全 文 ：Ø栽培Ø
红花种子萌发初期的生理生化研究
高文远 李志亮 肖培根
k中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 北京tsss|wl
摘要 通过分光光度计和电泳等实验技术o研究了红花种子萌发初期过氧化物酶!酯酶和可溶性蛋
白质等的变化∀
关键词 红花 过氧化物酶 酯酶 可溶性蛋白质
红花 Χαρτηαµ υσ τινχτοριυσ1为菊科一年
或二年生植物∀花入药o具活血通经o祛瘀止痛
之功效∀主治痛经!冠心病心绞痛!跌打损伤和
瘀血作痛等症∀红花原产埃及o汉代引入我国o
在我国栽培已有usss多年的历史∀红花的栽培
遍及各省o河南为其主产区o目前生产上仍有一
些问题尚待解决∀我们的观察表明o红花种子在
uxε 条件下能迅速萌发∀为了给生产栽培提供
理论依据o我们从过氧化物酶等几方面进行了
红花种子萌发初期的生理生化研究∀
1 材料与方法
取当年采收的红花种子o摆在培养皿中o用
滤纸保持湿度o放入uxε 的培养箱中进行萌发∀
隔uw小时取样t次o进行各项指标的测定∀
111 过氧化物酶活性的测定
取t°¯红花种子酶的提取液o加入v°¯反
应混合液o同时启动秒表记时o在zxt2• 型分
光光度计上wzs±° 处比色∀对照加s1t° ²¯Ù
的磷酸缓冲液v° k¯³ y1sl∀反应混合液中含有
s1t° ²¯Ù的磷酸缓冲液xs° k¯³ y1slo u u
s1su{°¯和愈创木酚s1st|° ∀¯酶活性的大小以
⁄wzsÙ°¬±Øª鲜重表示∀酶的提取}称取材料
tªo加入 s1t° ²¯Ù的 × µ¬¶2 缓冲液 x°¯
k³ {1xlo于研钵中加入少许石英砂后充分研
磨os∗ wε o{sssµÙ°¬±条件下离心tx°¬±o取上
清液备用∀
112 过氧化物酶!酯酶和可溶性蛋白质的电泳
分离胶浓度为zh o浓缩胶浓度为vh o点样
量为xsΛ ∀¯采用稳流电泳o电流强度us∗ ws° ∀
过氧化物酶染色采用联苯胺2 u u法≈t ~酯酶染
色采用醋酸2Α2萘酯2坚定蓝2 盐法≈u ~可溶
性蛋白质的染色采用考马斯亮蓝 uxs法≈u ∀样
液的提取与过氧化物酶活性测定时相似o将其
提取缓冲液改为蒸馏水即可∀
2 结果与分析
211 过氧化物酶的变化
图t显示了过氧化物酶的活性变化∀可以看
出o随着萌发的进程o酶的活性不断下降o 特
图t 过氧化物酶的活性变化
别是uw∗ w{小时这段时间o酶活性下降更为迅
速∀图u是种子萌发不同时期过氧化物酶同工酶
的电泳图谱∀各酶谱带的迁移率见表t∀可以看
出o随着种子的萌发o同工酶谱变化很大∀种子
未萌发时o只有t条谱带o萌发uw小时后o该带渐
渐消失o同时出现另t条谱带∀随着时间的延长o
同工酶谱带数逐渐增多∀红花种子未萌发时o处
于休眠状态o酶活性很高但同工酶组成很单一
o表明此时种子的代谢活动较简单o过氧化物酶
#{vv# 中国中药杂志 t||y年第ut卷第y期
的作用较单一o随着种子萌发的进程o酶活性尽
管有所下降但同工酶组成越来越复杂o说明红
花的代谢活动越来越复杂o过氧化物酶的作用
也变得越来越复杂∀
图u 过氧化物酶同工酶的电泳图谱
o
o≤ o⁄o∞oƒ1分别为种子萌发s1uwow{ozuo
|yotus小时的酶谱k图uov同l t∗ z1谱带号
¤1深色带 ¥1稍浅色带 ¦1浅色带
212 酯酶同工酶的变化
图v显示了酯酶同工酶的电泳图谱∀各谱带
的迁移率见附表∀可以看出o红花种子未萌发
时o同工酶谱带只有x条∀萌发uw小时后o增加了
两条谱带o此后u∗ y号谱带保持稳定∀萌发
图v 酯酶同工酶的电泳图谱
t∗ tt1谱带号
w{小时后o又增加了v条谱带o此后t∗ z号和ts
号谱带基本上保持稳定∀萌发zu小时后o{号谱
带消失∀|y小时后o|号谱带消失∀萌 发tus小时
后o又增加了tt号谱带∀酯酶同工酶电泳图谱的
变化表明了红花种子萌发过程中内部酯代谢活
动的变化∀
附表 各电泳谱带的迁移率
过氧化物酶
同工酶
谱带号迁移率
酯 酶
同工酶
谱带号迁移率
可溶性
蛋白质
谱带号迁移率谱带号迁移率
t s1uss t s1s{w t s1sws tw s1wyx
u s1vyy u s1uxz u s1syx tx s1xss
v s1wty v s1u|u v s1tss ty s1xws
w s1wyy w s1vyy w s1twx tz s1xzs
x s1xxs x s1wts x s1t|s t{ s1ysy
y s1yss y s1wxu y s1uwx t| s1yws
z s1yxs z s1w|z z s1uyx us s1yzu
{ s1x{| { s1vss ut s1y|x
| s1yut | s1vus uu s1zvx
ts s1y|{ ts s1vx| uv s1zzs
tt s1zwx tt s1v{s uw s1{ss
tu s1wtw ux s1{ux
tv s1wv{
213 可溶性蛋白质的变化
图w显示了可溶性蛋白质的电泳图谱∀各
图w 可溶性蛋白质的电泳图谱
t∗ ux1谱带号
谱带的近移率见附表∀可以看出o红花种子萌发
时蛋白质的变化比较复杂∀其中t∗ vo twotzo
t|∗ ut和uv号谱带较稳定oxots∗ tu和t{号谱
#|vv# 中国中药杂志 t||y年第ut卷第y期
带的颜色深浅有所变化o其余各谱带均有出现
和消失的现象∀萌发uw小时后o各谱带的变化不
大~萌发w{小时后o增加v条谱带~萌发zu小时
后o消失了u条谱带~萌发|y小时后o又消失了x
条谱带~萌发tus小时后o谱带无多大变化∀蛋白
质是基因表达的产物o其电泳图谱的复杂变化
进一步表明了红花种子萌发过程中内部代谢的
复杂变化∀
3 讨论
过氧化物酶是植物体内的保护酶之一o能
防御活性氧和其他过氧物自由基对细胞膜的伤
害≈v ∀此外o它还与细胞内许多代谢活动有
关≈w ∀红花种子休眠时o过氧化物酶活性较高但
组成单一o表明此时酶的功能可能主要是保护
作用∀随着萌发的进程o酶活性降低但组成越来
越复杂o说明酶的功能渐复杂o不再单是保护作
用∀酯酶可能参与若干酶类的修饰!激活或钝
化≈x o与内膜系统的发育有关≈y ∀红花种子萌发
时o要生根和发芽o其中的许多代谢活动都需要
酯酶参与∀花生种子!荚果和子叶的发育过程
中o酯酶同工酶的带数和活性均有所变化≈z ∀可
溶性蛋白质一部分为功能蛋白k酶等lo一部分
为贮备蛋白≈{ o其电泳图谱的复杂变化表现了
内部代谢的复杂变化∀
上述v种指标的检测均表明o红花种子萌发
初期内在代谢活动比较活跃和复杂∀大田栽培
时尽管此时期苗未出土o亦应加强管理o维持土
壤墒情o保证苗齐苗壮∀
4 参考文献
t 袁晓华等1植物生理生化实验1北京}高等教育出版社o
t|{vÚ uvv
u 上海植物生理学会1植物生理学实验手册1上海}上海科学
技术出版社ot|{xÚ vww
v 杨和平等1武汉植物学研究 t||t~|Ú vsy
w ²¦«¯²¤ ·¨¤¯q° ¤¯±·¨¯¯°«¼¶¬²¯ t|zz~t{Ú wyv
x 赖天斌等1中国油料 t|{y~kulv|
y 李春俭等1西北植物学报 t|{z~zÚ uv
z
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t||x) sz) uy收稿
川芎生长土壤的研究3
陈兴福 丁德蓉 刘岁荣 黄文秀 卢进
k四川省中医药研究院药物种植研究所 南川yw{ws{l
摘要 通过产区多点调查研究o结合室内化学分析对川芎生长土壤的分布概况!土类!土壤剖
面特征!理化性质!养分状况等作了研究∀
关键词 川芎 土壤 理化性质 养分状况
川芎 Λιγ υστιχυµ χηυανξ ιονγ ²µ·1为伞形
科多年生草本o根茎供药用o始载于5神农本草
经6列为上品o能活血行气o祛风止痛o治头痛o
胸胁痛o经闭腹痛o风湿痛o跌打损伤∀川芎主产
于都江堰市!新都县等地o是著名的川产道地药
材∀我们于t||t∗ t||w年对川芎生长土壤进行
了研究o现介绍如下∀
1 研究方法
采用野外调查研究与室内化学分析相结合
的方法o进行川芎生长土壤成土因素!土壤剖面
特征!物理化学性质等方面的研究∀
111 野外调查研究}按土壤普查研究的技术规
程o研究了川芎的分布o川芎土壤的成土因素!
剖面特征∀
112 室内分析
按中国科学院南京土壤研究所编著的5土
壤理化分析6中的方法o对川芎土壤的理化性质
等进行了分析测定∀
2 结果与讨论
211 川芎生长土壤的成土因素
21111 川芎的种植历史!地理分布及产区地形
3 为四川省应用基础研究项目内容之一
#swv# 中国中药杂志 t||y年第ut卷第y期