全 文 ：益髓生血颗粒对不同发育阶段小鼠
Αp血红蛋白稳定蛋白表达的影响
刘咏梅 t o吴志奎 t3 o柴立民 u o张新华 v o李 敏 t o陈玉英 t o吕鑫霞 t o朱晓云 t
ktq中国中医科学院 广安门医院 分子生物学研究室 o北京 tsssxv~
uq中国中医科学院 眼科医院 o北京 tsssws~
vq解放军 vsv医院 血液科 o广西 南宁 xvssutl
≈摘要   目的 }探讨益髓生血颗粒对不同发育阶段小鼠 Α2血红蛋白稳定蛋白 k¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬± ¶·¤¥¬¯¬½¬±ª³µ²2
·¨¬±o„‹ ≥°l表达的影响 ∀方法 }分别提取正常成年小鼠骨髓 !孕鼠 k孕 ut §l和胎鼠 k孕 tw §l胎肝胎脾有核细胞总
• ‘„o采用 µ¨¤¯2·¬°¨• ×2°≤• 方法检测中药益髓生血颗粒干预后对不同发育阶段小鼠的 Α2珠蛋白稳定蛋白基因表
达的影响 ∀结果 }中药干预后 o胎鼠 k孕 tw §l!孕鼠 k孕 ut §l的 „‹ ≥°基因表达无明显改变 o而成年鼠骨髓 „‹ ≥°
基因表达明显上调 ∀结论 }益髓生血颗粒治疗 Β2地中海贫血的可能分子机制之一 o是通过促进 „‹ ≥°基因的表达 o
减少游离 Α2珠蛋白的沉积 o遏止其对红细胞的毒害作用 o减少溶血发生而达到治疗效果 ∀
≈关键词   益髓生血颗粒 ~Β2地中海贫血 ~„‹ ≥°~基因表达
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsz2sys|2sw
≈收稿日期   ussy2sw2us
≈基金项目   国家自然科学基金项目 kvstztt||l~国家自然科
学基金重大研究计划项目 k|sws|ssvvl~广西自然科学基金项目 k桂
科自 swwztswl
≈通讯作者   3 吴志奎 oר¯}kstsl{{ssttw|o∞2°¤¬¯}ª¤°º∏½«¬2
®∏¬ƒ ¶¬±¤q¦²°
Β2地中海贫血是由于 Β2珠蛋白基因突变导致 Β2
珠蛋白合成抑制而引起的溶血性贫血 o又称为珠蛋
白生成障碍性贫血 o是全球发病率最高的遗传性疾
病之一 o目前临床上仍无有效的治疗药物 ∀血红蛋
白调控因子 Α2血红蛋白稳定蛋白 k¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬±
¶·¤¥¬¯¬½¬±ª³µ²·¨¬± o„‹≥°l可以作为分子伴侣结合和
稳定游离的 Α2珠蛋白链 o阻止氧自由基产生 o降低
对红细胞的氧化损伤 ≈t  ∀此蛋白有可能在 Β2地中
海贫血的病理过程发挥修饰作用 o并有可能对其治
疗产生一定的影响 ≈u  ∀
中药益髓生血颗粒治疗 Β2地中海贫血已取得
明显效果 ≈v  ∀临床研究表明 o益髓生血颗粒可以明
显改善患者临床症状 o提高外周血血红蛋白 k‹¥l和
抗碱血红蛋白 k‹¥ƒl的含量 ∀为探讨中药对 „‹≥°
的基因表达是否有促进作用 o本实验运用 µ¨¤¯2·¬°¨
°≤• 方法检测不同发育阶段小鼠造血组织的 „‹≥°
基因表达改变 o探讨益髓生血颗粒对不同发育阶段
小鼠 „‹≥°表达的影响 o进一步研究益髓生血颗粒
治疗 Β2地贫疗效的分子机制 ∀
1 材料与方法
1q1 材料
פ´ ⁄‘„聚合酶 !逆转录酶 k≥¬ª°¤公司 lo⁄‘„
 ¤µ®¨ µk宝生物工程有限公司 lo≥≠…• Šµ¨ ±¨ °≤•
°¬¬®¬·k„…Œ公司 l等 ~xzss定量 °≤• 仪 k美国 „…Œ
公司 lopuxŒ型低温高速离心机 k… ¦¨®°¤±公司 lo
≠°ussu精密天平 k上海精密仪器公司 lo水平电泳
仪 k北京六一仪器厂 lo全自动凝胶电泳图象分析系
统 k„° µ¨¶«¤° ³«¨ °¤¦¬¤¥¬²·¨¦«公司 l∀昆明种小鼠
y ∗ {周 oys只 kus雄性 ows雌性 lo由军事医学科学
院实验动物中心提供 o许可证号 ≥≤÷Ž2k军 lussu2
sst∀益髓生血颗粒 k批号 usswsxuzo中国中医科学
院广安门医院大兴制剂中心 ou1vy{ ª生药 o配成
ush水溶液 l∀引物序列由北京赛百盛基因技术有
限公司合成 oΒ2¤¦·¬±kuyv ¥³l}上游 xχ2Š„Š„≤≤×2
×≤„„≤„≤≤≤≤„Š≤≤ 2vχo下游 xχ2≤≤≤××ׄŠ≤„≤Š2
≤„≤׊ׄ„2vχ~„‹≥°ktz{ ¥³l}上游 xχ2Š„Š≤„Š2
Š„ŠŠ„Š≤„„Š„≤„Š2vχo下 游 xχ2≤≤Š„Š×Š×××2
ŠŠŠŠ××≤ׄ„2vχ~’ ¬¯ª²k§×lt{ ∀
1q2 动物处理
将小鼠随机分为 u组 o正常对照组和中药组 o每
#|sy#
第 vu卷第 z期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz
组含雄性小鼠 ts只 o雌性小鼠 us只 o分笼饲养 o每
笼 t雄 u雌 ∀合笼后治疗组按成人 x倍用药量灌胃
给药 k生药量 x1|uª# ®ªpt # §pt l每只 s1x°#
§pt o对照组给等量的蒸馏水 ∀密切观察阴栓并记录
产生时间 o待胚胎发育 tw §时 o处死 tru怀孕母鼠 o
取胎鼠之胎肝和胎脾 o胚胎发育 ut §时处死 tru母
鼠 o取胎鼠获取胎肝和胎脾 o并处死各组雄性小鼠 o
获取小鼠骨髓 ∀
1q3 胎肝及骨髓有核红细胞的制备
1q3q1 骨髓中成红细胞分离 断颈处死小鼠 o于
zxh乙醇浸泡消毒片刻 o无菌条件下取下肢股骨 o去
尽皮肤和肌肉 o浸于 w ε °…≥中 o剪断两端骨垢 o用
u °注射器吸取 ∞ ≥kw ε l冲出骨髓悬于 ts °
∞ ≥液中 o用滴管小心打散细胞团块 o离心 t xss µ
# °¬±pt ox °¬±o再用 ts °冷 ∞ ≥液冲洗 o离心
t xss µ# °¬±pt ox °¬±o最后加入 u °冷 °…≥液 o经
tss目不锈钢网过滤备用 ∀
1q3q2 胎肝胎脾成红细胞的分离 断颈处死怀孕
母鼠 o经 zxh乙醇浸泡动物解剖 o无菌条件下打开
腹腔 o取出子宫 o剥取胚胎 o取胎鼠获取胎肝和胎脾 o
在 us °°…≥kw ε l中洗去血污及脂肪 o置等量 °…≥
中 o取出胚胎置于 x °冷 ∞ ≥中 o在 tss目不锈
钢网上用 x °注射器将胚胎磨碎 o收集过滤于培养
皿中的细胞 o移至 ts °离心管中制成细胞悬液 ow
ε 水浴 v °¬±o使大块组织沉至管底 ∀取离心管上部
细胞悬液 o离心 t xss µ# °¬±pt ox °¬±o细胞经冷
°…≥液洗涤 ot xss µ# °¬±pt ox °¬±o溶于 y °冷
°…≥中 o制成细胞悬液 ∀
1q4 ° µ¨¦²¯ 梯¯度分离有核红细胞
1q5 样品总 • ‘„的提取
采用异硫氰酸胍一步法提取骨髓和胎肝 !胎脾
有核细胞总 • ‘„∀所提取的总 • ‘„用紫外分光光
度计测 Αu{s oΑuys o定量并检测其纯度 ∀ Αuys rΑu{s ∴
t1{为合格 ∀所提取的总 • ‘„进行 t1uh琼脂糖凝
胶电泳鉴定 o p{s ε 保存备用 ∀
1q6 逆转录反应
vs ˏ反应体系中含 }总 • ‘„ t Λªox ≅   ∂ 2
• × ¥∏©©¨µy ˏo  ∂ 2• ×kuss ˜# ˏpt lt ˏo’ ¬¯2
ª²k§×lt{ ks1x Λª# ˏpt lu ˏots °²¯ # pt §‘×°¶
v ˏos1t °²¯# pt ⁄×× u ˏo• ±¤¶¨ Œ±«¬¥¬·²µkws ˜
# ˏpt lt ˏo加 ⁄∞°≤水至 vs ˏ∀反应条件 }wu
ε 水浴反应 ys °¬±o|x ε x °¬±终止反应 ∀
1q7 µ¨¤¯2·¬°¨°≤• 反应
us ˏ反应体系中含 }¦⁄‘„ t ˏo上游引物
ks1sx Λª# ˏpt lt ˏo下游引物 ks1sxΛª# ˏpt l
t ˏou ≅ ≥≠…• ªµ¨ ±¨ °≤• °¬¬ts ˏo加 ⁄∞°≤水至
us ˏ∀反应条件 }|w ε 预变性 v °¬±~|w ε 变性 vs
¶ox{ ε 退火 vs ¶ozu ε 延伸 wx ¶o共 ws个循环 ~zu
ε 后延伸 { °¬±∀ t1uh琼脂糖凝胶电泳观察扩增结
果 ∀反应设立内对照 Β2¤¦·¬±∀每批实验均设立阴性
对照 k一份以水为模板的试剂空白对照 o一份以未
经反转录的总 • ‘„样品为模板的对照 l及阳性标
准曲线 k阳性对照品制备 }将样品按照 ts倍梯度稀
释为 totsotsu otsv otsw l∀实验后做熔点曲线监测
扩增产物的准确性 ∀实验中同步进行内对照 Β2¤¦·¬±
的定量检测 o以 „‹≥°与 Β2¤¦·¬±阈值 kΧτl之比作为
„‹≥°基因的相对表达量 ∀扩增反应在 Š ±¨ „¨°³
xzss荧光定量 °≤• 仪上进行 o每个循环电脑自动记
录反应管中的荧光信号值 o并描绘曲线 ∀反应结束
由 Š ±¨ „¨°³xzss ≥⁄≥ ¶²©·º¤µ¨分析结果 o自动计算
定量数值 ∀
1q8 统计学处理
所有实验数据采用 ≥°≥≥tt1s ƒ²µ• ¬±§²º¶统计
软件进行统计学处理 o采用单因素方差分析 o结果以
cξ ? σ表示 oΠ s1sx有显著性差异 ∀
2 结果
2q1 总 • ‘„ t1uh琼脂糖凝胶电泳
可见 u{≥和 t{≥条带明亮且前者大致是后者亮
度的 u倍 o说明提取总 • ‘„的完整性 o且未见基因
组 ⁄‘„污染 ∀
2q2 µ¨¤¯2·¬°¨°≤• 质量控制
2q2q1 °≤• 扩增产物 t1uh琼脂糖凝胶电泳 图 t
显示 uyv ¥³的 Β2¤¦·¬±和 tz{ ¥³的 „‹≥°特异性条
带明亮可见 o说明扩增片断准确 ∀
图 t tq⁄‘„ °¤®¨ µ⁄usss~u ∗ xq Β2¤¦·¬±kuyv ¥³l~
y ∗ |q„‹ ≥°ktz{ ¥³l
2q2q2 熔点曲线 „‹≥°和 Β2¤¦·¬±基因的熔点曲
线均为单一的峰 o并且没有加宽变形 o说明本实验可
#sty#
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
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以保证扩增产物的特异性 ∀
2q2q3 标准曲线 每次实验 u份阴性对照样品均
未扩增 o„‹≥°和 Β2¤¦·¬±基因的标准曲线由荧光定
量附带软件绘制 k°∞ xzsslo相关系数分别为
s1||wos1|{xo线性关系良好 o保证扩增过程结果准
确性 ∀
2q3 不同发育阶段小鼠 „‹≥°基因表达
结果显示 o中药干预后 o胎鼠 k孕 tw §l和孕鼠
k孕 ut §l胎肝胎脾的 „‹≥°基因的表达没有明显
改变 ~正常成年鼠骨髓细胞 „‹≥°基因表达量明显
升高 o与对照组比有显著性差异 kΠ s1sxlk表 tl∀
表 t 中药干预前后不同发育阶段小鼠 „‹ ≥°基因
表达的改变 kcξ ? σl
组别 ν
„‹≥°rΒ2¤¦·¬± kΧτl
对照组 中药组
胎鼠 k孕 tw §l | s1y{y ? s1twz s1z{t ? s1tvy
孕鼠 k孕 ut §l | s1{yv ? s1tvy s1zxx ? s1txt
成年鼠 tu s1|xt ? s1ty{ s1{s{ ? s1tsutl
注 }与对照组相比 tl Π  s1sx~Χτ为 µ¨¤¯2·¬°¨°≤• 荧光检测的阈
值 oΧτ越高基因的表达量越低
3 讨论
研究发现 oΒ2地中海贫血的发生很可能还与红
细胞内的一种 Α2珠蛋白稳定蛋白 k„‹≥°l密切相
关 ≈wox  ∀ „‹≥°可以防止 Α2珠蛋白沉淀于血液和活
性的细胞中 o阻断游离的 Α2珠蛋白沉积而对红细胞
造成毒害作用的过程 ≈u  o因此 Š¨¯ 等¯提出 o在正常
红细胞生成过程及一些珠蛋白链平衡失调的疾病
kΒ2地中海贫血 l中 o„‹≥°的表达是必需的 ≈y  ∀已
有研究证实 o„‹≥°表达水平的改变可以影响 Β2地
中海贫血小鼠的严重程度 ≈z  ∀但目前还没有证据
显示 „‹≥°基因序列本身的改变会影响 Β地中海贫
血的临床表型 o更没有药物干预对 „‹≥°数量和功
能是否产生影响的报道 ∀吴志奎课题组在用中药益
髓生血颗粒治疗 Β2地中海贫血疗效机制研究中 o首
次对此进行了初步研究 ∀
Β2地中海贫血属于中医 /童子劳 0 /虚劳 0等范
畴 o多因先天禀赋不足 o精血不充所致 ∀病机上既有
肾精亏虚 o脾肾两虚 o精血不足 o又有黄疸 !积聚 !本
虚标实是其特点 ∀本次纳入病例的主要证型为脾肾
两虚 !精血不足 !气血双亏 ∀益髓生血颗粒是宗 5内
经 6 /精血不足者 o补之以味 0的原则 o根据中医肾藏
精生髓 o精血同源的理论 o采用补肾益髓法 o以滋肾
养肝 !益精生血 !健脾补气 !消痞退黄为治疗原则 o方
中以山茱萸 !何首乌为君 o配以熟地黄 !补骨脂 !黄
芪 !鳖甲等药共奏补肾填精 !益气生血之功 o意在填
补肾中真阴 o使真阴得养 o髓海充盈 o血有生源 ∀课
题组研究已经证实 o益髓生血颗粒对 Β2地中海贫血
有明显的治疗作用 ∀中药治疗可以显著提高患者的
‹¥水平 o‹¥ƒ含量也明显升高 o贫血症状得到缓
解 ≈{2ts  ∀
本实验发现正常小鼠胚胎发育阶段中药益髓生
血颗粒对 „‹≥°的表达无显著性影响 o而对成年小
鼠骨髓 „‹≥°基因表达有较强的刺激作用 o用中药
益髓生血颗粒干预后 o成年小鼠骨髓 „‹≥°表达量
与正常对照组比较明显升高 ∀提示中药治疗 Β2地
中海贫血的机制之一是可能通过促进 „‹≥°基因表
达 o增加 „‹≥°含量 o从而增强 „‹≥°与患者体内游
离 Α2珠蛋白结合的能力 o阻止了游离的相对过剩的
Α2珠蛋白在红细胞和活性细胞中的沉积 o遏止了其
对红细胞的毒害作用 o减少溶血的发生而达到治疗
效果 ∀对于中药刺激 „‹≥°基因表达的具体作用机
制 o还有待于进一步研究 ∀
≈参考文献  
≈t  ⁄ ¥¨²µ¤«• o ∞ ¬¯¨½¨ µ• q Β2׫¤¯¤¶¶¨°¬¤≈ q ‘∞±ª¯  §¨o ussxo
vxv}ttvxq
≈u  Ž¬«° „ o Ž²±ª≠ o ‹²±ª• o ·¨¤¯q „± ¤¥∏±§¤±·¨µ¼·«µ²¬§³µ²2
·¨¬± ·«¤·¶·¤¥¬¯¬½¨ ¶©µ¨¨ ¤¯³«¤2«¤¨ °²ª¯²¥¬±≈  q ‘¤·∏µ¨o ussuo
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≈v  吴志奎 o张新华 o王 蕾 o等 q益髓生血颗粒治疗 Β2地中海贫
血症 |u例临床研究 ≈ q中国中医药信息杂志 ousswottkwl}
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≈w   ¬¨¯¨ Šo  ¤±¶²± o ≤ ¬¯±·²±  q „ ±²√¨¯ µ¨¼·«µ²¬§2¶³¨ ¦¬©¬¦°¤µ®2
µ¨²©·µ¤±¶°¬¶¶¬¥¯¨¶³²±ª¬©²µ° ±¨¦¨³«¤¯²³¤·«¬¨¶≈ q ‘¤·∏µ¨  §¨2
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≈x  ∏½½¤·² o ‘²·¤µ² • q ‹ ¤¨ °²ª¯²¥¬±j¶¦«¤³¨ µ²± ≈¨  q ‘¤·∏µ¨o
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≈y  Š¨¯¯⁄o Ž²±ª≠ o ∞¤·²± ≥„o ·¨¤¯q …¬²³«¼¶¬¦¤¯ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬½¤·¬²± ²©
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≈z  ƒ ±¨ªo Š¨¯¯⁄ „o «²∏≥o ·¨¤¯q  ²¯ ¦¨∏¯¤µ° ¦¨«¤±¬¶° ²©„‹ 2
≥°2° §¨¬¤·¨§¶·¤¥¬¯¬½¤·¬²± ²© ¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬±≈  q ≤¨¯ o¯usswo
tt|kxl}yu|q
≈{  吴志奎 o蔡辉国 q补肾生血药对 Β2地中海贫血基因水平的影
响 ≈ q中医杂志 ot||zov{kul}|tq
≈|  吴志奎 o张新华 q中医理论思维与分子生物学前沿技术相结
合开展肾生髓的现代研究 q国际中西医结合研究 ≈   q香港 }
香港新闻出版社 ot||z}tq
≈ts  吴志奎 o张新华 o方素平 o等 q补肾益髓法治疗 Β2地贫临床研
究 ≈ q中医杂志 oussvowwktul}|tyq
#tty#
第 vu卷第 z期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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„³µ¬¯o ussz
Εφφεχτ ον εξπρεσσιον οφ µ ιχε αλπηα2ηεµ ογλοβιν σταβιλιζινγ προτειν ιν διφφερεντ
δεϖελοπµ ενταλσταγεσ τρεατεδ ωιτη Ψισυι Σηενγξυε γρανυλεσ
Œ˜ ≠²±ª2° ¬¨t o • ˜ «¬2®∏¬t o ≤‹ „Œ¬2°¬±u o ‹ „‘Š ÷¬±2«∏¤v o Œ ¬±t o ≤‹∞‘≠∏2¼¬±ªt o ∂ ÷¬±2¬¬¤t o ‹˜ ÷¬¤²2¼∏±t
(t. ∆επαρτµ εντ οφ Βιολογψ, Γυανγ . ανµ εν Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsssxv, Χηινα;
u. Οπητηαλµ ολογψ Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsssxv, Χηινα;
v. ∆επαρτµ εντ οφ Βλοοδ, vsv ΗοσπιταλοφΠΛΑ, Ναννινγ xvssut, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¬¶¦∏¶¶·«¨ ©¨©¨¦·²©≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨²± ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬± ¶·¤¥¬¯¬½¬±ª³µ²·¨¬±
k„‹ ≥°l °• ‘„ ¬± §¬©©¨µ¨±·§¨ √¨¯²³° ±¨·¤¯ ¶·¤ª¨ ¶°¬¦¨q Μετηοδ : ׫¨ ·²·¤¯ • ‘„¶º µ¨¨ ¬¨·µ¤¦·¨§©µ²° ·«¨ ¥²±¨°¤µµ²º ®¤µ¼²¦¼·¨ ²©
±²µ°¤¯ ¤§∏¯·°¬¦¨ ¤±§·«¨ ®¤µ¼²¦¼·¨ ²©©¨·∏¶ ¬¯√ µ¨¤±§©¨·∏¶¶³¯¨¨ ± ¬± ³µ¨ª±¤±·¨§°¬¦¨ k³µ¨ª±¤±·¨§ut §¤¼¶l ¤±§©¨·¤¯ °¬¦¨ k³µ¨ª±¤±2
·¨§tw §¤¼¶lq ׫¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¯¨ √¨¯ ²©„‹ ≥° °• ‘„ ¬± §¬©©¨µ¨±·§¨ √¨¯²³° ±¨·¤¯ ¶·¤ª¨ ¶°¬¦¨ ¬±·¨µ©¨µ¨§º¬·«≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨º¤¶
° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ µ¨¤¯2·¬°¨°≤• q Ρ εσυλτ: ׫¨ ¬±·¨µ√ ±¨·¬²± ²©≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨¦²∏¯§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ∏³2µ¨ª∏¯¤·¨§·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¯¨ √¨¯¶
²©„‹ ≥° °• ‘„ ¬± ±²µ°¤¯ ¤§∏¯·°¬¦¨q Χονχλυσιον: ׫¨ µ¨¶∏¯·µ¨√ ¤¨¯ §¨·«¤·²±¨²©³²¶¶¬¥¯¨°²¯ ¦¨∏¯¤µ° ¦¨«¤±¬¶° ²©·«¨ ©¨©¨¦·¶¦¤∏¶¨§
¥¼ ≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨¬¶·«¤·¬·¦¤± ³µ²°²·¨·«¨ „‹ ≥° ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²±o µ¨§∏¦¨ ·«¨ ©µ¨¨Α2ª¯²¥¬± §¨ ³²¶¬·o ·«¨ ± ³µ¨√ ±¨··«¨ ³²¬¶²±
·² µ¨¼·«µ²¦¼·¨ ¤±§§¨ ¦µ¨¤¶¨ ·«¨ «¤¨ °²¯¼¶¬¶q
[ Κεψ ωορδσ] ≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨~ Β2·«¤¯¤¶¶¨°¬¤~ ¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬± ¶·¤¥¬¯¬½¬±ª³µ²·¨¬±k„‹ ≥°l~ ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²±
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussy2s|2uz
≈基金项目   国家自然科学基金项目 kvsvssu{wovswssx|ul~黑龙江省自然科学基金重大项目 k≠sv2swl
≈通讯作者   3 季宇彬 oר¯}kswxtl{w{yyssto∞2°¤¬¯}­¼¥ƒ «µ¥¦∏q §¨∏q¦±
西兰花中异硫氰酸盐诱导人肝癌细胞
‹ ³¨Š2u凋亡作用及其机制的研究
季宇彬 t3 o池文杰 u o邹 翔 t o郎 朗 t o王志举 u
ktq哈尔滨商业大学 生命科学与环境科学研究中心 o黑龙江 哈尔滨 txsszy~
uq哈尔滨商业大学 药物研究所博士后科研工作站 o黑龙江 哈尔滨 txsszyl
≈摘要   目的 }探讨西兰花中异硫氰酸盐 k¬¶²·«¬²¦¼¤±¤·¨¶oŒ×≤≥l诱导人肝癌细胞 ‹ ³¨Š2u凋亡过程中的作用及
其可能机制 ∀方法 }不同浓度 Œ×≤≥处理人肝癌细胞 ‹ ³¨Š2uo应用  ××法检测 Œ×≤≥对 ‹ ³¨Š2u细胞增殖的影响 ~流
式细胞仪检测活性氧 !线粒体膜电位 k∃Ω°l和细胞亚二倍体凋亡峰变化情况 ∀结果 }Œ×≤≥可明显抑制 ‹ ³¨Š2u细
胞增殖 ~txovsoysotusouws Λª# °pt的 Œ×≤≥作用于 ‹ ³¨Š2u细胞 uw «后 o细胞内活性氧分别为 kuv1t ? t1{lh o
kxv1v ? v1vlh okxz1| ? u1slh okz|1| ? v1wlh ok|v1w ? u1ylh ~∃Ω°分别为 k|w1{ ? x1xlh ok|t1{ ? x1wlh o
kyy1s ? x1ylh okyx1x ? y1ylh okww1v ? u1zlh ~ysotusouws Λª# °pt的 Œ×≤≥作用于 ‹ ³¨Š2u细胞 w{ «后可见
细胞凋亡率分别为 kty1y ? u1{lh okut1| ? w1wlh okzs1u ? x1vlh ∀结论 }Œ×≤≥能够通过刺激 ‹ ³¨Š2u细胞内活
性氧的产生 o损伤线粒体 o使其膜电位下降 o引起 ‹ ³¨Š2u细胞凋亡 ∀
≈关键词   西兰花 ~异硫氰酸盐 ~细胞凋亡 ~活性氧 ~线粒体膜电位
#uty#
第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz