全 文 ：中革嚆ChineseTraditionalandHerb丑Drugs第37卷第3期2006年3月
图4耒污染陶瓷膜的表面(A)和截面(B)的SEM图
Fig-4SEMpatternofsurface(A)andcrossection
(B)ofcePamicembraneti fouled
围5通过杞菊地黄丸水提液后污染的陶瓷膜的
表面(A)和截面(B)的SEM图
Fig．5SEMpatternofsurface(A)andcrossection
(B)ofceramicembranefouledbyQiju
DihuangPillaqueousextract
最小，只占总阻力的9．9％。
通过红外光谱对微滤杞菊地黄丸水提液的膜污
染物进行定性分析可知膜污染物中分子主要具有肽
键、羰基和羟基。如果采用一定方法测定水提液中物
质组成，就可知某一类非有效成分是造成膜通量下
降及膜污染的主要因素。
污染膜表面沉积层的组成物质的粒径分布情况
为：占有较大体积百分数的粒子的半径集中在
18．627“m左右，而占有较高数量的粒子的半径集
中在0．424pm左右。此结果提示在进行微滤前可
对药液进行预处理。如将药液经过高速离心，沉降药
液中粒径在18．627pm左右，以及粒径在0．424／zm
左右的粒子。将会有效地减轻0．2／zmAI。O。陶瓷膜
的枵染程度，提高膜的药液通量，提高生产效率，降
低生产成本。亦可能使得药效成分的转移率得到一
定程度地改善。但上述结论有待进一步验证。
SEM图中，未受污染的无机陶瓷膜表面光滑，
均匀，组成皮层和支撑层的颗粒清晰可见。污染膜的
表面，可见膜皮面为有一层污染物，将皮层覆盖住。
SEM图中可以清楚地看见膜皮层表面堆杂着大量
污染物，膜孔内未见明显的污染物堆积。由此可知，
在这一杞菊地黄丸水提液微滤系统中膜污染主要是
由于膜吸附截留污染物粒子从而在膜表面形成一层
污染物造成的，即形成表面沉积层，并且，这一阻力
是控制膜的微滤性能和污染情况的主要阻力之一。
膜表面形成表面沉积层的同时污染物粒子也会进入
膜孔，但膜孔中污染物量与表面污染物相比要少得
多。这与本实验中计算出的阻力分布的结果大致相
吻合。但仅根据SEM图像无法判断污染物的状态。
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大孔吸附树脂分离纯化荷叶中阿朴啡类生物碱
王普，罗旭彪，陈波’，姚守拙
(化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室湖南师范大学，湖南长沙410081)
摘要：目的优化大孔吸附树脂分离纯化荷叶中阿朴啡类生物碱的洗脱条件。方法采用大孔吸附树脂柱色谱
法，以不同体积分数甲醇水溶液进行洗脱，分离富集阿朴啡类生物碱，并配以HPLC进行同步监控。结果基于不
同体积分数甲醇水洗脱液对各种阿朴啡类生物碱洗脱能力不同．采用70％、80％、95“甲醇水溶液进行梯度洗脱，
荷叶中3种主要的阿朴啡类生物碱得到了分离富集。70％甲醇水溶液洗去目标物以外的杂质后，75．58％的Ⅳ降
警萎最眢；鸷紧珲等，重大专项。r创新药物盈中药现代化。、。食品安全关键技术，，及湖南省杰出青年基金资助(03JJYl002，2001BA746c
。通讯作害o。陈1BA8波04AT2。1l,：2：：嚣A2嚣器；知E—jl=d，。hen，。@，i。。ma．⋯
万方数据
·356· 中革蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月
荷叶碱和65，03％的。降荷叶碱富集干80％甲醇水洗脱液中，69．46％荷叶碱富集于95蹦甲醇水洗脱液中。各洗脱
液分别蒸干后得固体，Ⅳ一降荷叶碱和。降荷叶碱在相应的固体中质量分数分别为44．ol％、7．61％。荷叶碱在相应
的固体中质量分数为68．52％。结论此方法操作简单、重复性好，能有效分离富集荷叶中阿朴啡类各种生物碱。
关键词：荷叶}0一降荷叶碱；Ⅳ一降荷叶碱；荷叶碱；大孔吸附树脂；富集
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)03—0355—04
Isolationandpurificationofap rphinealkaloidsw thmacroporousadsorptionresin
WANGPu，LUOXu—biao，CHENt30，YAOShou—zhuo
(KeyLaboratoryofChemicalBiologyandTraditionalChineseMedicineAnalysisbyBothHunanProvince
andMinistryofEducation。HunanNorm lUniversity，Changsha410081·China)
Abstract：ObjeetiveTos udytheoptimalelutionc ditionsofmaeroporousadsorptionresinfor
differentaporphine—alkaloidsintheeavesofNelumbonucifera．MethodsMacroporousadsorptionresi
wasusedforadsorption，separation，andelu ofaporphineco centrationalkaloids．Theproc sswa
monitoredbyHPLC．ResultsAccordingtodifferentabilitiesofmethanolaqueouselutionsindifferent
concentration(70％，80％，and95％)toelutedifferentaporphinealkaloids，thatwereusedforgradient
elutionnturn，amIthethreekindsofaporphinealkaloidswereenrichedanoneofthemwaseparated，
Aftertheimpuritieswereabandonedin70％methanolaqueoussolution，75．58％N—nornuciferineand
65．03％0一nornueiferinewermainlycollectedin80％methan01aqueOuSsolution，and69．46％nuciferine
wasenrichedin95％methan01aqueoussolution．Withtheseelutions lutionsdried，theircontentsofN—
nor—nuciferine，O—norciferine，andnuciferinewer44．01％，7+61％，and68．52％intherelativesolid，
respectively．ConclusionThedevelopedmethodissimplewithgoodreproducibility．Itseffectiveto
enrichdifferentaporphinealkaloidsintheleavesofN．nuciferlnesurely．
Keywords：the1eavesofNelumbo月“ci如，WGaerm；0nornueiferine；Nnor ueiferine；nuciferine；
macroporousadsorptionresin；enrich
荷叶为睡莲科植物莲Nelumbo≈ucifera
Gaerm．的叶，具有清热解暑、升发清阳、凉血止血
之功”]。《本草纲目》载“荷叶服之，令人瘦劣”。现代
临床表明荷叶的总碱具有调血脂和降低胆固醇作
用，广泛用于肥胖症及高脂血症o“]。荷叶中生物碱
主要为阿朴啡类生物碱。本实验研究了荷叶中生物
碱的分析方法，以便为荷叶中的阿朴啡类生物碱的
大孔吸附树脂的分离纯化提供检测方法，并且优化
了大孔吸附树脂对不同生物碱的洗脱条件。
l仪器与材料
岛津I。c一10Avp高效液相色谱仪(配有
SPD10Avp紫外检测器，SIL10Avp自动进样
器)。JCX--250W超声波清洗器(山东济宁电子仪器
厂)，LD42A高速离心机(上海安亭科学仪器厂)。
HPDi00大孔吸附树脂(河北沧州宝恩化工
有限公司)；荷叶碱、o一降荷叶碱、Ⅳ一降荷叶碱对照
品(HPI。C测定纯度均在98％以上)，荷叶碱提取物
均由本实验室制备，1g提取物含荷叶生药材】0g，
产地湖南长沙。二次蒸馏水，试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 对照品溶液的制备：精密称取荷叶碱对照品
50mg、N降荷叶碱对照品25mg、O-降荷叶碱对照
品35mg置于10mL量瓶中，加甲醇超声溶解并稀
释至刻度。精密量取1．0mL置10mL量瓶中加甲
醇稀释至刻度，配成对照品溶液。再将这些对照品溶
液稀释成一系列不同质量浓度标准溶液，其中荷叶
碱、Ⅳ降荷叶碱、o一降荷叶碱溶液的质量浓度范围
分别为0．50～500／19／mL，0．25～250pg／mL，
0．35～350pg／mL。色谱图见图】。
2．2供试品溶液的制备：精密称取不同比例甲醇洗
脱物10mg左右．置于50mL量瓶中，加甲醇超声
溶解，并稀释至刻度。过0．45pm滤膜，备用。
2．3高效液相色谱法测定荷叶中阿朴啡类生物碱
2．3．1色谱条件：色谱柱：岛津VP--ODS柱(150
mm×4．6mm)；流动相：A(o．1％三乙胺水溶液)一B
(乙腈)线性梯度洗脱：0rain、60％A，0～15rain、
60％～20％A，15～20min、20％～0HA；检测波长：
280nm；体积流量：1mI，／min；柱温：室温。
2．3．2线性关系考察：以上述的一系列不同质量浓
度对照品溶液，分别进样lopL，以进样量为横坐
标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，并用线性回归方
程拟合。结果见表1。
2．4大孔吸附树脂纯化条件的考察
2．4．1树脂的预处理及再生：取HPD一100大孔吸
万方数据
中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月
t／rain
1 o降荷叶碱2Ⅳ一降荷叶碱3荷叶碱l—o—nornuciferl帅2N⋯⋯c】feri⋯3nuclferine
圈l D一降荷叶碱、Ⅳ一降荷叶碱和荷叶碱对照品的
HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfO-nornuciferine
N-nornuciferine，andnuciferinereference
$11bstances
表1线性方程殛线性范围
Table1 Linearequationandlinearranges
附树脂用甲醇浸泡24h后，装入树脂柱，用甲醇冲
洗，直至流出液不产生乳白色浑浊时，再用蒸馏水冲
洗至无醇味即可。
2．4．2上柱样品的制备：精密称量0．65g荷叶提取
物，以400mLl％盐酸水溶液超声提取2h，4000r／
min离心5min，取上清液。沉淀中再加入400mL
1％盐酸水溶液，超声，离心，取上清液。余下的沉淀继
续加1％盐酸水溶液200mL，重复上述步骤，最后将
3次上清液合并，定容至1D00mL供上柱用。
2．4．3静态吸附试验：准确平行称取3份处理好的
干树脂，每份1g，置于500mL磨口烧瓶中，加入已
知量的吸附原液，盖紧瓶塞，室温下放置24h，(每8
h振荡1次)，充分吸附后滤过，对滤液进行HPLC
测定，计算吸附容量。每1g干树脂对Ⅳ降荷叶碱、
荷叶碱、o一降荷叶碱的平均吸附容量分别为5．919、
7．596和0．676mg。
2．4．4洗脱条件的研究：采用小径柱探讨阿朴啡类
生物碱的分离富集条件。准确称取0．66g荷叶提取
物，上清液定容至1000mL，得上柱液，上柱(21
cm×2．5cm)。依次用水，20％、50％、60％、65％、
70％、75％、80％、85％、90％、95％甲醇水溶液各5
倍柱体积进行洗脱，流量为7．5mL／min，其中水洗
得到的溶液中不含阿朴啡类生物碱。分段收集从
20％甲醇开始的洗脱液(每份1倍柱体积，共50
份)，分析各洗脱液中阿朴啡类生物碱，绘制洗脱曲
线。图2为。一降荷叶碱、Ⅳ降荷叶碱、荷叶碱的洗脱
曲线。结果表明不同体积分数甲醇水洗脱液对不同
阿朴啡类生物碱洗脱能力不同，80％甲醇水洗脱液
能洗脱出75．58％Ⅳ一降荷叶碱和65．03％0一降荷
叶碱，95％甲醇水洗脱液可洗脱出69．46％荷叶碱。
图3为95％、80％甲醇水洗脱液色谱图。从洗脱曲
线和色谱图中可以看出在95％甲醇洗脱液中荷叶
碱可以单独洗出，而在其他体积分数的甲醇洗脱液
中，在富集了Ⅳ降荷叶碱或。一降荷叶碱同时也洗
出了其他生物碱。
收集号
盈2阿朴啡类生物碱洗脱曲线
0 4 8 12 16 20
|lrain
1O降荷叶碱2Ⅳ降荷叶碱3荷叶碱
1 Onornuciferine2一N⋯⋯ctferine3- uciferine
图3 80％甲醇水(A)和95％甲醇水(B)洗脱液的
HPLC圈谱
Fig．3HPLCChromatogramsof80％ ethanol
elution(A)and95％methanolelution(B)
2．5工艺验证：10g样品上大孔吸附树脂柱，分别
一
3●●iiijiiijiii¨，㈡f一
万方数据
·358· 中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrags第37卷第3期2006年3月
用5BV70％甲醇水溶液洗脱，再依次用10BV
80％甲醇水溶液，10BV95％甲醇水溶液洗脱，
80％、95％甲醇水洗脱液浓缩，干燥，称重。HPLC法
测定阿朴啡类生物碱，结果见表2。
表2 阿朴啡类各种生物碱的洗脱结果
Table2 Optimalelationresultsofvarlollsalkaloids
belongingtoaporphine
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喷雾干燥技术制备麦冬皂苷肠溶微球的处方设计研究
沈岚，冯怡，徐德生，林晓
(上海中医药大学药剂教研室，上海201203)
摘要：目的探索喷雾干燥技术制备麦冬皂苷肠溶微球的处方因素对镦球成型性的影响。方法单因索考察肠
溶囊材型号、用量、增塑剂种类、抗黏剂类型与用量，采用正交设计对肠溶微球处方进行优选。结果国产丙烯酸树
脂I和微粉硅胶均能满足制剂需要；最佳处方为药物与囊材比例1：4，蓖麻油用量1％，微粉硅胶用量1．5％。结论
麦冬皂苷肠溶微球质量符合预期要求；国产此类药用辅料有望成为肠溶微球生产的主要原料；处方设计研究为
采用喷雾干燥技术实现中药微囊化提供可靠的依据。
关键词：麦冬皂苷肠溶微球；处方设计；喷雾干燥技术
中围分类号：R286．02 文献标识鹤：A 文章编号：0253—2670(2006)03—0358—04
PrescriptiondesignfOphiopogonjap icussaponinentericm rosphere
byspraydryingtechnique
SHENLan，FENGYi，XUDesheng，LINXiao
(ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai201203，China)
Abstract：ObjectiveToexplorethprescriptionfactornophiopogonjap icussaponinenteric
microspherebyspraydryingtechnique．MethodsObservingthetypeandcontentofentericcoating
material，thetypeofplasticizer，thetypeandosageofantistiekinessmaterialbysinglefactor．Optimizing
theprescriptionbyorthogonaltestdesign．ResultsBothEudragitⅡandmicronizationsilicagelmadein
Chinacouldmeettheneedofthepreparation．Thebestprescriptionincludedtheproportionbetweendrug
andentericcoatingmaterial(1；4)，thedosageofcastoroiI(1％)，andthedosageofmicronizationsilica
gel(1．5％)．ConclusionO．japonicussaponinentericm erosphereaccordedwiththexpectingdemand．
Thekindofmedicalsubsidiarym terialm deiOC．hinawillbethemainrawmaterialinproducingthe
entericmicrosphere．Thestudyofprescriptiondesignwillprovideth basisfor ealizingmicroencap—
sulationinChinesemateriamedica．
Keywords：Ophiopogon—ponicussaponientericmicrosphere；prescriptiond ign；spraydrying
technique
喷雾干燥技术是较易实现工业化生产的微囊化
手段之一，其影响制剂成型及药物吸收的主要因素
包括处方组成、药物粒径、药物与囊材比、加料速度、
收稿日期：2005—05—30
囊材种类等，其中尤以处方组成最为关键。
前期药效研究结果证实，麦冬总皂苷能显著对
抗异丙肾上腺素引起的心肌缺血，成为麦冬抗心肌
万方数据
大孔吸附树脂分离纯化荷叶中阿朴啡类生物碱
作者： 王普， 罗旭彪， 陈波， 姚守拙， WANG Pu， LUO Xu-biao， CHEN Bo， YAO Shou-zhuo
作者单位： 化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室,湖南师范大学,湖南,长沙,410081
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(3)
被引用次数： 10次

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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200603015.aspx