全 文 ：丹参对小鼠沙眼衣原体输卵管炎模型
影响的实验研究
陈木开 o陈泽雄 3 o韩建德 o廖绮曼
k中山大学 附属第一医院 o广东 广州 xtss{sl
≈摘要 目的 }探讨丹参在治疗沙眼衣原体慢性输卵管炎和纤维化中的作用 ∀方法 }通过阴道内接种建立沙
眼衣原体输卵管炎小鼠模型 ~感染后第 v周分不同处理组 }只用阿奇霉素治疗组 o早期联合丹参治疗组和晚期联合
丹参治疗组 o于感染第 ts周 o观察输卵管的病变 !进行组织病理学观察和胶原增生指数分析 ∀结果 }与模型组比
较 ov组治疗组小鼠出现输卵管阻塞 !积水的并发症发生率和胶原增生指数降低有统计学差异 kΠ s1sxl∀早期给
丹参组与只用阿奇霉素治疗组和晚期给丹参组比较 o出现输卵管阻塞 !积水的并发症发生率和胶原增生指数降低
亦有显著统计学差异 kΠ s1sxl∀结论 }在用阿奇霉素治疗同时 o早期联合丹参治疗 o可明显减少沙眼衣原体感染
致输卵管阻塞 !积水的并发症发生 ~丹参抑制纤维化可能是其药理机制之一 ∀
≈关键词 沙眼衣原体 ~模型 ~小鼠 ~丹参 ~阿奇霉素
≈中图分类号 u{xqx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszlsy2sxuv2sv
≈收稿日期 ussy2tt2tt
≈通讯作者 3 陈泽雄 oר¯}ksusl{zzxxzyy2{v{vo∞2°¤¬¯}½¨ ¬¬²2
±ªvvv tyvq¦²°
沙眼衣原体作为性传播疾病最常见的病因之
一 o在世界范围导致很高的发病率和造成很大的社
会经济负担 ≈t ∀目前衣原体所致非淋菌性尿道炎
发病或宫颈炎率持续上升 o在我国经济发达地区已
占性传播疾病 k≥×⁄l首位 ≈u ∀沙眼衣原体感染女性
可引起慢性输卵管炎 !慢性盆腔炎 k°⁄lo近来被认
为是导致女性不孕的重要原因 ≈v o另外其导致的异
位妊娠 o是女性妊娠死亡的原因之一 ∀近年来对沙
眼衣原体生殖道感染小鼠模型的研究表明 o沙眼衣
原体引起的急 !慢性炎症细胞浸润及纤维增生病理
改变 o可导致输卵管粘连以及盆腔炎症 o这些重要病
理基础导致临床上 °⁄!不孕和异位妊娠 ≈w ∀丹参
Σαλϖια µ ιλτιορρηιζα
ª¨ q是常用活血化瘀中药 o具有
活血通经 o祛瘀生新的作用 o常用于治疗一些有纤维
化病变的病症 ∀本研究通过建立沙眼衣原体输卵管
炎小鼠模型 o探讨丹参在治疗慢性输卵管炎和抗纤
维化中的作用 ∀
1 材料与方法
1q1 材料
动物 }y ∗ {周雌性 ≤v r ¨小鼠 vs只 o体重
t{ ∗ uw ªo分笼颗粒饲料饲养 o每只动物作标记 o在
中山大学动物实验中心清洁级动物房饲养 ∀沙眼衣
原体和细胞株 } ²°±株 k∂ tuvl和 ¦≤²¼细胞购
买于美国
¬√§大学 ×≤≤o本实验室保存传代 ∀药
物 }丹参粉针由哈药集团中药二厂提供 o批号
usswswsysot日 t次 ot次 t支 o静脉滴注 ∀
1q2 方法
1q2q1 细胞培养和动物模型 沙眼衣原体 ²°±
株体外培养 !制备感染液的方法和分别用 u ≅ tsz
ƒ的 ²°±感染液通过阴道内接种感染建立动物
模型 o方法参照文献 ≈wox ∀
1q2q2 分组与给药 小鼠随机分为 x组 o每组 ts
只 ~对照组 }用无感染衣原体的 ¦≤²¼细胞制备的
/感染液 0接种 ~模型组 }在感染衣原体后不用药 ~阿
奇霉素组 }在感染后第 v周 o阿奇霉素 us ª# ®ªpt一
次灌胃给药 ~早期给丹参组 }在感染后第 v周按阿奇
霉素组剂量给药 t次 o而且于第 v周开始按照每日
丹参 ts ª# ®ªpt连续灌胃给药 tw §~晚期给丹参组 }
在感染后第 v周按阿奇霉素组剂量给药 t次 o在感
染后第 z周开始按照每日丹参 ts ª# ®ªpt连续灌胃
给药 tw §~对照组和治疗组给予等体积的生理盐水 ∀
1q2q3 大体观察及组织病理活检 于感染第 ts周
处死小鼠 o观察 !记录输卵管的大体病变 ∀取小鼠输
卵管组织 o行组织固定 !石蜡包埋 !切片 !常规 ∞染
色和 ¤¶¶²±染色 o进行组织病理学观察和胶原增生
#vux#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ y
¤µ¦«o ussz
指数分析 ∀其中胶原增生指数 }用细胞免疫组织化
学定量分析系统将 ¤¶¶²±染色皮肤组织切片的图
像在 ws倍物镜下采集至计算机中 o每只小鼠的切片
随机取 ts个视野 o每个视野为 xts 像素 o以亮绿
色 k胶原纤维 l为阳性 o求得阳性面积 !阳性强度均
值 o将两者相乘得到该指数 ∀
1q2q4 分析与统计 用彩色病理图像分析系统 !细
胞免疫组织化学定量分析系统 ∂ µ¨¶¬²±u1s∀用 ≥°≥≥
ts1s统计分析软件 o均数用 cξ ? σ表示 o计数资料用
ƒ¬¶«¨ µj¶ ¬¨¤¦·检验 o计量资料用 τ检验 ∀
2 结果
2q1 小鼠输卵管阻塞 !积水情况观察
在感染衣原体后第 ts周 o感染小鼠 |sh出现
输卵管阻塞 !积水并发症 k图 to表 tl∀ v组治疗组
小鼠与模型组比较 o出现输卵管阻塞 !积水的并发症
发生率有统计学差异 kΠ s1sxl~另外早期给丹参
组与只用阿奇霉素治疗组和晚期给丹参组比较 o出
现输卵管阻塞 !积水的并发症发生率亦有显著统计
学差异 kΠ s1sxl∀
图 t 小鼠大体解剖图
q对照组小鼠正常输卵管 ~
q感染沙眼衣原体的小鼠输卵管阻塞 !积水
2q2 小鼠输卵管病理改变观察
管壁见纤维细胞及纤维母细胞增生 o致管壁增
厚硬化 o黏膜皱壁变平 !减少 o严重者管腔狭窄甚至
闭塞 o部分管腔扩大 ~ ¤¶¶²±染色显示输卵管管壁
明显纤维细胞增生粘连 k图 ul∀对感染衣原体后第
ts周输卵管管壁纤维化胶原增生指数分析 o与模型
组比较 ov组给药治疗组胶原增生指数有明显降低
kΠ s1sxl∀另外 o早期给丹参组与只用阿奇霉素
治疗组和晚期给丹参组比较 o胶原增生指数有明显
降低 kΠ s1sxlk表 tl∀
图 u 小鼠输卵管病理切片 k ¤¶¶²±染色 o ≅ ussl
q小鼠正常输卵管管壁 ~
q感染沙眼衣原体后小鼠输卵管
管壁明显纤维细胞增生粘连
表 t 小鼠输卵管阻塞 !积水发生率和纤维化胶原
增生指数比较 kcξ ? σ, ν tsl
组别 输卵管阻塞 !积水 rh 胶原增生指数
对照 p p
模型 |s vz wxt ? t yvw
阿奇霉素 ystoul t{ vz| ? t svttoul
早期给丹参 ustl {vy ? tvutl
晚期给丹参 ystoul t| zwy ? s |vytoul
注 }与模型组比较 tl Π s1sx~与早期给丹参组比较 ul Π s1sx
3 讨论
²°±阴道内感染后 o引起小鼠出现类似人类的
生殖道沙眼衣原体感染的表现 o可用于沙眼衣原致
输卵管炎的发病机制研究 ≈wox ∀沙眼衣原体生殖道
感染小鼠模型建立有利于进一步对其不孕机制 !治
疗的研究 ∀
本研究中 o小鼠在感染衣原体后 o可出现输卵管
#wux#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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阻塞 !积水并发症 o发生率与以前研究相近 ≈wox ∀各
治疗组小鼠与模型组比较 o出现输卵管阻塞 !积水的
并发症发生率均有不同程度降低 ~虽然感染后 v §
给予阿奇霉素清除病原治疗 o但部分感染小鼠仍继
续慢性输卵管炎过程 ~丹参与阿奇霉素联合用药 o对
治疗慢性输卵管炎有明显效果 o且早期给丹参和晚
期给丹参组比较 o输卵管阻塞 !积水的并发症发生率
显著减少 ∀提示临床治疗女性沙眼衣原体生殖道感
染时 o早期联合丹参治疗 o有可能减少输卵管阻塞 !
积水的并发症发生 ∀
丹参有活血化瘀 !安神宁心 !抗氧化等功效 o其
临床应用范围广泛 ∀研究证明 o丹参可通过提高血
中超氧化物歧化酶的活性 o清除细胞内氧自由基 o从
而发挥抗炎作用 ~体外实验还发现丹参能从细胞 !分
子 !基因 v个水平上抑制胶原的产生 ≈y ~丹参及其复
方制剂对各种原因引起的心 !肝和肾等器官损伤引
起的纤维化过程有抑制作用 ≈zo{ ∀以前研究已表
明 o衣原体感染输卵管粘连 !阻塞和积水病理基础为
输卵管壁增厚 !纤维组织增生 ≈wox ~本研究发现 o在
感染早期 o即输卵管炎并发症发生前 o应用丹参 o可
以明显抑制输卵管纤维化过程 o而且早期给丹参组
与只用阿奇霉素治疗组和晚期给丹参组比较 o胶原
增生指数有明显降低 ~故丹参有可能通过发挥抗炎
和抑制纤维化过程作用 o减少输卵管阻塞 !积水的并
发症发生 ∀
≈参考文献
≈t ≥¦«¤¦«·¨µo ≥·²± µ¨∞o ²±¦¤§¤q ≥¦µ¨ ±¨¬±ª²©¦«¯¤°¼§¬¤¯ ¬±©¨¦2
·¬²±¶¬± º²° ±¨ ¤·¨±§¬±ª©¤°¬¯¼ ¦¯¬±¬¦¶≈ q • ¶¨· §¨o t||vo
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≈u 秦倩倩 o朱 昊 o张丽芬 qussv年全国性病流行病学分析 ≈ q
疾病监测 ousswotskwl}tvwq
≈v µ¬¨¯⁄q ׫¨ ¦¤µµ¬¨µ¶·¤·¨} ≤«¯¤°¼§¬¤·µ¤¦«²°¤·¬¶≈ q ±·¬°¬2
¦µ²¥≤«¨ °²·«¨ µo t||yot{k≥∏³³¯ l}yzztq
≈w 韩建德 o陈木开 o李 斌 o等 q沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病
理研究 ≈ q中山大学学报 k医学科学版 loussxouykxl}xusq
≈x 陈木开 o韩建德 o陈小红 o等 q ²°±沙眼衣原体致小鼠生殖道
感染模型的初步研究 ≈ q中国人畜共患病杂志 ousswousk{l}
y{zq
≈y 李 明 o王 强 o杨春欣 o等 q丹参对系统性硬皮病成纤维细胞
胶原基因表达的影响 ≈ q中华皮肤病 ot|||ovuktl}wzq
≈z 唐忠志 q丹参对自发性高血压大鼠心肌纤维化的逆转作用及
其机制研究 ≈ q华中科技大学学报 oussuovtkvl}u|utq
≈{ 陈岳祥 o李 石 o张兴荣 o等 q丹参伍用牛磺酸对大鼠 ≤≤ w¯中
毒性肝纤维化的防治作用 ≈ q中华肝脏病杂志 oussuotskul}
tw{tq
Εφφεχτσ οφ Σαλϖια µ ιλτιορρηιζα ον Χηλαµ ψδια τραχηοµ ατισ µ ιχε οφ σαλπινγιτισ
≤∞ ∏2®¤¬o ≤∞ 2¨¬¬²±ªo ¬¤±2§¨ o ±¬2°¤±
(Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλοφ Συν Ψατ2σεν υνιϖερσιτψ, Γυανγζηου xtss{s, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²©Σαλϖια µ ιλτιορρηιζα ²± ·µ¨¤·° ±¨·²©≤«¯¤°¼§¬¤·µ¤¦«²°¤·¬¶¶¤¯³¬±ª¬·¬¶k≤×≥l ¤±§
©¬¥µ²¶¬¶q Μετηοδ : °²∏¶¨ °²§¨ ¯©²µ≤×≥ º¤¶ ¶¨·¤«¯¬¶«¨ §¬± ≤v r¨¥¼ ¬±·µ¤√¤ª¬±¤¯ ¬±²¦∏¯¤·¬²±q¤©·¨µv º¨¨ ®¶°¬¦¨ º µ¨¨ µ¤±§²° ¼¯
§¬√¬§¨ §¬±·²v ªµ²∏³¶q ± ¼¯ ½¬·«µ²°¼¬¬± º¤¶ª¬√ ±¨ ²µ¤¯ ¼¯o ½¬·«µ²°¼¬¬± ¤±§ ¤¨µ¯¼ Σ. µ ιλτιορρηιζα ª¬√ ±¨o ²µ½¬·«µ²°¼¬¬± ¤±§ ¤¯·¨µΣ.
µ ιλτιορρηιζα ª¬√ ±¨q ©·¨µts º¨¨ ®¶o ²¥¶¨µ√¨·«¨ ¦«¤±ª¨ ²©²√¬§∏¦·²©°¬¦¨o ²¥¶¨µ√¨·«¨ «¬¶·²³¤·«²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨ ¤±§¤±¤¯¼¶¬¶¦²¯ ¤¯ª¨ ± «¬¶2
·²¦«¨ °¬¦¤¯ ¬±§¨ ¬q Ρ εσυλτ: v ×µ¨¤·° ±¨·ªµ²∏³¶¬±§∏¦¨ ·∏¥¤¯ ²¦¦¯∏¶¬²± ¤±§«¼§µ²¶¤¯³¬±¬ §¨ ¦µ¨¤¶¨§¤±§·«¨ ¦²¯ ¤¯ª¨ ± «¬¶·²¦«¨ °¬¦¤¯ ¬±§¨ ¬
§¨ ¦µ¨¤¶¨§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ·«¤± ·«²¶¨ ²©±² ·µ¨¤·° ±¨·ª¬√ ±¨ kΠ sqsxlq ∞¤µ¯¼ Σ. µ ιλτιορρηιζα ª¬√ ±¨ ªµ²∏³ ¬±§∏¦¨ ·∏¥¤¯ ²¦¦¯∏¶¬²± ¤±§
«¼§µ²¶¤¯³¬±¬ §¨ ¦µ¨¤¶¨§¤±§·«¨ ¦²¯ ¤¯ª¨ ± «¬¶·²¦«¨ °¬¦¤¯ ¬±§¨ ¬§¨ ¦µ¨¤¶¨§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ·«¤± ²± ¼¯ ½¬·«µ²°¼¬¬± ªµ²∏³²µ¯¤·¨µΣ. µ ιλτιορρηι2
ζα ª¬√ ±¨ ªµ²∏³kΠ s1sxlq Χονχλυσιον: • «¨ ± º¨·µ¨¤·≤×≥ ª¨ ±¬·¤¯ ¬±©¨¦·¬²± º¬·«½¬·«µ²°¼¬¬±o ¬©º¨¦¤± ª¬√¨Σ. µ ιλτιορρηιζα ·µ¨¤·2
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¬¦° ¦¨«¤±¬¶°¬±q
[ Κεψ ωορδσ] ≤«¯¤°¼§¬¤·µ¤¦«²°¤·¬¶~ ¶¤¯³¬±ª¬·¬¶~ °¬¦¨¶~ Σαλϖια µ ιλτιορρηιζα~ ½¬·«µ²°¼¬¬±
≈责任编辑 刘
#xux#
第 vu卷第 y期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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