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Inhibitory Activity of Diathus superbus L.and 11 Kinds of Diuretic Traditional Chinese Medicines for Urogenital Chlamydia Trachomatis in Vitro

瞿麦等12味利水中药体外抗泌尿生殖道沙眼衣原体活性检测



全 文 :瞿麦等 tu味利水中药体外
抗泌尿生殖道沙眼衣原体活性检测
李建军t o涂裕英t o佟菊贞t o汪培土u
kt1 中山医科大学 附属第一医院 广东 广州 xtss{s ~ u1 广东省武警总队医院 o广东 广州 xtsxszl
≈摘要  目的 }了解常用利水中药体外抗泌尿生殖道沙眼衣原体的活性 ∀方法 }应用微量 ¦≤²¼细胞培养法 o检
测了 tu味利水中药体外抗衣原体的活性 ∀结果 }瞿麦等 tu味中药体外均有不同程度的抗泌尿生殖道沙眼衣原体的
活性 o其 Œ≤¶值从 s qtuu ∗ yu qx °ª# °¯ p t o瞿麦 !茯苓皮 !猪苓 !茵陈的抗衣原体活性较强 ∀并发现 }随着中药浓度的
升高 o衣原体包涵体的体积和数量逐渐减小 !减少 o最后消失 ~未发现这 tu味利水中药对 ¦≤²¼细胞的生长有明显影
响和细胞毒作用 ∀结论 }瞿麦等 tu味利水中药体外均有一定抗泌尿生殖道沙眼衣原体的作用 ∀
≈关键词  利水中药 ~沙眼衣原体 ~非淋菌性尿道炎 ~药物敏感性试验
≈中图分类号 • u{x qx ~• |z qt ≈文献标识码 … ≈文章编号 tsst2xvsukussslts2syu{2sv
非淋球菌性尿道炎是目前最常见的性传播疾病
之一 o其主要致病菌为沙眼衣原体k≤ ×l≈t  ∀近几年
国内有学者应用以清热利水中药为主组成的方剂治
疗非淋球菌性尿道炎取得了良好疗效 o并且未发现
任何毒副作用≈u ∗ x  ∀为了解利水中药是否具有体外
抗衣原体活性并筛选出具有抗衣原体活性的中药 o
我们应用微量 ¦≤²¼细胞培养法 o检测了 tu味常
用利水中药的体外抗泌尿生殖道沙眼衣原体的活
性 o现报道如下 ∀
1 材料与方法
1 q1 利水中药
瞿麦 ∆ιατηυσ συπερβυσ q!茯苓皮 Πορια χοχοσ
k≥«¦º ql • ²©·!猪苓 Πολψπορυσ υ µ βελλατυσk° µ¨¶ql
ƒµ¬¨¶!茵陈 Αρτε µισια χαπιλλαρισ ׫∏±¥q!金钱草
∆εσµοδιυ µ στψραχιφολιυ µ k ’¶¥ql  µ¨µ!淡 竹 叶
Λοπηατηερυ µ γραχιλε …µ²±ª± !防己 Στεπηανια τε2
τρανδρα ≥ q²²µ¨ !泽泻 Αλισµ α οριενταλισ k≥¤° ql
∏½¨ ³q!木通 Χλε µ ατισ αρµ ανδιι ƒµ¤±¦«! 蓄 Πολψ2
γονυ µ αϖιχυλαρε q!通草 Τετραπαναξ παπψριφερυσ
k‹²²®qlŽqŽ²¦«!薏苡仁 Χοιξ λαχηρψµ αϕοβι q∂¤µq
¤2¼∏¨ ±k• ²°¤±ql≥·¤³©均购自广州市药材公司 o经
广州中医药大学药植鉴定教研室黄海波讲师鉴定均
≈收稿日期  t|||2sy2us
≈基金项目  卫生部科研基金中标课题k|y2u2szvl 中华医学
会皮肤科学研究基金课题kt||z2tsvl
为正品中药 ∀
取各味中药适量kxs ªl o用常规水提法提取试
验样品≈y  }先加 ts倍双蒸水kxss ªl浸泡 t«o电炉加
热至沸 owx °¬±后过滤 o药渣再加 ts倍双蒸水kxss
ªl o煮沸后加热 wx °¬±o过滤并合并 u次滤液 o加热
浓缩至 tΒt的水煎液 o相当于 t °¯ 煎液含 t ª中药 o
调 ³‹ 值至 z qw左右 o再 uxss µ# °¬±p t离心 us °¬±
后除去沉淀 o分装后常规高压灭菌消毒 o置 w ε 冰箱
保存备用 ∀
1 q2 菌株
ty株沙眼衣原体均来自我科性病专科门诊患
者泌尿生殖道 o经分离传代扩增后低温冰箱贮存备
用 ∀
1 q3 单层 ¦≤²¼细胞制备
¦≤²¼细胞用含 ts h小牛血清的 • ° Œ tyws
培养液培养 o取含有 s qu ≅ tsy个# °¯ p t的 ¦≤²¼细
胞悬液滴入 |y孔培养板 o置 vz ε 含 x h ≤ ’u培养箱
中培养 uw «o使每孔细胞长成致密单层细胞 ∀
1 q4 方法≈z 
1 q4 q1 衣原体菌株分离 应用 ¦≤²¼细胞培养
法 o将接种病人标本培养阳性的未染色孔衣原体菌
株连续传代 x次 o使大于 |s h的 ¦≤²¼细胞形成包
涵体后 o收集分装置 p {s ε 的低温冰箱备用 ∀
1 q4 q2 衣原体对中药敏感性检测 }先滴定储存的衣
原体菌株能引起 |s h以上细胞感染的接种浓度和
#{uy#
第 ux卷第 ts期
usss年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qts
’¦·qousss
量 o按已确定的接种量将待测分离株加入单层 ¦2
≤²¼细胞孔中 o室温下以 uuss µ#°¬±p t离心 ys °¬±o
然后在培养箱kvz ε ox h ≤ ’ul中温育 t «后弃上清
液 o每孔加入 s qt °¯ 含放线菌酮kt Λª# °¯ p tl的 • °2
Œ tyws培养液 o然后每孔加入用 • ° Œ tyws培养
液稀释的中药 s qt °¯ o放入培养箱继续培养 w{ «o然
后弃上清液吹干 o甲醇固定后再吹干 o用卢戈氏碘液
染色 o光镜下可见胞浆内的衣原体包涵体被染成棕
黄色 ∀光镜下未见包涵体的最低浓度为该中药的最
小抑菌浓度k Œ≤l o每孔平均包涵体细胞计数近于
xs h为 Œ≤xs ∀每次实验均设不加中药的空白对照
和不加衣原体分离株的阴性对照 o每次实验均设复
板 o每种中药均检测其不同浓度对 ¦≤²¼细胞的影
响及细胞毒性作用 o剔除有影响及细胞毒性的中药 o
所有结果均由专人负责观察 !记录 ∀
2 结果
tu味利水中药对泌尿生殖道沙眼衣原体的抗
菌活性结果见表 t ∀其 Œ≤≥ 值从 s qtuu °ª# °¯ p t
至 yu qx °ª# °¯ p t ∀当中药浓度为 u °ª# °¯ p t时≈{  o
≤ ×对各种中药的敏感率见表 u ∀结果显示 }≤ × 对
瞿麦 !茯苓皮 !猪苓 !茵陈具有较高的敏感性 o其
Œ≤≥均值均小于 u °ª# °¯ p t生药 ~对金钱草 !淡竹
叶 !防己 !泽泻有中度敏感性 o其 Œ≤≥ 均值在 u ∗ y
°ª# °¯ p t ~对木通 ! 蓄 !通草 !薏苡仁有较低的敏感
性 o甚至无明显抗 ≤ × 作用 o其 Œ≤≥ 均值在 tu q|w
∗ ys °ª# °¯ p t ∀试验中发现随着中药浓度的增加 o
衣原体包涵体的体积和数量逐渐减小减少 o最后消
失 ∀空白对照孔均见 ≤ × 生长 o阴性对照孔均未见
≤ × 生长 o实验中未发现这 tu味中药对 ¦≤²¼细胞
有细胞毒性作用 ∀
表 t tu味利水中药体外抗衣原体活性结果 °ª# °¯ p t
中药品种
衣原体数

Œ≤≥
s qtuu s quww s qw| s q|{ t q|x v q|t z q{t tx qyv vt qux yu qxs
ξ ? ¶
瞿麦 ty t w ts t ) ) ) ) ) ) s qww ? s qt|xt
茯苓皮 ty ) ) u v | u ) ) ) ) t q{v ? s q|{wy
猪苓 ty ) ) ) t tx ) ) ) ) ) t q{| ? s quwux
茵陈 ty ) ) ) v tu t ) ) ) ) t q{| ? s qyyzx
金钱草 ty ) ) ) ) { z t ) ) ) v qtz ? t qxzyv
淡竹叶 ty ) ) ) ) u tv t ) ) ) v q|t ? w qz{z
防己 ty ) ) ) ) ) tv v ) ) ) w qyw ? t qxzut
泽泻 ty ) ) ) t ) ts w t ) ) x qwv ? v qvyuy
木通 ty ) ) ) ) ) t y { t ) tu q|w ? v qztw|
蓄 ty ) ) ) ) ) ) w tu ) ) tv qy{ ? v qw|zu
通草 ty ) ) ) ) ) ) ) ) z | ww q{| ? ty qsts|
薏苡仁 ty ) ) ) ) ) ) ) ) u tw x{ qx| ? ts qyzus
表 u ty株 ≤ × 分离株对中药的敏感率
中药
浓度r
°ª# °¯ p t
敏感数r

敏感率r
h
瞿麦 u ty tss
猪苓 u ty tss
茵陈 u ty tss
茯苓皮 u tw {z qx
金钱草 u { xs
淡竹叶 u u tu qx
泽泻 u t y qux
其余 x种 u s s
3 讨论
我们的研究结果首次表明 o瞿麦等 tu味利水中
药都具有不同程度的体外抗泌尿生殖道沙眼衣原体
的作用 o以瞿麦的抗衣原体活性最强 o这说明利水中
药在治疗非淋菌性尿道炎中 o也通过其抗衣原体的
活性而达到治疗作用 ∀已有研究表明 }金钱草 !猪苓
等部分利水中药具有体外抑制和杀灭部分病原菌的
作用≈| ots  o这些中药体外抗衣原体的有效成分和作
用机理如何仍不清楚 o值得我们进一步深入研究 ∀
虽然中药本身含有多种有效成分 o其体内的作
用机理十分复杂 o但体外筛选实验为我们临床用药 !
复方研究和进一步提取有效成分提供了基础 o值得
我们运用此方法对其它中草药继续进行筛选检测 o
为开发抗衣原体的中药提供线索和依据 ∀
≈参考文献 
≈t  李建军 o佟菊贞 1 聚合酶链反应检测男性非淋菌性尿道炎沙眼
衣原体和解脲支原体 1 岭南皮肤性病科杂志 ot||y otyktl }t q
≈u  李少文 q清热利湿法治疗衣原体支原体尿道炎 tus例 1 湖南中
医杂志 ot||{ otwkvl }xy q
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第 ux卷第 ts期
usss年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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版社 ot||v1
≈ts  阴 健 q中药现代研究与临床应用 1 µ1 北京 }中医古藉出版
社 ot||x1
Ινηιβιτορψ Αχτιϖιτψ οφ ∆ιατηυσσυπερβυσ Λ .ανδ tt Κινδσ οφ ∆ιυρετιχ Τραδιτιοναλ
Χηινεσε Μεδιχινεσφορ Υρογενιταλ Χηλαµψδια Τραχηοµ ατισιν ςιτρο
Œ¬¤±2­∏±t o× ˜ ≠∏2¼¬±ªt o× ’‘Š ∏2½«¨ ±t o• „‘Š ° ¬¨2·∏u
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ §¨·¨¦··«¨ ¶∏¶¦¨³·¬¥¬¯¬·¼ ²©∏µ²ª¨ ±¬·¤¯ ¦«¯¤°¼§¬¤·µ¤¦«²°¤·¬¶k≤ ×l·²tu ®¬±§¶²©
§¬∏µ¨·¬¦·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶qΜετηοδσ: ׫¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶©²µ≤ × º¤¶§¨·¨¦·¨§
¥¼ °¬¦µ²¦∏¯·∏µ¨ ·¨¦«±¬´∏¨ ²© ¦≤²¼ ¦¨¯¯ ¬± √¬·µ²qΡεσυλτσ: „¯¯ ·«¨ tu ®¬±§¶²© §¬∏µ¨·¬¦·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨
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λατυ󤱧 Αρτε µισσια χαπιλλαρισ º µ¨¨ ¶·µ²±ª¨µq׫¨ ±∏°¥¨µ¤±§√²¯∏°¨²© ≤ × ¬±¦¯∏¶¬²±¶µ¨§∏¦¨§ªµ¤§∏¤¯ ¼¯ ¤±§
§¬¶¤³³¨ ¤µ¨§©¬±¤¯ ¼¯ º¬·«·«¨ µ¬¶¨ ²©¦²±¦¨±·µ¤·¬²±qΧονχλυσιονσ: „¯¯ ·«¨ tu ®¬±§¶²© §¬∏µ¨·¬¦·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨
° §¨¬¦¬±¨ ¶³²¶¶¨¶¶¶²°¨¬±«¬¥¬·²µ¼ ¤¦·¬√¬·¼ ©²µ∏µ²ª¨ ±¬·¤¯ ≤ × q
[ Κεψ ωορδσ] §¬∏µ¨·¬¦·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¬±¨ ¶~¦«¯¤°¼§¬¤·µ¤¦«²°¤·¬¶~±²±ª±²¦¦²¦¤¯ ∏µ¨·«µ¬·¬¶~§µ∏ª
¶∏¶¦¨³·¬¥¬¯¬·¼ ·¨¶·
≈责任编辑 古云霞 
复方丹参滴丸以药品身份获准在俄罗斯上市
天津天士力集团复方丹参滴丸成功通过俄罗斯卫生部处方药注册 o获准在俄罗斯上市 ∀丹参滴丸是俄
罗斯卫生部批准的第一例治疗心血管疾病的复方天然植物的处方用药 ∀申报过程 }复方丹参滴丸通过了俄
罗斯药典委员会 !管理委员会的审查 o并在俄罗斯科学院 !心脏病权威专家指导下 o在几家俄罗斯国家临床医
院进行严格的临床试验 o临床结果表明 o复方丹参滴丸对心绞痛有迅速起效的治疗作用 o并可降低冠心病患
者对硝酸甘油的依赖性 ∀与俄罗斯目前治疗心血管病同类药物相比 o具有疗效好 o安全性好 !质量可靠 !速效
及标本兼治的优点 ∀
据俄罗斯卫生部介绍 o俄罗斯是一个高比例心脑血管患者的国家 o所以复方丹参滴丸成功的处方药身份
在俄罗斯注册将有广阔的市场前景 ∀
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∂ ²¯ qux o‘²qts
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