全 文 ：浙贝母低温解除休眠过程中
过氧化物酶的电泳分析
高文远 李志亮 肖培根
k中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 北京 tsss|wl
摘要 为了探讨浙贝母低温解除休眠的生理机制 o利用电泳方法研究了芽 !鳞片近轴面表皮与鳞片
内部组织 v个部位在休眠解除过程中过氧化物酶同工酶的变化 ∀发现芽和鳞片不同部位的同工酶谱带
在解除休眠的不同时期均有变化 o且芽和鳞片近轴面表皮的过氧化物酶活性明显高于鳞片内部组织 ∀
这些结果说明芽和鳞片都参与了休眠的解除 ∀
关键词 浙贝母 休眠 过氧化物酶
浙贝母 Φριτιλλαρια τηυνβεργιι ¬´ q是一种
常用中草药 o其鳞茎具有镇咳 !消除淋巴结肿胀
等多种功效 ∀北京地区栽培的浙贝母每年早春
v月中旬出苗 oy月上旬回苗 o地下部分进入休
眠状态 ∀秋天时地下部分虽然解除了休眠 o但
在芽生长远未到达地面时 o冬季来临 o浙贝母又
被迫进入冬眠状态 ∀这样 o浙贝母一年中地上
部分的生活期不足 v个月 ∀李志亮等1t2经多年
研究发现 { ∗ ts ε 的低温处理 xx天左右可以
解除浙贝母夏季的休眠 o使其在气温比较适宜
的秋季芽出土生长 o达到一年生长两季的目的 ∀
延长了地上部分的光合作用时间 o提高了产量 o
缩短了浙贝母的栽培年限 ∀为了深入探讨浙贝
母低温解除休眠的生理机制 o本文用电泳方法
分析浙贝母低温解除休眠过程中芽 !鳞片近轴
面表皮和鳞片内部贮备组织 v个部位过氧化物
酶同工酶的图谱变化 ∀该研究还可为生产栽培
提供一定的理论依据 ∀
1 材料与方法
实验材料取自本所实验地 ∀待浙贝母地上
部分倒苗 o地下部分进入休眠状态后 o挑选无病
残鳞茎 o清水洗净后放于石英砂上保持湿度 ∀
然后放于 { ∗ ts ε 低温下处理 o定期取样 o液氮
固定后低温冰箱中保存 o最后统一进行电泳分
析 ∀
电泳采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳 ∀分
离胶浓度 ts h o浓缩胶浓度 w h ∀稳流电泳 o电
流强度 us ∗ ws ° o点样量 xs Λ¯ ∀染色于 ux
ε 下进行 ∀染色液的配制 }称取 s qtª联苯胺 o
先
用少量的无水乙醇溶解 o再用s qt °²¯ ro³
x qs的醋酸缓冲液稀释到 tss °¯ o临用前加入
s qx °¯ vs h的 u u ∀染色约 ts分钟 ∀样品的
提取 }取材料 t ªo加入 s qt °²¯ro³{ qx 的
×µ¬¶2≤¯缓冲液 x °¯ o再加入少许石英砂后充
满研磨 os ∗ w ε o{sss µr°¬± 条件下离心 us
°¬±∀上清液与 ts h甘油 tΒt混合 o加入少许
溴酚蓝后点样 ∀
2 结果与分析
图 t ou ov分别为浙贝母低温解除休眠过程
中芽 !鳞片近轴面表皮和鳞片内部贮备组织过
氧化物酶同工酶电泳图谱的变化 ∀首先可以看
出 o图 t ou的谱带颜色普遍深于图 v o表明芽和
鳞片近轴面表皮的过氧化物酶活性高于鳞片内
部组织 ∀
从图 t可以看出 o休眠状态时芽的过氧化
物酶同工酶图谱由 tt条谱带组成 ∀在整个低
温解除休眠过程中 o图谱下部的主要谱带保持
不变 o变化的主要是上部颜色较浅的谱带 ∀低
温作用 tx天后 o减少 t条谱带 o增加 u条谱带 ∀
低温作用 ux 天后 o减少 t 条谱带 ∀低温作用
vx天后 o又减少 t条谱带 o同时 u条谱带的颜
#svx# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 |期
色变浅 ∀低温作用 wx天时的谱带与 vx天时相
同 ∀低温作用 xx天后又减少 t条谱带 ∀
图 t 浙贝母低温解除休眠不同时期芽的
过氧化物酶同工酶的电泳图谱
图 u 浙贝母低温解除休眠不同时期
鳞片近轴面表皮过氧化物酶同工酶的电泳图谱
鳞片近轴面表皮过氧化物酶同工酶的电泳
图谱总的看来与芽的图谱比较接近k图 ul ∀休
眠状态时 o图谱谱带较少 o只有 z条谱带 ∀低温
解除休眠过程中 o图谱下部的主要谱带基本保
持不变 o只是最下部的两条谱带略有变化 ∀变
化主要集中在上部颜色较浅的谱带 ∀低温作用
tx天后新增了 t条谱带 ∀低温作用 ux天后 o
又增加 t条谱带 o且 t条谱带的颜色变浅 ∀低
温作用 vx天后 o又有 t条谱带的颜色变浅 ∀低
温作用 wx天后 o谱带的变化较大 o减少了 v条
谱带 o并有 t条谱带的颜色变浅 ∀低温作用 xx
天后 o最下部的 u条谱带颜色变浅 ∀
从图 v可以看出 o与芽和鳞片近轴面表皮
相比 o鳞片内部贮备组织的过氧化物酶同工酶
谱带较少 o颜色较浅 ∀休眠状态时 o只有 w条谱
带 ∀低温作用 tx天后 o谱带没变化 ∀低温作用
ux天后 o下部的 w条谱带颜色加深 o同时上部
新增 u条谱带 ∀低温作用 vx天时 o谱带与 ux
天时一致 ∀低温作用 wx天后 o上部的 t条谱带
颜色变浅 ∀低温作用 xx天后 o下部增加了 v条
谱带 o这样休眠解除时谱带增加到了 |条 ∀
图 v 浙贝母低温解除休眠不同时期
鳞片内部贮备组织过氧化物酶同工酶的电泳图谱
3 讨论
过氧化物酶同工酶的变化是由于 °
翻译变化的结果1u2 ∀它参与植物体内一系列
生理活性分子的合成或降解 o调节内源激素水
平 o参与结构分子的合成调节 o对细胞分化起重
要作用1v2 ∀它还参与氧化剂 u u 消长的调
控 o从而影响细胞内源环境的氧化还原状
态1w2 ∀浙贝母低温解除休眠过程中不同部位
过氧化物酶同工酶谱带的变化 o说明低温的作
用导致了 ° 翻译的变化 o进一步导致了各
部位生理代谢的变化 ∀这种变化的量变积累到
一定程度时 o便导致了休眠解除的质变 ∀鳞片
近轴面表皮与鳞片内部组织生理变化指标不一
致的现象 o在以前的研究中也曾发现1x2 ∀浙贝
母低温解除休眠过程中芽和鳞片不同部位过氧
化物同工酶的变化表明浙贝母休眠的解除是由
芽和鳞片共同参与完成的 ∀
4 参考文献
t 李志亮等 q中草药 ot|{x ~tyktl }tz
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x 高文远等 q广西植物 ot||w ~twktl }yx
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