全 文 ：咳喘穴位贴片与贴散体外透皮特性比较研究
何 群，邓桂明，杨广民，徐 立，王 适
（湖南中医药大学 药学院 药剂教研室，湖南 长沙 ４１０２０８）
［摘要］ 目的：比较咳喘穴位贴片与咳喘穴位贴散的体外透皮特性，从而评价剂型改革的可行性。方法：以丁
香酚，麻黄碱累计透皮率为评价指标，采用高效液相色谱法定量，选择Ｆｒａｎｚ扩散池及离体兔皮法进行体外透皮试
验。结果：贴散中麻黄碱和丁香酚的累计透皮率与时间的关系均为威布尔分布模型，贴片中麻黄碱和丁香酚的累
计透皮率与时间关系的释药曲线符合Ｈｉｇｕｃｈｉ方程模型。以丁香酚为指标，贴片的透皮速度是贴散的２３１９倍，透
皮总量是贴散的１７３８倍；以麻黄碱为指标，贴片的透皮速度是贴散的１７８４倍，透皮总量是贴散的１２１５倍。结
论：咳喘穴位贴片的透皮速度比贴散快，透皮总量比贴散多，透皮特性优于原剂型。
［关键词］ 咳喘穴位贴片；咳喘穴位贴散；Ｆｒａｎｚ扩散池；丁香酚；麻黄碱；ＨＰＬＣ；Ｈｉｇｕｃｈｉ方程；威布尔分布
［中图分类号］Ｒ２８３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１８１８７７０４
［收稿日期］ ２００６１１２０
［基金项目］ 湖南省教育厅０５Ｃ３７１（２００６．０１２００７．１２）
［通讯作者］ 何群，Ｔｅｌ：（０７３１）８４５８２３１，８４５８２３０，１３９７４９３０５１４，Ｅ
ｍａｉｌ：ｈｅｑｕｎ８８＠１２６．ｃｏｍ
咳喘穴位贴散系本院中医附属第一医院长期用
于预防及治疗咳喘及喘息型支气管炎的医院制剂，
由于贴散皆为生药原粉，用时需姜汁调敷，剂型落
后、使用不便、躯干部位不易敷贴稳定、易弄脏衣物、
无法携带、易染菌等缺点，为了克服传统散剂的弊
端，保证疗效，故改成贴片。欧美等国对贴片研究较
多，国内对其的研究处于起步阶段［１］，中药贴片研
究报道极为罕见［２５］。为探讨２种剂型的透皮规律，
比较其有效性的差异，作者以丁香酚，麻黄碱透皮率
为评价指标，采用高效液相色谱法定量，选择 Ｆｒａｎｚ
扩散池离体皮肤法对该穴位贴片与贴散的体外透皮
特性进行了比较研究。
１ 材料与仪器
盐酸麻黄碱（批号１２４１２００００１）、丁香酚（批号
７２５２００２０９）均购于中国药品生物制品检定所；丁
香、麻黄、白芥子、紫菀等８味药材购自湖南省药材
公司经销部，经我院杨广民教授鉴定符合２００５年版
《中国药典》一部有关规定；氮酮（化学纯 天津市科
密欧化学试剂开发中心）；生理盐水（自制）；药用黄
凡士林 （包头黄河石化有限责任公司，批号
２００５０１０１）；单硬脂酸甘油酯（上海三浦化工有限公
司，批号２００２０９１２）；甘油（河南焦作市化工三厂，批
号 ０５０１１６）；Ｓｐａｎ６０（天津市科密欧化学试剂开发
中心，批号２００４０２０２）；Ｔｗｅｅｎｕｍ８０（天津市光复精
细化工研究所，批号２００５１０２２）。
高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ），Ａｇｉｌｅｎｔ１１００系列四
元泵、二极管阵列检测器（ＤＡＤ）、ＡｇｉｌｅｎｔＣｈｅｍＳｔａ
ｔｉｏｎ（Ａｇｉｌｅｎｔ化学工作站）、手动进样器（以上均系安
捷伦科技有限公司）；ＡＲ２１４０型 Ａｄｅｎｔｕｒｅｒ电子分
析天平（感量０１ｍｇ，奥豪斯国际贸易上海有限公
司）；ＤＦ－１０１Ｓ集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义
市英峪予华仪器厂）；Ｆｒａｎｚ扩散池（自制）全玻璃注
射器（１０ｍＬ）（上海注射器厂）；超声波清洗器（昆山
市淀山湖检测仪器厂）。
健康新西兰大白兔（湖南中医药大学实验动物
中心提供，一级）。
２ 方法与结果
２．１ 咳喘穴位贴片及贴散的制备
２．１．１ 咳喘穴位贴片的制备 将本处方８味药材
粉碎过４０目筛，用超临界 ＣＯ２萃取法提取有效部
位，另将硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、药用黄凡士林、羊
毛脂、Ｔｗｅｅｎｕｍ８０，Ｓｐａｎ６０、甘油等水浴加热使其熔
融，降温至４０℃以下，加入上述超临界ＣＯ２萃取物，
混匀，排气泡，涂布于白细布上使其自然冷却，凝固
成２ｍｍ厚、直径为２ｃｍ的贴片。
２．１．２ 咳喘穴位贴散的制备 将本处方７味药材
粉碎过４０目筛，按等量递增法混匀，另将生姜熬成
汁，加入姜汁到上述７味药粉中调成糊状备用。
２．２ 有效成分定量方法
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２．２．１ ＨＰＬＣ测定丁香酚的含量 色谱条件［６］：
ＨｙｐｅｒｓｉｌＧＯＬＤＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５
μｍ）；流动相甲醇水（５５∶４５）；柱温 ４０℃；检测器
ＤＡＤ；丁香酚检测波长 ２８０ｎｍ；流量 １０ｍＬ·
ｍｉｎ－１。理论塔板数按丁香酚、桂皮醛计算不少于
３０００，分离度大于１５。
对照品溶液的制备：精密称取丁香酚对照品
００２１７ｇ，置１００ｍＬ量瓶中，用甲醇溶解并稀释至
刻度，摇匀，即得（每１ｍＬ含丁香酚０２１７ｍｇ）。
供试液的制备：精密称取丁香细粉约０３ｇ，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇５０ｍＬ，称
重，超声处理４５ｍｉｎ，放冷，再称重，用甲醇补足损失
的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液５ｍＬ，置２５ｍＬ
量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
２．２．２ ＨＰＬＣ测定贴散中麻黄碱含量 色谱条
件［７］：ＨｙｐｅｒｓｉｌＧＯＬＤＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，
５μｍ）；甲醇００５ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸二氢钾（磷酸调ｐＨ
３０）（１０∶９０）；柱温２５℃；检测器 ＤＡＤ；检测波长
２０６ｎｍ；流量１０ｍＬ·ｍｉｎ－１。理论塔板数按麻黄
碱计算不少于３０００，分离度大于１５。
对照品溶液的制备：精密称取盐酸麻黄碱对照
品１００ｍｇ，置５０ｍＬ量瓶中，用甲醇溶解并稀释至
刻度，摇匀。精密量取２ｍＬ，置５０ｍＬ量瓶中，用流
动相稀释至刻度，摇匀，即得（每１ｍＬ含盐酸麻黄
碱８μｇ）。
供试液的制备：取麻黄细粉约０２ｇ，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇２５ｍＬ，称重，超声
处理４５ｍｉｎ，放冷，再称重，用甲醇补足损失的重量，
摇匀，滤过，精密吸取续滤液１ｍＬ，置中性氧化铝柱
上，用５０％甲醇洗脱，收集洗脱液９ｍＬ置１０ｍＬ量
瓶中加磷酸１滴，用５０％甲醇稀释至刻度，摇匀，即
得。
２．３ 咳喘穴位贴片与贴散体外透皮特性研究
２．３．１ 离体动物皮肤的制备 取体重合格的兔子，
静养２４ｈ，处死。以８％硫化钠溶液去除兔毛，温水
洗净，取下背部皮肤，去除皮下脂肪及筋膜、血管，再
用生理盐水洗净，置于冰箱中４℃冷藏备用。
２．３．２ 透皮试验基本方法 经皮渗透实验装置与
基本方法采用离体皮肤法，实验采用改良 Ｆｒａｎｚ扩
散池，将兔皮用生理盐水冲洗干净，置于样品室与接
受室之间，固定，角质层朝上，真皮一侧与接受液接
触，排尽气泡，样品室与接受室直径均为２２ｃｍ２，透
皮面积为３８ｃｍ２，接受池中加入１４ｍＬ生理盐水
（接收介质），供给室中加入供试样品２ｇ，将安装好
的Ｆｒａｎｚ扩散池置于（３７±１）℃中搅拌，采用循环
水浴保温，磁力搅拌器的搅拌速度为 １２５０ｒ·
ｍｉｎ－１，于一段时间内间隔一定时间倾取全部接受
液，立即补充等体积的生理盐水，排气泡后继续实
验，取接受液１４ｍＬ，同时补加１４ｍＬ生理盐水，接
受液样品用ＨＰＬＣ测定丁香酚及麻黄碱的含量，以
皮上未透皮样品（２．１．１及２．１．２制备的样品）做比
较，求出各时间下的累计透皮率。
２．３．３ 咳喘穴位贴片与贴散各试验样品累计透皮
率测定结果 将咳喘穴位贴片与贴散按２．３．２的方
法测得丁香酚、麻黄碱的累计透皮率结果如表１、图
１所示。
表１ 咳喘穴位贴片与贴散体外透皮试验 ％
ｔ
／ｈ
丁香酚累计透皮率
贴片 贴散
麻黄碱累计透皮率
贴片 贴散
１ １５０ ０４８ ４７８ １２７
２ ２６９ ０９３ ７４６ ２５６
３ ３８９ １３６ ９５２ ３５７
４ ５０２ １７５ １１２５ ４５１
５ ５８７ ２２３ １２７８ ５８５
６ ６７４ ２６７ １４１７ ６９３
８ ８２２ ３３０ １６６１ ８４８
１０ ９８３ ３７８ １８７８ ９７２
１２ １１３０ ４４６ ２０７２ １１６１
１８ １４１５ ５８２ ２５７６ １５５０
２４ １６９９ ６６８ ３０００ １７５５
３０ １９８１ ８４７ ３３７４ ２２４３
４２ ２３１１ １０８１ ４０２３ ２９６８
５４ ２５６５ １３０６ ４５８５ ３５６９
６６ ２８３９ １５１２ ５０８６ ４０２９
７８ ３１０５ １７１３ ５５４４ ４４７３
９０ ３３４３ １９００ ５９６８ ４９４８
图１ 咳喘穴位贴片与贴散体外透皮试验结果
２．３．４ 咳喘穴位贴片与贴散各试验样品透皮动力
学模型的拟合 将咳喘穴位贴片与贴散各试验样品
透皮实验结果进行数学处理，建立透皮动力学方程，
并将曲线拟合成直线，即线性化处理，见表２。
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表２ 咳喘穴位贴片与贴散各试验样品透皮动力学模型的拟合 ％
数学模型
判断
指标
丁香酚累计透皮率
贴片 贴散
麻黄碱累计透皮率
贴片 贴散
威布尔分布 ｒ ０９９６０ ０９９８０ ０９９９５ ０９９９０
ＳＵＭ ２４８０ １４８７ ９２３２ ５３６６
Ｒ２ ０９９５４ ０９９８９ ０９９９５ ０９９９４
Ｈｉｇｕｃｈｉ方程 ｒ ０９９８９ ０９９４５ ０９９９９ ０９９５２
ＳＵＭ ３６４８ ６３３８ ０００３１５４ ３８９５
Ｒ２ ０９９９３ ０９９５４ ０９９９９ ０９９６０
零级动力学 ｒ ０９７０９ ０９９４３ ０９７８８ ０９９２４
ＳＵＭ １０１８ ６５３２ ２１１６ ６１０６
Ｒ２ ０９８１１ ０９９５３ ０９８７８ ０９９３７
一级动力学 ｒ ０８３３９ ０８６３６ ０８７３７ ０８６５１
ＳＵＭ ８９３８ ３０７７ １５４９ ２２２１
Ｒ２ ０８３３９ ０７７７６ ０９１０８ ０７７１１
对数正态分布 ｒ ０９６６５ ０９２９５ ０９６０８ ０９３１４
ＳＵＭ １１６９ ７８６８ ３８７４ ５３６８
Ｒ２ ０９７８３ ０９４３１ ０９７７７ ０９４４７
注：ｒ为线性相关系数；ＳＵＭ为残差平方和；Ｒ２为拟合度；ｒ临 ＝０８７４（α＝００１；υ＝５）
由数学模型拟合结果可知咳喘穴位贴片组 Ｑ
与ｔ之间有相关性的函数关系为威布尔分布模型、
Ｈｉｇｕｃｈｉ方程模型、零级动力学模型、对数正态分布
模型，进一步比较残差平方和及拟合度，则更接进、
更符合Ｈｉｇｕｃｈｉ方程模型；咳喘穴位贴散组Ｑ与ｔ之
间有相关性的函数关系为威布尔分布模型、Ｈｉｇｕｃｈｉ
方程模型、零级动力学模型、对数正态分布模型，进
一步比较残差平方和及拟合度，则更接进、更符合威
布尔分布模型。
２．３．５ 咳喘穴位贴片与贴散各试验样品透皮动
力学参数的提取及比较 为比较上述各组的透皮
速度及累积透皮量，设累积透皮量达 ３０％所需时
间 Ｔ３０％为透皮速度参数，透皮时间达９０ｈ的累积
透皮率 Ｑ９０ｈ为累积透皮量参数，代入各组对应的
数学函数方程式中，计算出 Ｔ３０％及 Ｑ９０ｈ，根据理论
值拟合的 Ｔ３０％ ９５％可信限的置信区间拟合 Ｔ１０％
±ｚ，其中 ｚ＝ｔ１－０００５／２·Ｓ／｜ｂ｜［１＋１／ｎ＋（ｙ３０％ －
珋ｙ）２／ｂ２ｌｘｘ］
１／２运用统计学方法求出各参数的误差
范围，即９５％置信区间 ｚ，进而求出拟合 Ｔ３０％ ±ｚ，
再换算出 Ｔ３０％ ±ｚ，同样，根据理论值拟合的 Ｑ９０ｈ
９５％可信限的置信区间拟合 Ｑ９０ｈ±ｚ，其中 ｚ＝
ｔ１－０００５／２·Ｓ［１／ｎ＋（ｘ９０ｈ－珋ｘ）
２／ｌｘｘ］
１／２运用统计学
方法求出各参数的误差范围，即９５％置信区间 ｚ，
进而求出拟合 Ｑ９０ｈ±ｚ，再换算出 Ｑ９０ｈ±ｚ，计算结
果见表３，４。
表３ 各试验样品透皮动力学参数Ｔ１０％，Ｑ９０ｈ
剂型 指标 Ｔ３０％ ／ｈ Ｑ９０ｈ／％
贴片 丁香酚 ７１３７ ３３９８
麻黄碱 ２３９９ ５９６８
贴散 丁香酚 １６５５ １９５５
麻黄碱 ４２８０ ４９１２
表４ 各组参数Ｔ３０％，Ｑ９０ｈ的误差范围
剂型 指标 Ｔ３０％ ／ｈ Ｑ９０ｈ／％
贴片 丁香酚 ７１０６～７１６９ ３３６５～３４３１
麻黄碱 ２３８６～２４１２ ５８５２～６０８４
贴散 丁香酚 １６４７～１６６３ １８３９～２０７１
麻黄碱 ４２０７～４３５３ ４８０２～５０２２
由表３，４可知，透皮速度快者Ｔ３０％小，透皮总量
高者Ｑ９０ｈ大，贴片与贴散麻黄碱和丁香酚两个指标
Ｔ３０％及Ｑ９０ｈ可信区间皆未重叠，差别有统计意义，以
丁香酚为指标，贴片的透皮速度是贴散的２３１９倍，
透皮总量是贴散的１７３８倍；以麻黄碱为指标，贴片
的透皮速度是贴散的１７８４倍，透皮总量是贴散的
１２１５倍。所以咳喘穴位贴片的透皮速度比贴散要
快，透皮总量比贴散多。
３ 小结
由本实验结果可知：贴散中盐酸麻黄碱和丁香
酚的累计透皮率与时间的关系均为威布尔分布模
型，贴片中盐酸麻黄碱和丁香酚的累计透皮率与时
间关系的释药曲线符合 Ｈｉｇｕｃｈｉ方程，两者透皮机
理不同。
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透皮速度参数Ｔ３０％相当于透皮总量（最大量接
近６０％）的５０％所需时间，透皮总量参数Ｑ９０ｈ（９０ｈ
后释药量极少，几乎测不出）相当于每贴的使用时
间。
［参考文献］
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选择研究［Ｊ］．药学研究，２００３，６（７）：３９１．
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［４］ 寿 旦，张静芸．化瘀巴布膏体外透皮吸收研究［Ｊ］．中草药，
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成药，２００４，２６（５）：３５６．
［６］ 中国药典［Ｓ］．一部，２００５：９２，２２４．
［７］ 张 杰，杜 进，张志勇．ＨＰＬＣ法测定麻黄碱含量［Ｊ］．黑龙江
医药，２００３，１６（２）：９５．
ＣｕｔａｎｅｏｕｓｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＫｅｃｈｕａｎａｃｕｐｏｉｎｔｐａｔｃｈａｎｄｐｏｗｅｒ
ＨＥＱｕｎ，ＤＥＮＧＧｕｉｍｉｎｇ，ＹＡＮＧＧｕａｎｇｎｉｎ，ＸＵＬｉ，ＷＡＮＧＳｈｉ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，ＨｕＮａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＤｒｕｇ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０２０８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｃｕｔａｍｅｏｕｓｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆＫｅｃｈｕａｎａｃｕｐｏｉｎｔｐａｔｃｈａｎｄｐｏｗｅｒ，ａｎｄｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｐｏｓｓｉｂｉｌ
ｉｔｙｏｆｄｏｓａｇｅｆｏｒｍｒｅｆｏｒｍｏｆＫｅｃｈｕａｎｒｅｃｉｐｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴａｋｅｔｈｅＥｕｇｅｎｄａｎｄＥｐｈｅｄｒｉｎｅａｓｔｈｅｉｎｄｅｘｅｓ，ＨＰＬＣｗａｓｅｍｐｌｏｙｅｄｔｏｄｅｔｅｒ
ｍｉｎｅｔｈｅｉｒｃｏｎｔｅｎｔｓ，ｔｈｅｐｏｎｄｗｉｔｈＦｒａｎｚｄｉｆｕｓｉｏｎｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｍｅａｓｕｒｅｄｔｈｅｃｕｔａｍｅｏｕｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆＰａｔｃｈｍａｔｃｈｅｄ
ｗｉｔｈＨｉｇｕｃｈｉＥｑｕａｔｉｏｎ．ＴａｋｅＥｕｇｅｎｄａｓｔｈｅｉｎｄｅｘ，ｔｈｅｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｏｔａｌｏｆＰａｔｃｈｉｓ２３１９ａｎｄ１７３８ｔｉｍｅｓｏｆｔｈｅｐｏｗｄｅｒ，ａｎｄ
１７８４ａｎｄ１２１５ｔｉｍｅｓｏｆｔｈｅｐｏｗｄｅｒｗｉｔｈｔｈｅＥｐｈｅｄｒｉｎｅａｓａｓｉｎｄｅｘ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＫｅｃｈｕａｎａｃｕｐｏｉｎｔｐａｔｃｈｗａｓ
ｍｏｒｅｒａｐｉｄｔｈａｎｔｈｅｐｏｗｄｅｒ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｔｏｔａｌｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｐｅｒｍｅａｔｉｏｎｏｆｐａｔｃｈｗａｓａｌｓｏｍｏｒｅｔｈａｎｔｈｅｐｏｗｄｅｒ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｋｅｃｈｕａｎａｃｕｐｏｉｎｔｐａｔｃｈ；Ｋｅｃｈｕａｎａｃｕｐｏｉｎｔｐｏｗｄｅｒ；Ｆｒａｎｚｄｉｆｕｓｉｏｎ；ｅｕｇｅｎｄ；ｅｐｈｅｄｒｉｎｅ；ＨＰＬＣ；ＨｉｇｕｃｈｉＥｑｕａ
ｔｉｏｎ；Ｗｅｉｂｕｌｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００６０９２７
［基金项目］ 广西教育厅项目（桂教科研［２００４］２０）
［通讯作者］ 杨克迪，Ｔｅｌ：（０７７１）２９４５６０８，Ｆａｘ：（０７７１）３２３３７１８，Ｅｍａｉｌ：ｋｄｙａｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
ＨＰＬＣ研究玉屏风散活性组分群一釜法提取效果
杨克迪，暴惠宾，李 宏，何开鹏
（广西大学 化学化工学院，广西 南宁 ５３０００４）
［摘要］ 目的：研究玉屏风散中活性成分群（黄芪甲苷、升麻苷及５Ｏ甲基维斯阿米醇苷）的提取条件。方
法：采用一釜法提取玉屏风散中活性成分群，ＨＰＬＣ分析各活性成分含量。以提取物中活性成分含量及得率为指
标，通过正交实验考察乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间和提取温度４个因素对提取效果的影响。结果：较佳的
提取条件为：单位质量（ｇ）药材以１０ｍＬ体积分数为９０％的乙醇，在８０℃下提取４ｈ。提取物中活性成分总含量和
得率分别为０．５３％，０．１６％。结论：在文中较优提取条件下，玉屏风复方中活性成分群得到有效提取。
［关键词］ 高效液相色谱；玉屏风散；活性成分群；一釜法提取
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１８１８８００４
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