定仪测定,1H和13CNMR用
BrukerAM-500型核磁共振仪测定,EIMS用 VG
ZAB-2F型质谱仪测定,FABMS用 Autospec-Ultima
ETOF型质谱仪测定,旋光用 Perkin-Elmer241型旋
光仪测定,红外光谱用 NicoletImpact400型红外仪
测定。色谱用硅胶(160~200目)及薄层用硅胶
GF254均为青岛海洋化工厂产品,所用溶剂为分析
纯,由北京化学试剂厂和天津化学试剂厂生产。
黄瑞香茎皮(10kg)采自甘肃省,原植物鉴定为
黄瑞香 Dgiraldi。
2 提取和分离
首先将黄瑞香茎皮的乙醇提取物用蒸馏水悬浮
分散,再依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取,减压
回收溶剂后得石油醚萃取物、醋酸乙酯萃取物、正丁
醇萃取物及水层残渣等4部分。通过热板法和烫尾
法等药理实验表明,石油醚萃取物具有强镇痛活性,
醋酸乙酯部分镇痛活性较弱,而正丁醇萃取物及水
层残渣则不具活性。为此,作者将石油醚萃取物进
行硅胶柱色谱(石油醚醋酸乙酯溶剂系统),用活性
流分进行进一步分离,得到了二萜原酸酯化合物
gniditrin(1),gnidicin(2),瑞香毒素(3),以及 Z咖啡
酸硬脂醇酯(4)。
图1 化合物1~4的结构
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第31卷第7期
2006年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 7
April,2006
3 鉴定
化合物1 无色无定形固体,具有刺激性,易溶
于乙醚、醋酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等。[α]25D+510
(c030,CHCl3);分子式 C37H42O10(分子质量
646)。1HNMR(CDCl3,300MHz)δ:770(2H,m,H3′,
7′),760(1H,brs,H2′),756(1H,brs,H1),738
(2H,m,H5′,6′),590~660(5H,m,H3″~7″),
580(1H,d,J=156Hz,H2″),510(1H,s,H12),
502(2H,brs,H16),493(1H,d,J=4Hz,H14),
427(1H,brs,H5),400~392(3H,m,H10,20),
365(2H,m,H7,8),252(1H,q,J=70Hz,H11),
188(3H,s,H17),169(3H,brs,H19),138(3H,d,
J=70Hz,H18),125(4H,brs,H8″,9″),090(3H,
t,J=70Hz,H10″);FABMSm/z(%):6792[M+
Na]+(4),6472[M+H]+(5),4811(10),2770(5),
2230(12),1050(100),770(20)。以上数据与化合
物gniditrin一致[2]。
化合物2 无色无定形固体,具有刺激性,易溶
于乙醚、醋酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等。[α]25D+450
(c025,CHCl3);1HNMR(CDCl3,300MHz)δ:774
(3H,m,H3′,5′,7′),763(1H,d,J=159Hz,H3″),
756(1H,brs,H1),746(2H,m,H4′,6′),740(5H,
m,H5″,6″,7″,8″,9″),640(1H,d,J=159Hz,H
2″),520(1H,s,H12),506(2H,brs,H16),492
(1H,d,J=24Hz,H14),425(1H,brs,H5),392
(3H,m,H10,20),360~380(2H,m,H7,8),256
(1H,q,J=68Hz,H11),188(3H,s,H17),178
(3H,brs,H19),138(3H,d,J=70Hz,H18);FAB
MSm/z(%):6292[M+H]+(25),4812(16),1311
(50),1050(100),770(25)。以上数据与化合物
gnidicin一致[3]。
化合物3 无色无定形固体,具有刺激性,易溶
于乙醚、醋酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等。[α]25D+573
(c050,CHCl3)。1HNMR(CDCl3,300MHz)δ:778
(2H,m,H3′,7′),764(1H,brs,H1),739(3H,m,
H4′,5′,6′),506(2H,brs,H16a),493(1H,s,H
16b),457(1H,d,J=24Hz,H14),426(1H,brs,
H5),390(3H,s,H10),380(2H,s,H20),351
(1H,m,H7),302(1H,d,J=27Hz,H8),255
(1H,m,H11),230(1H,m,H12a),180(3H,s,H
17),179(3H,brs,H19),174(1H,d,H12b),129
(3H,d,J=70Hz,H18);FABMSm/z(%):4832
[M+H]+(50),1051(100),931(8),771(23)。以
上数据与化合物瑞香毒素一致[4]。
化合物4 无色无定形固体,易溶于乙醚、醋酸
乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等。1HNMR(CDCl3,300MHz)
δ:758(1H,d,J=150,H2),709(1H,s,H5),702
(1H,d,J=81Hz,H9),688(1H,d,J=81Hz,H8),
627(1H,,d,J=150Hz,H3),554(2H,brs,OH),
419(2H,t,J=63Hz,H1′),167(2H,p,J=62Hz,
H2′),125(brs,脂链 CH2),088(3H,t,J=63Hz,
CH3);13CNMR(75MHz,CDCl3)δ:1676(s,C1),1460
(s,C7),1445(d,C3),1436(s,C6),1277(s,C4),
1224(d,C9),1159(d,C5),1155(d,C8),1143(d,
C2),648(t,C1′),319(t,C2′),297,296,295,294,
293,288(脂链 CH2),260(t,C16′),227(t,C17′),
142(t,C18′);FABMSm/z(%):4333[M+H]+(4),
4183[M-OH]+(4),3230(4),2950(2),1810(40),
1630(100),1470(5)。以上核磁数据与 Z咖啡酸硬
脂醇酯的数据一致[5]。
[参考文献]
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newcafeateestersfromrootsofMeremiatubersaandMdicsecta
PlantaMed,1999,65:678
StudyofchemicalconstituentsinstemrindofDaphnegiraldi
ZHOUGuangxiong1,YANGYongchun2,SHIJiangong2
(1ColegeofPharmacy,JinanUniversity,Guangzhou510632,China;
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第31卷第7期
2006年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 7
April,2006
2InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalSciences,Beijing100050,China)
Abstract] Objective:TostudytheconstituentswiththepainrelievingactivityfromthestemrindofDaphnegiraldi.Method:The
partitionoftheethanolextractandchromatographicseparationofthefractionswerecariedoutbythemonitoringofanelgesicpharmacological
activity.ThestructuresoftheisolatedcompoundsweredeterminedbyMSandNMR.Result:Fourcompoundswereisolatedfromthepainre
lievingfraction.Threeofthemwereidentifiedasditerpenes,gniditrin(1),gnidicin(2)anddaphnetoxin(3).Compound4wasdetermined
asZoctadecylcafeate.Conclusion:Compounds1,2and4wereisolatedfromtheplantforthefirsttime.
[Keywords] Daphnegiraldi;stemrind;chemicalconstituents [责任编辑 李 禾]
苦参汤中生物碱部位的化学成分
刘 斌,石任兵
(北京中医药大学 中药学院,北京 100102)
[摘要] 目的:研究苦参汤中生物碱部位的化学成分。方法:采用各种色谱法分离,运用多种波谱技术鉴定结
构。结果:分离鉴定出8个化合物:苦参碱(matrine,Ⅰ)、槐定碱(sophoridine,Ⅱ)、槐果碱(sophocarpine,Ⅲ)、槐胺碱
(sophoramine,Ⅳ)、氧化苦参碱(oxymatrine,Ⅴ)、氧化槐果碱(oxysophocarpine,Ⅵ)、苦豆碱(aloperine,Ⅶ)和鹰爪豆碱
(sparteine,Ⅷ)。结论:这些化合物均为首次从苦参汤中分离得到,苦豆碱为首次在组成苦参汤复方的3味中药苦
参、生地黄、黄芩中发现。
[关键词] 苦参汤;生物碱
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)07055704
[收稿日期] 20050510
[通讯作者] 刘斌,Tel:(010)647111996050,Email:liubinyn67
@163com
苦参汤始载于《千金方》,由苦参、黄芩、生地黄
3味中药组成,具有清热燥湿、泻毒养阴的功效,用
治“热病五六日以上,热交营分彻外壮热,用苦参以
燥湿除热,搜逐肾家久伏之邪,黄芩以泄肌肤之热,
生地黄以清血脉之邪”[1]。现代主要用于治疗阴道
炎、泌尿道感染、淋病、慢性结肠炎、慢性肝炎、病毒
性心肌炎、心律失常、冠心病以及多种皮肤病等[24]。
为阐明苦参汤药效物质基础,作者运用复方有效部
位研究思路与方法[5],采用大孔吸附树脂吸附分离
技术对苦参汤进行了提取分离。本研究首次报道从
苦参汤中生物碱部位分离得到的8种成分。
1 仪器和材料
BoetiusPHMK05型显微熔点测定仪(温度计未
校正);U-2000型紫外分光光度计;MicromassZab
Spec高分辨磁质谱仪;VARIANINOVA-600型核磁
共振仪,TMS为内标。柱色谱用硅胶(160~200目,
200~300目,青岛海洋化工厂),柱色谱用氧化铝
(100~200目,北京金欧亚科技发展有限公司)。
苦参、生地黄、黄芩饮片购自北京同仁堂医药集
团北城批发部,经鉴定分别为豆科植物苦参 Sophora
flavescensAit的干燥根,玄参科植物地黄 Rehmannia
glutinosaLibosch的干燥块根和唇形科植物黄芩
ScutelariabaicalensisGeorgi的干燥根。
2 提取和分离
依苦参汤处方量,称取苦参、黄芩和生地黄饮片
(3∶2∶8)共195kg,混匀,用乙醇提取,大孔吸附树脂
分离。其中,苦参汤中生物碱部位经硅胶柱色谱分
离,石油醚氯仿甲醇(100∶0∶0~0∶1∶3)混合溶剂梯
度洗脱,得到13个部分。其中部分2经硅胶、氧化铝
柱色谱分离,石油醚丙酮(4∶1~1∶4)混合溶剂梯度洗
脱,得到化合Ⅶ(5mg);部分3经硅胶、氧化铝柱色谱
分离,石油醚氯仿(4∶1~2∶1)、石油醚醋酸乙酯(20∶
1~10∶1)混合溶剂梯度洗脱,得到化合物Ⅷ(3mg);部
分6经硅胶柱色谱分离,醋酸乙酯无水乙醇二乙胺
(200∶1∶05~50∶1∶05)混合溶剂梯度洗脱,得到化合
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第31卷第7期
2006年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 7
April,2006