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Relationship of dynamic changes between protein contents in vegetative organs and growth years of Phytolacca acinosa

商陆营养器官中蛋白质量与生长龄动态变化关系研究



全 文 :中革番ChineseTrsd|tlonalandHerbalDrugs纂38卷第9期2007年9月
商陆营养器官中蛋白质量与生长龄动态变化关系研究
王桂芹,王玉良,代光照
(安徽科技学院生物系。安徽凤阳233100)
摘耍:目的为商陆的开发和利用提供依据。方法利用光学显微技术、组织化学定位方法对美洲商陆Phytolacca
decandra不同生长龄的根、茎和叶进行解剖结构研究。结果除幼根外,不同生长龄的营养器官中均有活性蛋白质分
布,薄壁细胞是恬性蛋白质分布的场所。结论幼茎中蛋白质的量最为丰富,颗粒也较大.与老叶、幼叶、老茎和老根
中蛋白质的数量厦大小差异极显著l二年生的贮藏根中不含蛋白质,额外形成层中几乎不舍蛋白质。
关键词:商陆;营养器官,蛋白质;不同生长龄}解剖结构罐i织化学定位
中圈分类号:R282.7 文献标识码tA 文章编号:0253—2670(2007)09一1396—04
Relationshipofdynamicchangesb tweenproteinco tentsinvegetativeorgans
andgrowthyearsofPhytolaccaacinosa
WANGGui—qin,WANGYu-liang,DAIGuang—zhao
(DepartmentofBiology.AnhuiCollegeofScienceandTechnologytFengyang233100,China)
Abstract:ObjectiveTopro idebasisforidentificationandutilizationofPhj,tolaccade ndra·
MethodsAnatomicstructuresofdifferent—agedstoringroots.stemsandleavesofP.decandrawe e
studiedbylightmicroscopeandhistochemicallocalization.ResultsDifferent—agedvegetativeorganshave
activeproteinsexcepttheyoungroots,andtheproteinusedtoexistinparenchymaceils.Conclusion
Proteinco tenti youngstemsisthehighestandthegrainsizeisbiggerthantheothero gans,andthe
proteinco tenta dgrainsizeinyoungstemshavenotabledifferencesfromthatintheoldleaves,young
leaves,oldstemsandroots.Noproteinhasbeenfoundintwo—year—oldstoringrootsandextrac mbium,
Keywords:Phytolaccadec ndraL.Ivegetativeorgan}proteins;differentgrowthyea s}anatomic
structurel histoehemical10cation
商陆是一种常见的药用植物。我国有4种:商陆
(野萝h)PhytolaccaacinosRoxb.、美洲商陆(垂序
商陆,十蕊商陆)P.decandraL.、多雄蕊商陆P.
polyandraBatalin及日本商陆P.血ponica
Makino,以美洲商陆分布广泛、资源丰富Ct,z]。长期
以来,商陆主根是传统的泻下逐水药,具有逐水消
肿、解毒散结、利尿等功效,用于治疗水肿、胀满、痛
肿等症口“】。现代药理研究表明,商陆营养器官中含
有商陆皂苷和商陆多糖,二者均有较强的免疫活性
作用,商陆多糖对免疫功能有促进作用,以50rag/
kg商陆多糖对小鼠灌胃,能促进腹腔巨噬细胞吞噬
功能,并刺激小鼠脾淋巴细胞增殖及诱导脾细胞产
生,还能诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生白介素一1
(IL—1)口]。国外近年来药理和临床实验表明,从商陆
叶片与种子中可以提取一种抗病毒蛋白,这种抗病
毒蛋白通过抑制人体免疫缺损病毒(即艾滋病病毒)
的复制可达到治疗艾滋病的目的。美国和南非已经
用商陆抗病毒蛋白为原料制成了抗艾滋病病毒的新
药,其疗效比tB前使用的药物高100~1000倍““],
可见商陆具有良好的开发前景。目前国内外对商陆
的药用价值以及药理作用都有过研究报道,但对商
陆进行解剖结构的比较研究未见报道,研究商陆根、
茎、叶中活性蛋白质的量与不同生长龄的动态变化
关系,对进一步研究开发商陆植物资源在抗病毒领
域的潜力具有一定的理论和实践意义。
1材料与方法
1.1材料:研究材料是美洲商陆的幼茎和老茎,幼
叶和老叶,二年生、三年生、四年生和六年生根。实验
前采自生长在校园中的美洲商陆。
1.z方法
警鍪晶留:婺蓄吾§銎院引进人才专项资助基盘(zRCz00436)
作者简介:王桂芹(1954--),女,内鼙古赤峰人,教授,学士,从事结构植物学研究.Tel:(0550)6734158E.maillwgqzll6@8;m.tom
万方数据
中革茵 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第3s卷第9期200/年9.el
1.2.1醋酸铅沉淀处理:截取茎、叶的适当部位,贮
藏根截取离茎最近的部分,醋酸铅浸泡24h,以沉
淀商陆植物体内的活性蛋白质。然后转移至FAA
固定液固定,并用FAA一甘油(1t )的软化剂对贮
藏根进行软化处理。
1.2.2切片:采用石蜡切片法制片,切片厚度为12
pm,番红一固绿双重染色,实验数据均为12个测量
值的平均值。 .
1.3数据处理:随机观察1z个视野,记录蛋白质颗
粒数目。同时用测微尺随机测量12个数据,记录蛋
白质颗粒的长度,井通过新复极差(LSR)法进行差
异显著性分析。
2结果与分析
2.1叶横切面结构与蛋白质分布及其量的变化:叶
的上表皮细胞近乎椭圆形,较大,存在稀疏的表皮
毛,上表皮中气孔量少}组成下表皮的细胞小,呈方
形或长方形,下表皮中气孔较多;叶肉中栅栏组织由
1~2层细胞构成,排列比较疏松,具有发达的细胞
间隙f海绵组织中细胞呈不规则形,排列疏松,细胞
间隙丰富。叶肉细胞中含有针状晶体,叶绿体的量较
高,叶中的维管柬构造与其他双子叶植物相同(图
1—1~4)。被醋酸铅沉淀的蛋白质呈不规则型,蛋白
质主要分布在叶肉细胞、韧皮部等薄壁细胞中,表皮
细胞中也有零星分布。
幼叶横切面叶肉中各种组织分化还不完全,整
个叶面宽度较狭窄,叶肉细胞中蛋白质颗粒量较少,
平均每个视野仅为0.83个(表1),且蛋白质颗粒也
较小,平均个体长度为13.13pm(表2)。
老叶中各种组织分化完全,蛋白质量较丰富。平
均每个视野为2.92个(表1),蛋白质颗粒也较大,
平均个体长度为21.99pm(表2)。
2.2茎横切面结构与蛋白质分布及其量变化:商陆
幼茎的横切面呈圆形,具有发达的皮层和髓部。在皮
层、髓和髓射线的细胞中有蛋白质颗粒分布(图1—
5),皮层中的蛋白质颗粒大于髓部。幼茎中蛋白质的
颗粒数为平均每视野5.33个(表1),平均个体长度
为30.25pm(表2)。
老茎的横切面呈不规则形,具有发达的髓腔和
次生木质部,次生韧皮部较窄。蛋白质颗粒仅分布于
次生韧皮部的薄壁细胞中(图1—6),平均每个视野
为1.75个(表1),蛋白质颗粒较小,平均长度为
9.69pm(表2)。
z.3根横切面结构与蛋白质的关系’
2.3.1商陆二年生根横切面结构与蛋白质分布:商
陆二年生根的横切面结构由外及里依次为周皮、次
生维管组织。构成周皮的术栓很发达,由4~6层细
胞构成,细胞较小,具有两种类型;不规则形和长方
形。栓内层较窄,由2~4层细胞构成,次生维管组织
中,次生韧皮部的量较大,次生木质部所占比例较
小,仅为根横切面的i/3,主要由导管、管胞、木纤维
和少量薄壁细胞组成。各种组织的薄壁细胞中均不
存在蛋白质(图1—1~7)。 .
2.3.2三年生商陆根的横切面结构与蛋白质分布
及其量:三年生商陆根的横切面与二年生的次生构
造基本相同,不同点有:构成周皮的栓内层厚度明显
增加,由8~10层细胞组成}出现了三生结构,额外
形成层产生于次生韧皮部外围的薄壁细胞,额外形
成层向内分裂形成大量薄壁组织。少数薄壁细胞中
有了少量淀粉粒和蛋白质的形成(图l-1~8),其中
蛋白质平均每视野为1个(表1),平均长度是12.84
pm(表2)。
2.3.3四年生商陆根的横切面结构与蛋白质分布
及其量:具有较厚的栓内层,由22~23层细胞构成
(图I-l~9),细胞的直径较小,具有2轮额外形成
层,三生薄壁组织更为发达,占根横切面的4/5,三
生结构中维管束呈环排列,量十分稀少(图1-I~
10)。细胞中含有丰富的淀粉粒和蛋白质,平均每视
野蛋白质的量为1.33个(表1),蛋白质个体较大,
平均长度为19.42pm(表2)。
2.3.4六年生根的横切面的结构及蛋白质分布及
其量:商陆六年生根横切面具有3轮额外形成层。三
生构造中维管柬在横切面的外方仍是呈轮排列,但
近中央部位已分化形成了十分丰富的木质部,三生
薄壁组织的量仅占根横切面的3/5(图1-11,12)。薄
壁细胞中蛋白质数量有所增加,平均每视野蛋白质
量为2.17个(表1),但其大小均有所下降,平均长
度为15.41pm(表2)。
2.4蛋白质在商陆不同器官(不同生长龄)内的分
布和量的变化规律及差异显著性分析:结果说明,商
陆的营养器官中除二年生根外,不同器官及不同生
长龄的同一器官内均有蛋白质的存在,同时蛋白质
均分布在各种营养器官的薄壁组织的细胞中。在贮
藏根中蛋白质分布在三生薄壁组织的细胞中,而宽
大的形成层中很少有蛋白质的分布。
蛋白质在商陆植物体内量的变化规律是:蛋白
质在幼芽中量最为丰富,与老茎、老叶、幼叶及不同
生长龄的贮藏根比较差异极显著(P<0.01);在不
同生长龄(--年生除外)的贮藏根中蛋白质量变化差
万方数据
中草番ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第9期2007年9月
Ef表皮co一皮层Pp-初生韧皮部Pi一髓Pc一髓腔Po-栓内层Pr一蛋白质Pm一薄壁组织
Sx一次生木质部sp一次生韧皮部Vy一赣管射线&一额外形成层
1一商陆幼叶横切面结构.示蛋白质2一商陆老叶横切面结构.示蛋白质3甫陆幼叶横切面结构,示蛋白质4一商陆老叶横切面结构,示蛋
白质5-商陆幼茎横切面结构。示表皮、皮层,韧皮部.髓、蛋白质6一商陆老茎横切面结构,示欢生韧皮部,攻生木质部、髓腔7墒陆二年
生根横切面结构8一商陆三年生根擞切面结构,示栓内层、微管射线、次生韧皮部、颠外形成层,蛋白质9一商陆四年生根横切面结构,示挂
内层、次生韧皮部,蛋白质10一商陆四年生根横切面结构,示弛管射线1l一商陆六年生根横切面绡椅,示栓内层,次生韧皮邦、蛋白质12-
商陆六年生根横切面结构,示徽昔射线、蛋白质
E-epidermlsCo-cc叶exPp-primary讪doemPi—phhPc—pithcavhyPo-pheIIc_dernPr—pxotelnpm-pexenchyam
Sx—secondaryxylemSD—secondarypholemvr—vascularraySe-supernumerarycambium
1一traiLsvefsviewofyoungleafinP.decandra.showingprotein2-trsnsveviewofoldl afinP·decandra,showingprotein3-trai18vel-s
viewofoldleafinP.decandra.showingprote 。parenchyma4-tr|lnsversvi wofoldleafinP·decandra,showingprotdn5-traBsver8
viewofyoung日teminP.decandra。showingepidermis,cortex,primarypholem,pith,andprotein6-t姗ve删viewofoldsteminP·
decandra.showingecondaryphloem,secondaryxylem,andpithcavity7一trgnsversviewoftwo—year-rootinP·decandra8-tr&tLqvers
viewofthree—year—i-OEdinP-d口andra.showingphellnderm,vascularray,secondaryphIoem,supernumerarycambium,andprotein9+
trflnitvl!rt;viewoffour—year-rootinP.decandratShowingphellnderm·prtein.andseco d ryphloem10-transversvi wofoldsteminP.
decandra.showingvmmeuhrray11一transversvi wof ix—year—rootinP.dec.ndra,showingp elloderm,protein,andsecondaryphloem
12一trarmversvi wofoldsteminP-decandra·showingvascularrays dprotein
圈1美洲商陆横切面
Fig.1CrossectionsofP.decandra
异不显著;蛋白质在幼叶内量最少,与老叶比较差异 的原因可能与化学防御有关。商陆幼茎中蛋白质颗
极显著;幼叶与不同生长龄的贮藏根及老茎比较差 粒的平均长度最大。商陆幼茎与老茎呈极显著差异
异不显著(表1)。蛋白质在幼芽中的量较老茎多,原 (尸因是商陆属于多年生植物,贮藏根中营养储藏丰富, 著差异(尸为幼茎生长提供了充足的养分,幼茎长势好、较租 蛋白质颗粒大小比较差异无显著性(表2)。
壮,粗壮的幼茎中富含薄壁组织(髓部存在),而老茎 3结论与讨论
中薄壁组织的量较少,髓部的薄壁细胞已破碎形成 3.1对商陆植物的有效利用:由于商陆营养器官中
髓腔。蛋白质在老叶中的量较幼叶多也与叶中薄壁 蛋白质的量是有变化的,因而如果以获取抗病毒蛋
组织的量有关。从而证明,商陆植物体地上部分蛋白 白质为目的,则应考虑合理利用商陆的营养器官问
质的量与薄壁组织相关。地下部分蛋白质的量较少 题,传统用药仅用其根,地上部位通常则被丢弃,对
万方数据
中革黄ChineseTraditionalndHerbalDrugs第38卷第9期2007年9月
衰1置自质量的差异丑着性(LSR)
Table1 Notabledifferencesfproteinco tent(LSR)
寰2墨白质颗垃长度的差异显著性(LSR)
Table2 Notablediffeienc器ofprotein
particlelength(LSR)
资源而亩无疑是一种浪费。根据在商陆的营养器官
幼茎中所发现的蛋白质的量最为丰富这一实验结
果,可以采取在一年之内收获2~3次幼茎以获取较
多的商陆活性蛋白质,同时也可以从老叶、老根和老
茎中获取。
3.2商陆植物体内蛋白质分布与化学防御的关系:
植物体在长期适应环境的进化过程中形成了复杂的
化学防御体系以避免病、虫害的发生。化学防御的本
质是在细胞内积累或在受到天敌伤害和病原体入侵
时合成某些防御性化合物口]。根据植物化学性质,其
防御化合物分别为:鞣质、生物碱、酚类化合物、植物
激素、蛋白抑制剂和挥发性化合物等o”。已证明商
陆植物体内的活性蛋白质不仅是一种广谱的抗病毒
蛋白[“】,还是蛋白质抑制荆‘”】。活性蛋白质在商陆
植物体内总的分布规律(除老茎和幼叶外)是:地上
部分高于地下部分,幼茎内的量最丰富。幼茎较粗,
又嫩又脆,容易遭受病虫害的侵袭,而实际上商陆植
物体迄今为止未发现任何比较严重的病虫害的发
生,由此推测可能与其化学防御机制有关,活性蛋白
质可能是其体内主要的防御性化合物。 .
RefefenⅢ! .
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万方数据
商陆营养器官中蛋白质量与生长龄动态变化关系研究
作者: 王桂芹, 王玉良, 代光照, WANG Gui-qin, WANG Yu-liang, DAI Guang-zhao
作者单位: 安徽科技学院,生物系,安徽,凤阳,233100
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(9)
被引用次数: 2次

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