全 文 :绿升麻中1个新环阿屯烷型三萜皂苷
卢 滨1,范云双2,段宏泉1
(1.天津医科大学 药学院,天津 300070;
2.天津工业大学 中空纤维膜过程教育部重点实验室,天津 300160)
[摘要] 目的:研究绿升麻中对肿瘤细胞有细胞毒活性的化学成分。方法:以硅胶柱、凝胶等多种柱色谱分
离,制备高效液相色谱纯化,以各种波谱鉴定化合物结构。结果:分离得到1个环阿屯烷型三萜类化合物,鉴定其
结构为(23R)16β,23∶23α,26∶24α∶25triepoxy9,19cyclolanost7en3OβDxylopyranoside。结论:化合物1是新化
合物,命名为(23R)26deoxycimicifugoside。化合物1对宫颈癌细胞(Hela)和小鼠成纤维细胞(L929)具有一定的
细胞毒作用,IC50分别为7224,5597mg·L
-1。
[关键词] 绿升麻;环阿屯烷型三萜皂苷;肿瘤细胞毒活性
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)13155804
[收稿日期] 20080128
[基金项目] 天津医科大学科研基金(2004xk32)
[通讯作者] 段宏泉,Tel:(022)23542838,Email:duanhq@
tijmu.edu.cn
绿升麻为毛茛科植物类叶升麻 Actaeaasiatica
Hara的根茎,主要分布在我国东北,内蒙古、河北、
山西、陕西、甘肃、青海、湖北、四川、云南及西藏东
部。作为湖北省土家族传统药物,应用历史悠久。
绿升麻味辛、微苦,性平,具有散风热,祛风湿,透疹,
解毒的作用,在湖北省鄂西地区土家族民间用于治
疗风热头痛,咽喉肿痛,风湿疼痛,风疹块,麻疹不
透,百日咳,子宫脱垂,犬咬伤等[1,2]。同属其他植
物化学成分研究较多,绿升麻的化学成分研究较少,
已报道的化合物以环阿屯烷型三萜皂苷和色原酮类
化合物为主。本研究报道从绿升麻醋酸乙酯提取物
中分离鉴定的1个新三萜皂苷类化合物。
1 仪器和试药
BrukerAVANCE300型核磁共振波谱仪,吡啶
d5(pyd5)为溶剂,三甲基硅烷(TMS)为内标;日本
分光公司(JASCO)高效液相色谱仪,PU-1580型
泵,RI-1530和 UV-1575型检测器;YMCPack
ODSASH3435色谱柱(20mm×250mm,5μm),
C18HS40M16211(BiotageInc.USA),Toyopearl
HW-40C(Tosoh);液质联用色谱仪 Aliance2695,
QuatroMicroTMESI(Waters);红外光谱仪 NICO
LET380FT-IR(ThermoElectronCorporation);柱色
谱和薄层色谱用硅胶均系青岛海洋化工厂生产,所
用试剂均为分析纯。
药材于2004年9月采自湖北省鹤峰县,由中南
民族大学生命科学院万定荣教授鉴定为绿升麻 A.
asiatiea,标本(D20040901)存放于天津医科大学药
学院。
2 提取分离
绿升麻根茎26kg粉碎后用95%的乙醇加热
回流提取3次,每次6h。提取液减压浓缩至浸膏
600g,浸膏加水混悬后,分别用石油醚、醋酸乙酯、
正丁醇萃取,得石油醚萃取物41g,醋酸乙酯萃取物
210g和正丁醇萃取物31g。醋酸乙酯萃取物经硅
胶柱色谱,以石油醚醋酸乙酯梯度洗脱,得50个组
分。组分25经C-18中压色谱柱(甲醇水8∶2)和
ToyopearlHW-40C(氯仿甲醇,2∶1)分离,进一步
经反相半制备高效液相色谱柱(YMCPackODSA,
甲醇水8∶2,3mL·min-1,254nm)纯化,得到化合
物1(175mg)。
3 结构鉴定
化合物1 白色无定型粉末。[α]25D -816(c
105,吡啶);HRESIMSm/z6813615[M+Na]+,
确定其分子式为 C37H54O10。IR(KBr)cm
-1:3423
(羟基),1733(羰基)。1HNMR谱显示1对特征的
环丙烷上质子信号[δH057,108(each1H,d,J=
36Hz)];5个甲基[δH103,107,134,141,148
(each3H,s)]和1个裂分的甲基[δH095(d,3H,
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J=55Hz)];1个乙酰基[δH221(3H,s)];1个糖
的端基质子[δH486(d,1H,J=74Hz)];1个烯质
子[δH516(1H,d,J=64Hz)];1个与氧相连的次
甲基质子[δH347(dd,1H,J=115,38Hz)]。
13CNMR和 DEPT谱显示化合物1有37个碳
原子,除去 1个木糖基[δC1079(C1′),760(C
2′),791(C3′),716(C4′),675(C5′)]和 1个
乙酰基(δC,1713,214),该化合物骨架具有30个
碳原子,包括1个双键(δC1482,1145),4个与氧
相连的次甲基碳[δC882(C3),771(C12),735
(C16),636(C24)];1个与氧相连的亚甲基碳 δC
692(C26)和季碳637(C25),以及1个缩醛季
碳δC1063(C23)。根据以上氢谱与碳谱数据,结
合文献报道的升麻属中存在的环阿屯烷型三萜皂苷
类化合物,推测化合物1为具有缩酮结构的环阿屯
烷型三萜皂苷类化合物。
化合物1的 HMBC谱显示 H7(δH516)与次
甲基碳δC427(C5)、亚甲基碳 δC218(C6)和2
个季碳δC217(C9),498(C14)相关,表明双键
位置在7,8位。δH221(3H,s,Ac)和 δH523(H
12)均与羰基碳δC1711(C12)相关,表明乙酰基与
C12相连。糖端基质子 δH486(H1′)与 δC882
(C3)有 HMBC远程相关,表明化合物1的糖基连
接在C3位。经三氟醋酸水解,并与糖标准品 TLC
比较,鉴定糖基为 D木糖,其端基氢[δH486(1H,
d,J=74Hz,H1′)]的偶合常数较大,表明糖基的
构型为β构型。
将化合物1与已知化合物26deoxycimicifugoside
的碳谱数据[3]比较,仅 C20,21,24,25位区别较大,
推测与26deoxycimicifugoside的C23位立体构型不
同,参考陈绍农等[4]报道,当C23位为R构型时 H
20的化学位移在δH180左右,C20的化学位移在δC
260左右;当C23位为S构型时H20的化学位移在
δH225左右,C20的化学位移在 δC235左右。同
时,化合物1的NOESY谱显示H22β(δH217)与H
24(δH 370)呈现 NOE相关,结合相同骨架化合
物———23epi26deoxyactein[4]的单晶衍射结构,确定
化合物1的C23为R构型。综上,鉴定化合物1的
结构为(23R)16β,23∶23α,26∶24α∶25triepoxy9,19
cyclolanost7en3βOβDxylopyranoside,结构式见
图1。
图1 化合物1的结构式
化合物1 白色无定型粉末,[α]25D -816(c=
105,吡啶);HRESIMSm/z6813615[M+Na]+。
IR(KBr)cm-1:3423,2962,2876,1733,1456,
1378,1244,1045。1H和13CNMR波谱数据见表1。
表1 化合物1和26deoxycimicifugoside的NMR数据(pyd5)
No.
化合物11)
δC δH
26deoxycimicifugoside[3]
δC δH
1 306 119,164(m) 302 115,160
2 299 125,220(m) 295 188,225
3 882 347(dd,115,38) 879 343(dd,42,115)
4 408 - 404 -
5 428 120 425 118
6 222 158,196 218 148,180
7 1145 516(d,64) 1141 511(dd,12,75)
8 1482 - 1477 -
9 217 - 213 -
10 287 - 283 -
11 369 298(dd,160,90) 366 125(d,163),294dd
12 771 523(d,87) 768 523(d,87)
13 485 - 481 -
14 510 - 505 -
15 428 196,217(m) 431 208,213
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续表1
No.
化合物11)
δC δH
26deoxycimicifugoside[3]
δC δH
16 735 460(qlike,75) 745 433
17 572 183(m) 566 178
18 152 148(s) 148 149(s)
19 292 057,108(d,35) 289 052(d,40),106(d,40)
20 261 183 231 225
21 221 095(d,55) 214 102(d,66)
22 371 175,220(m) 373 146,160
23 1063 - 1059 -
24 636 370(s) 624 365(s)
25 637 - 624 -
26 692 393(q,12) 682 362(d,102),405(d,102)
27 142 141(s) 142 147(s)
28 272 107(s) 269 105(s)
29 262 134(s) 257 130(s)
30 146 103(s) 143 099(s)
1′ 1079 486(d,74) 1074 483(d,760)
2′ 760 406(m) 756 401(dd,76,83)
3′ 791 417(t) 786 413(dd,83,85)
4′ 716 422(m) 712 420(ddd,50,85,100)
5′ 676 393(m),431(dd,36,102) 671 371dd
OAc 1711 - 1707 -
214 221(s) 216 217s
注:1)1HNMR(300MHz);13CNMR(75MHz)
4 抗肿瘤活性实验[5]
MTT法测定化合物对宫颈癌细胞(Hela)和小
鼠成纤维细胞(L929)细胞毒作用,IC50值分别为
7224,5597mg·L-1,表明化合物对肿瘤细胞的生
长具有一定的抑制作用,有必要深入研究。
[参考文献]
[1] 万定荣湖北省土家族常用植物药(毛茛科)[J].中药材,
1990,13(3):13.
[2] 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草.第3卷[M].
上海:上海科技出版社,1999.
[3] KusanoA,TakahiraM,ShibanoM.Studiesontheconsitituents
ofcimicifugaspecies.Twelvenewcyclolanostanolglycosidesfrom
theundergroundpartsofCimicifugasimplexWormsk[J].Chem
PharmBul,1999,47(4):511.
[4] ChenSN,LiW K,FaricantDS.Isolation,structureelucida
tion,andabsoluteconfigurationof26deoxyacteinfromCimicifuga
racemosaandclarificationofnomenclatureassociatedwith27de
oxyactein[J].JNatProd,2002,65(4):601.
[5] GaoWY,ZhangR,JiaW,etal.Immunosuppressivediterpenes
fromVeronicastrumsibiricum[J].ChemPharmBul,2004,52
(1):136.
AnewcycloartanetriterpenesaponinfromrhizomeofActaeaasiatica
LUBin1,FANYunshuang2,DUANHongquan1
(1.SchoolofPharmaceuticalSciences,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China;
2.KeyLaboratoryofHolowFiberMembraneMaterialandMembraneProcesofMinistryofEducation,
TianjinPolytechnicUniversity,Tianjin300160,China)
[Abstract] Objective:ToisolateandelucidatethechemicalconstituentswiththecytotoxicityactivityfromtherhizomeofAct
aeaasiatica.Method:Thechemicalconstituentswereisolatedbyrepeatedcolumnchromatography(ToyopearlHW40Candprepara
tiveHPLC)andthestructureofcompound1waselucidatedbyspectraldataanalysis.Result:Acycloartanetriterpenesaponincom
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poundwasisolatedandidentifiedtobe(23R)16β,23∶23α,26∶24α∶25triepoxy9,19cyclolanost7en3βOβDxylopyranoside.
Conclusion:Compound1wasanewcompoundandnamed(23R)26deoxycimicifugoside.TheIC50valuesofcompound1forcel
growthinhibitionofHelaandL929cellineswere7224and5597mg·L-1,respectively.
[Keywords] Actaeaasiatica;cycloartanetriterpene;cytotoxicityactivity
[责任编辑 王亚君]
[收稿日期] 20081028
[基金项目] 香港研究资助局(RGC)课题(CUHK4316/03M)
[通讯作者] 赵明,Tel(0852)31634087,Fax:(0852)
26037203,Email:zzhzhaoming@yahoo.com
狭叶红景天的化学成分及其抑制结核分枝
杆菌生长活性的研究
黄英俊1,赵 明1,宗玉英1,陈超杨2,车镇涛1
(1.香港中文大学 中医学院,香港;2.香港中文大学 微生物学系,香港)
[摘要] 目的:研究狭叶红景天的化学成分;评价狭叶红景天提取物及其化学成分体外抗结核分枝杆菌
(ATCC27294)活性。方法:运用硅胶,SephadexLH-20,RP-18等柱色谱及半制备液相色谱对狭叶红景天的化学
成分进行分离纯化,并利用核磁共振、质谱等技术,鉴定它们的化学结构;通过测试体外最低抑制浓度(minimalin
hibitoryconcentrations,MIC)和最低杀菌浓度(minimalbactericidalconcentrations,MBC)来评价有关物质的抗结核
分枝杆菌活性。结果:分离、纯化并鉴定了12个化合物,分别为β谷甾醇(βsitosterol,1),酪醇(tyrosol,2),反式对
羟基肉桂酸(trans4hydroxycinnamicacid,3),香叶醇 β吡喃葡萄糖苷(geranylβglucopyranoside,4),橙花醇 β吡喃
葡萄糖苷(nerylβglucopyranoside,5),正己醇β吡喃葡萄糖苷(hexylβglucopyranoside,6),没食子酸(galicacid,7),
表没食子儿茶素3没食子酸酯[(-)epigalocatechingalate,8],棉皮素7Oα吡喃鼠李糖苷(rhodiolgin,9),异落
叶松树脂醇9Oβ吡喃葡萄糖苷(isolariciresinol9Oβglucopyranoside,10),正辛醇α吡喃阿拉伯糖(1→6)β吡喃
葡萄糖苷(rhodiooctanoside,11),和橙花醇α吡喃阿拉伯糖(1→6)β吡喃葡萄糖苷(sacranosideB,12)。结论:化合
物3,6,9~12为首次从狭叶红景天中发现,化合物4,5为首次从红景天属植物中分得;狭叶红景天80%乙醇提取
物、醋酸乙酯萃取物以及化合物7,8,对结核分枝杆菌具有一定抑制和杀灭活性。
[关键词 ] 狭叶红景天;化学成分;体外抗结核分枝杆菌活性
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)13151105
狭叶红景天Rhodiolakirilowi(Regel)Maxim.是
景天科 Crassulaceae红景天属植物,多年生草本,生
于海拔2000~5600m的山地多石草地或石坡上,
主产于我国西藏、云南、四川、新疆、青海、甘肃、陕
西、山西、河北等省,缅甸也有分布[1]。其根茎药
用,可清热退烧、解毒、防瘟,治肺炎、腹泻、四肢肿胀
等[2]。现代药理研究发现,狭叶红景天具有预防高
原反应[3,4]、活血化瘀、提高耐缺氧能力[5]、辐射保
护[6]、改善心血管系统功能等作用[7]。有关狭叶红
景天的化学成分研究,始于20世纪80年代,从中发
现的成分主要有苯乙醇苷类:红景天苷[812]和酪
醇[911];酚苷类 rodiolinozide[11]和熊果苷[12];黄烷3
醇衍生物类 表没食子儿茶素3没食子酸酯[11,12],
3,3′digaloylproprodelphinidinB2(rhodisin),3,3′di
galoylprocyanidinB2,表没食子儿茶素,表儿茶素,
表儿茶素3没食子酸酯[11];黄酮类 木犀草素和三
粒小麦黄酮(3′,4′,5′,5,7五羟基黄酮,trice
tin)[11];植物甾醇类 β谷甾醇[9]和胡萝卜苷[10];生
氰糖苷百脉根苷[10,12];非生氰糖苷 rhodiocyanoside
A[12];以及蔗糖[10],没石子酸[11]和 β吡喃果糖(1
→4)β吡喃葡萄糖[12]等。作者从甘肃产狭叶红景
天Rhodiolakirilowi中分离、鉴定了12个化合物,并
发现狭叶红景天 80%乙醇提取物、醋酸乙酯萃取
物、没食子酸(7)和表没食子儿茶素3没食子酸酯
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第33卷第13期
2008年7月
中 国 中 药 杂 志
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