全 文 ：中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月·741·
表4注射用舒血宁对大鼠全脑缺血再灌注模型的影响
(；士s，一一10)
Table4 EffectofShuxueningI jectioninglobalcerebral
ischemia／reperfusionofrat (i士s，弹=lO)
组剐。?警，，脑爹7 脑譬到。u．=心；。u．：；)(10。
与假手术组比较：4P
。P<0．05’。P<0．01口smodelgroup
异常是药物治疗的主要目标[6]。脑缺血实验模型按
局部解剖学通常分为全脑缺血和局部脑缺血两大
类。本实验采用的4种模型中，小鼠急性不完全性脑
缺血、大鼠双侧颈总动脉结扎、小鼠中动脉栓塞属局
部脑缺血模型，大鼠四动脉结扎属全脑缺血模型。实
验结果表明，注射用舒血宁给药组能明显延长小鼠
存活时间，降低大、小鼠脑缺血后的脑指数，改善脑
水肿程度，降低脑组织中的LDH、CPK的释放。脑
梗死面积和神经学行为指标更从整体水平反映了注
射用舒血宁改善小鼠神经行为，缩小脑梗死面积，有
明确的抗实验性脑缺血作用。
缺血性脑血管疾病是一种多危险因素的疾病，且
各因素错综复杂。本实验表明注射用舒血宁对实验动
物脑缺血的保护作用机制还待进一步的深入研究。
References：
[1]HeT，MingL．ProtectiveeffectsofextractofAs打agaluson
injuriesofglobalcerebralischemiaandreperfusioninratsand
anoxiainmice[J1．ChinPharmacolBul (中国药理学通
报)，2004，20(5)：576—580．
E23RenJ，JiaZP．ProtectiveeffectsofGinkgolidesonthree
typesofcerebralischemicmodelsinratsI-J]．丁．rnditChin
DrugResClinPharmacol(中药薪药与临床药理)，2005，16
(1)：41-45．
[3]XuSY，BianRL，ChenX．MethodologyinPharmacological
Experiment(药理实验方法学)[M]．Beijing：People
7
s
MedicalPublishingHouse，2001．
[4]HanY，LiuN．Thechangeofthecontentofinterleukin一8
aftercerebralisehemia—reperfusioninjuryinrats[J]．ChinJ
Arterioscler(中国动脉硬化杂志)，2005，13(2)；155-157．
[5]LiuJ，YaoCS．Theeffectofischemicpreconditioningonthe
expressionof ntercellularadhesionmolecule一1inducedby
cerebralischemia-reperftlsioninra s[J]．J咖矽lexyNerv
Dis(中风与神经疾病杂志)，2004，21(6)：510—512．
[63LiXY，TuCC．Studyofprotectiveeffectofpentoxifylline
(PTX)onacutec rebralischemiainmice[J]．ActaAcad
MedJiangxi(江西医学院学报)，2003，43(6)：37—39．
羟基红花黄色素A抗凝作用的研究
臧宝霞，金鸣+，李金荣
(首都医科大学附属北京安贞医院一北京市心肺血管疾病研究所药理研究室，北京100029)
红花为菊科植物CarthamustinctoriusL．的干
燥花，为活血化瘀代表药，常用于治疗冠心病、脑血
栓等心脑血管疾病。羟基红花黄色素A(hydroxy—
saffloryellowA，HSYA)是红花主要有效成分，具
抗血小板激活因子的作用[1]，红花黄色素为红花抗
血栓有效部位[2]。红花黄色素所含主要成分为
HSYA，为了探索红花抗血栓形成的有效成分，本实
验观察了HSYA抑制血小板聚集及抗凝的作用，以
探讨红花活血化瘀的机制。
1材料与方法
1．1仪器：Chrono—Log型血小板聚集仪。
1．2 药品与试剂：HSYA为本研究室以红花水提
液经大孔树脂一葡聚糖凝胶柱色谱法制备，质量分数
为97％；ADP钠盐为BM公司进口分装，以生理盐
水配成2mrnol／L溶液，一30℃保存，用前解冻；冻
干含钙组织凝血活酶，上海荣盛生物技术有限公司
产品，肝素为北京鼎国生物技术发展中心产品，香丹
注射液为雅安三九药业有限公司产品；其他试剂均
为国产分析纯。
1．3动物：雄性新西兰家兔为合格动物，体重3～4
kg，中国药品生物制品检定所提供；清洁级Wistar
大鼠为维通利华公司提供，体重300g。
1．4 HSYA抑制ADP诱导家兔血小板聚集试验：
家兔耳正中动脉取血，枸橼酸钠抗凝，120×g离心
5min，取富血小板血浆(PRP)，下层1100×g离
心10min得贫血小板血浆(PPP)，用PPP稀释
收稿日期；2006—10—23
作者简介：臧宝霞(1961一)，女(满族)，北京人，主任药师，医学硕士，研究方向为中药红花活血化瘀作用机制的研究。
Tel：(010)644564816 456308
*通讯作者金鸣Tel：(010)64456308E—mail：jinzang@public3．bta．net．cn
万方数据
·742· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月
PRP得4．5×10“／L血小板混悬液备用。取180弘L
PRP置比浊管中加入HSYA液(终浓度为4．0、
7．9、15．8、31．7mmol／L)40弘L，37℃预热后加入
2mmol／LADP5肛L，记录血小板聚集曲线，以等体
积蒸馏水代替HSYA为溶剂空白。依下式计算药物
血小板聚集抑制率。
抑制率一(空白管血小板最大聚集率一HSYA管血小
板最大聚集率)／空白管血小板最大聚集率×100％
1．5 HSYA对大鼠血浆凝血酶原时间(PT)的影
响：大鼠腹主动脉取血，枸橼酸钠抗凝，1100×g离
心10min，分离PPP置冰浴中备用。依试剂盒方法
实验，酶标板置37℃水面上，每孔加入待测血浆
50肛L，给药管加HSYA药液(终浓度为8．4、16．8、
33．7、67．3mmol／L)或香丹注射液(终浓度为1／4、
1／8香丹注射液)50弘L，溶剂对照管以同体积蒸馏
水代替药液，混匀后37℃温育1min，迅速加入
37℃含钙组织凝血活酶溶液100btL，立即混匀，加
酶时开动秒表，以钢丝轻轻搅动约4S后，每隔2S
向上挑动，至生成固体细丝终止计时即为PT。
1．6 HSYA对大鼠血浆复钙时间(RT)的影响：
取血方法同1．5，120×g离心5min，分离PRP置
冰浴备用。37℃酶标板每孔加入待测血浆50弘L，
给药管加HSYA药液(终浓度为16．4、24．6、36．9、
55．3mmol／L)或肝素(终体积分数为0．07％)50
肚L，溶液对照管以同体积蒸馏水代替药液，混匀后
37℃温育1min，加入0．025mol／LCaCl2溶液50
弘L混匀，加入CaCI。时开动秒表，于血浆凝固前1
min每隔i0S以钢丝挑动1次，至生成固体细丝终
止计时即为RT。
1．7数据处理方法：所有数据均用SPSS10．0软
件以方差分析及口检验法统计分析。
2结果
2．1 HSYA抑制ADP诱导家兔体外血小板聚集
作用：结果见表1。HSYA抑制ADP诱导的家兔血
小板聚集作用具明显的量效关系，当HSYA浓度为
31．7mmol／L时，其血小板聚集率已很低为不到
10％，HSYA抑制家兔血小板聚集的IC。。约为16
mmol／L，提示此成分可通过抑制血小板的聚集缓
解血栓形成。
2．2 HSYA延长大鼠离体血浆PT的作用：表2结
果可见，HSYA能明显地延长大鼠离体血浆PT且
呈明显的量效关系。以香丹注射液与HSYA条件一
致情况下进行平行试验。结果表明HSYA浓度为
67．3mmol／L时，其延长PT的作用强度与香丹注
射液相近。
2．3 HSYA延长家兔离体血浆RT的作用：表3
结果可见，HSYA能明显地延长大鼠离体血浆RT
且呈明显的量效关系，55．3mmol／L即3．4％
HSYA延长RT的作用与0．2％的肝素相当，提示
HSYA的抗凝作用远较肝素为弱。
表1 HSYA抑制ADP诱导家兔体外血小板聚集的作用
Table1 EffectofHSYAagainstrabbitplatelet
aggregationinducedbyADPinvitro
与空白管比较：’P<0．05。一P<0．001
’P<0．05⋯P<0．001口sblanktube
表2 HSYA对大鼠离体血浆PT的影响(一一4)
Table2 EffectofHSYAonplasmaPTofrat
invitro(一一4)
与H20对照管比较：⋯P<0．001
⋯P<0．001口sH20controltube
表3 HSYA对家兔离体血浆RT的影响瓴一4)
Table3 EffectofHSYAonplasmaRTofrabbit
invitro(n一4)
与H20对照管比较：⋯P
3讨论
本实验结果表明，HSYA对ADP诱导的家兔
血小板聚集具明显的抑制作用，且可明显延长大鼠
血浆PT和家兔血浆RT，提示该药对内源性及外
源性凝血系统均具抑制作用。
红花在临床上主要以水煎液入药，红花黄色素
为红花水溶性组分，为红花抗血栓有效部位。本研究
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月·743·
室试验结果表明，HSYA为一血小板激活因子受体
拮抗剂，拮抗血小板激活因子的作用为HSYA抗血
栓作用的机制之一。本实验结果表明HSYA可抑制
ADP诱发的家兔血小板聚集，延长PT及RT，提示
该成分为红花抗血栓有效成分，可阻断多种途径诱
发的血栓形成反应。抑制血栓形成为红花活血化瘀
的主要途径之一，本研究结果对进一步阐明红花活
血化瘀作用机制，指导开发相关新药具重要意义。
References：
[1]ZangBX，JinM，SiN，eta1．Theantagonisticeffectof
hydroxysaffloryel wAagainstplateletac ivatingfactor
[J]．ActaPharmSin(药学学报)，2002，37(9)：696—699．
Is]Wu，LiJ R，ChenWM，eta1．Inhibitioneffectf
flavonesfromC．tinctoriusL．againstPMNaggregationnd
adhesionnducedbyplateletac ivatingfactorEJ]．Chin
PharmJ(中国药学杂志)，2002，37(10)：743—745．
天麻醋酸乙酯提取物抗ADP诱导的家兔血小板聚集作用及机制
淤泽溥，林青+，李秀芳，代蓉，孟保华，何晓山，王妍
(云南中医学院药理教研室，云南昆明650200)
天麻为兰科植物天麻GastrodiaelatBlume的
干燥块茎，古名赤箭，是传统的平肝息风药。现代药
理学研究表明天麻及其制剂具有镇痛、镇静、催眠、
延缓衰老、扩张血管、降低血黏度及抑制血小板聚集
等作用[1]。本室前期研究发现天麻醋酸乙酯萃取部
分(主要成分为以4，4r_二苯酚甲烷、三聚对羟基苯
甲醇等为主的酚性化合物)具有较强的抗血小板聚
集作用，本研究在前期工作基础上对天麻醋酸乙酯
部分进行柱色谱分离，筛选出活性最强的b段，观察
其对家兔血小板聚集的影响，并探讨其作用机制。
1材料
1．1 天麻的提取和分离：药材由本院药植鉴定教研
室张庆芝副教授鉴定为兰科植物天麻G．elata
B1ume。取10kg粉碎后，用95％乙醇浸泡6h，连
续提取3次，减压浓缩得到深褐色糖浆状醇提物
155g。然后用醋酸乙酯：正丁醇、水萃取，浓缩回收
分别得到醋酸乙酯萃取部分(143g)、正丁醇萃取
部分(250g)、水萃取部分(100g)。将醋酸乙酯萃
取部分用硅胶柱色谱分离，分别得到a(6．7g)、
b(6．6g)、C(1．8g)、d(0．17g)、e(0．6g)等5
段，经初步测定醋酸乙酯萃取部分b段[洗脱系统为
氯仿一甲醇(6：1)’]有较强的抗血小板聚集作用，故
对其进行活性研究。
1．2试剂与仪器：阿司匹林，由昆明友谊制药厂惠
赠。维拉帕米，上海禾丰制药有限公司产品，批号：
H31021343；二磷酸腺苷(ADP)系Sigma公司产
品，溶于生理盐水中。Fura-2／Am购自Sigma公司，
用DMSO溶解后，一20℃避光保存，质量浓度为1
mg／mL，使用时终浓度为3／-mol／L。其他试剂均为
AR级产品。IISS一1B数字式超级恒温浴槽(成都
仪器厂)，LBY—NJ2血液凝聚仪(北京普利生科贸
集团)，RF一5000荧光分光光度计(13本岛津)，台
式低速离心机(上海电机厂)。
1．3实验动物：日本大耳白兔，体重2～2．5kg，雌
雄兼用，由昆明医学院动物科提供，动物合格证号：
滇实动证第2005014号。
2方法
2．1 体外血小板聚集实验：自清醒兔颈动脉取血，
以3．8％枸橼酸钠(血与抗凝剂体积比为9：1)抗
凝收集于塑料离心管中，以1000r／min离心10
min得到上层液即富血小板血浆(plateletrich
plasma，PRP)，余下以3000r／min离心10min得
到贫血小板血浆(plateletpoorplasma，PPP)∽o，
PPP用以调零和稀释PRP中的血小板数。实验过
程中所有接触血小板的器皿均先进行硅化处理，用
比浊法口3进行血小板聚集性测定，记录血小板聚集
率，并以公式[对照管聚集率一样品管聚集率)／对照
管聚集率×100％]计算药物对血小板聚集抑制率，
实验数据用i士s表示，方差齐用t检验，方差不齐
用t7检验(下同)o
2．2血小板细胞钙浓度([-Ca2+]t)测定(荧光法)：
同上方法得到家兔PRP，以3000r／min离心10
收稿日期：2006—11-22
基金项目：云南省自然科学基金资助项目(2002c0057M)
作者简介：淤泽溥(1957一)，男，教授，硕士生导师，长期从事药理与中药药理学教学和科研工作，发表论文51余篇。
E—mail：yuzepu@126．tom
*通讯作者林青Tel：(0871)6554562Fax：(0871)6212252E—mail：kminqing@yahoo．com．cn
万方数据
羟基红花黄色素A抗凝作用的研究
作者： 臧宝霞， 金鸣， 李金荣
作者单位： 首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所药理研究室,北京,100029
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(5)
被引用次数： 28次
参考文献(2条)
1.Zang B X;Jin M;Si N The antagonistic effect of hydroxysafflor yellow A against platelet activating
factor[期刊论文]-药学学报 2002(09)
2.Wu W;Li J R;Chen W M Inhibition effect of flavones from C.tinctorius L.against PMN aggregation and
adhesion induced by platelet activating factor[期刊论文]-中国药学杂志 2002(10)
本文读者也读过(10条)
1. 王天.傅风华.韩冰.朱梅.李桂生.刘珂.WANG Tian.FU Feng-hua.HAN Bing.ZHU Mei.LI Gui-sheng.LIU Ke 羟基
红花黄色素A对实验性心肌梗死大鼠的保护作用及机制[期刊论文]-中草药2007,38(12)
2. 龚学忠 丹参、灯盏花、银杏叶对心肌缺血及血液流变性影响的研究进展[期刊论文]-中国处方药2005(12)
3. 张岭.宋艳.李长龄.刘珂.朱海波 羟基红花黄色素A对常氧/低氧犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响[期刊论文]-中
草药2008,39(1)
4. 樊瑛.杨树森 口服抗凝药治疗冠心病的最新研究[期刊论文]-哈尔滨医科大学学报2004,38(6)
5. 刘丽.刘敏涓.罗承峰.周旭红.冯莹.LIU Li.LIU Min-juan.LUO Cheng-feng.ZHOU Xu-hong.FENG Ying 冠心病患
者抗凝、纤溶功能及单核细胞上CD 40-CD 40L系统表达的研究[期刊论文]-血栓与止血学2008,14(6)
6. 黄相中.黄霁秋.庾石山.胡友财.屈晶.刘悦 柳叶金叶子叶的化学成分研究[期刊论文]-中草药2007,38(6)
7. 韩丽英.刘璐.杨玉香 疏血通对不稳定型心绞痛患者血液高凝状态的影响[期刊论文]-邯郸医学高等专科学校学
报2005,18(5)
8. 李吉林.王伟 血栓调节蛋白与冠心病关系研究进展[期刊论文]-中国血液流变学杂志2004,14(1)
9. 朱剑铭 脑卒中诊疗设备的新进展[期刊论文]-上海生物医学工程2006,27(3)
10. 张蔷蓉 温州民间补肾草药和验方七肾汤[期刊论文]-中草药2008,39(6)
引证文献(29条)
1.姜茁松.王丽娜.耿玮 HPLC测定谷红注射液中羟基红花黄色素A的含量[期刊论文]-中国现代中药 2011(9)
2.夏丽.陈向梅.彭莉蓉.王世祥.王晓雯.左燕.张鹏.刘勤社.郑晓晖 苏木对红花中羟基红花黄色素A的药代动力学影
响[期刊论文]-中国中药杂志 2013(2)
3.任爱农.姚苗苗.王大为 红花注射液热转化的HPLC/UV/MS特征图研究[期刊论文]-中成药 2011(6)
4.王银光.张琴.涂利宽.万敬员.李炯.罗文军 羟基红花黄色素A对脂多糖作用后血管内皮细胞诱导型一氧化氮合酶
表达的影响[期刊论文]-生物技术通报 2009(7)
5.范莉.濮润.赵海誉.刘璇.韩健.王宝荣.果德安 红花抗ADP诱导的血小板聚集活性研究[期刊论文]-中国中药杂志
2011(9)
6.裴崇强.孙春燕.金鸣 注射用红花黄色素缓解油酸诱导的大鼠急性肺损伤作用[期刊论文]-中草药 2010(4)
7.金鸣.董宁宁.吴伟.李金荣.臧宝霞.童静 羟基红花黄色素A缓解大鼠心肌细胞凋亡作用的研究[期刊论文]-中草药
2009(6)
8.贾菲菲.柴秋彦.贾俊.张立伟 红花黄色素B抗凝作用研究[期刊论文]-山西中医学院学报 2009(3)
9.张岭.宋艳.李长龄.刘珂.朱海波 羟基红花黄色素A对常氧/低氧犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响[期刊论文]-中草
药 2008(1)
10.张宇 华法林联用红花水煎剂致泌尿系出血1例分析[期刊论文]-长春中医药大学学报 2012(3)
11.林崇亭.吴达改 红花黄色素治疗慢性肾功能不全的临床分析[期刊论文]-中国临床医生 2011(1)
12.李页瑞.陈勇.王龙虎.陈雪英.刘雪松.孙长海.闫文杰 羟基红花黄色素A双罐组式逆流提取工艺研究[期刊论文]-
中国中药杂志 2009(21)
13.林崇亭.吴达改 红花黄色素治疗慢性肾功能不全的临床分析[期刊论文]-中国临床医生 2011(1)
14.陈俊.肖万泽 红花黄色素治疗糖尿病下肢血管病变临床观察[期刊论文]-湖北中医杂志 2013(12)
15.冯雪科 不同中药组合抗凝血作用的实验研究[期刊论文]-海南医学 2012(4)
16.张荣.王涛.刘启德.陈少洁 高效液相色谱法测定桃仁红花配伍药对中羟基红花黄色素A含量的变化[期刊论文]-
广州中医药大学学报 2009(4)
17.杨志家.王溥.李玲.吴绍华.刘香格 红花黄色素氯化钠治疗冠心病高黏滞血症的疗效评价[期刊论文]-河北医药
2012(22)
18.张宏宇.陈沫.熊文激 红花黄色素抗血栓和降血脂作用的实验研究[期刊论文]-中国实验诊断学 2010(7)
19.昝慧宁.马程浩.王芃.麻宁.王春红.施荣富 邻胺基-羟基吸附树脂的制备及其对羟基红花黄色素HSYA的纯化效果
研究[期刊论文]-离子交换与吸附 2012(3)
20.李晓锋.胡晓茹.戴忠.张燕.梁宏.林瑞超 红花中2个倍半萜的分离和鉴定[期刊论文]-中草药 2012(9)
21.张琳.沈国舜.张镜年.聂培鹤.支建明 羟基红花黄色素A的血管作用及其机制研究[期刊论文]-上海交通大学学报
（医学版） 2009(4)
22.余海.李慧丽.李小丹.刘晓熹.贺翔鸽 中药红花注射液穴位离子导入治疗外伤性玻璃体积血[期刊论文]-国际眼
科杂志 2012(11)
23.秦晓娟.魏宗德 红花黄色素对心血管保护作用的研究进展[期刊论文]-临床荟萃 2009(3)
24.张宇.郑为超 红花黄素抗炎作用机制研究概况[期刊论文]-江苏中医药 2010(9)
25.李桂伟.刘新桥 红花黄色素治疗冠心病研究进展[期刊论文]-中国中医急症 2010(9)
26.萨仁高娃.陈红梅.泉山 蒙药红花化学成分及药理活性研究概况[期刊论文]-内蒙古民族大学学报（自然科学版
） 2009(3)
27.王艺蓉.白咸勇 红花的作用及机制研究进展[期刊论文]-滨州医学院学报 2009(6)
28.周文婷.哈木拉提·吾甫尔.艾尼瓦尔·吾买尔 抗血栓中药的实验研究进展[期刊论文]-中药材 2011(9)
29.姚苗苗.董仲才.任爱农 羟基红花黄色素A的研究进展[期刊论文]-中南药学 2009(12)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200705037.aspx