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HPLC测定山楂中芦丁的含量



全 文 :份约 s1w ªo精密称定 o分别置 ux °棕色量瓶中 o各
准确加入丹酚酸 …对照品溶液适量 o照供试品溶液
制备方法制成供试品溶液 o按上述色谱条件进样 o测
定含量 o并计算回收率 o结果见表 t∀
表 t 心舒颗粒中丹参酮 µ „加样回收率
取样量

样品中含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
• ≥⁄
rh
s1usy w s1|zw t1zxt |y1u
s1usv u s1|x{ t1zy{ tss1u
s1usw t s1|yv t1zy| ||1{ |{1u t1|
s1ust x s1|xs t1zwy |{1w
s1uss x s1|wy t1zuv |y1u
2110 样品测定
取 v个批次的心舒颗粒 o照 213项下方法制成
供试品溶液 o按上述色谱条件测定 o结果批号
sysztuosysztvosysztw的样品质量分数分别为
w1x{ow1yuow1{w °ª# ªpt o• ≥⁄h u1||∀
3 讨论
心舒颗粒中丹酚酸 …含量较高 o且在本研究的
条件下其色谱峰不受杂质峰的干扰 o测试结果准确 !
可靠 o可用于心舒颗粒的质量控制 ∀
≈参考文献  
≈t  程显隆 o王 峰 1丹参中丹酚酸 …的高效液相色谱法含量测
定 ≈ 1药物分析杂志 oussvouvkul}tw|1
≈责任编辑 鲍 雷  
‹°≤测定山楂中芦丁的含量
孙 蓓 t3 o钱钧强 t
k天津医科大学 附属肿瘤医院 o天津 vsssysl
≈收稿日期   ussz2st2tt
≈通讯作者   3 孙蓓 oר¯}tvxtuuyy|swo∞2°¤¬¯}¶∏±³¨ ¬ssvƒ ¶¬2
±¤q¦²°
山楂是我国一种常用中药 o味酸 ! 甘 o性微
温 o归脾 ! 胃 ! 肝经 o具有消食健胃 ! 行气散瘀功
能 o用于肉食积滞 o胃脘胀满 o泻痢腹痛 o瘀血经
闭 o产后瘀阻 o心腹刺痛 o疝气疼痛 ! 高脂血症
等 ≈t  ∀近年来 o更广泛用于治疗心血管疾病和抗
菌消炎 o引起国内外学者的注意和重视 ≈u  ∀山楂
降压 ! 增加冠脉血流量 ! 降低血脂 ! 耐缺氧 ! 强
心 ! 抗心率不齐的有效成分为黄酮类化合物 o其主
要成分为芦丁 ! 金丝桃苷 ! 牡荆素等 ∀为此 o建立
山楂总黄酮有效成分的含量测定方法 o完善其质量
标准是非常必要的 ≈v  ∀用反相高效液相色谱法 o
对山楂总黄酮中的芦丁进行了含量测定方法学的研
究 ∀结果表明 o该测定方法准确 ! 灵敏 ! 重复性
好 o获得了满意的结果 ∀
1 仪器与试药
≥°⁄ pts„紫外可见检测器 o≤ pts„×输液泵 k日
本岛津 lo„‘„≥ׄ•色谱工作站 ~…°ut’≥型电子天平 ∀
山楂购自天津市药材公司 o芦丁对照品购自中
国药品生物制品检定所 ∀甲醇为色谱纯 o冰醋酸 !乙
醇为分析纯 o水为超纯水 ∀由山楂提取分离得到总
黄酮 ∀取山楂 tss ªo以 ysh乙醇 zss °回流提取
u次 o每次 t1x «o合并滤液 o减压浓缩至 xs °o加
|xh乙醇使浓缩液乙醇浓度达到 {sh o静置 o过滤 o
减压回收至干即得 ∀
2 方法与结果
2q 1 色谱条 件分 析 ≥∏±·¨® ¶¦¬±¦¨ ≤t{ 柱
kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l~柱温为室温 ~流动相水 2
甲醇 2乙酸 kysΒv{Βul~流速 t °# °¬±pt ~检测波长
vws ±°≈w  ~灵敏度 sqsu „˜ƒ≥~进样量各 us ˏ∀
2q2 供试品与对照品溶液的制备 对照品溶液制
备 }精密称取芦丁对照品 ts °ª置 ts °量瓶中 o加
甲醇 2水 ktΒtl溶解并稀释至刻度 o摇匀 o作为对照溶
液 k每 t °含芦丁 t °ªl∀
供试品溶液制备 取山楂总黄酮 ts °ªo以
|xh乙醇超声提取 vs °¬±o静置后 o滤取上清液 o浓
缩至干 o以 vsh乙醇转溶并通过聚酰胺柱 o以 t{s
°zsh乙醇洗脱 o回收溶剂 o浓缩至干 o用甲醇 2水
ktΒtl溶解残渣 o定容至 ts °量瓶中 o即得 ∀
#vzxu#
第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
按 211项下色谱条件得到对照品及供试品溶液
的色谱分离图 o如图 t所示 ∀
图 t 山楂的 ‹ °≤图
„q对照品 ~…q供试品溶液 ~tq芦丁
2q3 线形关系考察 精密吸取上述对照品溶液配
制成浓度为 tsotxousouxoxs °ª# pt的系列标准
溶液 o依次进样 o按上述色谱条件测定峰面积 o以对
照品浓度为横坐标 o峰面积为纵坐标 o绘制标准曲
线 o得回归方程 Ψ € tuw v|Ξ n u w{{1toρ€ s1||| |∀
结果表明芦丁在 ts ∗ xs °ª# pt与峰面积呈良好

的线性关系 ∀
2q4 精密度试验 精密吸取对照溶液 us ˏo重复
样品 x次 o• ≥⁄ s1xuh kν €xl∀
2q5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 o定时
ksoyotuouwovy «l进行测定 o• ≥⁄ t1vh kν € xlo表
明样品在 vy «内稳定 ∀
2q6 重复性试验 按 2q2项下方法制备供试品溶
液 y份 o并以上述测定方法测定 o其平均质量浓度为
s1tsy s °ª# ªpt o• ≥⁄ t1th kν € ylo表明本实验重
复性良好 ∀
2q7 加样回收率试验 取已知含量的山楂总黄酮 o
加入一定量的芦丁对照品 o按上述方法进行含量测
定 o由测得量与加入量计算回收率 o其平均回收率为
||1wxh o• ≥⁄ t1wvh kν €ylo见表 to表明方法回收
率良好 ∀
2 q8 样品的测定结果 分别精密吸取对照品溶液
表 t 山楂中芦丁的加样回收率
样品
r°ª
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª 回收率 rh 平均值 rh • ≥⁄rh
ts1sts s1tts s1s{t s1t|s |{1wz
ts1ssu s1ttu s1s{t s1t|u |{1ss
ts1ss| s1tty s1tsu s1ut{ ||1{y ||1wx t1w|1||{ s1tsx s1tsu s1us| tst1x{
ts1ss{ s1tsy s1tsu s1uts tst1ty
ts1ssx s1tt{ s1tsu s1ut{ |z1yu
及各供试品溶液各 us ˏo按上述色谱条件依次进
样 o以外标法计算其中芦丁的质量分数分别为
t1tsh ot1tvh ot1tth o• ≥⁄ t1wh ∀
3 讨论
山楂中芦丁含量较低 o甲醇提取芦丁的同时 o也
提取出大量的杂质和其他成分 ∀无法直接进行色谱
测定 o必须对提取物进行净化处理 ∀经超声提取可
分散浸膏 o使有效成分充分地溶于有机溶剂 ∀再经
聚酰胺柱进行净化 o收集乙醇洗脱部分进行高效液
相色谱测定 o聚酰胺吸附并去除大量杂质 o芦丁洗脱
较为完全 o并能使其基线分离 o在芦丁主峰附近无杂
质峰干扰 ∀
据文献报道山楂总黄酮中 v个主要有效成分分
别为芦丁 !金丝桃甙 !牡荆素 ∀其中芦丁为主要成分 o
因此作者只对芦丁进行了定量分析 o而其他 u种成分
有待进一步研究分析 ∀
含量测定过程中 o波长按文献报道 o选择了 vws
±°∀经实验 o流动相没有采用文献报道的水 2异丙
醇 2醋酸 k{sΒtzΒvlo而采用水 2甲醇 2醋酸 kysΒv{Β
ulo结果达到了预期的目的 ∀
用高效液相法测定山楂中芦丁含量 o结果准确 !
重现性好 !灵敏度高 o可作为山楂质量标准含量测定
项的测定方法 ∀
≈参考文献  
≈t  沈映君 q中药药理学 ≈  q北京 }人民卫生出版社 ousss}xzwq
≈u  金治萃 o白莲花 o胡 荫 o等 q山楂注射液对免疫功能的影响
≈ q内蒙古医学杂志 ot||uotukwl}vq
≈v  张 妍 o李厚伟 o张永春 o等 q山楂中总黄酮几种提取分离方法
的考察及含量测定 ≈ q哈尔滨医科大学学报 ousstovxkvl}
t{vq
≈w  高光跃 o冯毓秀 o秦秀芹 q山楂类果实的化学成分分析及其质
量评价 ≈ q药学学报 ot||xovskul}tv{q
≈责任编辑 牛泽宇  
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第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz