全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6月·841·
2．6验证试验：4kg圆背角无齿蚌匀浆，在4℃以
下用4倍蒸馏水提取1次，醇沉时乙醇体积分数为
70％，盐析的氯化钠溶液质量浓度为8％，进行了批
样品验证，结果收率分别为0．5％、0．6％、0．575％，
含糖量分别为42．84％、45．23％、43．56％。
3讨论与结论
采用综合加权评分法的分析方法进行评估，进
行方差分析得到结果。可以看出不同水平的水提次
数、醇沉体积分数、盐溶的氯化钠质量浓度对测定结
果影响都不显著。多次提取可以提高收率，但影响不
很显著，工时大为延长，效率不高，选择水提1次。盐
析的氯化钠溶液质量浓度较低时，提取的有效组分
外观、质量较好。通过对数据的直观分析，水提1次，
醇沉的乙醇体积分数为70％，盐溶的氯化钠质量浓
度为8％，综合分较高，因此作为最佳工艺。
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HPLC法测定灵丹草软胶囊中臭灵丹酸
梅之南，杨建科2，李效宽1，李芸芳1
(1．中南民族大学民族药物研究所，湖北武汉430074；2．湖北南洋药业有限公司，湖北武汉430022)
摘 要：目的 建立HPLC法测定灵丹草软胶囊中臭灵丹酸的方法。方法采用AgilentZorbaxXDB-Cts色谱柱
(250mm×4．6mm，5ttm)，流动相：乙腈一水(60：40)，检测波长：210nm，体积流量：1．0mL／min，柱温：25℃。结果
臭灵丹酸线性范围为12．91～129．1Fg／mL(r一0．9999)，平均回收率为99．7％，RSD为2．o％。结论该测定方法
简便快捷、精密度高、准确性好，可以作为灵丹草软胶囊的定量测定方法，以控制其质量。
关键词：灵丹草软胶囊；臭灵丹酸；高效液相色谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)06—0841—03
Determinationofp erodonticacidinLingdancaoSoftCapsulabyHPLC
MEIZhi—nan，YANGJian—ke，LIXiao—kuan，LIYun—fang
(1．InstituteofE hicMedicine，South—CentralUniversityforNationalities，Wuhan430074，China；2．Hubei
SouthOceanPharmaceuticalCo．，Ltd．，Wuhan430022，China)
Abstract：ObjectiveToestablishanHPLCmethodforeterminationofp erodonticacidinLingdan—
caoSoftCapsula．MethodsAgilentZorbaxXDB—C】8column(250mm×4．6mm，5肚m)wasused．Aca—
tonitrile—water(60t40)wasusedasmobilephase，thedetectionwavelengthwas210nm，flowratewas
1．0mL／min，andcolumntemperaturewasat25℃．ResultsThelinearrangeofpterodonticacidwas
12．91—129．1tLg／mL(r一0．9999)，theaveragerecoveryrateofpterodonticacidwas99．70A，RSDwas
2．O％．ConcLusionThemethodiSsimple，accurate，andeliable，anditc beusedtothequalitycontrol
ofthispreparationeffectivelyasaquantitativemethod．
Keywords：LingdancaoSoftCapsula；pterodonticacid；HPLC
灵丹草为菊科植物臭灵丹Laggerapterodonta
(DC．)Benth．的干燥地上部分，具有疏风、解毒利
咽、止咳祛痰的作用。《滇南本草》记载其有“治风热
积毒、痈疽、疮疖、疥癣、白风癣疮”等功效。灵丹草已
上市的剂型有颗粒剂‘1|、胶囊剂和片剂，其工艺技术
特点是将处方中的药材提取挥发油后，滤液浓缩成
收稿日期：2006—10—15
作者简介：梅之南(1970一)，男，博士，副教授，主要从事新药的研究与开发。
Tel：(027)67843237Fax：(027)67843220E—mail：imm—scuec@mail．scuec．edu．cn
万方数据
·842· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6,el
浸膏，将干燥的浸膏粉碎后加入适当的辅料直接灌
胶囊，或者进行制粒、干燥后压制成片剂，并包衣。为
了提高药物的稳定性，掩盖药物的不良臭味，笔者制
备了灵丹草软胶囊。本实验主要采用HPLC法测定
灵丹草软胶囊中具有抗菌活性的有效成分臭灵丹
酸，控制该制剂的质量，更有效地保证其临床疗效。
1仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪，包括DAD检测
器，自动进样器。
臭灵丹酸对照品为自制品，UV、IR、MS、1H—
NMR、13C—NMR波谱数据与文献报道[2~4]一致，经
HPLC法鉴定其质量分数在99．0％以上。灵丹草软
胶囊为自制品，每粒装0．6g；乙腈为色谱纯，水为重
蒸馏水。
2方法与结果
2．1检测波长的选择：经对臭灵丹酸对照品溶液进
行紫外扫描，发现在230nm以下有紫外吸收，考虑
到该色谱下样品有较好的紫外吸收，又能将溶剂的
吸收尽量降低，因此选用210am为检测波长。
2．2色谱条件：色谱柱：AgilentZorbaxXDB—C18
(250mm×4．6mm，5pm)；流动相：乙腈一水(60：
40)；检测波长：210nm；体积流量：1．0mL／min；柱
温：室温。理论塔板数按臭灵丹酸计算不低于6000。
2．3对照品溶液的制备：精密称取臭灵丹酸对照品
适量，加甲醇制成50btg／mL的溶液，摇匀，作为对
照品溶液。
2．4供试品溶液的制备：取灵丹草软胶囊10粒，倾
出内容物，约取1．50g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
精密加入80％甲醇25mL，密塞，称定质量，超声
(功率300W，频率25kHz)处理40min，放冷，再称
定质量，用80％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，
取续滤液，作为供试品溶液。
2．5干扰试验：按灵丹草软胶囊的处方制备不含灵
丹草干浸膏和挥发油的阴性样品，照供试品溶液的
制备方法制备阴性样品溶液，进样测定，结果见图
l。结果表明阴性样品对测定无干扰。
2．6线性范围的考察：精密称取在60℃减压干燥
2h的臭灵丹酸对照品适量，加甲醇制成含臭灵丹
酸258．2弘g／mL的对照品溶液，摇匀。分别精密量
取该溶液0．5、1、2、3、5mL置10mL量瓶中，用甲
醇依次稀释成系列对照品溶液。分别进样20肛L，测
定，记录色谱峰面积。将峰面积与相对应的质量浓度
进行回归处理，计算回归方程为Y一52．12X一
17．62，r一0．9999。结果表明臭灵丹酸在12．91～
k c
0 ， lU l， 20
t／min
*一臭灵丹酸
*-pterodonticacid
图1臭灵丹酸对照品(A)、灵丹草软胶囊(B)和阴性样
品(C)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsofpterodonticacid
referencesubstance(A)，LingdancaoSoft
Capsula(B)，andnegativesample(C)
129．1pg／mL时与相应峰面积呈良好的线性关系。
2．7精密度试验：取50ptg／mL臭灵丹酸对照品溶
液，重复进样测定6次，结果臭灵丹酸峰面积的
RSD为0．44％。
2．8重现性试验：取批号20050401灵丹草软胶囊
样品6份，制备供试品溶液，进样测定峰面积，并计
算其中臭灵丹酸的质量分数，结果臭灵丹酸的平均
质量分数为0．87mg／g，RSD为0．99％。
2．9稳定性试验：取批号20050401灵丹草软胶囊
样品制备供试品溶液，分别在0、2、4、6、8h进样20
肚L，测定，记录峰面积，结果臭灵丹酸峰面积的RSD
为1．4％。表明被测溶液在8h内稳定。
2．10加样回收率试验：取含臭灵丹酸0．52rag／粒
的批号20050401灵丹草软胶囊样品3份，每份
0．75g，精密称定，分别加入0．34、0．68、1．02mg
臭灵丹酸对照品，制备供试品溶液，进样测定。结果
平均加样回收率为99．7％，RSD为2．o％(九一9)。
2．11样品的测定：分别称取不同批号灵丹草软胶
囊样品，制备供试品溶液，分别精密吸取臭灵丹酸对
照品溶液和供试品溶液各20肛L，记录峰面积，计算
灵丹草软胶囊中臭灵丹酸的质量分数，结果见表1。
表1灵丹草软胶囊中臭灵丹酸的测定结果(矗一3)
Table1 DeterminationofpterodonticacidinLindancao
SoftCapsula(^一3)
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6月·843·
3讨论
本实验通过对甲醇一水、甲醇一0．2mol／L磷酸
二氢钠、乙腈一水不同比例的流动相系统进行比较，
发现乙腈一水(60：40)系统分离效果较好，峰形对
称，故选择此系统为流动相。在该条件下，臭灵丹酸
峰分离良好，峰形对称，理论板数按臭灵丹酸峰计算
不低于6000，臭灵丹酸与相邻色谱峰的分离度大于
2．0，且阴性样品无干扰。
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丹参中总酚酸的分离纯化工艺研究
杨小宁，唐 星，柳玉石
(沈阳药科大学药学院，辽宁，沈阳 110016)
摘 要：目的 考察不同分离纯化工艺对丹参中酚酸类成分提取效率的影响。方法 以丹参提取液中丹酚酸B和
总酚酸转移率为指标，考察不同分离纯化工艺，并采用HPLC法测定各成分的量。结果纯化工艺确定为60％、
80％乙醇醇沉两次，相应乙醇体积分数洗涤沉淀；醋酸乙酯和10％碳酸钠溶液交替萃取。结论水提醇沉和醋酸乙
酯萃取法适合于丹参总酚酸的分离纯化。
关键词：丹参；丹酚酸B；丹参总酚酸；醇沉
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)06—0843一03
SeparationandpurificationofsalvianolicacidsfromSalviamiltiorrhiza
YANGXiao—ning，TANGXing，LIUYu—shi
(SchoolfPharmacy，ShenyangPharm ceuticalUniversity，Shenyang110016，China)
Keywords：SalviamiltiorrhizaBunge；salvianolicacids；salvianolicacidB；al oholsedimentation
丹参为唇形科植物丹参Salviamiltiorrhiza
Bunge的干燥根茎，其有效成分包括水溶性成分和
脂溶性成分。脂溶性成分是以丹参酮为代表的醌类
化合物，具有良好的抗炎作用；水溶性成分主要有丹
参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、咖啡酸、丹酚酸
A、B等，总称为总酚酸。丹参总酚酸具有明显的抗
血栓形成、溶纤和抗脂质过氧化的作用，是治疗心肌
缺血、心绞痛、心肌梗死等心血管疾病的有效成分，
其中丹酚酸B的量最高，而且是主要的活性成分[1]。
丹参水溶性成分的提取方法多采用水提醇沉法，醇
沉效率低，损失大[2]，且所得产物的质量分数低。本
实验在原有方法的基础上，对总酚酸的分离纯化工
艺进行了新的研究，并以药材中有效成分转移的程
度(转移率)为考察指标，对各个工艺步骤及终产物
的总酚酸与丹酚酸B的提取效率进行了测定。
1仪器与材料
收稿日期：2006一10—04
Hitachi高效液相色谱仪，HSM色谱工作站；
Jspes2012—5—10000、Jspes2012—5—100000聚醚
砜膜组件(50mm×300ram)由吉林市金赛科技开
发公司提供。
丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素钠对照品均购于中
国药品生物制品检定所，迷迭香酸对照品由北京百
灵威化学品有限公司提供，甲醇为色谱纯，其他试剂
均为分析纯，去离子水。丹参饮片产自安徽，经鉴定
为丹参S．miltiorrhizaBunge的干燥根茎。
2方法与结果
2．1 总酚酸的HPLC法测定[3]：配制适宜质量浓
度的对照品溶液，采用外标两点法分别测定丹酚酸
B、迷迭香酸、原儿茶醛和丹参素(以丹参素钠计)的
量，以4种成分的量之和作为总酚酸的量。
2．2丹参中总酚酸的测定：取丹参饮片，粉碎至40
万方数据
HPLC法测定灵丹草软胶囊中臭灵丹酸
作者： 梅之南， 杨建科， 李效宽， 李芸芳， MEI Zhi-nan， YANG Jian-ke， LI Xiao-kuan，
LI Yun-fang
作者单位： 梅之南,李芸芳,LI Xiao-kuan,LI Yun-fang(湖北南洋药业有限公司,湖北,武汉,430022)，
杨建科,李效宽,MEI Zhi-nan,YANG Jian-ke(中南民族大学民族药物研究所,湖北,武汉
,430074)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(6)
被引用次数： 1次

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引证文献(1条)
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