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[ Κεψ ωορδσ] ¶«¨ ±©∏¬±­¨¦·¬²±~ ¦¤µ§¬²ª¨ ±¬¦¶«²¦®~ ·∏°²µ± ¦¨µ²¶¬¶©¤¦·²µ2Α~ ¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2tΒ
≈责任编辑 古云侠  
≈收稿日期   ussy2tu2sx
≈基金项目   科技部创新药物和中药现代化项目 kussu„„uvuuxl
≈通讯作者   3 李建荣 oר¯}kstslywsxyxzxo∞2°¤¬¯}‹ ≠ °∞• 2
Œ‘Ž°¤¬¯·²}·²±«¬¨°ƒ ¶¬±¤q¦²°q
金草片对子宫肌瘤模型大鼠免疫功能的干预作用
李建荣 tou3 o吴兰生 t o张广平 t
ktq中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszss~ uq澳门科技大学 药物及健康应用研究所 o澳门 l
≈摘要   目的 }探讨金草片对子宫肌瘤模型大鼠免疫功能的干预作用及该模型与临床发病机制的相关性 ∀方
法 }大鼠随机分为正常组 !模型组 !阳性药组 o金草片高 !中 !低剂量组 o以雌激素和雌 !孕激素肌肉注射造成大鼠子
宫肌瘤模型 o观察模型大鼠胸腺 !脾脏 !子宫和卵巢质量 o用流式细胞仪测定其 ×细胞亚群 ≤⁄vo≤⁄w和 ≤⁄{的水
平 o用放射配体结合分析法测定雌激素受体水平 o进行子宫组织的病理检查 ∀结果 }模型组大鼠表现出其免疫器官
胸腺质量降低 o子宫质量增加 o卵巢质量降低 ~≤⁄vo≤⁄w和 ≤⁄wr≤⁄{明显降低 o≤⁄{明显升高 ~雌激素及其受体水
平升高 ~子宫组织呈明显病变 o金草片剂量组与模型组比较 o检测各指标差异显著 ∀结论 }金草片对模型大鼠的免
疫功能低下状态表现为明显对抗作用 o调节免疫功能可能是其治疗子宫肌瘤的作用机制之一 ∀
≈关键词   金草片 ~大鼠 ~子宫肌瘤模型 ~×细胞亚群 ~雌激素受体
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uuzz2sx
近期对子宫肌瘤发病机制的临床研究结果表
明 o子宫肌瘤的发生与机体细胞免疫功能紊乱有
关 ≈t  o作者在对外源性雌 !孕激素致动物子宫肌瘤
模型不同造模阶段进行动态研究时发现 o随造模时
#zzuu#
第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ ut
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间的延长 o模型大鼠的免疫功能呈下降趋势 ≈u  ∀金
草片在民间用于治疗子宫肌瘤 ∀现报道金草片对子
宫肌瘤模型大鼠免疫功能的干预作用 o同时探讨该
模型与临床发病机制的相关性 ∀
1 材料
1q1 药物与试剂 金草片提取物 o由筋骨草 Αϕυγα
δεχαµ βενσ加水提取 o得率为 uh o每克提取物含乙酰
哈巴苷 vs °ªo由本所制剂室提供 o批号 svttux~桂枝
茯苓丸 o成都金鼎药业有限公司生产 o批号 susuuzo用
前加蒸馏水溶解配制 ∀苯甲酸雌二醇注射液 ot °ª#
°pt o上海第九制药厂生产 o批号 ussuttsu~黄体酮
注射液 ous °ª# °pt o上海通用药业有限公司生产 o
批号 svsyst~≤⁄vo≤⁄wo≤⁄{抗体 o碘 ≈tux Œ 雌二醇放
射免疫试剂盒 o北京北免东雅生物技术研究所生产 o
批号 svttux~已烯雌酚 o≥¬ª°¤公司产品 ~考马斯亮蓝
蛋白测定试剂盒 o南京建成生物工程研究所生产 o批
号 ussvtuts~雌二醇 k∞u l标记底物 o北京百安肽生物
技术研究所产品 o批号 ussvtuus∀
1q2 动物 ≥⁄大鼠 o≥°ƒ级 o雌性 o体重 uss ∗ uxs
ªo购自北京维通利华实验动物有限公司 o合格证号
≥≤÷Žk京 lussu2sssv∀
1q3 仪器 ⁄ƒ p |y型 ty管放射免疫 µ计数器 }
合肥核仪器厂制造 ~紫外双波长分光光度仪 }˜∂ p
vssso日本岛津公司制造 ~µp计数 oƒ× p ysvso西安
核仪器厂制造 ~流式细胞仪 }∞°Œ≤≥q÷o美国 ≤²∏¯·¨µ
公司制造 ∀
2 方法
取未孕大鼠 o随机分为正常组 !模型组 !桂枝茯
苓丸组 o金草片提取物高 kws °ª# ®ªpt l!中 kus °ª
# ®ªpt l!低 kts °ª# ®ªpt l剂量组 o每组 ts只 ∀除
正常组外均肌肉注射苯甲酸雌二醇 os1u °ªr只 ov
次 r周 o连续注射 v个月 o于造模 v个月后加黄体酮
t1x °ªr只肌注 ou次 r周 o连续注射 t个月复制动物
子宫肌瘤模型 ≈v  ∀造模后 t个月各给药组灌胃给
药 o给药体积均为 x °# ®ªpt ∀造模 w个月后 o按
照下述方法测定各指标 ∀
2q1 测定 ∞u水平 各组大鼠以 vh戊巴比妥腹腔
注射麻醉 kts °# ®ªpt lo称重 o腹主动脉取血 o离
心 ov sss µ# °¬±pt otx °¬±o取血清 o按照放免试剂
盒方法测 ∞u水平 ∀
2q2 测定 ≤⁄vo≤⁄w和 ≤⁄{水平 各组大鼠以
vh戊巴比妥腹腔注射麻醉 kts °# ®ªpt lo称重 o
腹主动脉取肝素钠抗凝全血 tss ˏ置一次性试管
中 o每管加入用 °…≥稀释的抗 ≤⁄vo≤⁄wo≤⁄{ ts
ˏos1ux ∗ s1x Λªr管 o混匀 ow ε 温箱放置 vs °¬±o
加溶解人 • …≤液 o每管 v °o混匀 o离心 t sss µ#
°¬±pt ov °¬±o加入 °…≥缓冲溶液 x °o混匀 o离心
t sss µ# °¬±pt ou °¬±ou ∗ v遍 ovss目尼龙网过
滤 o加入生理盐水 u ∗ v °o流式细胞仪检测 o在荧
光直方图上分别计算出 ≤⁄vo≤⁄wo≤⁄{的阳性细
胞峰的百分率 ∀
2q3 测定脏器系数 取血后各组大鼠分别取出胸
腺和脾脏 o称重 ~沿子宫膀胱连接处剪取子宫和卵
巢 o剥离周围脂肪 o迅速称重 o计算胸腺 !脾脏 !子宫
和卵巢的系数 k脏器质量 r体重 lo比较组间差异 ∀
2q4 测定子宫组织雌激素受体 k∞• l水平 取大鼠
子宫 o用精密卡尺测量子宫分角根部横 !竖径后 o取
部分子宫用组织匀浆机制成匀浆 o采用放射配体结
合分析法 ≈w 测定 ∞• 水平 ∀
2q5 检查子宫组织的病理形态 取大鼠子宫 o于子
宫分角以上相同部位横切取材 s1x ¦°o每侧取材 v
块 o石蜡包埋 o‹∞染色和苦味酸平滑肌特殊染色
k∂ Šlo光镜观察子宫组织形态 o每张切片选取 v个部
位 o在 ts ≅ ts倍镜下 o测量平滑肌厚度 o以目镜显微
测微尺的格数表示 o取平均值 o比较组间差异 ~按照半
定量分级标准 k p }子宫肌层未见增厚 o未见有炎性浸
润 o结构正常 ~ n }子宫肌层增厚不明显 o肌细胞未见
明显增多 ~6 }子宫肌层轻度增厚 o肌细胞增多 o见炎
性细胞浸润 ~7 }子宫肌层明显增厚 o肌细胞增多 o排
列较紊乱 o炎性细胞浸润较重 ~8 }子宫肌层明显增
厚 o肌细胞明显增多 o肌细胞排列紊乱 o弥漫性炎细胞
浸润 lo将子宫组织的病变程度分为 w级 o以秩和检验
进行统计 o比较各组大鼠子宫病变程度的组间差异 ∀
2q6 统计方法 数据以 cξ ? σ表示 o计数数据以组
间 τ检验进行 o计量数据以秩合检验进行统计 ∀
3 结果
3q1 对子宫肌瘤模型大鼠子宫和卵巢质量的影响
与正常组比较 o模型组大鼠的子宫质量明显增
加 o卵巢质量明显减轻 ~与模型组比较 o金草片提
取物给药 v个剂量组大鼠的子宫质量均明显减轻 o
其高剂量组大鼠的卵巢质量明显增加 o中 ! 低剂量
大鼠卵巢质量呈现增加趋势 o但未见显著性差异 ∀
见表 t∀
3q2 对子宫肌瘤模型大鼠胸腺和脾脏质量的影响
#{zuu#
第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
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表 t 各组子宫肌瘤模型大鼠子宫和卵巢系数的变化
kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
卵巢系数 子宫系数
正常 p v1svs ? s1xwt t1uuu ? s1tvy
模型 p t1ys{ ? s1yu{tl u1vsw ? s1v|{tl
桂枝茯苓丸 u uxsxl u1st{ ? s1wsx t1{zs ? s1vv|vl
金草片 ws u1tss ? s1ysxvl t1zu{ ? s1uswvl
us t1|{z ? s1xtv t1{{x ? s1uuuvl
ts t1{xy ? s1yvy t1|ux ? s1wzyul
注 }与正常组比较 tl Π  s1sxoul Π  s1st~与模型组比较 vl Π 
s1sxowl Π  s1st~xl丸重 k表 u ∗ z同 l
与正常组比较 o模型组大鼠的胸腺明显萎缩 o其
质量明显降低 o脾脏质量明显增加 ~与模型组比较 o
金草片提取物给药 v个剂量组大鼠的胸腺质量均明
显增加 o脾脏质量呈增加趋势 o但未见显著性差异 ∀
见表 u∀
表 u 各组子宫肌瘤模型大鼠胸腺和脾脏系数的变化
kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
胸腺系数 脾脏系数
正常 p s1zsz t ? s1twz x t1|ts ? s1tyu
模型 p s1v|v t ? s1tuy vtl u1uty ? s1vwxtl
桂枝茯苓丸 u uxsxl s1zww x ? s1t|| |vl u1vvw ? s1vvu
金草片 ws s1z{s s ? s1t{s yvl u1wu{ ? s1uxs
us s1{t| u ? s1tvs zvl u1w|u ? s1vys
ts s1{{s y ? s1txy wvl u1wwv ? s1tz{
3q3 对子宫肌瘤模型大鼠子宫分角根部横竖径的
影响 与正常组比较 o模型组大鼠子宫分角根部横 !
竖径均明显增大 ~与模型组比较 o金草片提取物给药
v个剂量组大鼠子宫分角根部横 !竖径均不同程度
地明显减小 ∀见表 v∀
表 v 各组子宫肌瘤模型大鼠子宫分角根部横竖径的变化
kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
分角根部横直径
r°°
分角根部竖直径
r°°
正常 p w1vu ? s1w{ w1vx ? s1xx
模型 p z1wx ? s1zstl y1yw ? s1y|tl
桂枝茯苓丸 u uxsxl y1|z ? s1|vvl x1xu ? s1yuvl
金草片 ws y1ux ? s1wxvl x1vu ? s1v|vl
us y1xs ? s1xzvl x1xw ? s1yvvl
ts y1|x ? s1yuvl x1z{ ? s1v{vl
3q4 对子宫肌瘤模型大鼠 ×细胞亚群的影响
与正常组比较 o模型组大鼠的 ×细胞亚群 ≤⁄vo
≤⁄w水平和 ≤⁄wr≤⁄{比值明显降低 o≤⁄{水平明
显升高 ~与模型组比较 o金草片提取物给药 v个剂
量组的 ≤⁄w水平和 ≤⁄wr≤⁄{比值均明显升高 o
高 !中剂量组的 ≤⁄v水平明显升高 o≤⁄{水平明显
降低 o低剂量组对 ≤⁄v和 ≤⁄{水平的影响不显
著 ∀见表 w∀
3q5 对子宫肌瘤模型大鼠血清雌激素及子宫雌激
素受体 k∞• l水平的影响 与正常组比较 o模型组大
鼠血清的雌二醇水平均明显升高 o大鼠子宫组织的
雌激素受体水平明显升高 ~与模型组比较 o金草片提
取物给药 v个剂量组大鼠的雌二醇水平和雌激素受
体水平均明显降低 ∀见表 x∀
表 w 对子宫肌瘤模型大鼠 ×细胞亚群的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别 剂量 r°ª# ®ªpt ≤⁄vrh ≤⁄wrh ≤⁄{rh ≤⁄wr≤⁄{
正常 p x|1v ? z1t| wv1s ? x1sv ty1v ? v1vt u1zts ? s1xvs
模型 p wv1y ? x1x{tl ut1v ? x1xytl uu1v ? v1|{tl s1||w ? s1vu{tl
桂枝茯苓丸 u uxsxl w{1w ? z1uw vu1y ? z1||vl t{1y ? v1xsvl t1{uv ? s1x|{vl
金草片 ws xv1u ? {1xsul vw1z ? {1t{vl t{1x ? v1yyvl t1|v{ ? s1xwyvl
us xt1v ? z1s{ul vt1y ? y1vvvl ty1z ? v1vvvl t1|zt ? s1x|vvl
ts wz1v ? x1s| uz1z ? w1wvvl t|1x ? w1ts t1w{| ? s1w{uvl
表 x 对子宫肌瘤模型大鼠血清雌激素及子宫雌激素受体
水平的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
∞•
r³°²¯# ªpt
∞u
r³ª# °pt
正常 p ww1ws ? t|1yx vw1zw ? tt1{w
模型 p yy1us ? t{1sttl yx1tx ? t|1wxtl
桂枝茯苓丸 u uxsxl yu1z ? ts1uuvl wx1tz ? x1u{vl
金草片 ws v|1w ? tw1v{vl wt1{x ? |1z|vl
us ww1v ? ut1svvl ww1vw ? tv1uuvl
ts xs1s ? t{1s|vl ww1yw ? y1{zvl
3q6 对子宫肌瘤模型大鼠子宫组织的影响 正常
对照组大鼠子宫平滑肌染色呈黄色 o未见平滑肌明
显增厚 o未见炎性细胞浸润 o组织结构正常 ∀模型组
大鼠子宫平滑肌染色呈黄色 o平滑肌厚度较对照组
增厚 o肌细胞排列不规则 o紊乱 o染色强阳性 ∀阳性
药组 !高 !中 !低剂量组大鼠子宫平滑肌染色呈黄色 o
子宫肌层增厚和肌细胞排列较紊乱等病理性改变均
有不同程度的减轻 o∂ Š染色的着色程度也有不同
程度减轻 ∀见图 to表 yoz∀
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表 y 对子宫肌瘤模型大鼠子宫平滑肌厚度的影响
kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
子宫平滑肌厚度
r格数
正常 p |1y ? t1v{
模型 p tx1v ? t1{wtl
桂枝茯苓丸 u uxsxl tv1w ? s1|yvl
金草片 ws |1{ ? s1yzvl
us |1t ? t1xuvl
ts {1z ? t1|tvl
表 z 对子宫肌瘤模型大鼠子宫组织病变程度的影响
kν € tsl
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
子宫病变程度
p n 6 7 8
正常 p ts s s s s
模型 ul p s s u w w
桂枝茯苓丸 wl u uxsxl s v z s s
金草片 wl ws x w t s s
us w x t s s
ts u x v s s
图 t 各组大鼠子宫组织病理切片 k∂ Š染色 o ≅ ussl
„q正常组 ~…q模型组 ~≤q给药组
4 讨论
4q1 外源性雌 !孕激素致动物子宫肌瘤模型于
t|{t年由国外文献报道 ≈v  o该模型是目前我国研制
子宫肌瘤治疗药物及其作用机制使用的唯一模型 ∀
作者在对该模型不同造模阶段进行动态研究时发
现 o随造模时间的延长 o模型大鼠的胸腺呈明显萎缩
趋势 o进一步对造模动物 ×细胞亚群进行观察的结
果显示 o模型大鼠的 ≤⁄v水平和 ≤⁄wr≤⁄{明显降
低 o≤⁄{水平明显升高 o尤其是代表机体免疫功能强
弱的 ≤⁄w水平明显降低 ≈u  ∀另有研究报道 o子宫肌
瘤造模大鼠的免疫调整因子 Œ2uk白介素 2ul水平下
降 oבƒ2Αk肿瘤坏死因子 l水平显著上升 ≈x  ∀提示
雌孕激素致子宫肌瘤模型大鼠的免疫功能呈现低下
状态 ∀
×细胞是机体免疫的核心细胞 o末梢血 ×细胞
发育为功能不同的亚群 o各亚群的数量和功能发生
异常时 o就可能导致机体免疫功能紊乱并发生一系
列的病理变化 ∀临床研究表明 o子宫肌瘤的发生与
机体细胞免疫功能紊乱有关 o ≤⁄wo≤⁄{等生长介
导因子使子宫肌细胞改变其遗传物质中肿瘤抑制基
因的活性而产生肌瘤 ≈t  ∀该模型动物在免疫功能
方面表现的低下状态与临床患者的研究结果相一
致 ∀本研究结果显示 o金草片提取物可对抗模型大
鼠免疫功能低下的状态 o其对模型大鼠免疫功能的
调节作用可能是其治疗子宫肌瘤的作用机制之一 ∀
4q2 子宫肌瘤是卵巢甾体激素依赖性肿瘤 o激素通
过受体起作用 ∀肌瘤内存在高浓度的雌 !孕激素受
体 o雌 !孕激素能促使肌瘤生长 ≈y  ∀据对子宫肌瘤
患者外周血大颗粒淋巴细胞 kŠl数量研究的报
道 o子宫肌瘤患者 Š百分率明显低于正常组 o并
认为外周血 Š数目降低与子宫肌瘤患者本身雌
激素抑制 Š成熟 o而致患者机体免疫力低下有
关 ≈zo{  ∀因此 o雌激素受体水平升高是造成子宫肌
瘤患者免疫功能低下的主要影响因素之一 ∀本研究
结果显示 o金草片提取物可明显降低模型大鼠雌激
素受体水平 o提示 o其对模型大鼠免疫功能低下的干
预作用可能是通过影响雌激素受体水平而实现 ∀
4q3 外源性雌 !孕激素致动物子宫肌瘤模型造模机
制及其与临床疾病的相关性研究报道较少 ∀本研究
结果显示 o该模型在免疫功能和激素受体水平方面
的表现与临床子宫肌瘤的发病机制具有一定的相似
性 o提示该模型在用于评价其治疗药物的有效性时
具有较大的参考价值 ∀
≈参考文献  
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第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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广东医学 ot||votwkyl}vvzq
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疫功能的相关性研究 ≈ q中国实验方剂学杂志 oussyotukzl}
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≈v  ƒ∏­¬¬≥o ‘¤®¤¶«¬°¤‘o ’®¤°∏µ¤ ‹ o ·¨¤¯q °µ²©¨¶·¨µ²± 2¨¬±§∏¦¨§
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§¬¶¶¨°¬±¤·¨≈ q „° ’¥¶·¨·Š¼± ¦¨²o t|{totv|kul}tywq
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国协和医科大学联合出版社 ot||{}xyyq
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医学 # 妇产科学分册 ot||youvkul}|xq
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细胞的观察 ≈ q内蒙古医学院学报 ousstouvktl}tvq
≈{  • ¤®¨ µ≤ q • ²¯¨²©«²µ°²±¤¯ ¤±§µ¨³µ²§∏¦·¬√¨©¤¦·²µ¶¬± ·«¨ ·¨¬2
²¯²ª¼ ¤±§·µ¨¤·° ±¨·²©∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼²°¤≈  q ∞¦¨±·°µ²ª ‹²µ°
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≈责任编辑 古云侠  
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[ Κεψ ωορδσ] Γλψχψρρηιζα υραλενσισ~ ¬¯¦²µ¬¦¨~ §¨ ±¶¬·¼~ ¥¬²°¤¶¶~ ª¯¼¦¼µµ«¬½¬±¬¦¤¦¬§¦²±·¨±· ≈责任编辑 张宁宁  
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第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
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