全 文 ：的机制之一。上述结果表明, 中剂量为最佳剂量。
之所以未表现为剂量依赖性, 可能与胃肠安丸采用
通因通用治疗原则有关。
肠黏膜通透性[ 6] 是指某一特定物质在肠黏膜表
面通过非易化扩散方式渗透的能力。一般以单位时
间内某种物质 (如糖分子) 从肠腔吸收入血并从尿
液排出的量来表示。糖类是目前应用较多的分子探
针,通过测定尿液中 L/ M 值, 探讨药物对肠黏膜通
透性的影响。本研究对实验大鼠尿液 L/ M 值检测
结果显示:模型组由于肠黏膜屏障损伤, L / M 值显
著升高 ( P< 0
05) , 说明其存在黏膜通透性增高, 屏
障保护作用下降;而胃肠安丸组 L/ M 值显著降低,
提示胃肠安丸可能通过降低肠黏膜通透性, 保护肠
黏膜屏障,从而有效阻止病原微生物及其毒素经肠
腔进入消化道以外的器官,发挥止泻作用。
长期以来, 胃肠动力异常被认为是 IBS 症状产
生的主要病理基础, 且 IBS 患者胃肠动力异常具有
广泛性、高反应性的特点。本研究对模拟 IBSD 大
鼠的餐后空肠平滑肌运动检测结果显示: 模型大鼠
平滑肌运动幅度较对照组显著增大,出现肠动力紊
乱;而胃肠安丸可使平滑肌运动幅度显著下降。结
合血清 NO 测定结果推测, 胃肠安丸可能通过降低
空肠平滑肌运动的幅度、缓解平滑肌痉挛、干预或调
整小肠传输功能紊乱, 延长肠内容物在肠腔内停留
时间,从而促进乳糜及水分吸收,达到止泻目的。
胃肠安丸由木香、麝香、檀香、沉香、朱砂、川朴、
枳壳、大黄、巴豆霜、川芎、大枣 11味中药组成, 其中
木香、檀香、沉香、川朴、枳壳具有行气调中止痛之
功,朱砂逐痰涎除中恶腹痛,川芎、麝香活血以行气,
大黄、巴豆霜攻下积滞, 大枣调和诸药, 综观全方具
有芳香化浊、理气止痛、健胃导滞等功效, 组方注重
攻补兼施,寒热并用,临床常用于治疗多种消化系统
疾病。本研究表明该方作为一个中药复方制剂, 是
从多方面发挥其对 IBSD 的治疗作用, IBS 的病因
未明确、病理改变复杂, 胃肠安丸对 IBSD 的作用
机制还有待进一步研究。
参考文献:
[ 1]
Natalia Nieto, Marla Dolores Mesa
Cont ribu tion of polyun
satu rated fat ty acids to intest inal repair in proteinenergy m al
nut rit ion [ J]
Dig Dis S ci , 2007, 52( 6) : 14851496

[ 2]
徐海珍, 谢建群, 施
斌
腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏
膜炎性细胞因子的表达及温中健脾方对其影响的研究 [ J ]

上海中医药杂志, 2007, 41( 6) : 6972

[ 3]
周干南
小鼠腹泻模型的制备及与腹泻指数的应用 [ J]
中
草药, 1994, 25( 4) : 195199

[ 4]
Powell A K, Byw ater R A
Endogen ou s nit ric oxide release
modulates the direction and frequen cy of colonic migratin g
motor complexes in the isolated mouse colon [ J ]
N eur og as
t roente rol Mot il , 2001, 13( 3) : 221

[ 5]
王继峰
生物化学 [ M ]
北京:中国中医药出版社, 2007

[ 6]
尚晓滨, 吴成中, 李东华, 等
活血化瘀中药对清解通下中
药增效作用的实验研究 [ J]
中国中西医结合外科杂志,
2006, 12( 2) : 125128

八味沉香胶囊对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制探讨
李月玲1 , 杨玉梅1 * ,钱立娜1 ,崔成立1 , 王玉华2
收稿日期: 20100521
基金项目:内蒙古自然科学基金重点项目 ( 200508010902)
作者简介:李月玲( 1979 ) ,女,锡伯族,辽宁省新民县人,讲师,硕士,从事药理学的教学、科研工作。
T el : ( 0472) 7167843
Email: yueyue_lyl@ 126. com
* 通讯作者
杨玉梅
T el: ( 0472) 7167824
Fax: ( 0472) 7167824
Email : yym457@ yahoo. com. cn
( 1
包头医学院,内蒙古 包头
014060; 2
内蒙古医学院, 内蒙古 呼和浩特
010059)
摘
要:目的
观察八味沉香胶囊对大鼠局灶性脑缺血的保护作用,初步探讨其作用机制。方法
采用改良的线
栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型 ( MCAO) ,进行大鼠的神经行为学评分,测定丙二醛 ( MDA ) 水平、超氧化物歧
化酶 ( SOD) 活性,病理切片观察神经元形态结构的改变 ,免疫组织化学方法检测核因子
B ( NF
B) 蛋白的表达。
结果
八味沉香胶囊能减少局灶性脑缺血大鼠的神经功能评分, 降低局灶性脑缺血后血清中 MDA 水平, 提高
SOD 活性, 神经细胞形态的改变与模型组比较明显减轻,并且抑制 NF
B 的表达。结论
八味沉香胶囊对大鼠局
灶性脑缺血有明显的保护作用,其机制可能是通过有效地拮抗自由基损伤,提高脑组织抗氧化能力, 抑制炎症与免
疫反应来实现的。
关键词:八味沉香胶囊; 局灶性脑缺血; 丙二醛; 超氧化物歧化酶; NF
B
中图分类号: R286
10


文献标识码: A


文章编号: 0253 2670( 2010) 12 2043 03
!2043!中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 12 期 2010 年 12月


八味沉香胶囊是由沉香、肉豆蔻、丁香、广枣、木
香等组成的蒙药制剂,具有平息气血相搏、止痛、补
心益气之功效, 用于气血相搏、心区疼痛、昏厥、心
悸、失眠、急躁不安、健忘症、癫痫等的治疗。笔者系
统研究了八味沉香胶囊对大鼠心脑血管功能的影
响[ 1]。本研究拟观察八味沉香胶囊对脑缺血损伤的
保护作用并初步探讨其作用机制,为其临床应用提
供实验依据。
1
材料
1
1
药物和试剂:八味沉香胶囊内容物 (含槲皮素
68
32 g / g) ,内蒙古医学院药学院提供, 临用时充
分研磨后用蒸馏水配成混悬液。尼莫地平片 (西安
博爱制药有限责任公司,批号 E07034) ; 2, 3, 5三苯
基氯化四氮唑 ( T TC) 染色剂 (北京化学试剂公
司) ; 超氧化物歧化酶 ( SOD) 测试盒、丙二醛
( MDA) 测试盒 (南京建成生物工程研究所) ; 核因
子
B ( NF
B) 试剂盒 (北京百奥泰斯公司)。
1
2
动物: 健康 Wistar 大鼠, 清洁级,由内蒙古大
学实验动物中心提供, 许可证号: SCXK ( 蒙 )
20020001。
1
3
主要仪器: 721 B 型分光光度计 (上海第三
分析仪器厂) ;离心机 (北京医疗仪器修理厂) ; 数码
照相机 (日本 Sony ) ; BI 2000 图像分析系统 (成
都盟泰科技有限公司)。
2
方法
2
1
分组与给药:健康雌性 Wistar 大鼠 72 只,体质
量 ( 220 ∀ 50) g,随机分为假手术组 (生理盐 20 mL/
kg) ,模型组 (生理盐水 20 mL/ kg) ;尼莫地平组 ( 0
024
g/ kg) ;八味沉香胶囊大、中、小剂量 ( 1
2、0
6、0
3 g/
kg) 组;每组 12只。各组大鼠均 ig 给药,连续 24 d, 1
次/ d,于末次给药 1 h 后开始造模。
2
2
大鼠局灶性脑缺血模型的制备:采用改良的栓
线法制备局灶性大鼠脑缺血模型[ 2] 。室温 ( 22 # )
条件下, 3% 戊巴比妥钠 30 mg/ kg ip 麻醉大鼠后,
仰卧固定于手术台上。颈正中切开,分离左侧颈总
动脉 ( CCA)、颈外动脉 ( ECA )、颈内动脉 ( ICA ) ,
结扎 ECA、CCA 近心端; 在 CCA 近动脉分叉处剪
一小口,提起 ECA、CCA 以便止血[ 3]。缓慢向 ICA
插入栓线 (向内上方角度插入, 否则易误入翼腭动
脉) , 直到有阻力不能再插入为止, 回抽少许, 栓线插
入深度为 ( 20 ∀ 2) mm (自 CCA 分叉处算起)。结
扎 ICA,缝合皮肤。假手术组仅切开皮肤和剥离血
管, 不进行栓线处理, 其余操作同他组。术后大鼠
保温。
2
3
观察指标:大鼠清醒后立刻观察动物行为障碍程
度;采取双盲法并参考 Longa 等[ 4]的方法对大鼠行为
障碍分级评分。脑缺血 24 h 后, 3% 戊巴比妥钠 30
mg/ kg ip麻醉大鼠,取血制备血清,用 721 B 分光光
度计按试剂盒说明书测定 SOD 活性及 MDA 水平。
取血后断头取脑,置于 - 20 # 低温冰箱快速冷冻 20
min;去除嗅球、小脑和低位脑干, 冠状切片, 每片厚 2
mm,将脑片置于玻璃皿中,加入 1% TTC 溶液, 37 #
水浴中避光孵育 20 min,待显色完全后置于甲醛溶液
中固定。将梗死区与切下的 5等份脑分别称质量,计
算梗死区占总脑切片的质量百分比,即梗死范围。其
余脑组织进行固定,石蜡包埋。每个组织块连续切片
进行 HE染色和免疫组织化学染色。免疫组织化学染
色按试剂盒说明书进行,用 BI 2000 图像分析系统进
行图像分析,检测分析阳性细胞。
2
4
统计学处理: SPSS 11
5 统计软件进行数据处
理分析,所有数据均用 x ∀ s 表示,组间差异的显著
性检验用 t 检验。
3
结果
3
1
一般情况: 实验期间各组大鼠摄食、进水及生
长状况良好,给药 24 d 未有大鼠死亡。手术过程中
共死亡 9 只。实验开始与结束各组大鼠体质量无
显著差异。
3
2
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠神经功能的影响:
与模型组比较,八味沉香胶囊各组和尼莫地平组均
有降低神经功能评分的趋势,但差异无统计学意义,
结果见表 1。
3
3
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠血清中 SOD 活
性和 MDA 水平的影响:与模型组比较,八味沉香胶
囊各剂量和尼莫地平均可明显提高血清中 SOD 活
性,降低 MDA 水平 ( P< 0
05)。见表 1。
3
4
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠脑梗死范围的影
响:与模型组比较,八味沉香胶囊各剂量和尼莫地平
均可使脑梗死范围缩小 ( P< 0
01)。见表 1。
3
5
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠脑病理组织学的
影响:经 HE 染色后, 光镜下可见假手术组大鼠脑
组织神经元基本正常, 核居中,无神经元变性、坏死,
无细胞水肿及间质水肿; 模型组神经元变性、坏死、
结构模糊、胞体肿胀,有不同程度的核深染、核固缩、
核溶解,神经元数目明显减少,有神经细胞自溶及坏
死,间质水肿明显,细胞及血管周围间隙增大;尼莫
地平组细胞间隙增宽,神经细胞和神经胶质细胞水
!2044! 中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 12 期 2010 年 12月
表 1
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠神经功能、血清 MDA 和 SOD、梗死范围和 NF
B 蛋白表达的影响 (x ∀ s)
Table 1
Effect of Bawei Chenxiang Capsula on neurological function, MDA and SOD in serum, cerebral in farction range,
and NF
B protein expression of focal cerebral ischemia injury in rats ( x∀ s)
组别 剂量/ ( g ! kg - 1 ) 动物/只 神经功能评分 SOD/ (U ! mL - 1) MDA/ ( nmol! mL - 1) 梗死范围/% 阳性细胞数/个
假手术
- 12

0 160
58 ∀ 6
08 6
73 ∀ 1
72



0 5
25 ∀ 1
42
模型
- 10 2
2 ∀ 0
92 128
76 ∀ 10
71# # 10
43 ∀ 2
91# # 38
88 ∀ 5
98# # 27
70 ∀ 4
22# #
尼莫地平 0
024 10 1
8 ∀ 0
92* * 156
53 ∀ 6
99* * 6
44 ∀ 1
60* * 24
92 ∀ 6
24* * 12
70 ∀ 2
58* *
八味沉香胶囊 1
2 10 1
6 ∀ 0
70* * 159
60 ∀ 8
44* * 7
45 ∀ 2
01* 30
26 ∀ 3
31* * 14
20 ∀ 3
26* *
0
6 10 1
9 ∀ 0
74* * 159
55 ∀ 8
53* * 8
03 ∀ 2
05* 31
63 ∀ 3
84* * 18
10 ∀ 3
14* *
0
3 11 1
9 ∀ 0
83* * 158
74 ∀ 8
99* * 8
39 ∀ 1
87* 33
84 ∀ 5
13* 22
27 ∀ 2
72* *


与假手术组比较: # # P < 0
01;
与对照组比较: * P < 0
05
* * P< 0
01


# # P< 0
01 v s Sham operat ion;
* P < 0
05
* * P < 0
01 v s cont rol grou p
肿及间质疏松程度均明显减轻; 八味沉香胶囊大剂
量组神经细胞排列基本整齐, 少数细胞轻度肿胀, 核
仁清楚,胞膜连续;中剂量组神经细胞及胶质细胞仅
有轻微水肿,核仁清晰, 胞膜完整,个别细胞坏死溶
解;小剂量组神经细胞和神经胶质细胞有轻度水肿。
见图 1。
3
6
八味沉香胶囊对大鼠局灶性脑缺血损伤后
NF
B 蛋白的影响: 免疫组化结果显示, 缺血损伤可
以增加 NF
B在脑组织中的表达; 与模型组比较,八
味沉香胶囊各剂量和尼莫地平均可明显抑制 NF
B
的表达 ( P< 0
05)。见图2和表1 (表达NF
B 的阳
性细胞为光镜下见胞核内有棕黄色颗粒)。
图 1
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠大脑病理组织学的影响
Fig. 1
Ef fect of Bawei Chenxiang Capsula on pathological change of focal cerebral ischemia injury in rats
图 2
八味沉香胶囊对脑缺血大鼠脑组织中 NF
B 蛋白表达的影响
Fig. 2
Effect of Bawei Chenxiang Capsula on NF
B protein expression of focal cerebral ischemia injury in rats
4
讨论


本实验结果显示, 八味沉香胶囊能减轻脑缺血
大鼠的神经功能障碍, 明显提高脑缺血后血清中
SOD 活性,降低 MDA 水平; 明显抑制 NF
B 的表
达,减轻缺血神经元功能损害,对局灶性脑缺血损伤
具有明显的保护作用。近年来的研究表明, 脑缺血
损伤与炎症反应密切相关, 当脑缺血时氧自由基和
其他信使刺激可激活 NF
B、趋化因子和炎性细胞
因子等。活化的 NF
B 又可与多种炎性介质基因
上的启动子或增强子中的
B 序列作用,诱导炎性
介质的表达,促使炎性细胞在脑组织中浸润引起损
伤[ 5]。本实验结果提示, 八味沉香胶囊对氧自由基
的产生具有抑制作用, 同时也增强内源性氧自由基
清除系统的功能,减轻脂质过氧化反应,并且抑制炎
症与免疫反应,从而达到对缺血脑组织的保护作用。
参考文献:
[ 1]
杨玉梅, 覃建民, 李月玲, 等
八味沉香胶囊对大鼠血栓形
成和微循环的影响 [ J]
中国民族医药杂志, 2010, 16( 3 ) :
4344

[ 2]
冯新红, 沈
霞, 袁
伟, 等
栓线法制作局灶性大鼠脑缺
血再灌注模型的改进及效果 [ J]
徐州医学院学报, 2003,
23( 6) : 483485

[ 3]
何学令
插线法制作大鼠局灶性脑缺血再灌流模型方法的
改进 [ J ]
四川动物, 2003, 22( 3) : 178179

[ 4]
Longa E Z, Weins tein P R, Carl son S, et al . Reversible mid
dle cereb ral artery occlu sion with ou t craniectomy in rat s [ J ]

S tr oke, 1989, 20( 1) : 8491

[ 5]
Seegers H, Grill on E , T rioull ier Y, et al . Nuclear factor
kappa B act ivat ion in permanent int raluminal focal cerebral is
chemia in the rat [ J]
N eu rosc i L et t , 2000, 288 ( 3 ) :
241248

!2045!中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 12 期 2010 年 12月