全 文 ：高效液相色谱法测定宽肠理气汤中松果菊苷和毛蕊花糖苷
张 岩
收稿日期: 20100608
作者简介:张 岩( 1964 ) ,男,河北省沧县人,主管药师, 1998年毕业于天津中医学院,从事中药成分测定、临床应用及剂型改革。
Email: guanyh12345678@ sin a. com
(天津医科大学总医院 药剂科, 天津 300052)
摘 要:目的 建立高效液相色谱法测定宽肠理气汤中松果菊苷及毛蕊花糖苷的方法。方法 采用高效液相色谱
法,色谱柱为 Ag ilent C18 ( 250 mm 4 6 mm, 5 m) ,流动相为乙腈1%冰醋酸进行梯度洗脱, 柱温为 40 ! ,体积流
量为 1 0 mL / min, 检测波长为 334 nm。结果 松果菊苷平均回收率 98 78% , RSD 为 0 90% ; 毛蕊花糖苷平均回
收率为 99 39% , RSD为 1 75% ; 结论 本方法简便、可靠、重现性较好,可用于宽肠理气汤中松果菊苷及毛蕊花糖
苷的测定。
关键词:宽肠理气汤; 松果菊苷;毛蕊花糖苷; 高效液相色谱
中图分类号: R286 02 文献标识码: B 文章编号: 0253 2670( 2010) 12 1994 02
宽肠理气汤为我院协定处方, 内含肉苁蓉、郁李
仁、木香、乌药、陈皮等中药,具有活络通血、顺气宽
肠的作用,用于活血、顺气,恢复肠蠕动,通便通气解
除肠麻痹,使病人早日进食, 尽快康复 [ 1] , 多用于外
科术前体检和术后排气, 预防肠梗阻、肠黏连。君药
肉苁蓉是列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉的干燥带鳞叶
肉质茎 [ 2] ,苯乙醇苷类成分为肉苁蓉的有效成分, 除
具有补肾壮阳功效外,更兼具有抗衰老、增强记忆、
提高免疫力等多种功能[ 3]。松果菊苷和毛蕊花糖苷
为苯乙醇苷类成分中的指标性成分 [ 4]。肉苁蓉生药
和商品药材中松果菊苷和毛蕊花糖苷进行的 HPLC
法测定的报道较多[ 57] ,但复方制剂中对上述两种成
分同时进行测定的报道较少。本研究以松果菊苷与
毛蕊花糖苷为考察指标, 建立的 HPLC 法测定宽肠
理气汤中有效成分, 为制定质量标准奠定基础。
1 仪器与试剂
日本岛津 LC 2010CHT 高效液相色谱仪,
LCso lut ion工作站。乙腈为色谱纯, 由天津市康科
德科技有限公司提供,水为去离子水,其余试剂均为
分析纯;松果菊苷 (批号 111670200503)、毛蕊花糖
苷 (批号 111530200303)对照品均购于中国药品生
物制品检定所; 宽肠理气汤样品由天津医科大学总
医院提供(批号 20080506、20080607、20080508, 规
格 200 mL/袋)。
2 方法与结果
2 1 色谱条件: 色谱柱为 Agilent C18 ( 250 mm
4 6 mm, 5 m) ,流动相为乙腈1%冰醋酸进行梯度
洗脱,柱温为 40 ! , 体积流量为 1 0 mL/ min, 检测
波长为 334 nm。
2 2 标准曲线的绘制:精密称取松果菊苷对照品适
量,加 50%甲醇制成 0 323 6 mg / mL 的储备液。分
别精密吸取对照品储备液 0 25、0 5、2 5、5、10 mL
置 10 mL 量瓶中, 用 50%甲醇稀释至刻度。分别精
密吸取对照品溶液 10 L, 注入液相色谱仪, 测定峰
面积。以进样量为横坐标, 色谱峰面积为纵坐标,得
回归方程Y= - 793 98+ 1 106 X , r= 0 999 9。结
果表明松果菊苷在 0 080 9~ 3 236 g 与峰面积线
性关系良好。
精密称取毛蕊花糖苷对照品适量, 加 50%甲醇
制成0 22 mg/ mL 的储备液。分别精密吸取对照储
备液 0 25、0 5、1、5、10 mL 置 10 mL 量瓶中, 用
50%甲醇稀释至刻度。分别精密吸取对照品溶液
10 L,注入液相色谱仪, 测定峰面积。以进样量为
横坐标, 色谱峰面积为纵坐标, 得回归方程 Y =
- 3 632 8+ 2 106 X , r= 0 999 9。结果表明毛蕊
花糖苷在 0 055~ 2 2 g 与峰面积线性关系良好。
2 3 供试品溶液的制备:取宽肠理气汤样品, 4 000
r/ min离心 15 min, 去除沉淀部分, 取上清液, 用
0 45 m微孔滤膜滤过, 取续滤液, 即得。
2 4 阴性样品溶液的制备:按处方取除肉苁蓉的各
味药材, 按供试品溶液的制备方法制得阴性样品
溶液。
2 5 精密度试验: 取同一宽肠理气汤 (批号
20080506)供试品溶液, 连续进样 6 次, 测定松果菊
苷和毛蕊花糖苷的峰面积,结果松果菊苷与毛蕊花
糖苷峰面积的 RSD分别为 1 04%、2 58%。
∀1994∀ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 12 期 2010 年 12月
2 6 重现性试验: 取同一批宽肠理气汤 (批号
20080506)样品,按供试品溶液的制备方法平行制备
6份供试品溶液, 注入液相色谱仪,记录峰面积。结
果样品中松果菊苷平均质量浓度为 65083 1 g/ mL,
RSD 为 1 11%; 毛蕊花糖苷平均质量浓度为
23 098 8 g / mL, RSD为 1 52%。
2 7 稳定性试验: 取同一宽肠理气汤 ( 批号
20080506)制得的供试品溶液, 分别在 0、2、4、8、12
h进样,记录峰面积,结果在本实验条件下松果菊苷
和毛蕊花糖苷在 12 h内稳定,松果菊苷与毛蕊花糖
苷峰面积值的 RSD分别为 1 53%、1 65%。
2 8 加样回收率试验: 取批号 20080506 宽肠理气
汤样品, 精密量取 25 mL, 置 50 mL 量瓶中, 共 6
份,分别精密加入 0 161 8 mg/ mL 松果菊苷对照品
溶液 10 mL 及 0 11 mg/ mL 毛蕊花糖苷对照品溶
液 5 mL,制备供试品溶液, 测定, 计算回收率,结果
松果菊苷平均回收率为 98 78% , RSD为 0 9% ;毛
蕊花糖苷平均回收率为 99 39%, RSD为 1 75%。
2 9 样品的测定:取 3个批号的宽肠理气汤水煎液
各 2份,按供试品溶液制备方法操作,以平均峰面积
计算松果菊苷和毛蕊花糖苷的质量浓度, 结果见表
1, 图谱见图 1。
表 1 宽肠理气汤中松果菊苷和毛蕊花糖苷的测定结果
( n= 2)
Table 1 Determination of echinacoside and verbascoside
in Kuanchang Liqi Decoction ( n= 2)
批 号 松果菊苷/ (g ∀ mL- 1 ) 毛蕊花糖苷/ (g ∀ mL- 1)
20080506 65 039 1 23 271 6
20080507 65 295 9 22 980 2
20080508 65 073 9 22 983 1
t / min
1松果菊苷 2毛蕊花糖苷
1echin acos ide 2 verbascoside
图 1 对照品(A)、宽肠理气汤( B)、缺肉苁蓉的阴性样品( C)的 HPLC图谱
Fig 1 HPLC Chromatograms of reference substances ( A) , Kuanchang Liqi Decoction (B) ,
and negative sample without Cistanches Herba ( C)
3 讨论
本实验利用 HPLC 法测定宽肠理气汤中松果
菊苷和毛蕊花糖苷,该法灵敏度高、重现性好、结果
准确、方便易行,适用于宽肠理气汤中松果菊苷及毛
蕊花糖苷的测定。
参考文献:
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[ 7] 王长林,屠鹏飞,郭玉梅 人工栽培管花肉苁蓉的化学成分分
析[ J] 中草药, 2004, 35( 6) : 676
HPLC法测定复方儿茶止泻膜剂中儿茶素、表儿茶素和没食子酸
赵新峰, 毛 莹,高 明*
收稿日期: 20100602
基金项目:大连市科技局资助项目( 2008E11SF171)
作者简介:赵新峰,男,山东人,药物分析学博士,主要从事药品质量控制研究。
T el : ( 0411) 87403735 Email: zhaoxinfengw y@ 126 com
* 通讯作者 高 明 T el: ( 0411) 87402361 Email: gm 056@ 126 com
(大连大学医学院, 辽宁 大连 116622)
摘 要:目的 建立 H PLC 法同时测定复方儿茶止泻膜剂中儿茶素、表儿茶素和没食子酸 3 个成分的方法。方法
色谱柱为Hyper sil ODS( 250 mm 4 6 mm, 5m) , 流动相为乙腈50 mmol/ L 磷酸二氢钾( 8# 92) ,体积流量为 1 0
∀1995∀中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 12 期 2010 年 12月