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Effects of Carthamus tinctorius injection on bcl-2,caspase-3 expression related to neurons apoptosis after local cerebral ischemia

红花注射液对大鼠局灶性脑缺血后梗死体积和神经元凋亡相关蛋白bcl-2,caspase-3表达的影响



全 文 :≈u  孙启良 o卫永第 o杨伟超 o等 1 独角莲各部位的元素分析 1 吉林
中医药 ot||x ow }ws1
≈v  孙启良 o卫永第 o杨雨东 1 Š≤r≥法分析独角莲叶挥发油 1 中
国药学杂志 ot||x ovsk|l }xzu1
≈w  李 静 o卫永第 o李云辉 o等 1 独角莲块茎挥发油化学成分的研
究 1 吉林农业大学学报 ot||y ot{kul }u|1
≈x  孙淑芬 o曾 艳 o秦 岩 o等 1 独角莲中 y种元素测定 1 微量元
素与健康研究 ot||{ otxkul }z{1
≈y  陈雪松 o陈迪华 o斯建勇 1 中药白附子的化学成分研究k ´ l1
中草药 ousss ovtkzl }w|x1
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νιυµ γιγαντευµ ∞±ª¯1 ϑ Ασιαν Νατ Προδ Ρεσousst ovkwl }uzz1
≈{  孙淑芬 o曾 艳 o赵维诚 1 独角莲抑制恶性肿瘤的实验研究 1
中医研究 ot||{ ottkyl }{1
≈|  尹建元 o朴春姬 o杨建增 o等 1 禹白附抗肿瘤活性研究k ´ l1 长
春中医学院学报 ousss otykul }xu1
≈ts  王顺启 o倪 虹 o陈 力 o等 1 独角莲对肝癌细胞 ≥ ≤2zzut
细胞增殖抑制作用机理的研究 1 细胞生物学杂志 oussv oux
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≈tu  熊 延 o李伟敏 o王 勇 o等 1 细胞分裂素在 °• ‘„ 和蛋白质
水平上同时促进µ¥¦≥基因的表达k英文l1 南开大学学报k自
然科学版l oussv ouyktl }|z1
≈tv  雪 君 o倪培华 o李 莉 o等 1 可疑肺癌病人纤支镜检查标本
的 °xv基因突变检测 1 癌症 ousss ot|kvl }uty1
≈tw  萨姆布鲁克 o⁄ • 拉塞尔 1 分子克隆实验指南 1 上册 1 第 v
版 1 北京 }科学出版社 oussu1xww1
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( Μολεχυλαρ Χψτογενετιχσ Λαβ , Νανκαι Υνιϖερσιτψ, Τιανϕιν vssszt , Χηινα)
[ Αρστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶¦µ¨ ±¨ ¤±§¬§¨±·¬©¼·«¨ §¬©©¨µ¨±·¬¤¯ ¼¯ ¬¨³µ¨¶¶¨§ª¨ ±¨ ¶¬± «¨ ³¤·²¦¨¯¯∏¯¤µ¦¤µ¦¬±²°¤¦¨¯¯¶≥ ≤2zzut µ¨¶³²±¶2
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χλυσιον : ׫¨ µ¨¶¨¤µ¦««¤¶³µ²√¬§¨§¬°³²µ·¤±·¦¯∏¨¶©²µ·«¨ °²¯ ¦¨∏¯¤µ° ¦¨«¤±¬¶° ²©«²º «¨ ³¤·²¦¤µ¦¬±²°¤¦¨¯¯¶µ¨¶³²±¶¨¬±ª·² Τ1 γιγαντευµ1
[ Κεψ ωορδσ] „∞²×Š∞ k·«¨ ¤´ ∏¨²∏¶ ¬¨·µ¤¦·©µ²° §µ¬¨§µ«¬½²° ¶¨²© Τψπηονιυµ γιγαντευµl ~°• ‘„ §¬©©¨µ¨±·¬¤¯ §¬¶³¯¤¼~‹ ³¨¤·²¦¨¯¯∏¯¤µ
≤¤µ¦¬±²°¤¦¨¯¯¶≥ ≤2zzut ≈责任编辑 方文贤 
红花注射液对大鼠局灶性脑缺血后梗死体积和
神经元凋亡相关蛋白 ¥¦¯2u o¦¤¶³¤¶¨2v表达的影响
罗 嘉t o方治平t 3 o周黎明t o来松涛u
kt1四川大学 华西医学中心 基础与法医学院 药理教研室 o四川 成都 ytsswt ~
u1河南省洛阳市急救中心 o河南 洛阳 wztsssl
≈摘要  目的 }探讨红花注射液对神经元凋亡相关蛋白 ¥¦¯2u o≤¤¶³¤¶¨2v表达的影响 ∀方法 }将 ≥⁄大鼠随机分
为缺血对照组 !红花大 !中 !小剂量组 o采用大鼠大脑中动脉栓塞模型以及 ××≤ 染色和免疫组织化学染色方法 o在不
#zz|#
第 u|卷第 ts期
ussw年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ ts
’¦·²¥¨µoussw
同时间点观察各组大鼠脑梗死体积的变化以及 ¥¦¯2u o≤¤¶³¤¶¨2v阳性细胞表达的不同 ∀结果 }在不同时间点各给药
组大鼠的脑梗死体积低于缺血对照组 o有统计学意义k Π s1sxl ~大剂量组脑梗死体积与中剂量组和小剂量组脑梗
死体积相比亦有显著性差异k Π s1sxl o而中 !小剂量组之间比较无显著性差异k Ё s1sxl ∀各给药组大鼠 ¥¦¯2u阳
性细胞表达的数目均高于缺血对照组 o而 ≤¤¶³¤¶¨2v阳性细胞表达数目则低于缺血对照组k Π s1sxl ~大剂量组阳性
细胞表达的数目与中剂量组和小剂量组阳性细胞表达的数目相比亦有显著性差异k Π s1sxl o而中 !小剂量组之间
比较无显著性差异k Ё s1sxl ∀结论 }红花注射液可减少脑梗死体积 o在脑缺血损伤急性期可增加 ¥¦¯2u的表达而
减少 ≤¤¶³¤¶¨2v的表达 ∀
≈关键词  脑梗死 ~红花 ~细胞凋亡 ~¥¦¯2u ~≤¤¶³¤¶¨2v
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlts2s|zz2sw
≈收稿日期  ussw2st2sx
≈通讯作者  3方治平 o∞2°¤¬¯}©¤±ª½«¬³¬±ªt{ ƒ tyv1¦²°
大量动物实验研究结果表明 o脑缺血后神经元
的死亡包括坏死和凋亡过程 ∀在脑缺血急性期 o神
经元坏死和凋亡并存 o细胞坏死位于缺血中心区 o细
胞凋亡主要出现在缺血半暗带 ∀凋亡可能决定了最
终梗死体积≈t  ∀
动物实验研究发现红花可拮抗脑缺血再灌注诱
导的 ≤¤u n r≤¤2°ŽŒŒ活性的抑制≈u  ∀但红花对神经
细胞凋亡的影响尚未见报道 ∀本实验利用局灶性大
鼠脑缺血模型及免疫组织化学染色方法 o观察红花
注射液对大鼠脑缺血后梗死体积和神经元凋亡相关
蛋白 ¥¦¯2u o≤¤¶³¤¶¨2v表达的影响 o进一步从分子水
平上探讨红花的作用机制 o并通过红花注射液大 !
中 !小剂量对脑缺血疗效的观察探讨其量效关系 o以
便为临床用药和开发祖国中药宝库提供更多的依
据 ∀
1 材料和方法
111 动物分组及用药 ≥⁄大鼠 {s只 o体重 uss ∗
uxs ªo雌雄不限 ∀动物等级二级 o由华西医科大学
动物实验中心提供 ∀随机将大鼠分为 ××≤ 染色和
凋亡两组 o每组再分为对照组 !红花大 !中 !小剂量
组 ∀各组又随机分为缺血再灌注 w «和 uu «两小
组 o每小组动物 x只 o共 {组 ∀各治疗组均于手术前
w §每日上午 |时腹腔注射红花注射液 x ou1x ot1ux
°#®ªpt o缺血对照组同上法腹腔注射生理盐水 v
°#®ªpt ∀红花注射液由四川雅安三九药业公司提
供 o每支 us °o批号 stvyuu ∀
112 大脑中动脉闭塞k≤„’l模型的制作 参照
²±ª¤≈v 等的线栓法 o略做改进 ∀用 ts h水合氯醛kw
°#®ªpt o¬³l麻醉大鼠 ∀将麻醉后的大鼠仰卧位固
定 o消毒皮肤 o铺无菌洞巾 o颈正中切口 o分离左侧颈
总动脉 o颈外动脉 o颈内动脉 o结扎颈总动脉 !颈外动
脉 o于颈总动脉分叉切口处向颈内动脉插入栓线约
kt{1x ? s1xl °° o感觉有阻力即达大脑中脉起始部 o
完全阻断其血流 o结扎颈内动脉 ∀所用栓线为直径
s1u °°尼龙渔线 o头段烧圆 o顶端直径约ks1ux ∗
s1u{l °°∀术中室温在kuz ? s1xl ε ∀术后缝合伤
口 o动物回笼 ∀u «后拔出渔线 o即造成缺血再灌注
模型 ∀大鼠 ≤„’ 模型的神经功能评分采用  ¤¨
²±ª¤评分法 os分 }无神经系统功能缺失症状 o活动
正常者 ~t分 }不能完全伸展对侧前爪者 ~u分 }出现
左侧 ‹²µ±¨ µ征 o爬行时出现向右转圈者 ~v分 }行走
时身体向右侧偏瘫侧倾倒者 ~w分 }不能自发行走
者 o意识丧失者 ∀评分为 s分和 w分者均被剔除 o随
机补充 o保证每小组 x只不变 ∀
113 ××≤染色测梗死体积 将 ××≤ 组大鼠分别于
缺血再灌注后 w «和 uu «深度麻醉 o迅速断头取脑 o
于 p us ε 冰箱中速冻 u °¬±o将大脑作连续 u °°冠
状切片 o共 y片 o然后将脑片放入 u h ××≤ 磷酸盐缓
冲液中 vz ε 恒温孵育 t «o正常脑组织染为红色 o梗
死灶呈白色 ∀数码相机拍照后 o应用病理图像分析
仪测量脑梗死面积 ∀根据公式 ς€ k Αt n , n Α±l·r
u算出梗死体积 o其中 τ为切片厚度 oΑ为梗死面
积 ∀
114 ‹∞和免疫组织化学染色 将凋亡组大鼠深度
麻醉后开胸 o夹闭腹主动脉 o从心脏至升主动脉先快
速灌注 vz ε 生理盐水 txs °o再灌注 w h多聚甲醛
txs °o断头取脑 o置于 w h多聚甲醛液中固定 w «o
然后放入 vs h蔗糖中 ow ε 冰箱过夜至组织块沉底 ∀
将组织块取出放入 p us ε 恒温冰冻切片机中从视
交叉前缘向后作连续切片 o片厚 z Λ°∀取相同层面
切片分别做 ‹∞染色和免疫组织化学染色 ∀免疫组
化采用 ≥°法 o⁄„…显色 ∀所用一抗 ¥¦¯2u o¦¤¶³¤¶¨2v
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ ts
’¦·²¥¨µoussw
的浓度均为 tΒwss o由 ≥¤±·¤ ≤µ∏½¨ 公司提供 ~≥³即用
型工作试剂盒由北京中山生物公司提供 ∀
2 统计学处理
应用 ≥°≥≥ts1s版软件进行单因素方差分析 o均
数间两两比较用 θ检验 ∀
3 结果
311 ××≤组梗死体积比较 再灌注 w «各组梗死体
积k°°vl比较 o对照组梗死体积为kt|{1|z ? ux1xyl o
各治疗组与对照组比较均有显著性差异 k Π 
s1sxl ~大剂量组kyv1wz ? tu1xsl中剂量组ktuz1z| ?
tv1x{l和小剂量组ktu|1y{ ? |1tsl相比亦有显著性
差异k Π s1sxl o而中 !小剂量组之间比较无显著性
差异k Ё s1sxl ∀
再灌注 uu «各组梗死体积k°°vl比较 o对照组
梗死体积为ku{s1tu ? tv1{yl o各治疗组与对照组比
较均有显著性差异 k Π  s1sxl o红花大剂量组
ktsv1uv ? ty1uzl与中剂量组kus{1vt ? tt1v|l和小
剂量组kus{1{v ? tu1xul比较亦有显著性差异k Π
s1sxl o中 !小剂量组之间比较无显著性差异k Π 
s1sxlk表 tl ∀
表 t 缺血 u «再灌注 w «ouu «缺血灶体积kcξ ? σ, ν € xl
分组
剂量
r°#®ªpt
再灌注 w «平均
缺血灶体积r°°v
再灌注 uu «平均
缺血灶体积r°°v
‘≥ v t|{1|z ? ux1xy u{s1tu ? tv1{y
红花 t1ux tu|1y{ ? |1ts us{1{v ? tu1xu
u1x tuz1z| ? tv1x{ us{1vt ? tt1v|
x yv1wz ? tu1xs tsv1uv ? ty1uz
注 }红花各组与缺血对照组相比 Π均  s1sx
312 ‹∞染色 再灌注后 w «o对照组缺血灶中心区
大量神经元消失 o出现较多的红色细胞和鬼影细胞
及少量形态完全的可逆性受损细胞 o病灶周围以可
逆性受损细胞及正常细胞为主 o伴轻度炎性细胞浸
润 ~再灌注后 uu «对照组出现明显的缺血坏死 o病
灶中心区神经细胞脱失更明显 o范围较 w «增大 o梗
死血管周围出现大片空泡区 o提示严重脑水肿 o炎性
细胞浸润也较前明显 ∀各治疗组与相应对照组相
比 o坏死区缩小 o神经元受损减轻 ∀其中以红花大剂
量组保护作用最为明显 ∀
313 ¥¦¯2u免疫组化染色 应用 ≥°法 o¥¦¯2u阳性细
胞为胞质成棕黄色 ∀每片选 ts个阳性视野 o大脑皮
层和纹状体区各 x个 o分别计数网格中的阳性细胞
数 o取其均值为该例阳性细胞数 ∀再灌注后 w «可
见 ¥¦¯2u阳性细胞弥散分布于基底节和皮层 o再灌注
后 uu «其数量减少 ∀对照组再灌注后 w «o¥¦¯2u阳
性细胞为kut ? ul o再灌注后 uu «o¥¦¯2u阳性细胞数
明显减少 o为k| ? wl ~红花各剂量组与对照组在对应
时间点相比 ¥¦¯2u阳性细胞数表达增多 o有统计学意
义 ∀其中红花大剂量组与中 !小剂量组之间比较亦
有统计学意义 o中 !小剂量组之间无统计学意义 ∀证
实红花有促进抗凋亡蛋白 ¥¦¯2u的作用 ∀
314 ≤¤¶³¤¶¨2v免疫组化染色 同 313 的计数方法 ∀
再灌注后 w «可见 ≤¤¶³¤¶¨2v阳性细胞仅有少量散在
分布于基底节和皮层 o再灌 uu «显著增多 ∀红花各
剂量组与对照组在相应时间点相比 ≤¤¶³¤¶¨2v阳性
细胞数表达减少 o有统计学意义 ∀其中红花大剂量
组与中 !小剂量组比亦有统计学意义 o≤¤¶³¤¶¨2v阳性
细胞数表达最少 ~中 !小剂量组间无统计学意义 ∀证
实红花有抑制促凋亡蛋白 ≤¤¶³¤¶¨2v的作用k表 ul ∀
表 u 缺血 u «再灌注 w «ouu «…¦¯2uo≤¤¶³¤¶¨2v
阳性细胞数kcξ ? σ, ν €xl
分组
剂量
r°#®ªpt
再灌注 w «
…¦¯2u
再灌注 w «
≤¤¶³¤¶¨2v
再灌注 uu «
…¦¯2u
再灌注 uu «
≤¤¶³¤¶¨2v
缺血对照组 ut? u u|? u |? w yw? tu
红花 t1ux vu? v tu? w uv? u ww? x
u1x vv? z tt? x u|? w wu? y
x wz? w {? u vy? z u|? w
注 }红花各组与对照组相比 Π均  s1sx
4 讨论
脑缺血后神经元死亡是一个极其复杂的病理过
程 ∀研究结果表明缺血后神经元死亡主要表现为坏
死和凋亡两种形式 o分别涉及主动和被动细胞死亡
机制 ∀在脑缺血急性期 o神经元坏死与凋亡并存 o细
胞坏死位于缺血中心区 o细胞凋亡主要出现在缺血
半暗带 ~而在脑缺血的迟发性神经元死亡期 o则以细
胞凋亡为主 ∀凋亡可能决定了最终梗死体积 ∀细胞
凋亡是在生理和病理条件下的一种主动死亡方式 o
是受细胞内基因和一些细胞外因子调控的生物学过
程 ∀自 t||s年以来 o大量的动物实验证实缺血性神
经元损伤过程存在细胞凋亡后 o凋亡相关基因和蛋
白的研究也日趋深入 ∀ …¦¯2u家族蛋白在神经元凋
亡中起重要的作用 o包括抑制凋亡的 ¥¦¯2u o¥¦¯2¯ o
¦¯2t和促进凋亡的 …¤¬o…¬¬等 ∀其中 ¥¦¯2u是重要
的抑制神经元凋亡的蛋白 o在缺血后注定要存活的
神经元中表达 ∀大量的研究表明脑缺血后 w ∗ y «
¥¦¯2u开始表达 o随着缺血坏死的加重 uw «后表达明
显减少 ∀Œ¶¨±°¤±±等研究发现 o在局灶性缺血模型
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中 ¥¦¯2u在缺血半暗带区注定存活的神经元中表达
明显 ∀ ≤¤¶³¤¶¨2v属于白介素 tΒ转换酶家族 o是涉及
细胞凋亡的蛋白酶 ∀ ≤¤¶³¤¶¨2v 以往又被称为
≤°°vu o是凋亡的重要执行者和哺乳动物细胞凋亡
的关键蛋白酶 ∀近来认为 ≤¤¶³¤¶¨2v参与了脑缺血
后神经元损伤的病理过程 o在脑缺血中起重要作
用≈w  ∀ ≤¤¶³¤¶¨ 的本质是一些半胱氨酸蛋白酶 o其剪
切位点是在特异的天冬氨酸k„¶³l残基 ∀它们是
Œ≤∞相关蛋白酶家族的成员 ∀在正常的状态下 o它
们以无活性的酶原形式存在 o凋亡信号刺激其特异
„¶³残基处被剪切后激活 o同时释放 ‘端结构域 ∀
所有的 ≤¤¶³¤¶¨ 就能次序的激活其下游的 ≤¤¶³¤¶¨ o
形成 ≤¤¶³¤¶¨ 级联反应 o将凋亡信号一级级传至凋亡
底物 ∀ ≤¤¶³¤¶¨2v被认为是细胞凋亡蛋白级联反应的
必经之路≈x  ∀ ≤¤¶³¤¶¨2v能裂解 ⁄‘„ 修复相关分子
聚 „⁄°核糖多聚酶 o促使细胞凋亡 ∀研究表明缺血
后 y ∗ { «有 ≤¤¶³¤¶¨2v的表达 o随着缺血坏死的加重
其表达明显增加 ouw «时达高峰 ∀本研究结果进一
步证实了以上结论 ∀
传统中药红花由于具有扩张血管 o降低血液黏
稠度 o抗血小板聚集 o耐缺氧 o提高机体免疫力等作
用而广泛用于临床 ∀本教研室的前期实验也充分证
实了红花具有明显的治疗大鼠心肌缺血 !防止静脉
血栓形成 o提高小鼠耐缺氧能力的作用 ∀本课题研
究结果表明 o在再灌注 w «和 uu «o红花各剂量组都
能明显减少梗死体积 o对脑缺血有保护作用 ∀同时
各剂量组与对照组在对应时间点相比 o¥¦¯2u 表达增
多 o≤¤¶³¤¶¨2v表达减少 o说明红花对脑细胞凋亡有
抑制作用 ∀ ‹∞染色也显示红花能明显保护缺血半
暗带 ∀本实验研究结果为临床缺血性脑卒中的治疗
提供了可靠的实验室依据 ∀
≈参考文献 
≈t  ‹¶∏≤ ≠ o „± Š o¬∏≥ o ετ αλ1 ∞¬³µ¨¶¶¬²± ²©¬°° §¨¬¤·¨ ¤¨µ¯¼ ª¨ ±¨
¤±§ªµ²º·«©¤¦·²µ°• ‘„ ¬± ¤ ²¯¦¤¯ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤ °²§¯¨¬±·«¨ µ¤·1
Στροκε ot||v ouw }z{1
≈u  ‹∏≥ ± o «¤±ª Š ≠ o «¤² • 1 ∞©©¨¦·²© ≤¤µ·«¤°∏¶·¬±¦·²µ¬∏¶²±
≤¤un r≤¤2°ŽŒŒ ¤©·¨µ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤1 Μαγαζινε οφ Ξυζηου Μεδιχαλ
Υνιϖερσιτψk徐州医学院学报l ot||{ otx kvl }uux1
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¥µ¤¯ ¤µ·¨µ¼ ²¦¦¯∏¶¬²± º¬·«²∏·¦µ¤±¬¨¦·²°¼¬±µ¤·¶1 Στροκε ot|{| ous }{w1
≈w  «¤±ª≠ …o∏² ≠ o⁄²±ª • • 1 ∞©©¨¦·²©≤¤¶³¤¶¨2v ²± ±¨ µ²±¬±­∏µ¼²©
¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤1 Γυο ωαι ψι ξυε ναο ξυε γυαν φεν χεk国外医学#脑
血管分册l ousss ou }u|1
≈x  ≤«¨ ±ª ∞ ‹ oŽ¬¶¦« ⁄ Š oετ αλ1≤²±√ µ¨¶¬²± ²© ¥¦¯2u ·² ¥¤¬2¯¬®¨ §¨¤·«
©¤¦·²µ¥¼ ¦¤¶³¤¶¨¶1 Σχιενχε ot||z ouz{ktul }t|yy1
Εφφεχτσ οφ Χαρτηαµ υστινχτοριυσινϕεχτιον ον βχλ2u ,χασπασε2v εξπρεσσιον
ρελατεδ το νευρονσ αποπτοσισ αφτερ λοχαλ χερεβραλισχηεµια
˜’ ¬¤t oƒ„‘Š «¬2³¬±ªt o‹’˜ ¬2°¬±ªt o„Œ ≥²±ª2·¤²u
(t1 Πηαρµαχολογψ ∆επαρτµεντ , Ωεστ Χηινα Μεδιχαλ Χεντερ οφ Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt , Χηινα ;
u1 Εµεργενχψ Χεντερ, Λυοψανγ wztsss , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²© Χαρτηαµυσ τινχτοριυσ ²± ¥¦¯2u o¦¤¶³¤¶¨2v ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²© ¤³²³·²¶¬¶²© ±¨ ∏µ²±¶1
Μετηοδ : ≥⁄µ¤·¶º µ¨¨ µ¤±§²°¼ §¬√¬§¨§¬±·²¬¶¦«¨ °¬¤¦²±·µ²¯ ªµ²∏³o ¤¯µª¨2§²¶¨ ªµ²∏³o °¬§§¯ 2¨§²¶¨ ªµ²∏³¤±§ ²¯º2§²¶¨ ªµ²∏³1 ׫¨ °¬§§¯¨
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ªµ²∏³¶«²º §¨ °²µ¨ §¬¶·¬±¦·¨©©¨¦·k Π s1sxl1 Χονχλυσιον : Χ1τινχτοριυ󬱭¨¦·¬²±¦¤±µ¨§∏¦¨ ·«¨ √²¯∏°¨²©¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬±©¤µ¦·¬²±o¤±§¬±¦µ¨¤¶¨§
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[ Κεψ ωορδσ] ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¬±­¨¦·¬²±~ Χαρτηαµυστινχτοριυ󬱭¨¦·¬²±~¤³²³·²¶¬¶~¥¦¯2u ~¦¤¶³¤¶¨2v
≈责任编辑 方文贤 
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第 u|卷第 ts期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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