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Study on correlation of soil nutrients and content of active constituents in root of Rumex gmelini

土壤养分与毛脉酸模根中生物活性成分含量之间的相关性研究



全 文 :土壤养分与毛脉酸模根中生物活性成分
含量之间的相关性研究
王振月 t3 o李瑞明 tou o王宗权 tov o马微微 t o康毅华 t
ktq黑龙江中医药大学 药学院 o黑龙江 哈尔滨 txssws~
uq天士力集团 现代中药研究所 o天津 vsswsu~
vq河北以岭医药集团 医药研究院 o河北 石家庄 sxssvxl
≈摘要   目的 }通过探讨土壤营养成分与毛脉酸模根中生物活性成分含量之间的相关性 o为毛脉酸模药材种
植土壤类型的选择及合理化的施肥提供科学依据 ∀方法 }采用 ‹ °≤色谱法 o梯度洗脱 o测定了一年生毛脉酸模根
中 z种生物活性成分 k白藜芦醇 !白藜芦醇苷 !大黄酚苷 !酸模素 !大黄素 !大黄酚 !大黄素甲醚 l含量 o并对土壤中的
营养成分与毛脉酸模根中 z种生物活性成分含量分别进行多元逐步回归分析 ∀结果 }建立了 z个逐步回归方程 o
其中 v个具有统计学意义 ∀结论 }全钾含量水平高的土壤不利于毛脉酸模药材的种植 ∀碱解氮 !速效磷 !速效钾含
量水平较高的土壤则有利于毛脉酸模药材种植 ∀
≈关键词   毛脉酸模 ~土壤营养成分 ~生物活性成分 ~逐步回归分析
≈中图分类号   ≥ xyz ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2t|{w2sw
≈收稿日期   ussx2ts2us
≈基金项目   国家自然科学基金项目 kvsuzstxyl
≈通讯作者   3 王振月 oר¯}kswxtl{ut|yuxwo∞2°¤¬¯}º¤±ª½«¨ ±
¢¼∏¨ ƒ tyvq¦²°
毛脉酸模 Ρυµ εξ γµ ελινι ×∏µ¦½q为蓼科酸模属多
年生宿根草本植物 o广泛分布于黑龙江省大小兴安
岭及张广才岭等地区 o是黑龙江省 !吉林长白山地区
的重要药用资源植物 o以根入药 o味甘 o性寒 o有清热
解毒 !凉血止血 !通便利尿之功 o民间以治疗癣病或
止血著称 ≈tou  ∀化学成分分析 ≈v 及药理试验结果表
明 o根中含有白藜芦醇及白藜芦醇苷等二苯乙烯类
成分 o其具有保护心肌缺血 2再灌注损伤的作用 !抑
制动脉粥样硬化 !抗炎 !抗氧化和抗肿瘤等作用 ≈w2y  ~
酸模素具有抗真菌作用 ≈z  ~大黄酚 !大黄素等蒽醌
类成分则具有抗菌 !抗癌等作用 ≈{o|  ~还存在黄酮类
化合物 ∀因此 o毛脉酸模作为一种新中药材或原料
药有相当重要的生产和研究价值 ∀
人工种植的药材 o药效成分的种类和数量往往
因地区及气候不同而异 o给品质控制带来许多困难 o
不合理的施肥也严重影响了药材的产量和药效成
分 ∀这些问题 o严重影响了我国传统药材的生产 o研
究土壤中的营养成分与药用植物生物活性成分之间
的关系 o将为中药材的 Š„°生产提供科学依据和实
践指导 ∀为此 o本研究用 ⁄°≥数据处理软件对土壤
中的营养成分与毛脉酸模根中 z种生物活性成分含
量进行逐步回归分析 ≈ts  o来探讨二者之间的相关
性 o为将来毛脉酸模药材的规范化种植提供科学依
据 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶高效液相色谱仪 k• ¤·¨µ¶uy|x型泵 ou||y
型二极管阵列检测器 lo∞°³²º µ¨工作站 ∀毛脉酸模
药材的干燥根采于黑龙江中医药大学药用植物园 ~
白藜芦醇 !白藜芦醇苷均由美国 ≥¬ª°¤公司提供 o大
黄素 k批号 szxy2usstts l!大黄酚 k批号 z|y2
usstszl!大黄素甲醚 k批号 zx{2ussssyl均由中国
药品生物制品检定所提供 o大黄酚苷 k大黄酚 2t2Ο2
Β2∆2葡萄糖苷 l!酸模素从植物毛脉酸模中提取分离
得到 o经波谱分析鉴定结构 o归一化法计算 o含量在
|{h以上 ∀甲醇为美国 ⁄¬®°¤公司产品 o色谱纯 ~磷
酸为分析纯 ~水为自制重蒸水 ∀
2 方法 ≈tt 与结果
2q1 土壤营养成分的测定 对 y个样地的土壤营
养成分进行测定 o土壤有机质的测定采用 Žu ≤µu ’z
容量法 ~土壤全氮的测定采用开氏消煮法 ~土壤水解
性氮的测定采用碱解扩散法 ~土壤全磷的测定采用
酸溶 2钼锑抗比色法 ~土壤有效磷的测定采用 s1x
#w{|t#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
°²¯# pt ‘¤‹≤’v浸提 2钼锑抗比色法 ~土壤缓效钾
的测定采用 t °²¯ # pt ‹‘’v煮沸浸提 2火焰光度
法 ~土壤速效钾的测定采用 t °²¯ # pt ‘‹w ’„¦浸
提 2火焰光度法 ∀结果见表 t∀
表 t 土壤质地及其养分的含量
土壤类型 全氮 rh 全磷 rh 全钾 rh 碱解氮 rh 速效磷 rh 速效钾 rh 有机质 rh
木炭土 s1yvz s1t|x t1|v{ s1sus |z s1ssx u| s1suv yx tv1{xt
沙土 s1uzy s1s{v t1{sy s1stx y| s1ssv vz s1sus w{ u1|zu
黄土 s1t|{ s1sz{ t1{xy s1stw |v s1ssw wv s1st{ |z u1xyt
黑钙土 t s1wtu s1s|x u1v|t s1suv yz s1ssw z{ s1suv xt {1zuw
黑钙土 u s1uu| s1s{v t1|vz s1sty wx s1ssw zx s1sus |{ v1vuu
黑钙土 v s1uy{ s1s{z t1|tz s1stz z| s1ssv {| s1st| zy u1{yv
2q2 色谱条件 ° ¤¯± ·¨¶¬¯≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uss
°°ox Λ°lo预柱 °«¨ ±²° ±¨ ¬¨ ’⁄≥2≤t{ kv1s °° ≅ w
°°l~流动相 „ 为甲醇 o…为水 k磷酸调 ³‹ 为
u1sl~线性梯度洗脱条件 }流动相从 vsh 甲醇到
tssh甲醇 o时间为 s ∗ xs °¬±~流速 t °# °¬±pt ~
检测波长 uxw ±°k蒽醌类成分 lovsv ±°k二苯乙烯
类成分 louux ±°k酸模素 l~柱温 ws ε ~进样量 us
ˏ∀对照品和样品的色谱图见图 t∀
图 t 对照品和毛脉酸模样品的 ‹ °≤图 kuxw ±°l
„1对照品 ~…1样品 ~tq白藜芦醇苷 ~uq白藜芦醇 ~vq大黄酚苷 ~
wq酸模素 ~xq大黄素 ~yq大黄酚 ~zq大黄素甲醚
2q3 供试样品的制备 毛脉酸模根部阴干后 o粉碎
过 {s目筛 o在 xs ε 下干燥至恒重 ∀每个样品精密
称取 s1u ªo置索氏提取器内加 xsh乙醇 yx °提
取 w «o滤过 o蒸干 ∀残渣用 ts °甲醇溶解 o并定容
至刻度 o此溶液再过 s1wx Λ°的微孔滤膜 o弃去初
滤液取续滤液作为供试品溶液 ∀
2q4 线性关系的考察 精密称取白藜芦醇 !白藜芦
醇苷 !大黄酚苷 !酸模素 !大黄素 !大黄酚 !大黄素甲
醚对照品适量 o溶于甲醇配制成质量浓度依次为
s1ttos1yyos1usos1tvos1t|os1tuxos1s| ª# pt的
对照品溶液 o分别精密吸取此溶液 o注入高效液相色
谱仪 o以进样量 ΞkΛªl为横坐标 o峰面积 Ψ为纵坐
标绘制标准曲线 o结果见表 u∀
2q5 加样回收率试验 精密称取已知白藜芦醇苷 !
白藜芦醇 !大黄酚苷 !酸模素 !大黄素 !大黄酚 !大黄
素甲醚含量的供试品粉末 k{s目 lx份 o定量加入白
藜芦醇苷 !白藜芦醇 !大黄酚苷 !酸模素 !大黄素 !大
黄酚 !大黄素甲醚对照品适量 o按 2q3项下制备供试
品溶液 o测定含量 o计算加样回收率依次为 |{1zh o
tst1|h o |z1uh o tss1yh o tsw1yh o tsv1uh o
|{1wh ∀
表 u 样品线性关系考察
成分 回归方程 ρ 线性范围 rΛª
白藜芦醇 Ψ € z1s{v ≅ tsw n {1t|| ≅ tsy Ξ s1||| | s1sts ∗ u1vt
白藜芦醇苷 Ψ € u1vtt ≅ tsx n v1|sy ≅ tsy Ξ t1sss s s1syv ∗ uw1u
大黄酚苷 Ψ € v1t|s ≅ tsw n u1usx ≅ tsy Ξ t1sss s s1st| ∗ tu1y
酸模素 Ψ € w1yv| ≅ tsy Ξ p t1vt{ ≅ ts w s1||| | s1stv ∗ tt1s
大黄素 Ψ € {1sss ≅ tsw n v1vu{ ≅ tsy Ξ s1||| { s1st{ ∗ v1||
大黄酚 Ψ € z1stu ≅ tsv n v1||u ≅ tsy Ξ t1sss s s1stu ∗ x1ux
大黄素甲醚 Ψ € z1|zv ≅ tsv n t1ztx ≅ tsy Ξ s1||| | s1ss{ ∗ s1|wx
2q6 样品测定 精密吸取各样品的供试液 us ˏ
注入高效液相色谱仪 o测得不同样品中的白藜芦醇
苷 !白藜芦醇 !大黄酚苷 !酸模素 !大黄素 !大黄酚和
大黄素甲醚含量结果见表 v∀
#x{|t#
第 vu卷第 t|期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t|
’¦·²¥¨ µo ussz
表 v 不同土壤类型下毛脉酸模根中生物活性成分的质量分数 h
土壤类型 白藜芦醇苷 白藜芦醇 酸模素 大黄酚苷 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚
木炭土 t1{ys s1ssy s1w{z s1vsx s1sux s1usx s1sut
砂土 t1xuy s1ss{ s1vuz s1uyt s1suu s1t{y s1su|
黄土 t1{uz s1sty s1zut s1t|s s1svw s1t|z s1sv{
黑钙土 t s1{yx s1sw| s1ty| s1swx s1svw s1t|{ s1svt
黑钙土 u t1yvx s1su{ s1uss s1uts s1sts s1tuu s1svt
黑钙土 v t1{xu s1stz s1u|x s1usy s1ssx s1tvw s1suv
3 结果分析
采用浙江大学研制的 ⁄°≥统计软件对土壤中
的营养成分 k表 tl与毛脉酸模中 z种次生代谢产物
含量 k表 vl分别进行逐步回归分析 o并建立逐步回
归方程 ∀下列表中 Ξt , Ξu , Ξv , Ξw , Ξx , Ξy , Ξz分别代
表全氮 !全磷 !全钾 !碱解氮 !速效磷 !速效钾 !有机
质 ~Ψt , Ψu , Ψv , Ψw , Ψx , Ψy , Ψz分别代表白藜芦醇苷 !白
藜芦醇 !酸模素 !大黄酚苷 !大黄素 !大黄酚 !大黄素
甲醚 ∀逐步回归结果如下 }
Ψt € w1yzy p t1xytΞv (t)
Ψu € p s1s{{ p s1wtzΞu n s1sss u|tΞw n s1sstΞx n
s1sss uutΞy (u)
Ψv € t1vyv p s1xsxΞv (v)
Ψw € s1z|s p s1yuxΞv n s1sstΞw n s1ssuΞy (w)
Ψx € s1sus n s1sutΞv (x)
Ψy € s1tw| n s1sswΞz (y)
Ψz € s1sv{ p s1s|vΞu (z)
从方程 ∞可以看出白藜芦醇苷与土壤中的全钾
呈负相关 o相关系数 s1{x| xo而且所建立的方程
Π  s1sxo达到显著水平 ∀从方程 ƒ 可以看出白藜
芦醇与土壤中的全磷 !碱解氮 !速效磷 !速效钾都存
在相关性 o在其他营养成分固定时 o白藜芦醇含量与
全磷呈负相关 o与碱解氮 !速效磷 !速效钾呈正相关 o
相关系数达 s1||| yo而且所建立的方程 Π  s1sxo
达到显著水平 ∀从方程 Š可以看出酸模素含量与土
壤中的全钾呈负相关 o但所建立的方程未达到显著
水平 ∀从方程 ‹可以看出大黄酚苷含量与全钾 !碱
解氮 !速效钾都存在相关性 o在其他营养成分固定时
大黄酚苷含量与全钾呈负相关 o与碱解氮 !速效钾呈
正相关 o相关系数达 s1||{ xo而且所建立的方程
Π  s1sxo达到显著水平 ∀从方程 Œ可以看出大黄
素含量与全钾呈正相关 o但所建立的方程未达到显
著水平 ∀从方程 可以看出大黄酚含量与有机质含
量呈正相关 o但所建立的方程未达到显著水平 ∀从
方程Ž可以看出大黄素甲醚含量与全磷呈负相关 o
但所建立的方程未达到显著水平 ∀
4 讨论
毛脉酸模根中白藜芦醇苷含量与土壤中的全钾
呈现显著的负相关 o其他土壤营养成分与白藜芦醇
苷含量的相关性较弱 o达不到显著水平 ∀说明全钾
含量高的土壤不适合毛脉酸模根中白藜芦醇苷的累
积 ∀毛脉酸模根中白藜芦醇含量与土壤中的全磷 !
碱解氮 !速效磷 !速效钾都存在相关性 ∀在其他营养
成分稳定时 o白藜芦醇含量与全磷呈现较强的负相
关 o与碱解氮 !速效磷 !速效钾分别呈正相关 o说明土
壤中全磷含量过高不利于白藜芦醇的累积 o碱解氮 !
速效磷 !速效钾含量水平较高的土壤有利于毛脉酸
模中白藜芦醇的累积 ∀在碱解氮 !速效磷 !速效钾中
速效钾直接作用相对较弱 ∀
毛脉酸模根中酸模素含量与土壤中的全钾呈现
负相关 o但这种相关性不强 ∀
毛脉酸模根中大黄酚苷含量与土壤中的全钾 !
碱解氮 !速效钾都存在相关性 ∀在其他营养成分固
定时 o大黄酚苷含量与土壤中的全钾呈负相关 o与碱
解氮 !速效钾分别呈现正相关 ∀说明全钾含量水平
较高的土壤不适于大黄酚苷含量的累积 o而碱解氮 !
速效钾含量水平较高的土壤有利用大黄酚苷含量的
累积 ∀在碱解氮和速效钾中速效钾的直接作用相对
较强 ∀
毛脉酸模根中大黄素的含量与全钾呈现正相
关 o但这种相关性不显著 ∀与土壤中的其他营养成
分没有表现出较好的相关性 ∀
毛脉酸模根中大黄酚的含量与有机质含量呈现
正相关 o但这种相关性不显著 ∀与土壤中的其他营
养成分没有表现出较好的相关性 ∀
毛脉酸模根中大黄素甲醚的含量与全磷呈现负
相关 o但这种相关性不显著 ∀与土壤中的其他营养
成分没有表现出较好的相关性 ∀
如果从 z种次生代谢产物综合来考虑分析全钾
和全磷含量水平高的土壤不利于毛脉酸模药材的种
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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植 ∀碱解氮 !速效磷 !速效钾含量水平较高的土壤有
利于毛脉酸模药材种植 ∀通过分析毛脉酸模根中次
生代谢产物的含量与全氮 !有机质含量的直接相关
性不强 o但有机质利于药材产量的提高 o故施加有机
质肥料来提高药材产量的方法不会对其药材质量产
生负影响 ~通过施加氮肥 !磷肥 !钾肥不仅可以使产
量提高 o而且可提高药材质量 ∀
≈参考文献  
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≈w  ‹∏±ª o ≤«¨ ± Žo ‹∏¤±ª≥ ≥o ·¨¤¯q ≤¤µ§¬²³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·
²©µ¨¶√ µ¨¤·µ²¯o ¤±¤·∏µ¤¯ ¤±·¬²¬¬§¤±·§¨ µ¬√ §¨©µ²° ªµ¤³¨ ¶≈ q ≤¤µ2
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ª¨ ±¤¶¨ uo ¤±§°¤·2µ¬¬° ·¨¤¯ ²¯³µ²·¨¤¶¨ |≈ q ≤¤±¦¨µ• ¶¨o ussuo
yuktzl}w|wxq
≈z  江纪武 o肖庆祥 q植物药有效成分手册 ≈   q北京 }人民卫生
出版社 ot|{yozy{q
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²© °¨²§¬± ©µ²° √ ±¨·¬¯¤ª² ¯¨¬²¦¤µ³¤≈ q „° ≤«¬±  §¨o t||yo
uwkul}tv|q
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医药 #植物药分册 ousstotykvl}tstq
≈ts  唐启义 o冯明光 q实用统计分析及其计算机处理平台 ≈   q北
京 }中国农业出版社 ot||z}uttq
≈tt  崔红花 o王振月 o王宗权 o等 q主成分分析考察毛脉酸模最佳
采收期 ≈ q中国中药杂志 oussxovskttl}{s{q
Στυδψ ον χορρελατιον οφ σοιλνυτριεντσανδ χοντεντ οφ αχτιϖε
χονστιτυεντσ ιν ροοτ οφ Ρυµ εξ γµ ελινι
• „‘Š «¨ ±2¼∏¨ t o Œ• ∏¬2°¬±ªtou o • „‘Š ²±ª2´ ∏¤±tov o  „ • ¬¨2º ¬¨t o Ž„‘Š ≠¬2«∏¤t
(t. Χολλεγε οφ Πηαρµ αχψ, Ηειλονγϕιανγ Υνιϖερσιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, Ηαρβιν txssws, Χηινα;
u. Χηινεσε Μεδιχινε Χεντερ, Τασλψ Ρ&∆ Ινστιτυτε, Τιανϕιν vsswsu, Χηινα;
v. Ηεβει Ψιλινγ Πηαρµ αχευτιχαλΓρουπ, Μεδιχινε Ινστιτυτε, Σηιϕιαζηυανγ sxssvx, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ³µ²√¬§¨ ¶¦¬¨±·¬©¬¦¥¤¶¬¶©²µ·«¨ ¶¨¯¨ ¦·¬²± ²©¤ªµ²·¼³¨ ¤±§³µ²³¨ µ·¼ ©¨µ·¬¯¬½¤·¬²± ©²µΡυµ εξ γµ ελινι¦∏¯·¬2
√¤·¨§¬± ¦²°³¯¬¤±¦¨ º¬·«ª²²§¤ªµ¬¦∏¯·∏µ¤¯ ³µ¤¦·¬¦¨ kŠ„°lq Μετηοδ : ‹ °≤ ° ·¨«²§º¤¶¤³³¯¬¨§·² §¨ ·¨µ°¬±¤·¨ ·«¨ ¦²±·¨±·²©¶¨√ ±¨
¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶kµ¨¶√ µ¨¤·µ²¯o ³²¯¼§¤·¬±o ¦«µ¼¶²³«¤±²¯ t2ª¯∏¦²¶¬§¨ o ± ³¨²§¬±o °¨²§¬±o ¦«µ¼¶²³«¤±²¯ ¤±§ ³«¼¶¦¬²±l ²©¤±±∏¤¯ Ρ1
γµ ελινιq „±§·«¨ ¦²µµ¨ ¤¯·¬²± ¥¨ ·º¨¨ ± ¶²¬¯±∏·µ¬¨±·¶¤±§¦²±·¨±·²©¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶¬± ·«¨ µ²²·²©Ρ1 γµ ελινιº µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ §¥¼ ¶·¨³º¬¶¨
µ¨ªµ¨¶¶¬²± ¤±¤¯¼¶¬¶q Ρ εσυλτ: ≥ √¨ ±¨ µ¨ªµ¨¶¶¬²± ¨´ ∏¤·¬²± º µ¨¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §q ׫¨ ¶·¤·¬¶·¬¦¶¬ª±¬©¬¦¤±¦¨ º¤¶©²∏±§¬± ·«µ¨¨²©·«¨ °q Χονχλυ2
σιον: ׫¨ ¶²¬¯ º¬·««¬ª«·²·¤¯ Ž¯¨ √¨¯ ¬¶±²·¶∏¬·¤¥¯¨©²µΡ1 γµ ελινι ¦∏¯·¬√¤·¬²±q …∏··«¨ «¬ª«¨ µ¤√¤¬¯¤¥¯¨‘o ¤√¤¬¯¤¥¯¨°o ¤√¤¬¯¤¥¯¨Ž
¯¨ √¨¯ ²©¶²¬¯¬¶¶∏¬·¤¥¯ q¨
[ Κεψ ωορδσ] Ρυµ εξ γµ ελινι~ ¶²¬¯ ±∏·µ¬¨±·~ ¤¦·¬√¨¦²±¶·¬·∏¨ ±·~ ¶·¨³º¬¶¨ µ¨ªµ¨¶¶¬²± ¤±¤¯¼¶¬¶
≈责任编辑 张宁宁  
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第 vu卷第 t|期
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