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沙梨茎皮的化学成分研究



全 文 :收稿日期:2013-05-15 接受日期:2013-07-19
* 通讯作者 E-mail:hongguang jin@ hotmail. com;wooer@ chosun. ac. kr
天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2013,25:1669-1672
文章编号:1001-6880(2013)12-1669-04
沙梨茎皮的化学成分研究
金洪光1,2* ,张秀荣1,冯 波1,禹银兰2*
1吉林医药学院药学院,吉林 132013;2 韩国朝鲜大学药学院,光州广域市 501759
摘 要:采用大孔吸附树脂 HP-20、MCI gel、硅胶及 RP-18 等各种色谱方法进行分离纯化,运用光谱学方法对得
到的化合物进行结构鉴定。从韩国全罗南道地区沙梨茎皮的甲醇提取部分分离鉴定了 8 种化合物:木栓酮
(1),表木栓醇(2),羽扇豆酮(3),羽扇豆醇(4),β-香树酯醇(5),β-谷甾醇(6),6-O-乙酰基熊果苷(7),(-)-表
儿茶素(8)。化合物 1,2,3,5,7 和 8 为首次在该属植物中得到。
关键词:沙梨茎皮;三萜类化合物;苷类化合物;黄酮类化合物
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A
Chemical Constituents from the Stem Bark of Pyrus pyrifolia
JIN Hong-guang1,2* ,ZHANG Xiu-rong1,FENG Bo1,WOO Eun-rhan2*
1College of Pharmacy,Jilin Medical College,Jilin 132013,China;
2College of Pharmacy,Chosun University,Gwangju 501-759,Republic of Korea
Abstract:Compounds were isolated and purified by macroporous adsorptive resin HP-20,MCI gel,silica gel and RP-18
column chromatographies. Their structures were identified by spectroscopic methods. Six triterpenoids and one glycosides
and one flavonoids were isolated from the stem bark of Pyrus Pyrifolia. and their structures were identified as Friedelin
(1),Epifriedelanol (2) ,Lupenone (3) ,Lupeol (4) ,β-Amyrin (5) ,Stigmast-5-en-3β-ol (6) ,6-O-Acetyl arbutin
(7) ,(-)-Epicatechin (8). Compounds 1,2,3,5,7 and 8 were obtained from the plant for the first time.
Key words:Pyrus pyrifolia;triterpenoids;glycosides;flavonoids
沙梨 Pyrus pyrifolia (Burm. f.)Nakai [Ficus
pyrifolia Burm. f.]又名麻安梨(贵州土名),为温热
带植物,我国南北各地均有栽培。沙梨的果实含有
苹果酸,枸橼酸,果糖,葡萄糖等成分,味甘、微酸、性
凉,入肺、胃、心经。具有生津润燥,清热化痰的功
效。沙梨茎皮为蔷薇科梨属植物沙梨 Pyrus pyrifolia
的干燥树皮,味苦、性寒。具有清热解毒的功效,主
治热病发热,疮癣[1]。国外对沙梨的化学成分研究
已有过一些报道[2-4],而对茎皮的化学成分尚无报
道。刘吉开等[5]曾对西洋梨枝化学成分进行过一
定研究,从中分离鉴定了 8 个化合物,并进行了初步
的抗菌和抗肿瘤实验。本实验利用多种分离分析技
术对韩国全罗南道地区沙梨干燥茎皮进行研究,从
中分离得到 8 个单体化合物,经核磁共振谱等数据
分析,并与文献对照鉴定了化合物的结构,为全面系
统研究梨属植物提供了实验依据。
1 仪器与试剂
Fisher Scientific 307N0043 型熔点测定仪(温度
未校正);Varian Unity Inova 500 及 Unity Inova 600
型核磁共振仪;JEOL JMS 700 型质谱仪;Autopol-IV
型旋光测定仪;Bruker IMS85 型红外光谱仪。薄层
色谱用硅胶分为正相及反相硅胶板,为默克公司生
产;柱色谱用硅胶粒径分为 40 ~ 63 μm 及 63 ~ 200
μm,为默克公司生产;聚苯乙烯型大孔吸附树脂
(MCI gel CHP20P)为日本三菱化学公司生产。
沙梨茎皮为韩国朝鲜大学药学院药草园提供,
经禹银岚教授鉴定为 Pyrus pyrifolia 的茎皮,现保存
于朝鲜大学药学院。
2 提取与分离
取沙梨茎皮 1. 00 kg,甲醇回流提取 3 h,共 3
次,合并提取液,减压浓缩,干燥得粗提取物 154. 26
g。取沙梨茎皮甲醇粗提取物溶于 1 L蒸馏水中,置
于 3 L 分液漏斗中,加入二氯甲烷 1 L,萃取,共 3
次,合并萃取液,减压浓缩,干燥得 18. 21 g。采用相
同方法,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到
19. 73 g和 57. 37 g。取二氯甲烷萃取部分 1. 52 g,
经硅胶柱色谱,以正己烷-乙酸乙酯(30 ∶ 1 ~ 1 ∶ 3)
梯度洗脱,得到 D-1 ~ D-16 共 16 个组分。在 D-2
中,用 RP-18 柱色谱以丙酮-水(7∶ 1)分离,得到化合
物 1(15. 88 mg)和化合物 3(1. 72 mg);在 D-4 中,
用 RP-18 柱色谱以丙酮-水(7∶ 1)分离,得到化合物
2(13. 20 mg);在 D-7 中,用 RP-18 柱色谱以丙酮-水
(6∶ 1)分离,得到化合物 4(14. 80 mg)和化合物 5
(6. 96 mg);在 D-8 中,用 RP-18 柱色谱以丙酮-水(5
∶ 1)分离,得到化合物 6(11. 68 mg)。
取乙酸乙酯萃取部分 6. 10 g,经大孔吸附树脂
HP 20 柱色谱,依次用蒸馏水,20% 甲醇,40% 甲
醇,60% 甲醇,80% 甲醇及 100% 甲醇梯度洗脱,得
到 E-1 ~ E-6 共 6 个组分。E-2 经 MCI gel柱色谱,
依次用 10% 甲醇,15% 甲醇,20% 甲醇,25% 甲
醇,30% 甲醇梯度洗脱,得到 E-2-1 ~ E-2-5 共 5 个
组分。其中,E-2-1 经硅胶柱色谱,以氯仿-甲醇-水
(6∶ 1 ∶ 0. 1 ~ 3 ∶ 1 ∶ 0. 1)分离得到化合物 7(1. 58
mg);组分 E-2-2 经硅胶柱色谱,以氯仿-甲醇-水(6
∶ 1∶ 0. 1 ~ 3 ∶ 1 ∶ 0. 1)分离得到化合物 8(287. 52
mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 白色针状结晶(丙酮),mp. 262 ~
263 ℃;EI-MS m/z:426[M]+;[α]25D -75. 8°(c 0. 18,
CHCl3);
1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ:2. 39 (1H,
ddd,J = 14. 0,5. 3,2. 0 Hz,H-2a),2. 30 (1H,m,H-
2b) ,2. 25 (1H,m,H-4) ,1. 97 (1H,m,H-1a) ,1. 75
(1H,m,H-6a) ,1. 68 (1H,dd,J = 12. 0,5. 2 Hz,H-
1b) ,1. 22 (1H,m,H-19) ,1. 18 (3H,s,CH3-28),
1. 05 (3H,s,CH3-27),1. 01 (3H,s,CH3-26),1. 00
(3H,s,CH3-30),0. 95 (3H,s,CH3-29),0. 89 (3H,
d,J = 6. 8 Hz,CH3-23),0. 87 (3H,s,CH3-25),
0. 72 (3H,s,CH3-24);
13 C NMR (125 MHz,CDCl3)
δ:213. 5 (s,C-3),59. 6 (d,C-10) ,58. 4 (d,C-4) ,
53. 3 (d,C-8) ,42. 9 (d,C-18) ,42. 3 (s,C-5) ,41. 7
(t,C-2) ,41. 4 (t,C-6) ,39. 8 (s,C-13) ,39. 4 (t,C-
22) ,38. 4 (s,C-14) ,37. 6 (s,C-9) ,36. 2 (t,C-16) ,
35. 8 (t,C-11) ,35. 5 (t,C-19) ,35. 2 (q,C-30) ,
32. 9 (t,C-21) ,32. 6 (t,C-15) ,32. 2 (q,C-28) ,
31. 9 (q,C-29) ,30. 7 (t,C-12) ,30. 2 (s,C-17) ,
28. 4 (s,C-20) ,22. 4 (t,C-1) ,20. 4 (q,C-26) ,18. 8
(q,C-27) ,18. 4 (t,C-7) ,18. 1 (q,C-25) ,14. 8 (q,
C-24) ,7. 0 (q,C-23)。以上数据与文献[6,7]报道的
基本一致,由此确定化合物 1 为木栓酮。
化合物 2 白色针状结晶(丙酮),mp. 280 ~
282 ℃;EI-MS m/z:428[M]+;[α]25D + 14. 5°(c
0. 02,CHCl3);
1H NMR (600 MHz,CDCl3)δ:3. 73
(1H,d,J = 2. 4 Hz,H-3α),1. 88 (1H,m,H-2b) ,
1. 73 (1H,tt,J = 12. 0,3. 6 Hz,H-6b) ,1. 55 (1H,
m,H-2a) ,1. 25 (1H,m,H-4) ,1. 16 (3H,s,CH3-
28),1. 00 (3H,s,CH3-27),0. 99 (3H,s,CH3-29),
0. 98 (3H,s,CH3-26),0. 96 (3H,s,CH3-24),0. 94
(3H,s,CH3-30),0. 93 (3H,d,J = 7. 0 Hz,CH3-
23),0. 85 (3H,s,CH3-25);
13 C NMR (150 MHz,
CDCl3)δ:72. 7 (d,C-3),61. 3 (d,C-10) ,53. 2 (d,
C-8) ,49. 1 (d,C-4) ,42. 8 (d,C-18) ,41. 7 (t,C-
6) ,39. 6 (s,C-13) ,39. 3 (t,C-22) ,38. 3 (s,C-14) ,
37. 8 (s,C-5) ,37. 1 (s,C-9) ,36. 0 (t,C-16) ,35. 5
(t,C-11) ,35. 3 (t,C-19) ,35. 1 (t,C-2) ,35. 0 (q,
C-30) ,32. 8 (t,C-21) ,32. 3 (t,C-15) ,32. 1 (q,C-
28) ,31. 8 (q,C-29) ,30. 6 (t,C-12) ,30. 0 (s,C-
17) ,28. 2 (s,C-20) ,20. 1 (q,C-26) ,18. 6 (q,C-
27) ,18. 2 (q,C-25) ,17. 5 (t,C-7) ,16. 4 (q,C-
24) ,15. 7 (t,C-1) ,11. 6 (q,C-23)。以上数据与文
献[6-8]报道的基本一致,由此确定化合物 2 为表木栓
醇。
化合物 3 白色针状结晶(丙酮),mp. 168 ~
170 ℃;IR cm-1:1710,1641,883;EI-MS m/z:424
[M]+,409 [M-Me]+;1H NMR (600 MHz,CDCl3)
δ:4. 69 (1H,d,J = 2. 4 Hz,H-29),4. 57 (1H,d,J
= 2. 4 Hz,H-29) ,2. 36-2. 51 (3H,m,H-2,H-19) ,
1. 92 (1H,m,H-21) ,1. 68 (3H,s,CH3-30),1. 32
(1H,m,H-21) ,1. 02 (3H,s,CH3-26),0. 96 (3H,s,
CH3-23),0. 94 (3H,s,CH3-27),0. 82 (3H,s,CH3-
25),0. 78 (3H,s,CH3-28),0. 76 (3H,s,CH3-24);
13C NMR (150 MHz,CDCl3)δ:218. 3 (s,C-3),150. 9
(s,C-20) ,109. 4 (t,C-29) ,54. 9 (d,C-5) ,49. 8 (d,
C-9) ,48. 2 (d,C-19) ,47. 9 (d,C-18) ,47. 3 (s,C-
4) ,42. 9 (s,C-17) ,42. 8 (s,C-14) ,40. 7 (s,C-8) ,
39. 9 (t,C-22) ,39. 6 (t,C-1) ,38. 1 (d,C-13) ,36. 9
(s,C-10) ,35. 5 (t,C-16) ,34. 2 (t,C-2) ,33. 5 (t,C-
7) ,29. 8 (t,C-21) ,27. 4 (t,C-15) ,26. 6 (q,C-23) ,
25. 1 (t,C-12) ,21. 4 (t,C-11) ,21. 0 (q,C-24) ,
19. 6 (t,C-6) ,19. 3 (q,C-30) ,18. 0 (q,C-28) ,15. 9
0761 天然产物研究与开发 Vol. 25
(q,C-26),15. 8 (q,C-25) ,14. 5 (q,C-27)。以上数
据与文献[9]报道的基本一致,由此确定化合物 3 为
羽扇豆酮。
化合物 4 白色针状结晶(丙酮),mp. 213 ~
216 ℃;IR cm-1:3335,1647,885;EI-MS m/z:426
[M]+;1H NMR (300 MHz,CDCl3)δ:4. 68 (1H,d,J
= 2. 2 Hz,H-29a),4. 56 (1H,d,J = 2. 2 Hz,H-
29b) ,3. 19 (1H,dd,J = 11. 4,4. 9 Hz,H-3α) ,2. 37
(1H,td,J = 11. 1,5. 8 Hz,H-19β) ,1. 91 (1H,m,H-
21) ,1. 68 (3H,s,CH3-30),1. 35 (1H,m,H-18) ,
1. 32 (1H,m,H-21) ,1. 02 (3H,s,CH3-26),0. 96
(3H,s,CH3-23),0. 94 (3H,s,CH3-27),0. 82 (3H,
s,CH3-25),0. 78 (3H,s,CH3-28),0. 76 (3H,s,
CH3-24);
13 C NMR (75 MHz,CDCl3)δ:151. 21 (s,
C-20),109. 53 (t,C-29) ,79. 21 (d,C-3) ,55. 47 (d,
C-5) ,50. 62 (d,C-9) ,48. 48 (d,C-18) ,48. 19 (d,
C-19) ,43. 21 (s,C-17) ,43. 02 (s,C-14) ,41. 01 (s,
C-8) ,40. 20 (t,C-22) ,39. 06 (s,C-4) ,38. 89 (t,C-
1) ,38. 23 (d,C-13) ,37. 36 (s,C-10) ,35. 77 (t,C-
16) ,34. 46 (t,C-7) ,30. 03 (t,C-21) ,28. 19 (q,C-
23) ,27. 61 (t,C-2) ,27. 61 (t,C-15) ,25. 31 (t,C-
12) ,21. 12 (t,C-11) ,19. 50 (q,C-30) ,18. 52 (t,C-
6) ,18. 21 (q,C-28) ,16. 33 (q,C-25) ,16. 17 (q,C-
26) ,15. 58 (q,C-24) ,14. 74 (q,C-27)。以上数据
与文献[10]报道的基本一致,由此确定化合物 4 为羽
扇豆醇。
化合物 5 白色结晶(丙酮),mp. 195 ~ 197 ℃;
EI-MS m/z:426[M]+;[α]25D + 138° (c 0. 32,
CHCl3);
1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ:5. 18 (1H,t,
J = 3. 0 Hz,H-12),3. 23 (1H,m,H-3) ,1. 13 (3H,
s,H-27a) ,1. 00 (3H,s,CH3-23),0. 97 (3H,s,CH3-
26),0. 94 (3H,s,CH3-25),0. 87 (3H,s,CH3-29),
0. 87 (3H,s,CH3-30),0. 83 (3H,s,CH3-28),0. 79
(3H,s,CH3-24);
13 C NMR (125 MHz,CDCl3)δ:
145. 4 (s,C-13),121. 9 (d,C-12) ,79. 2 (d,C-3) ,
55. 4 (d,C-5) ,47. 8 (d,C-9) ,47. 4 (d,C-18) ,47. 0
(t,C-19) ,41. 9 (s,C-14) ,39. 9 (s,C-8) ,38. 9 (s,
C-4) ,38. 8 (t,C-1) ,37. 3 (t,C-22) ,37. 1 (s,C-
10) ,34. 9 (t,C-21) ,33. 6 (q,C-29) ,32. 8 (t,C-7) ,
32. 7 (s,C-17) ,31. 3 (s,C-20) ,28. 6 (q,C-28) ,
28. 3 (q,C-23) ,27. 4 (t,C-16) ,27. 1 (t,C-2) ,26. 3
(t,C-15) ,26. 2 (q,C-27) ,23. 9 (q,C-30) ,23. 7 (t,
C-11) ,18. 6 (t,C-6) ,17. 0 (q,C-26) ,15. 8 (q,C-
24) ,15. 7 (q,C-25)。以上数据与文献[11,12]报道的
基本一致,由此确定化合物 5 为 β-香树酯醇。
化合物 6 白色结晶(丙酮),mp. 138 ~ 141 ℃;
EI-MS m/z:414[M]+;1H NMR (300 MHz,CDCl3)
δ:5. 35 (1H,d,J = 5. 0 Hz,H-6),3. 52 (1H,m,H-
3) ,0. 97 (3H,s,CH3-18),0. 83 (3H,s,CH3-19)。
以上数据与文献[13]报道的一致,与 β-谷甾醇标准品
共薄层色谱,两者 Rf 值相同,且混合熔点不下降,由
此确定化合物 6 为 β-谷甾醇。
化合物 7 白色粉末,mp 198. 5 ~ 199. 5 ℃;EI-
MS m/z:314[M]+;13 C NMR 中 δ119. 7 (d),116. 7
(d)为两个重叠信号峰,对应1H NMR 中 δ6. 92
(2H,d,J = 9. 0 Hz),6. 69 (2H,d,J = 9. 0 Hz)分
别为两个 H,显示具有一个苯环的 AABB系统。依
据 δ103. 7 (d),78. 0 (d) ,75. 4 (d) ,75. 1 (d) ,71. 8
(d) ,64. 9 (t)可能为六碳吡喃糖,对照文献[14]与熊
果苷的结构相似。13C NMR 中 δ172. 9 (s),20. 9(q)
显示具有乙酰基,1H NMR 中 δ2. 04 (3H,s)单峰为
乙酰基甲基。其中葡萄糖的 6位明显向低场移动,
表明乙酰基的连接位置为葡萄糖的 6位,由此确定
化合物 7 为 6-O-乙酰基熊果苷。1H NMR (500 MHz,
CD3OD)δ:6. 92 (2H,d,J = 9. 0 Hz,H-3,5),6. 69
(2H,d,J = 9. 0 Hz,H-2,6) ,4. 70 (1H,d,J = 7. 5
Hz,H-1) ,4. 38 (1H,dd,J = 2. 0,12. 0 Hz,H-6a) ,
4. 24 (1H,dd,J = 7. 0,12. 0 Hz,H-6b) ,2. 04 (3H,
s,COOCH3);
13 C NMR (125 MHz,CD3OD)δ:172. 9
(s,COOCH3),154. 1 (s,C-4) ,152. 4 (s,C-1) ,
119. 7 (d,C-3,5) ,116. 7 (d,C-2,6) ,103. 7 (d,C-
1) ,78. 0 (d,C-3) ,75. 4 (d,C-5) ,75. 1 (d,C-
2) ,71. 8 (d,C-4) ,64. 9 (t,C-6) 20. 9 (q,
COOCH3)。
化合物 8 类白色粉末,mp. 217 ~ 219 ℃;EI-
MS m/z:291[M + H]+;1H NMR (500 MHz,
CD3OD)δ:6. 97 (1H,d,J = 2. 0 Hz,H-2),6. 79
(1H,dd,J = 2. 0,8. 0 Hz,H-6) ,6. 75 (1H,d,J =
8. 0 Hz,H-5) ,5. 93 (1H,d,J = 2. 5 Hz,H-6) ,5. 91
(1H,d,J = 2. 5 Hz,H-8) ,4. 81 (1H,s,H-2) ,4. 17
(1H,d,J = 3. 0 Hz,H-3) ,2. 85 (1H,dd,J = 5. 0,
16. 5 Hz,H-4b) ,2. 73 (1H,dd,J = 3. 0,16. 5 Hz,H-
4a) ;13 C NMR (125 MHz,CD3OD)δ:158. 2 (s,C-
7),157. 8 (s,C-5) ,157. 5 (s,C-9) ,146. 1 (s,C-
3) ,145. 9 (s,C-4) ,132. 4 (s,C-1) ,119. 5 (d,C-
6) ,116. 0 (d,C-5) ,115. 5 (d,C-2) ,100. 2 (s,C-
1761Vol. 25 金洪光等:沙梨枝的化学成分研究
10),96. 5 (d,C-6) ,96. 0 (d,C-8) ,80. 0 (d,C-2) ,
67. 6 (d,C-3) ,29. 4 (t,C-4)。以上数据与文
献[15,16]报道的基本一致,由此确定化合物 8 为(-)-
表儿茶素。
4 结果与讨论
沙梨作为一种常用水果,广受人们的喜爱,因此
对果实的研究比较受到关注。但从植物药用成分的
研究及有效利用方面来看,从沙梨茎皮的部分提取
分离化学有效成分,无疑为全面开发利用药用植物
沙梨提供了理论依据,同时为揭示其活性物质和进
一步开发奠定很好的基础。本研究从韩国全南地区
干燥沙梨茎皮中共分得 8 个化合物,其中 5 个为三
萜类成分,1 个为苷类成分,1 个为黄酮类成分,且多
为首次在梨属植物中分离得到,多种三萜类成分的
存在可能成为沙梨茎皮的代表活性成分。
参考文献
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