全 文 ：ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｎｄＭａｘｉｎｇＳｈｉｇａｎ
ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｂａｓｅｄｏｎｂｉｏｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｓ
ＦＡＮＤｏｎｇｌｉ１，２，ＬＩＡＯＱｉｎｇｗｅｎ２，３，ＹＡＮＤａｎ２，４，ＭＡＸｉａｏｊｕｎ１，ＸＩＡＯＸｉａｏｈｅ２，ＺＨＡＯＹａｎｌｉｎｇ２
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ；２．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，３０２ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＰＬＡ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３９，Ｃｈｉｎａ；
３．ＨｕｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００７，Ｃｈｉｎａ；
４ＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００１５，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｐｒｏｂｅｉｎｔｏｔｈｅｏｂｊｅｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｕｔｈｅｎｔｉｃｉｔｙｏｆｆｏｕｒｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｂｅｔｅｅｎＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｎｄＭａｘｉｎｇ
Ｓｈｉｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎｆｒｏｍｂｉｏｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｐｏｗｅｒｔｉｍｅｃｕｒｖｅｓｏｆｇｒｏｗｔｈｏｆＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓａｔｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａ
ｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｎｄＭａｘｉｎｇＳｈｉｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＴＡＭＡｉｒＩｓｏｔｈｅｒｍａｌＣａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ．Ｔｈｅｇｒｏｗｔｈｒａｔｅ
ｃｏｎｓｔａｎｔｓｏｆｐｒｏｍｏｔｉｖｅａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｏｎｓｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｂｅｔｅｅｎＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｎｄＭａ
ｘｉｎｇＳｈｉｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｆｒｏｍｔｈｅｐｏｉｎｔｏｆｖｉｅｗｏｆＴＣＭｔｈｅｏｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＢｏｔｈｔｈｅＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎａｎｄＭａｘｉｎｇＳｈｉｇａｎｄｅ
ｃｏｃｔｉｏｎｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ．ＴｈｅｋａｎｄＰｍｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｍａｓｓｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅ
ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎｗｉｔｈｗａｒｍｐｒｏｐｅｒｔｙｗａｓｗｅａｋｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＭａｘｉｎｇＳｈｉｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎｗｉｔｈ
ｃｏｏｌｐｒｏｐｅｒｔｙ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ＭａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎｄｅｃｒｅａｓｅｄｈｅａｔｏｕｔｐｕｔｉｎｇｒｏｗｔｈｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｍｏｒｅｗｅａｋｌｙｔｈａｎＭａｘｉｎｇＳｈｉｇａｎｄｅｃｏｃｔｉｏｎ．
Ｔｈｅｒｅｗａｓａｓｔａｂｌｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｍ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｓｔｕｄｙｉｎｇｏｎｂｉｏｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｓｃａｎｓｈｏｗｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆｆｏｕｒｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆ
ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．Ｓｏ，ｉｔｐｒｏｖｉｄｅｓａｎｅｗａｎｄｕｓｅｆｕｌｍｅａｎｓｆｏｒｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｆｏｕｒｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ；ｂｉｏｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃｓ；Ｍａｈｕａｎｇｄｅｃｏｃｔｉｏｎ；ＭａｘｉｎｇＳｈｉｇａｎｄｅｃｏｃ
ｔｉｏｎ
［责任编辑 古云侠］
大黄素对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响
杨永青１，２，杨公社１
（１．西北农林科技大学 动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，陕西 杨凌 ７１２１００；
２．山西师范大学 生命科学学院，山西 临汾 ０４１０００）
［摘要］ 目的：研究大黄素（ｅｍｏｄｉｎ，ＥＭＯ）对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：分离培养大鼠前体
脂肪细胞，按照ＥＭＯ添加剂量不同，把培养板中接种细胞的培养孔随机分为０，５，１０，２０，４０，８０，１６０μｍｏｌ·Ｌ－１处
理组；采用ＭＴＴ比色法和流式细胞术测定ＥＭＯ对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响；采用油红Ｏ染色提取法，检测脂
肪细胞内甘油三酯积聚量的变化；采用形态学观察，检测前体脂肪细胞分化的形态学变化。结果：２０～１６０μｍｏｌ·
Ｌ－１的ＥＭＯ对大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化呈剂量和时间依赖性地抑制作用，并可在一定程度上诱发前体脂肪
细胞凋亡。结论：ＥＭＯ具有潜在的减肥降脂作用。
［关键词］ 大黄素；大鼠；前体脂肪细胞；增殖；分化
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）０５０４２４０４
［收稿日期］ ２００６０４１０
［基金项目］ 国家重点基础研究发展计划资助项目（９７３计
划）（２００４ＣＢ１１７５００）；国家自然科学基金资助项目（３０４７１２３９）
［通讯作者］ 杨公社，Ｔｅｌ：（０２９）８７０９２４３０，Ｅｍａｉｌ：ｇｓｙａｎｇ９９９
＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
人和动物的肥胖被认为是其前体脂肪细胞过度
增殖与分化的结果。抑制前体脂肪细胞的过度增殖
与分化，不仅有利于人类减肥降脂，预防肥胖引起的
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中 国 中 药 杂 志
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相关疾病，而且有望提高畜禽的胴体瘦肉率，特别是
降低猪的背膘厚。ＥＭＯ是传统中药大黄、何首乌、
虎杖等的主要活性成分之一，属蒽醌类衍生物，具有
抗炎、抑菌、免疫调节、抗肿瘤等多种药理作用［１］。
近年来，中医药工作者用高效液相色谱法在含大黄
的中药复方合剂———轻身减肥片、减肥降脂片中精
确检测了ＥＭＯ含量，但 ＥＭＯ是否能够有效地影响
前体脂肪细胞的增殖与分化，还有待于进一步研究。
本试验旨在为该活性成分应用于临床和动物生产，
降低人和动物的体脂沉积提供理论依据。
１ 材料
１．１ 主要仪器
超净工作台（ＳＷ－ＣＪ－１Ｆ型，苏州净化设备有
限公司），ＣＯ２培养箱（ＥＬＩＴＥⅡ型，美国 ＲＥＶＣＯ公
司），微量移液枪（ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ，德国），倒置显微镜、数
码照相机（Ｏｌｙｍｐｕｓ，日本），酶联检测仪（ＤＧ５０３１
型，华东电子集团医疗装备有限责任公司），紫外可
见光分光光度计（ＵＶ－２１０２ＰＣ型，上海龙尼柯仪
器有限公司），高压灭菌锅（ＬＤＺＸ－４０Ⅱ型，上海申
安医疗器械厂），流式细胞仪（ＣＯＵＬＴＥＲＣＲＯＰ．
ＥＳＰ）等。
１．２ 试剂
Ｍ１９９培养基（Ｇｉｂｃｏ公司）；胎牛血清（ＦＣＳ，杭
州四季青）；Ⅰ型胶原酶（美国进口，鼎国生物技术
公司分装）；二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、ＭＴＴ、碘化丙啶
（ＰＩ），ＴｒｉｔｏｎＸ１００、枸橼酸钠等均购自 Ｓｉｇｍａ公司；
油红Ｏ、伊红、苏木精均为上海化学试剂公司进口分
装；其他试剂为国产分析纯。
１．３ 动物
２０日龄健康雄性ＳＤ大鼠，动物合格证号ＳＣＸＫ
（军）２００２－００５，购自第四军医大学实验动物中心。
１．４ 药物
ＥＭＯ（批号 ０７５６２００１１０）对照品，购自中国药
品生物制品检定所。
２ 方法
２．１ 前体脂肪细胞培养与药品处理
２．１．１ 前体脂肪细胞培养 无菌取出大鼠皮下、肾
周围及附睾的白色脂肪组织，用 Ｉ型胶原酶消化
法［２］制备细胞悬液。９６孔培养板接种细胞密度为
每孔１×１０４个，２４孔和６孔培养板接种细胞密度为
每平方厘米５×１０４个。细胞在３７℃，５％ＣＯ２，饱和
湿度条件下培养。接种当日记为第０天，以后每３ｄ
换液１次。
２．１．２ 药品处理 ＥＭＯ溶解在 ＤＭＳＯ中，－２０℃
贮存备用。加药时用含１０％胎牛血清的Ｍ１９９培养
液稀释到所需浓度，要求 ＤＭＳＯ在培养液中的终浓
度不超过１％。
２．２ ＭＴＴ测定
细胞在９６孔培养板中培养至第３天，更换培养
液，分组并加入一定浓度梯度的 ＥＭＯ，使药物终浓
度分别达０，５，１０，２０，４０，８０，１６０μｍｏｌ·Ｌ－１，每一剂
量组设３个重复，以０μｍｏｌ·Ｌ－１的 ＥＭＯ为对照。
在药物作用２４，４８，７２ｈ３个时间点进行ＭＴＴ测定。
检测前４ｈ，每孔加２０μＬＭＴＴ（５ｍｇ·ｍＬ－１），
继续孵育。然后弃培养液，加入１５０μＬＤＭＳＯ／孔，
摇匀，在酶联检测仪 ４９０ｎｍ处测定各组吸光度
（Ａ），并计算实验组抑制率。
抑制率（％）＝（Ａ对照 －Ａ实验）／Ａ对照 ×１００％
２．３ 流式细胞仪检测
２．３．１ 细胞收集 细胞在６孔培养板中培养至第
３天，更换培养液，分组并加入一定浓度梯度的
ＥＭＯ，使药物终浓度分别达到０，４０，８０μｍｏｌ·Ｌ－１。
继续孵育４８ｈ后，以０２５％胰蛋白酶加００２％ 的
ＥＤＴＡ消化，１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，收获细胞。
ＰＢＳ洗３次，加入７０％乙醇固定，４℃贮存过夜后上
机测定。检测时要求每一份样品的细胞数达 ５×
１０５～１×１０６个。
２．３．２ 染色测定 将收集到的细胞以１０００ｒ·
ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，弃乙醇，ＰＢＳ洗２次。每一份样品
用５０μｇ·ｍＬ－１的 ＰＩ染色液１ｍＬ染色３０ｍｉｎ，流
式细胞仪测定细胞周期各时相ＤＮＡ含量，分析细胞
周期变化及细胞凋亡情况。
２．４ 油红Ｏ染色提取
细胞在２４孔培养板中培养至第６天，更换培养
液，分组并加入一定浓度梯度的 ＥＭＯ，使药物终浓
度分别达到０，５，１０，２０，４０，８０，１６０μｍｏｌ·Ｌ－１，每一
剂量组设３个重复。在药物作用２４，４８，７２ｈ３个时
间点进行油红Ｏ染色提取测定。
测定时将待测细胞所在的培养板取出，弃培养
液，ＰＢＳ洗３次，１０％甲醛固定３０ｍｉｎ，ＰＢＳ洗３次，
３２℃干燥，然后用含１％ 油红Ｏ的异丙醇溶液染色
７ｍｉｎ，ＰＢＳ洗３次。最后用１００％异丙醇提取被染
细胞中的油红Ｏ，在可见光分光光度计５００ｎｍ处测
定，记录各组Ａ值，并计算实验组抑制率（计算方法
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同２．２）。以相同处理过的空白孔溶液作参比相。
２．５ 前体脂肪细胞分化的形态学观察
２４孔培养板中用于油红Ｏ染色提取的细胞，培
养至第６天，用０，８０，１６０μｍｏｌ·Ｌ－１的 ＥＭＯ处理
４８ｈ以后，在倒置显微镜下观察并记录各组细胞的
形态学变化。
２．６ 统计学处理
采用Ｅｘｃｅｌ２００３绘制曲线并对统计数据进行单
因素方差分析。
３ 结果
３．１ ＥＭＯ对前体脂肪细胞增殖的影响
图１显示，ＥＭＯ对前体脂肪细胞增殖的抑制率
随药物浓度变化的曲线。其中５～１０μｍｏｌ·Ｌ－１的
ＥＭＯ剂量依赖性地促进前体脂肪细胞增殖，而２０～
１６０μｍｏｌ·Ｌ－１的ＥＭＯ剂量依赖性地抑制前体脂肪
细胞增殖，抑制率为３９％ ～７２６％；而且同一浓度
的ＥＭＯ，对前体脂肪细胞增殖的抑制率随作用时间
的延长而增加。
图１ ＥＭＯ对前体脂肪细胞增殖的抑制作用
３．２ ＥＭＯ对前体脂肪细胞的细胞周期和凋亡的影
响
应用ＰＩ染色流式细胞术检测ＥＭＯ对前体脂肪
细胞的细胞周期和凋亡的影响。结果显示，４０，８０
μｍｏｌ·Ｌ－１的ＥＭＯ组中，Ｇ１期细胞比数显著高于对
照组，Ｓ期细胞比数显著低于对照组，表明 ＥＭＯ可
剂量倚赖性地使前体脂肪细胞的细胞周期呈现
Ｇ１→Ｓ期阻滞。同时与对照组相比，４０，８０μｍｏｌ·
Ｌ－１的ＥＭＯ组在 Ｇ１峰之前均出现了一个较小的凋
亡细胞峰，而且随着 ＥＭＯ浓度的增加，前体脂肪细
胞的凋亡率增加。
３．３ ＥＭＯ对前体脂肪细胞分化的影响
表１表明，不同浓度的ＥＭＯ对前体脂肪细胞的
分化呈剂量依赖性地抑制作用，抑制率为４６％ ～
９５３％；同一浓度的ＥＭＯ对前体脂肪细胞分化的抑
表１ ＥＭＯ各剂量组对前体脂肪细胞分化的抑制率 ％
ＥＭＯ／μｍｏｌ·Ｌ－１ ２４ｈ ４８ｈ ７２ｈ
０ ０ ０ ０
５ ４６２１） ６２５１） １９２５１）
１０ ８５５１，２） １５９１１，２） ２５３５１，２）
２０ １３８２１，２） ２３８６１，２） ３９９１１，２）
４０ １９７４１，２） ３６３６１，２） ５０７０１，２）
８０ ２８２９１，２） ６２５０１，２） ８２６３１，２）
１６０ ４０１４１，２） ８１２５１，２） ９５３１１，２）
注：同一作用时间内，与正常对照组相比１）Ｐ＜００５；与最低剂
量组相比２）Ｐ＜００５
制率随作用时间的延长而增加。
３．４ ＥＭＯ对前体脂肪细胞分化形态的影响
图２表示，前体脂肪细胞培养至第６天，用不同
浓度的ＥＭＯ处理４８ｈ后的细胞形态。其中对照组
９５％ 以上的细胞已充脂，且众多小脂滴正在膨大融
合为大而饱满的脂滴；８０μｍｏｌ·Ｌ－１ＥＭＯ组，约
５０％ 的细胞充脂，且细胞中的脂滴多为小脂滴，外
形致密浓缩的凋亡样细胞也很少；１６０μｍｏｌ·Ｌ－１
ＥＭＯ组，大多数细胞变成了中空的梭形细胞，细胞
中可见的脂滴很少，并有继续消失的趋势，有少量凋
亡样细胞。
图２ ＥＭＯ不同剂量组中前体脂肪
细胞的分化形态（×２５０）
ａ．对照组；ｂ．８０μｍｏｌ·Ｌ－１组；ｃ．１６０μｍｏｌ·Ｌ－１组
４ 讨论
本研究表明，在一定剂量范围内，ＥＭＯ能够剂
量依赖性地抑制大鼠前体脂肪细胞的增殖与分化，
并可在一定程度上诱导前体脂肪细胞凋亡。该结果
与张崇本［３］研究结果基本一致。至于５～１０μｍｏｌ
·Ｌ－１的ＥＭＯ对大鼠前体脂肪细胞的增殖呈一定的
促进作用，分析认为可能是低剂量的ＥＭＯ触动了动
物细胞增殖的某个关键基因或蛋白所致，但确切的
作用机制目前尚未见报道。
外界因素对细胞增殖的影响最终都体现在细胞
周期上。本试验表明，ＥＭＯ可显著引起原代培养的
大鼠前体脂肪细胞 Ｇ１期到 Ｓ期阻滞。该结果与徐
丽敏［４］研究角质形成细胞的结果相似，但与 Ｗａｎｇ
Ｘｉｎｈｕａ［５］研究血管内皮细胞的结果有所不同，认为
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可能是细胞种类不同所致。
ＥＭＯ影响细胞增殖与分化的作用机制目前尚
不清楚。有报道认为［６］，ＥＭＯ可阻滞细胞钙通道，
使钙离子内流受阻。在细胞周期中，需要有钙离子
依赖的蛋白激酶参与；细胞凋亡时，核裂解也是钙离
子依赖的核酸内切酶介导的［７］。因此认为 ＥＭＯ有
可能作为一种钙离子通道阻滞剂起作用。动物前体
脂肪细胞的分化主要受 Ｃ／ＥＢＰα（ＣＡＡＴ／ｅｎｈａｎｃｅｒ
ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎａｌｐｈａ）和 ＰＰＡＲγ２（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆ
ｅｒａｔｏｒｓａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｇａｍｍａ２）的转录调控。当
外界因素使其表达上调，则促进前体脂肪细胞分化，
反之，则前体脂肪细胞的分化受阻［８］。刘勇［９］研究
表明：细胞内钙离子浓度升高，可上调ＰＰＡＲγ和 Ｃ／
ＥＢＰα表达，促进ＦＡＳ活性，有利于前体脂肪细胞分
化。本研究中ＥＭＯ剂量依赖性地抑制前体脂肪细
胞分化有可能与钙离子通道阻滞有关。
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通报，２００３，１９（８）：８５１．
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Ｅｆｅｃｔｏｆｅｍｏｄｉｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｏｆｒａｔｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ
ＹＡＮＧＹｏｎｇｑｉｎｇ１，２，ＹＡＮＧＧｏｎｇｓｈｅ１
（１．ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＦａｔＤｅｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄＭｕｓｃｌｅＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＮｏｒｔｈＷｅｓｔＳｃｉｔｅｃｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｉｓｔｒｙ，
Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｈａｎｘｉＴｅｃｈｅｒｓ＇Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｉｎｆｅｎ０４１０００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｅｍｏｄｉｎ（ＥＭＯ）ｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｒａｔｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ．
Ｍｅｔｈｏｄ：Ｓｅｐａｒａｔｉｎｇａｎｄｃｕｌｔｕｒｉｎｇｒａｔｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ，ｇｒｏｕｐｉｎｇｔｈｅｗｅｌｓｔｈａｔｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｇｒｏｗｉｎｇａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｃｅｒｔａｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａ
ｔｉｏｎｓｕｃｈａｓ０，５，１０，２０，４０，８０，１６０μｍｏｌ·Ｌ－１ｒａｎｄｏｍｌｙ，ＭＴＴｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＣＭ）ｗｅｒｅａｄｏｐｔｅｄｔｏｄｅ
ｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆＥＭＯｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｒａｔｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ．ＴｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆＴＧ（ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）ｉｎａｄｉｐｏｃｙｔｅｓｗａｓａｓｓａｙｅｄｂｙｏｉｌ
ｒｅｄＯｓｔａｉｎｉｎｇ，ａｎｄｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＥＭＯｉｎｔｈｅ
ｒａｎｇｅｏｆ２０１６０μｍｏｌ·Ｌ－１ｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓｉｎａｄｏｓｅａｎｄｔｉｍｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ，
ａｎｄｉｎｄｕｃｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓｉｎａｃｅｒｔａｉｎｄｅｇｒｅｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＥＭＯｓｈｏｕｌｄｈａｖｅａｐｏｔｅｎｔｉａｌｔｏｓｅｒｖｅａｓａｆａｔｒｅｄｕｃｉｎｇｄｒｕｇ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｅｍｏｄｉｎ；ｒａｔ；ｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
［责任编辑 古云侠］
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