全 文 ：滤液, 即得。
214　线性关系考察: 精密称取番石榴苷对照品适
量, 加甲醇溶解制成质量浓度分别为 01078 7、
01236 1、01393 5、01629 6、01787 0、11180 5 m gö
mL 系列对照品溶液。分别精密吸取上述溶液各 10ΛL , 注入液相色谱仪, 测定峰面积。以峰面积为横坐
标, 番石榴苷量为纵坐标绘制标准曲线, 计算得回归
方程 Y = 31284 0× 106 X + 11940 7× 105, r =
01999 9。结果表明番石榴苷在 01787～ 111805 Λg
与峰面积具有良好的线性关系。
215　精密度试验: 精密吸取番石榴苷对照品溶液
(01550 8 m gömL ) 10 ΛL , 注入液相色谱仪, 连续测
定 6 次, 测定番石榴苷峰面积, 其R SD 为 0101%。
216　稳定性试验: 取番石榴叶药材供试品溶液 10ΛL , 注入液相色谱仪, 分别在 0、015、1、2、4、8、12、24
h 进样, 测定其峰面积, 其R SD 为 0184% , 结果表明
供试品溶液在 24 h 内稳定。
217　重现性试验: 取番石榴叶药材供试品 6 份, 每
份约 2 g, 分别精密称定, 制备供试品溶液, 测定番石
榴苷峰面积, 计算其质量分数R SD 为 0192%。
218　加样回收率试验: 取番石榴叶药材供试品 6
份, 每份约 1 g, 分别精密称定, 加入番石榴苷对照品
溶液 (0115 m gömL ) 各 50 mL , 制备供试品溶液, 分
别测定, 计算加样回收率。结果平均回收率为
98102% , R SD 为 1121%。
219　样品测定: 分别精密吸取番石榴苷对照品溶液
和供试品溶液各 10 ΛL , 注入液相色谱仪, 测定 3 批
药材样品, 测定结果见表 1。
3　讨论
表 1　样品测定结果 (n= 3)
Table 1　D eterm ination results of samples (n= 3)
批号 番石榴苷ö(m g·g- 1) RSD ö%
1 7147 0192
2 4131 1121
3 5123 1104
　　曾以甲醇2水 (36∶64)、甲醇2012% 磷酸溶液
(36∶64)、甲醇2012% 冰醋酸溶液 (36∶64) 为流动
相进行试验, 结果以甲醇2012% 磷酸溶液 (36∶64)
为流动相, 番石榴苷与其他组分色谱峰达到较好分
离。 以番石榴苷对照品溶液进行紫外 (200～ 400
nm ) 扫描, 在 360、257 nm 处均有吸收, 经实验结果
证明番石榴苷在 257 nm 处吸收较强, 且分离效果
良好, 故选择 257 nm 作为检测波长。
样品用甲醇溶解, 分别考察回流提取、索氏提取及
超声提取的效果。结果表明, 样品用甲醇超声提取 30
m in 效果较好, 方法操作简便, 番石榴苷提取完全。番
石榴苷可溶于甲醇、乙醇等溶剂, 因此采用 70% 甲醇、
70% 乙醇、甲醇超声提取30 m in 比较。结果表明, 用甲
醇超声提取效果最佳, 番石榴苷提取完全。
通过本实验建立了 H PL C 测定番石榴叶药材
中番石榴苷量的方法, 该方法准确、可靠。但是由于
时间的关系, 采集的药材批数有限, 所以该方法只做
方法学研究。
参考文献:
[ 1 ]　广西壮族自治区卫生厅1 广西中药材标准 [M ]1 南宁: 广西
科学与技术出版社, 199221
[ 2 ]　曾玉兰1 番石榴叶的显微与薄层色谱鉴别 [J ]1 中药材,
2002, 25 (8) : 55225531
[ 3 ]　朱长福, 同利琪, 柯有梅, 等 1 番石榴叶的质量标准研究
[J ]1 中草药, 2006, 37 (6) : 94229431
RP-HPLC 法测定石仙桃中天麻素和天麻苷元①
林丽聪1, 吴春敏23 , 陈海滨2, 张怡评1
(11 福建中医学院 药学系, 福建 福州　350003; 21 福建省药品检验所, 福建 福州　350001)
摘　要: 目的　建立石仙桃药材中天麻素及天麻苷元的测定方法, 测定新鲜石仙桃不同药用部位及石仙桃炮制品
中天麻素和天麻苷元的量。方法　采用H ypersil C18色谱柱 (250 mm ×416 mm , 5 Λm ) , 乙腈20105% 磷酸溶液 (3∶
97)为流动相, 检测波长为 220 nm。结果　不同药用部位中所含的量相差较大; 天麻素、天麻苷元质量浓度与峰面积
均呈良好的线性关系; 平均回收率分别为 99161% (n= 6)、97117% (n= 6)。结论　本法操作简便、准确、具有良好的
重现性, 为石仙桃药材的合理应用及质量控制奠定基础。
·382·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007206210
基金项目: 福建省科技攻关重点项目 (2004Y31)
作者简介: 林丽聪 (1982- ) , 女, 硕士研究生, 研究方向为中药化学及药物质量标准研究。3 通讯作者　吴春敏　T el: (0591) 87622202　E2m ail: w chm ra@yahoo1com 1cn
关键词: 石仙桃; 天麻素; 天麻苷元; 高效液相色谱
中图分类号: R 28216　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0283- 03
　　石仙桃系兰科石仙桃属植物石仙桃 P holid ota
ch inensis L indl1 的全草, 始载于《生草药性备要》, 广
泛分布于福建、广东、广西等省。本品为福建民间常
用的一种中草药, 性味甘凉, 具有养阴、清热、利湿消
瘀的功效。临床上主要用于治疗高血压、头晕和各种
原因引起的头痛, 也可用于咳嗽、吐血、梦遗等[1 ]。其
提取物制成的单方制剂头痛定糖浆为国家准字号药
品, 临床上用于治疗神经机能性头痛、脑震荡后遗
症[2 ]。石仙桃药材中的镇痛有效成分为天麻素和天
麻苷元[3 ] , 因而测定石仙桃中天麻素和天麻苷元的
量对于控制药材质量具有重要的意义。为发掘石仙
桃不同部位的药用价值, 本实验分别测定了新鲜石
仙桃叶子、假鳞茎、根茎、根及种子中天麻素和天麻
苷元的量, 并选择假鳞茎以 100 ℃水煮 20 m in, 60
℃烘烤[4 ]进行炮制, 建立其天麻素及天麻苷元的测
定方法, 为石仙桃药材的合理应用及质量控制提供
理论依据。
1　仪器与试剂
日本岛津L C - 2010A 高效液相色谱仪, 二极
管阵列检测器, CLA SS2V P 色谱工作站。
天麻素 (批号 1108072200205)、天麻苷元 (批号
H 20006210G)对照品由中国药品生物制品检定所提
供。石仙桃药材经福建省药品检验所鉴定为兰科石
仙桃属植物石仙桃 P 1 ch inensis L indl1, 乙腈为色谱
纯, 纯净水为M ili2Q 纯水, 其他试剂为分析纯。
2　方法与结果
211　色谱条件: 色谱柱: H ypersil BD S C 18色谱柱
(250 mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 乙腈20105% 磷
酸溶液 (3∶97) ; 检测波长: 220 nm ; 体积流量: 110
mL öm in; 进样量: 10 ΛL。色谱图见图 1。
töm in
12天麻素　22天麻苷元
12gastrodine　2242hydroxybenzyl alcoho l
图 1　天麻素对照品 (A)、天麻苷元对照品 (B)和石仙桃药材 (C)的 HPLC 图谱
F ig11　HPLC Chromatogram s of gastrod ine (A) , 4-hydroxybenzyl a lcohol (B) , and Pseudobu lbus seu
H erba Pholidotae Ch inens is (C)
212　对照品溶液的制备: 精密称取常温减压干燥
12 h 的天麻素对照品适量, 加乙腈2水 (3∶97) 溶液
溶解, 制成 100 ΛgömL 的溶液。精密称取常温减压
干燥 12 h 的天麻苷元对照品适量, 加甲醇制成 1
m gömL 的溶液, 精密吸取 1 mL 置 100 mL 量瓶中,
加乙腈2水 (3∶97)溶液制成 10 ΛgömL 的溶液。
213　供试品溶液的制备: 石仙桃鲜品剪碎, 取约 2
g; 炮制品粉碎后过 4 号筛, 取约 015 g, 分别精密称
定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入 70% 甲醇 50 mL , 称
定质量, 加热回流提取 4 h, 放冷, 再称定质量, 用
70% 甲醇补足减失的质量, 滤过, 取续滤液 5 mL , 浓
缩至近干, 残渣加乙腈2水 (3∶97) 溶液溶解, 转移至
10 mL 量瓶中, 加乙腈2水 (3∶97) 溶液稀释至刻度,
摇匀, 滤过, 取续滤液过 0145 Λm 微孔滤膜, 即得。
214　标准曲线的制备: 精密称取常温减压干燥 12
h 的天麻素对照品适量, 加乙腈2水 (3∶97) 溶液溶 解, 制成 11140 m gömL 的溶液。精密吸取上述溶液011、012、014、018、1、2、5 mL 置 10 mL 量瓶中, 加乙腈2水 (3∶97)稀释至刻度, 摇匀。精密称取常温减压干燥 12 h 的天麻苷元对照品适量, 加甲醇制成01107 8 m gömL 的溶液。精密吸取上述溶液 011、015、1、2、5、10、15、25 mL 置 100 mL 量瓶中, 加乙腈2水 (3∶97)稀释至刻度, 摇匀。分别精密吸取上述对照品溶液 10 ΛL 注入高效液相色谱仪, 以峰面积(Y )对进样质量浓度 (X )回归, 得回归方程。天麻素:Y = 1 883 775155 X + 19 377125, r= 11000, 线性范围 为 11140～ 57010 ΛgömL ; 天 麻 苷 元: Y =3 427 039141 X - 1 776103, r= 01999 9, 线性范围为01107 8～ 26195 ΛgömL。215　精密度试验: 取同一供试品溶液重复进样6 次, 每次 10 ΛL , 测定峰面积。天麻素和天麻苷元 6次峰面积计算结果的 R SD 分 别 为 1124% 和
·482· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
1150%。
216　重现性试验: 取同一产地石仙桃炮制品 5 份,
每份约 015 g, 分别精密称定, 制备供试品溶液, 按上
述高效液相色谱条件测定, 结果天麻素和天麻苷元
质量分数的R SD 分别为 2100% 和 2127%。
217　稳定性试验: 取同一产地石仙桃炮制品 1 份,
制备供试品溶液, 分别在 0、4、6、8、10、12 h 进样, 测
定峰面积, 天麻素和天麻苷元峰面积的R SD 分别为
0127% 和 2190% , 结果表明样品在制备供试品溶液
后至少 12 h 内稳定。
218　回收率试验: 精密称取石仙桃炮制品 6 份, 每
份约 0125 g, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 分别精密
加入 5198 m gömL 天麻素对照品 1 mL 和 63 Λgö
mL 天麻苷元对照品 1 mL , 制备供试品溶液, 按上
述高效液相色谱条件测定, 计算, 结果天麻素和天麻
苷元的平均回收率分别为 99161% 和 97117%。R SD
值分别为 3185% 和 2101%。
219　样品测定
21911　新鲜石仙桃不同部位的测定: 取新鲜石仙桃
叶子、粗假鳞茎、细假鳞茎、根茎、根及种子各约 2 g,
分别精密称定, 制备供试品溶液, 按上述高效液相色
谱条件测定, 结果见表 1。
表 1　石仙桃不同部位中天麻素和天麻苷元的
测定结果 (n= 2)
Table 1　D eterm ination of gastrod ine and 4-hydroxybenzyl
a lcohol in d ifferen t parts of Pseudobu lbus seu
H erba Pholidotae Ch inens is (n= 2)
部　位 天麻素ö% 天麻苷元ö%
叶子　　 01172 01142
粗假鳞茎 31280 01051
细假鳞茎 01798 01347
根茎　　 11149 01151
根　　　 01163 01030
种子　　 01708 01106
21912　不同产地石仙桃炮制品测定: 取石仙桃炮制
品约 015 g, 精密称定, 制备供试品溶液, 按上述高效
液相色谱条件测定。结果见表 2。
3　讨论
311　供试品溶液的制备: 由于流动相主要成分为水,
用甲醇溶解样品进样分析, 会出现前倾峰, 因此对照
品和提取的样品均采用乙腈2水 (3∶97)溶解后进样。
表 2　不同产地石仙桃炮制品中天麻素和
天麻苷元的量 (n= 2)
Table 2　Con ten ts of gastrod ine and 4-hydroxybenzyl
a lcohol of processed products of Pseudobu lbus
seu H erba Pholida lae Ch inens is from differen t
habita ts (n= 2)
编号 产地 天麻素ö% 天麻苷元ö%
01 福建闽侯 21489 01019
02 福建泉州 11726 01013
03 福建永泰 11805 01012
04 福建宁德 11863 01007
05 福建闽清 11797 01008
312　提取条件的考察
31211　溶剂的选择: 分别用 70% 甲醇及 70% 乙醇
回流提取 1 h (n= 2) , 结果表明 70% 甲醇提取天麻
素的量较高, 天麻苷元的量相差不大, 因此选择
70% 甲醇提取。
31212　溶剂体积分数的选择: 分别用 50%、70%、
90% 甲醇回流提取 1 h (n = 2) , 结果表明 50% 与
70% 甲醇提取的天麻素的量相近且较 90% 甲醇提
取的量高, 由于 50% 甲醇提取的溶液难于滤过, 因
此选择 70% 甲醇为提取溶剂。
31213　提取时间的选择: 分别采用 70% 甲醇回流
提取 1、2、3、4、5 h (n= 2) , 实验表明, 当提取时间超
过 4 h 时, 天麻素的量趋于稳定, 因此选择提取时间
为 4 h。
31214　不同溶剂用量的选择: 分别采用 25、50、100
mL 甲醇提取, 结果表明溶剂用量为 50 与 100 mL
天麻素的量相差不大, 因此选用 50 mL 提取。
313　测定新鲜石仙桃中叶子、假鳞茎、根茎、根及种
子中天麻素及天麻苷元的量, 结果以假鳞茎中天麻
素的量最高, 根茎次之, 叶子、根及种子的量最低; 且
同一植株中粗假鳞茎中天麻素的量明显高于细假鳞
茎天麻素的量, 而天麻苷元量则明显较低。
参考文献:
[ 1 ]　南京中医药大学1 中药大词典 [M ]1 上海: 上海科学技术出
版社, 20061
[ 2 ]　卫生部药品标准中药成方制剂 [S ]1 第 9 册 1 19941
[ 3 ]　张怡评, 林丽聪, 吴春敏 1 天麻素和天麻苷元的镇痛作用研
究 [J ]1 福建中医学院学报, 2006, 16 (6) : 302311
[ 4 ]　林丽聪, 张怡评, 吴春敏 1 石仙桃炮制工艺研究 [J ]1 海峡药
学, 2007, 19 (3) : 272301
·582·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月