全 文 ：复方丹参片对冠心病患者血浆蛋白影响的
蛋白质组学研究
马增春t o高 月t 3 o谭洪玲t o肖成荣t o吴红金u o王升启t
kt1 军事医学科学院 放射医学研究所 o北京 tss{xs ~u1 北京市中西医结合医院 o北京 tsssv|l
≈摘要  目的 }用蛋白质组学技术考察复方丹参片对冠心病患者血浆蛋白的影响 o在分子水平上探讨复方丹
参片活血化瘀的作用机制 ∀方法 }收集正常 !冠心病患者和复方丹参片用药病人组的血浆 o用二向电泳 !图像分析 !
质谱鉴定等蛋白质组学技术测定复方丹参片对冠心病患者血浆中有影响的蛋白质 ∀结果 }蛋白质组学研究发现 o
冠心病病人血浆与正常相比有 v个蛋白质下调和 y个蛋白质上调 o复方丹参片可使这些改变的蛋白质水平有所恢
复 ∀胶内酶切提取蛋白进行质谱鉴定 o其中冠心病病人血浆与正常相比升高的蛋白质有免疫球蛋白 !纤维蛋白原 !
粒酶 o冠心病病人血浆与正常相比降低的蛋白质有细胞表面糖蛋白k≤⁄ww≥°l ∀冠心病病人服用复方丹参片后可降
低免疫球蛋白 !纤维蛋白原 !粒酶 ∀结论 }复方丹参片可以降低冠心病患者血浆中的纤维蛋白原和粒酶 o其可能通
过抑制单核细胞黏附 !平滑肌细胞增殖和迁移 !减轻炎症而治疗冠状动脉粥样硬化 ∀
≈关键词  复方丹参片 ~蛋白质组学 ~动脉粥样硬化 ~冠心病
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyls|2szyy2sw
≈收稿日期  ussx2sw2us
≈基金项目  国家 {yv重大专项kussv„„uuswul ~国家自然科
学基金资助项目kvsuztytzl
≈通讯作者  3 高月 oר¯ }kstslyy|vtvtu oƒ¤¬}kstslyy|vtvtu o
∞2°¤¬¯}ª¤²¼∏¨ ƒ ±¬¦q¥°¬q¤¦q¦±
研究表明复方丹参片具有抗心肌缺血 !舒张血
管 !保护内皮损伤 !缩小心肌梗死面积 o抗自由基 !减
少缺血再灌注心肌损伤 !保护心肌高能磷酸化合物
及线粒体膜等广泛的心血管活性≈t  ∀分子药理学的
研究表明 o复方丹参是通过影响基因的表达调控达
到治疗作用的 o如丹参可抑制血管内皮细胞和粒细
胞表达黏附分子≈u ov  o降低血管平滑肌和血小板膜
上黏附分子的表达≈w  o丹参酮可以抑制心肌细胞 ¦2
­∏±基因的表达≈x 等 ∀
蛋白质组在药物作用靶标 !安全性评价 !耐药性
机制 !疾病动物模型研制和中医药现代化等方面有
新颖而重要的应用≈y  ∀中药作用的整体观与蛋白质
组学的思路不谋而合 o中药具有多组分 !多靶点和多
途径的作用特点 o分析用药前后的蛋白表达差异 o可
初步阐明中药复方的作用机制 ∀本实验考察了复方
丹参片对临床病人血浆蛋白的影响 o旨在从分子水
平上探讨复方丹参片活血化瘀的作用机制 ∀
1 试剂与仪器
≤‹„°≥ o³«¤µ°¤¯¼·¨v2ts oŒ°Š缓冲液 !丙烯酰胺 o
甲叉双丙烯酰胺等双向电泳试剂均购自 „°¨ µ¶«¤°
³«¤µ°¤¦¬¤公司 ∀
蛋白质定量标准购自 °¬¨µ¦¨ 公司 ∀考马斯亮蓝
•2uxs !考马斯亮蓝 Š2uxs购自 „ • ∞≥≤’ 公司 ∀去
除白蛋白试剂盒购自 °¬¨µ¦¨ 公司 ∀复方丹参片购自
广州白云山制药厂 o批号 usstswts ∀
„°¨ µ¶«¤° ³«¤µ°¤¦¬¤公司蛋白质学研究配套仪
器 }Œ°Š³«²µ等电聚焦仪 o∞·¤± ⁄„×¶¬¬二向垂直电
泳仪 o∏¯·¬× °¨³ ¶ 温控循环水浴 oŒ°¤ª¨ ≥¦¤±±¨ µ扫
描仪 oŒ°¤ª¨ °¤¶·¨µu⁄ ∞¯¬·¨图像分析软件 ∀分光光度
计 ⁄˜yws来自美国 …¨ ¦®°¨ ± ¦²∏¯·¨µ∀
2 方法
211 临床血浆收集 正常人 !冠心病患者和服用
复方丹参片病人的年龄均在 xx ∗ yx岁 o每组收集 {
份血浆 ∀取 t °抗凝血液 ow ε 放置 vs °¬±后 o离
心kv sss ≅ γ otx °¬±l o取上清转移至 ∞³管 o离心
kz xss ≅ γ ovs °¬±l o取上清 o从 {份血浆样品中各
吸取 tss ˏ血浆合并 o得到正常 !病人和复方丹参
片用药组血浆蛋白样品 ∀
212 从血浆中去除白蛋白 加抗白蛋白抗体珠到
离心管中 o然后加 v{s ˏ双蒸水作用 us ¶o离心
ktu sss ≅ γ ot °¬±l o弃洗脱液 ∀加 {s ˏ血浆到离
#yyz#
第 vt卷第 |期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ |
¤¼oussy
心管中 o与抗白蛋白抗体反应 t °¬±o离心ktu sss ≅
γ ot °¬±l o收集洗脱液 o将洗脱液再加到离心管中 o
再次与抗白蛋白抗体反应 t °¬±o离心ktu sss ≅ γ ,t
°¬±l o收集洗脱液 ∀加 xs ˏ缓冲液到离心管中 o与
抗白蛋白抗体珠反应 t °¬±o离心ktu sss ≅ γ ot
°¬±l o收集洗脱液 ∀将洗脱液合并得到去除白蛋白
的血浆蛋白样品 ∀
213 蛋白质含量测定 将蛋白质定量标准梯度稀
释后用考马斯亮蓝 Š2uxs染色 o波长 x|x ±°测定吸
光度kΑl o做标准曲线 o样品稀释 tss倍测定蛋白质
含量 ∀
214 二向电泳 二向电泳步骤参考以前本室报
道≈z  o第一向等电聚焦采用 wxs ˏ体系 o当聚焦到
ts sss ∂«µ时停止 o经两步平衡后 o进行 ≥⁄≥2°„Š∞
电泳 ∀
215 考马斯亮蓝染色 考马斯亮蓝染色液ks1t h
考马斯亮蓝 !xs h甲醇 !ts h冰醋酸l染色 y «o考马
斯亮蓝脱色液kux h乙醇 !{ h冰醋酸l脱色 tu «∀
216 差异蛋白质的酶切与提取 选取 u⁄胶上存在
明显差异的蛋白质点 o用刀片沿斑点染色边缘切下
蛋白点置于 t1x °∞³管中 o用含 xs h 乙腈和 ux
°°²¯#pt碳酸氢铵溶液脱色 o胶片真空离心干燥 ∀
加 w ˏ胰酶 ovz ε 保温 t{ «o加入 x h三氟乙酸 tus
ˏ于 ws ε 保温 t «o吸出上清 o加入 u1x h三氟乙酸
和 xs h乙腈溶液 tus ˏ于 vs ε 保温 t «o合并上清
液冷冻干燥≈{  ∀
217 制备肽质量指纹谱 用 x ˏ三氟乙酸溶解样
品 o取 t ˏ点靶 o另取 t ˏΑ2腈基2w2羟基肉桂酸溶
于 s1t h三氟乙酸rxs h乙腈的饱和溶液作基质 o室
温干燥 ∀质谱仪采用激光波长 vvz ±° o反射检测 ∀
质谱峰用 …µ∏®¨µ的肽段标准或胰酶的自切峰
k ‹ n }|sy1xsx ot sus1xsw ot txv1xzw ou tyv1sxz o
u uzv1tys ⁄¤l进行标定≈{  ∀
218 数据库检索初步鉴定蛋白质 数据库检索程
序根据输入的蛋白质等电点 !分子质量范围及肽质
量指纹谱数据和其他一些参数在数据库中寻找与这
些参数相匹配的蛋白质≈|  ∀检索参数为 ≠种属选择
人 ~胰酶酶切 ~≈ 可变修饰选择氨基甲酰化和氧
化 ~…漏切点选择 t ~ 肽质量标准差选择 s1v ~¡单
同位素质量 o检索数据库为 «·³}rrººº q°¤·µ¬¬2
¶¦¬¨±¦¨ q¦²°∀
3 结果
311 复方丹参片对冠心病患者血浆中蛋白质影响
的二向电泳结果 分别将正常 !冠心病和复方丹参
片作用后的除去白蛋白的血浆蛋白质 o进行 v次双
向电泳 o第一向用 ³‹为 w ∗ z o长度为 uw ¦°的预制
胶条 o第一向结束后进行 ≥⁄≥2°„Š∞电泳 o图像分析
时将冠心病患者的凝胶选做参考胶 o其他胶与参考
胶相匹配 o蛋白质点经标准化后输出数据到 ∞¬¦¨¯
进行统计分析 ∀正常 !冠心病和复方丹参片作用后
的除去白蛋白血浆的双向电泳凝胶上的蛋白质点的
个数分别为kuxy ? ttl okuzv ? tul okuyx ? twl个 ∀
将蛋白质点的灰度进行图像分析统计后发现冠心病
病人血浆与正常相比有 v个蛋白质下调和 y个蛋白
质上调k表 tl o复方丹参片可使这些改变的蛋白质
水平有所恢复 ∀
表 t 复方丹参片对血浆蛋白质影响的二向
电泳图象分析结果kcξ ? σl
序号 正常组 冠心病组 复方丹参组
vw s1{xw ? s1syz s1v{v ? s1sustl s1y{| ? s1s|vtl
{s s1zsv ? s1szt t1vtv ? s1sy|tl s1uxs ? s1svttl
{| s1u{x ? s1suw s1x{y ? s1tuutl s1uv| ? s1s|sul
tsw u1t{u ? s1wwy w1vy ? s1v|stl t1ytt ? s1y{|tl
tyv t1vvw ? s1wuw s1xsy ? s1szvtl t1tyw ? s1usstl
t|x s1s{| ? s1st{ s1xvx ? s1syytl s1syu ? s1svttl
t|y s1uus ? s1ssw s1{yt ? s1tv{tl s1tys ? s1swttl
ut| s1wtv ? s1svs s1uyx ? s1svytl s1uxy ? s1stt
uv| s1uzu ? s1suz tl
注 }与正常组相比tl Π s1sx ;与冠心病组相比u) Π s1st
312 差异蛋白质的质谱鉴定 选取图像分析统计
后病人血浆与正常相比有改变且复方丹参片可使其
有所恢复的蛋白质点 o胶内酶切提取蛋白进行质谱
鉴定 o其中冠心病人血浆与正常相比升高的蛋白质
有免疫球蛋白k¬°°∏±²ª¯²¥∏¯¬±l o纤维蛋白原k©¬¥µ¬±²2
ª¨ ±l o粒酶kŠµ¤±½¼°¨ ≤l o冠心病人血浆与正常相比
降低的蛋白质有 ≤⁄ww≥°k表 ul ∀冠心病患者服用复
方丹参片后可降低免疫球蛋白 !纤维蛋白原 !粒酶 ∀
4 讨论
血浆蛋白质组学的研究结果表明 o冠心病患者
血浆中纤维蛋白原的水平升高 o服用复方丹参片后
纤维蛋白原水平降低 ∀纤维蛋白原是心血管病的一
个独立的可改变的危险因素 o其在冠状动脉粥样硬
化形成早期 o即与低密度脂蛋白一起侵入动脉壁 o它
可直接损伤血管内皮细胞并破坏血管内皮细胞的抗
凝和纤溶活性 ∀纤维蛋白原通过其在血小板上的配
体 Š³µ¥r ¶¤使血小板聚集及血小板与单核细胞
#zyz#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 u 肽质指纹图谱的数据库搜索结果
序号 数据库序列号 分值 匹配肽段 等电点r分子质量 覆盖率r h 蛋白质名称
{s …„≤{zwxy y{ {rwy y qvurxu zu{ u| 免疫球蛋白
{| ƒŠ‹˜… yx tsr{v { qxwrxy t{s vs 纤维蛋白原
t|x Œzzvzu yv vrux ts qsxrv vwt {| 粒酶
ut| °• ≥≤u xs xruu | qvvruz v{| u| 细胞表面糖蛋白 ≤⁄ww≥°
的黏附 o促进炎症和血栓形成 ∀纤维蛋白原的另一
重要功能是通过其 µv序列结合到细胞间黏附分子
kŒ≤„tl并调整 Œ≤„t依赖性黏附 o作为内皮细胞
和单核细胞间必需的桥连子而在冠状动脉粥样硬化
的免疫炎症反应中起重要作用≈ts  ∀研究发现 o纤维
蛋白原除了参与凝血过程外 o还刺激血管平滑肌的
迁移和增殖 o促进血小板聚集性增高 o血黏稠度改
变≈tt  ∀认为高纤维蛋白原血症在动脉内壁的沉积
可能先于低密度脂蛋白的沉积 o在冠心病的发展中 o
特别是早期其作用可能比低密度脂蛋白更重要≈tt  ∀
血浆蛋白质组学的研究结果表明 o„≥患者血浆
中粒酶的水平升高 o服用复方丹参片后粒酶水平降
低 ∀粒酶是细胞毒性淋巴细胞分泌的一种颗粒 o在
冠心病中介导细胞免疫反应引起血管内皮细胞凋
亡 o加重内皮损伤而促进冠状动脉粥样硬化≈tu otv  ∀
复方丹参片可以减少粒酶的产生而减轻内皮损伤 ∀
血浆蛋白质组学的研究结果表明 o复方丹参片
可以降低冠心病血瘀证病人血浆中的纤维蛋白原和
粒酶 o可能通过抑制单核细胞黏附 !平滑肌细胞增殖
和迁移 !减轻炎症而治疗冠状动脉粥样硬化 ∀
≈参考文献 
≈t  高秀梅 o张伯礼 q丹参及提取物对心血管系统药理作用研究
进展 q天津中医 oussu ot|ktl }zw q
≈u  ≤«¨ ± ≠ ‹ o¬± ≥ oŽ∏ ‹ ‹ q≥¤¯√¬¤±²¯¬¦¤¦¬§… ¤·¨±∏¤·¨¶∂ ≤„2
t ¤±§Œ≤„2t ¬¨³µ¨¶¶¬²±¬± בƒ2¤¯³«¤2·µ¨¤·¨§«∏°¤±¤²µ·¬¦ ±¨§²·«¨ 2
¬¯¤¯ ¦¨¯¯¶q ϑ Χελλ Βιοχηεµ , usst o{ukvl }xtu q
≈v  姜开余 o顾振纶 o阮长耿 o等 q丹参素对 ≤⁄tt¥o°2¶¨¯¨ ¦·¬±oŒ2
≤„ 2t o∂ ≤„2t o∞2¶¨¯¨ ¦·¬± 表达的影响 q中国药理学通报 o
usst otykyl }y{u q
≈w  姜开余 o阮长耿 o顾振纶 o等 q丹参酮 µ „磺酸钠对内皮细胞和
血小板体外表达黏附分子的作用 q中国药理学报 ot||{ ot|
ktl }wz q
≈x  • ∏ ≠ o ‹²±ª ≤ ≠ o¬± ≥ qŒ±¦µ¨¤¶¨ ²©√¬·¤°¬± ∞ ¦²±·¨±·¬± ⁄
¤±§µ¨§∏¦·¬²± ²©¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²¶¬¶¬± ¦«²¯ ¶¨·¨µ²¯2©¨ §µ¤¥¥¬·¶¥¼ ¤ º¤·¨µ2
¶²¯∏¥¯¨ ¤±·¬²¬¬§¤±·2µ¬¦« ©µ¤¦·¬²± ²© Σαλϖια µιλτιορρηιζα . Αρτερισχλερ
Τηροµβ ςασχ Βιολ,t||{ ot{ }w{t q
≈y  马增春 o王升启 q蛋白质组技术的研究进展及其在药物研究中
的应用 q中华国际医药杂志 oussv ouktl }vz q
≈z  马增春 o高 月 o吕俊萍 o等 q双向电泳中三种蛋白质检测方
法的比较 q中国生物化学与分子生物学杂志 oussw ouskvl }
tuu q
≈{  «¤² ≠ o «¤±ª • o Ž«² ≠ o ετ αλq °µ²·¨²°¬¦¤±¤¯¼¶¬¶²©¬±·¨ªµ¤¯
³¯¤¶°¤ ° °¨¥µ¤±¨ ³µ²·¨¬±¶q Αναλ Χηεµ , ussw ozykzl }t{tz q
≈|  ¬° ‹ o∞±ªo≠¤·¨¶• o ετ αλ. Œ§¨±·¬©¬¦¤·¬²±²©u⁄2ª¨¯³µ²·¨¬±¶}„
¦²°³¤µ¬¶²± ²© „⁄Œrגƒ ³¨ ³·¬§¨ °¤¶¶°¤³³¬±ª·²Λ≤2∞≥Œ·¤±§¨ °
°¤¶¶¶³¨¦·µ²°¨ ·µ¼q ϑ Αµ Σοχι Μασσ Σπεχτρο oussv otw }|xz q
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·¬¦¤¦·¬√¬·¼¬± ±¨§²·«¨ ¬¯¤¯ ¦¨¯¯¶q Αχτα Πηψσιολ Σχανδ , ussu otzykul }
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≈tt  ‘¤¬·²  q∞©©¨¦·¶²©©¬¥µ¬±²ª¨ ± o©¬¥µ¬± ¤±§·«¨¬µ§¨ªµ¤§¤·¬²± ³µ²§∏¦·¶
²±·«¨ ¥¨«¤√¬²∏µ²©√¤¶¦∏¯¤µ¶°²²·« °∏¶¦¯¨ ¦¨¯¯¶q Νιππον Ρονεν Ι2
γακκαι Ζασσηι , usss ovzkyl }wx{ q
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¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²¶¬¶¤±§·µ¤±¶³¯¤±·√¤¶¦∏¯¤µ§¬¶¨¤¶¨ }¤¶¶²¦¬¤·¬²± º¬·« ¦¨¯¯
§¨¤·«¤±§ ¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²·¬¦§¬¶¨¤¶¨ ¶¨√ µ¨¬·¼q Μοδ Πατηολo ussv oty
kxl }wys q
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∏´¨ ±¦¨¶²© ¬°°∏±¨ 2 °¨ §¬¤·¨§ ¦¨¯¯ §¨¤·« ¬± ¤·«¨µ²°¤·²∏¶ §¬¶¨¤¶¨¶q
Χαρδιοϖασχ Τοξιχολ, ussv ovkvl }uy| q
Εφφεχτσ οφ φυφανγδενσηεν ταβλετσ ον ηυµαν ατηεροσχλεροτιχ
πλασµα προτειν υσινγ προτεοµιχ τεχηνιθυε
„  ±¨ª2¦«∏±t oŠ„’ ≠∏¨ t oׄ‘‹²±ª2¯¬±ªt o ÷Œ„’ ≤«¨ ±ª2µ²±ªt o • ˜ ‹²±ª2­¬±u o • „‘Š ≥«¨ ±ª2 ¬´t
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u1 Βειϕινγ Ηοσπιταλ οφ Υνιτεδ Χηινιεσε2Ωεστερν Μεδιχινε , Βειϕινγ tsssv| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײµ¨¶¨¤µ¦«·«¨ ©¨©¨¦·¶²©©∏©¤±ª§¨±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶²± ¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²·¬¦³¯¤¶°¤³µ²·¨¬± ∏¶¬±ª³µ²·¨²°¬¦·¨¦«±¬´∏¨ ¤±§
©∏µ·«¨µ ¬¨³¯²µ¨ ¬·¶³²·¨±·¬¤¯ °²¯ ¦¨∏¯¤µ° ¦¨«¤±¬¶°·²¦∏µ¨ ¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²¶¬¶q Μετηοδ : ׫¨ ³¯¤¶°¤²©±²µ°¤¯ o¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²¶¬¶¤±§¦∏µ¨§ªµ²∏³º µ¨¨
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第 vt卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¦²¯¯¨ ¦·¨§o¤±§·«¨ ¤¯¥∏°¬±¬± ³¯¤¶°¤ º¤¶µ¨°²√ §¨q°µ²·¨²°¬¦³µ²·²¦²¯ ¬±√²¯√ §¨²©u2⁄∞o¬°¤ª¨ ¤±¤¯¼¶¬¶¤±§¶³¨¦·µ²° ·¨µ¼ §¨·¨¦·¬²± º¤¶∏¶¨§
·² §¨·¨¦·µ¨ª∏¯¤·¨§³¯¤¶°¤³µ²·¨¬± ¥¼©∏©¤±ª§¨±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶qΡεσυλτ : v §¨¦µ¨¤¶¨§ ¬¨³µ¨¶¶¨§¤±§y «¬ª«¨µ³µ²·¨¬±¬±¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²·¬¦³¯¤¶°¤¦²∏¯§
¥¨ µ¨¦²√ µ¨¨§¥¼©∏©¤±ª§¨±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶q׫¨ ¯¨ √¨¯¶²©©¬¥µ¬±²ª¨ ±o Šµ¤±½¼°¨ ≤ ¤±§¬°°∏±²ª¯²¥∏¯¬± º µ¨¨ §¨¦µ¨¤¶¨§¥¼ ©∏©¤±ª§¨ ±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶q
Χονχλυσιον : ׫¨ ¯¨ √¨¯¶²©©¬¥µ¬±²ª¨ ±oŠµ¤±½¼°¨ ≤ ¬± ¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²·¬¦³¯¤¶°¤¦²∏¯§¥¨ §¨¦µ¨¤¶¨§¥¼ ©∏©¤±ª§¨ ±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶q׫¨ ©¨©¨ ¦·¶²©©∏2
©¤±ª§¨ ±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶²± ¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²¶¬¶¬±¦¯∏§¨§·«¤·}¬±«¬¥¬·¬²± ²©¤§«¨¶¬²± ²© °²±²¦¼·¨ o¬±«¬¥¬·¬²± ²©³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§°¬ªµ¤·¬²± ²© ∂≥≤ o¤±§
º ¤¨®¨ ±¬±ª²©¬±©¯¤°°¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] ©∏©¤±ª§¨±¶«¨ ±·¤¥¯ ·¨¶~³µ²·¨²°¬¦¶~¤·«¨µ²¶¦¯ µ¨²¶¬¶~¦²µ²±¤µ¼ «¨ ¤µ·§¬¶¨¤¶¨ ≈责任编辑 古云侠 
≈收稿日期  ussx2sy2uu
≈通讯作者  3芮菁 oר¯ }ksuuluvvxvss{
银杏总内酯注射液对大 !小鼠脑缺血的改善作用
芮 菁 3 o李元静 o张月玲 o刘 云
k天津市药品检验所 o天津 vssszsl
≈摘要  目的 }研究银杏总内酯注射液对大鼠实验性局部脑缺血的改善作用 o并初步探讨其作用机制 ∀方法 }
用三氯化铁kƒ ≤¨¯ vl造成大鼠大脑中动脉缺血模型k≤„’l o观察对缺血大鼠行为状态 !脑梗死面积及脑组织形态学
的影响 ~应用肾上腺素2胶原蛋白诱导的小鼠体内血栓形成模型 o观察该药整体抗血栓作用 ~应用二磷酸腺苷k„⁄°l
诱导大鼠血小板聚集试验和葡聚糖2xss造成的大鼠高血黏度试验 o观察该药对血小板聚集和血液流变性的影响 ∀
结果 }银杏总内酯注射液 v1s °ª#®ªpt及以上剂量可改善 ≤„’大鼠的行为障碍 o减少脑缺血区的梗死范围 ~y1s °ª
#®ªp t及以上剂量可显著抑制小鼠体内血栓的形成 o降低大鼠全血黏度 ~t1x °ª#®ªp t及以上剂量可明显降低 „⁄°诱
导的血小板聚集率 ∀结论 }银杏总内酯注射液对动物实验性脑缺血具有明显的改善作用 o其作用机制可能与改善
血凝状态 !抑制血小板依赖性血栓的形成有关 ∀
≈关键词  银杏总内酯 ~脑缺血 ~血小板聚集 ~血液流变性 ~血栓形成
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyls|2szy|2sw
银杏叶提取物制剂是目前世界上最畅销的植物
药制剂 o而银杏总内酯注射液即由银杏叶经过提取
分离后得到的一种可供注射的药用制剂 o该制剂的
主要有效成分为银杏内酯 ∀据报道银杏内酯具有抗
血小板聚集 !抑制体内血栓形成及改善血液流变性
的功效≈t ou  ∀依据该功效 o笔者对银杏总内酯注射
液进行了大 !小鼠改善脑缺血及抗血栓作用的观察
并初步探讨其作用机制 o以期为临床应用提供参考 ∀
1 材料
111 动物
昆明种小鼠 o体重 uy ∗ vs ª~≥⁄大鼠 o体重uts ∗
vus ª~雌雄各半 o清洁级 o由北京维通利华实验动物
技术有限公司提供 o许可证号 ≥≤÷Žk京l2ussu2sssv ∀
112 药物
银杏总内酯注射液浓缩液 ots °r支 o含银杏总
内酯 y1s °ª#°pt o天津市现代医药开发研究所提
供 o批号 usswsxux ∀舒血宁注射液 k银杏叶注射液l o
含总黄酮醇苷 w1u °ªr支 o大同惠达药业有限责任公
司提供 o批号 svttuxt ∀ xχ2腺苷二磷酸二钠盐
k„⁄°l oׅ⁄生物公司生产 o批号 ≤¤µf ttssv ∀尼莫
地平注射液 o天津金耀氨基酸有限公司生产 o批号
sutttvu ∀葡聚糖 ×2xssk⁄¨ ¬·µ¤± ×2xssl o˜≥联星生物
公司产品 o批号 tz2vsus2su ∀
113 仪器
…≥ p yvw血小板聚集仪 o北京生化仪器厂生产 ∀
Šp • p {系列血液黏度仪 o北京世帝科学仪器公司
生产 ∀
2 方法
211 对大鼠局部脑缺血行为 !脑梗死面积的影响
21111 大鼠大脑中动脉闭塞试验模型制作及分组
给药 按 ×∏°∏µ¤等≈v 方法 o大鼠¬³水合氯醛 kvxs
°ª#®ªptl麻醉 ∀左侧卧位固定 o在眼外眦与外耳道
#|yz#
第 vt卷第 |期
ussy年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ |
¤¼oussy