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Quality change on Alisma plantago-aquatica at various growing-seedling stages, transplanting stages, and collecting stages

不同育苗期、移栽期和采收期川泽泻质量变化研究



全 文 :·754· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月
究一致;其他成分总体也呈下降趋势。胎菊各项指标
较高,但是产量过低,可作为高等茶饮。挥发油、总黄
酮类化合物是主要解热、降压的成分,其量是菊花入
药的质量保证。本品菊花作为普通饮品或入药,兼顾
产量与质量,最佳采收期应定为半开期和盛开期,即
花的形态为舌状花全开,管状花开40%以下为宜,
加以形态指标更利于控制产品质量均一性。
3.2引种地与原产地样品比较:统计分析比较原产
地与引种地挥发油量,结果显示没有显著差异(P>
0.05)。直观分析挥发油量看,原产地桐乡样品高于
引种地。但从形态学看,桐乡样品以胎菊和杯菊为
多,芮城同花期(半开期以前)样品挥发油量也在
0.3%以上,与原产地相当。原因是2005年10月中
旬采收期间,当地连续下雨无法采收,整体推迟了采
期,因此成品中多见花后期菊花。所以山西芮城引种
的白菊花在严格控制采收期下,内在质量与原产地
相当,因此芮城引种白菊花比较适宜。
3.3不同加工方法比较:由表2可见,传统蒸晒加
工方式样品中挥发油量较低且颜色较浅,可能由于
经过长时间的日晒而导致挥发油的散失,且加工工
序繁琐,不利于大生产;而机械化加工不仅高效卫
生,因加工时间短在挥发油的保留上明显具有优势,
且其他成分量也较高;蒸烘法虽降低了挥发油的损
失,但是其他成分与蒸晒样品相差不大。自菊花中挥
发油的量影响因素以采收期>干燥加工方法>产地
贮藏等。因此机械加工是较好加工工艺。
3.4施肥与否,扦插和普通种苗的比较:为了更科
学地施肥和培育幼苗,本实验对使用肥料和不同培
育苗地块做了对照研究。由表2可知,施肥地块的样
品在各种指标上均有一定的提高,但产品安全性评
价很重要,对各种肥料的使用应有严格控制,特别是
防止重金属超标;普通苗较优于扦插苗,但扦插成活
率高,宜大田移栽。因为实验次数较少,尚不能准确
反映质量优劣,还应经过多次实验验证。
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不同育苗期、移栽期和采收期川泽泻质量变化研究
刘红昌,杨文钰。,陈兴福
(四川农业大学农学院,四川雅安625014)
摘要:目的 以川泽泻中主要成分23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇A为指标成分,并通过HPLC指纹图谱比
较,进行质量制定。方法 采用梯度洗脱法进行色谱分离,使用“中药指纹图谱相似度计算软件”和DPS软件进行数
据处理。结果在6月25日育苗、9月10日移栽和当年的12月下旬初采收,川泽泻药材的总体质量最佳。结论
随着育苗期、移栽期和采收期的后延,川泽泻药材总体质量下降。
关键词:川泽泻;育苗期;移栽期;采收期
中图分类号:R282.7 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)05—0754—05
收稿日期:2006—08—12
作者简介:刘红昌(1979一),男,贵州瓮安人,讲师,硕士,主要从事中药材栽培与鉴定。
Tel:13984162598E—mail:liuhongchan966yahoo.com.cn
*通讯作者杨文钰Tel:13908160352E—mail:Wenyuyang@263.net
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月·755·
QualitychangeonAlismapZ口n矗口gD一口g“口ffc口atvariousgrowing—seedlingstages,
transplantingstages,andcollectingstages
LIUHong-chang,YANGWen-yu,CHENXing-fu
(CollegeofAgronomy,SichuanAgric lturalUniversity,Ya
7
an625014,China)
Abstract:ObjectiveToestablishthequalitystandardofAlisma户Z以竹£口go一口9“口≠if口through
comparingsystematicallythechangesofHPLCfingerprintof23一alisolBand24一alisolA,andother
correspondingcomponentsaswell.MethodsThegradientelutionmodewasappliednchromatographic
separationandatawereanalyzedby“ComputerAidedSimilarityEvaluation”softwareandDPSstatistic
software.ResultsTotalqualityofA.plantago—aquaticawasthebestwhengrow—seedlingwasat25th,
June,transplantingat10th,September,andcollectingat22nd,Decemberinthesameyear.Conclusion
Totalqualitywilldropalongwiththepostponementofgrow—seedlingstage,transplantingst ge,and
collectingstage.
Keywords:Alismaplantago—aquaticaLinn.;grow—seedlingstage;transplantingstage;collecting
stage
川泽泻Alismapl ntago—aquaticaLinn.为泽
泻科(Alismataceae)植物泽泻的干燥球茎,为利水渗
湿之要药,神农本草列为上品,是最常用的中药之一,
为四川有名的道地药材,现主要分布于川西平原的彭
山县谢家镇、都江堰市大观镇和石羊镇、乐山市五通
桥区蔡京镇[1’2]。中药材GAP的源头在于制定科学
合理的生产管理措施及规范化栽培的操作规程
(SOP)并按要求实施,生产出优质的中药材产品。保
证中药材的规范化生产及SOP操作规程的有效实施
是实现中药现代化的一个重要组成部分[3]。关于川泽
泻不同育苗期、移栽期和采收期的研究已有报道[41,
但仅凭传统栽培经验或某一二个成分的量的高低来
规范川泽泻药材的操作规程具有很大的主观性和片
面性。本试验旨在研究川泽泻药材不同育苗期、移栽
期和采收期的总体质量变化,从而为生产实践中川泽
泻药材规范化栽培的操作提供可靠的科学依据。
1材料与方法
1.1 试验设计:本试验于2004年6月~2005年1
月分别在四川省天全县仁义乡岩峰村和四川农业大
学教学农场进行,供试材料川泽泻种子购于四川省乐
山市五通桥区蔡京镇。采用单因素随机区组设计,育
苗期设置3个水平,即6月25日、7月5日和7月15
日,于9月17日移栽;移栽期设置3个水平,即9月
10日、9月20日和9月30日,于7月20日育苗。小
区面积14.8m2,前作均为水稻,设置3次重复。栽培
过程中的管理按常规田间管理进行。于当年的11月
15日开始,采用对角线取样法取样,之后每隔7d取
样1次,至2005年1月5日收获止,共取样8次。
1.2 仪器与试药:Agilent高效液相色谱仪,
Eppendorf高速冷冻离心机等;对照品23一乙酰泽泻
醇B和24一乙酰泽泻醇A购自南京中医药大学植物
药深加工工程研究中心,乙腈为色谱纯(美国fisher
进口分装),其余试剂均为分析纯。采用“中药指纹图
谱相似度计算软件”和DPS统计软件进行数据处理。
1.3 色谱条件:HypersilODS柱(250mm×4.6
mm,5弘m),流动相为乙腈一水,采用梯度洗脱,乙腈
的体积变化:35%一75%一100%;时间梯度O一40
min----60min;体积流量0.8mL/min;柱温25℃;进
样量10肛L。

1.4溶液制备
1.4.1供试品溶液;精密称取于60℃干燥至恒重
的过20目筛的样品1.000g,置于500mL圆底烧
瓶中,加入20mL甲醇,浸泡12h,然后置回流提取
器中在70℃下回流提取3h,残渣用甲醇i0mL洗
涤两次,合并滤液,挥尽甲醇,用色谱纯乙腈溶解,滤
过并定容至10mL,置混匀器上混匀,离心(12000
r/min)20min,再过0.45肛m滤膜,即为待测样品。
1.4.2对照品溶液:精密称取于60℃干燥至恒重
的23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇A各2.000、
9.000mg,分别置于25mL量瓶中,用色谱纯乙腈
定容,置混匀器上混匀,离心(12000r/min)20
min,再过0.45弘m滤膜,即为对照品液。
1.5样品中23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇A
的测定:采用梯度条件并参照文红梅等[5~83的方法
测定样品中23一乙酰泽泻醇B和24乙酰泽泻醇A
的量,以二者的质量浓度对峰面积平均值做图,求得
其线性回归方程分别为:A一一1.483+
1136939.5×C,r=0.9999,23一乙酰泽泻醇B在
万方数据
·756· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月
0.08~0.4pg/mL峰面积与质量浓度呈线性关系;
A=3.909+727380.952×C,r—O.9999,24一乙酰
泽泻醇A在0.7441.86p.g/mL峰面积与质量浓
度呈线性关系。
1.6方法学考察
1.6.1重现性试验:取12月22日采收样品10份,
在优化条件下测定,各主要色谱峰的相对保留时间和
相对峰面积的RSD分别在0.25oA和1.87%以内。
1.6.2稳定性试验:取12月29日采收样品供试液
分别在0、2、4、6、8、12、24、48、72h测定,各主要色
谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD分别在
0.89%和3.58%以内。
1.6.3精密度试验:取1月5日采收样品供试液,连
续进样10次测定,各主要色谱峰的相对保留时间和
相对峰面积的RSD分别在0.35%和2.82%以内。
各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的
RSD均未超过5%,符合《中药注射剂指纹图谱研究
的技术要求(暂行)》[9]。
1.7样品测定:在优化的条件下,将供试品溶液分
别进样,测定各批次样品并记录其色谱图。
2结果与分析
2.1不同育苗期样品的质量变化
2.1.1不同育苗期样品的指纹图谱:不同育苗期样
品的HPLC指纹图谱见图1。3个不同育苗期样品
指纹图谱的出峰数分别为32、31和34个,平均相似
0 10 2U jU 40 5U 6U
t|min
图1不同育苗期样品的HPLC指纹图谱重叠图
Fig.1HPLCSuperposedchromatogramsfvarious
grow—seedlingstagesamples
度为0.98,表明不同育苗期样品质量相当稳定。
2.1.2不同育苗期样品质量比较:不同育苗期样品
指纹图谱有24个共有峰,在所有共有峰中,除个别
峰外,大部分共有峰均表现出随着育苗期推迟,峰面
积逐渐降低,且越往后峰面积下降越剧烈(表1,峰6
为24一乙酰泽泻醇A,峰9为23一乙酰泽泻醇B)。6
月25日育苗样品的总峰面积最大,有17个共有峰
的峰面积大于7月5日育苗期样品相应共有峰的峰
面积,24个共有峰的峰面积均大于7月15日育苗
期样品的相应共有峰的峰面积。23一乙酰泽泻醇B和
24一乙酰泽泻醇A的量均随着育苗期的后延而逐渐
下降(表2)。
表1不同育苗期样品主要共有峰平均峰面积比较(拧一3)
Table1 Comparisonofmeanpeakareaformaincommonpeaksatvariousgrow-seedlingstages国一3)
主要共有峰平均峰面积
育苗期——1r—————-—————3——————4——————5——————6——————7——————8——————9————一101 2
06—25
07—05
07—15
510.83 355.58 276.44 273.66 352.74 775.32 236.773816.502 187.63311.30
424.19 247.08 165.00 277.54 370.04 626.79 207.013618.992234.28298.96
324.92 258.64 i24.63 201.28 285.95 389.07 72.83 2 607.941721.67194.92
2.2不同移栽期样品的质量变化
2.2.1不同移栽期样品的指纹图谱:不同移栽期样
品的指纹图谱见图2。3个移栽期样品的指纹图谱出
峰数分别为31、33和30,共有峰为26个,平均相似
度为0.99,表明不同移栽期样品的质量十分稳定。
2.2.2不同移栽期样品质量比较:随着移栽期的推
迟,除少数共有峰外,大部分共有峰的峰面积均逐渐
下降(表3,峰7为24一乙酰泽泻醇A,峰9为23一乙酰
泽泻醇B)。9月10日移栽的样品中有22个共有峰
的峰面积大于9月20日移栽样品相应色谱峰的峰
面积,26个共有峰峰面积均大于9月30日移栽样品
相应色谱峰的峰面积。色谱共有峰总峰面积以9月
10日移栽样品的最大,9月20日移栽样品的次之。
23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇A的量均随着移
栽期的后延而逐渐下降(表4)。
2.3不同采收期样品的质量变化
2.3.1不同采收期样品的指纹图谱:不同采收期样
品的指纹图谱见图3,8个采收期样品指纹图谱出峰
数分别为33、31、34、35、34、33、32和30,共有峰25
个,平均相似度为0.95,表明不同采收期样品质量十
分稳定。
2.3.2不同采收期样品质量比较:各个共有峰峰面
积均是随着川泽泻生育期的进行而逐渐上升,在当
年的12月下旬,除23一乙酰泽泻醇B色谱峰的峰面
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第s期2007年5月·757·
表2不同育苗期样品23一乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻酵A
量及主要共有峰总峰面积差异分析(腮一3)
Table2 Differenceanalysesof23一alisolBand24-alisolA
contentsandtotalpeakareaformaincommon
peaksonvariousgrowing—seedlingstagesamples
(跨一3)
育苗期23七(gg!兰三剐24=泽m三L刖篙茹专塾}·mL一1) (腿· 一1) 总峰面积 5% 1%
06—25 1.93 0.11 9096.75A/A/A
07—05 1.97 0.09 8469.87A/B/B一/b/b
07—15 1.52 0.05 6181.84B/C/Cc/c/c
A/A/A横向表示23一乙酰泽泻醇B、24一乙酰泽泻醇A的量和主
要共有峰总峰面积分别与自身比较,竖向表示3者各自在3个育苗
期的比较;大写字母表示在5%范围内比较,小写的在1%范围内比
较(表4、6同)
K}K|Kinhorizontalshowscomparisonofcontentsfor23一alisol
B,24一alisolA,andtotalpeakareaonmaincommonpeak,
respectivelyandinverticalomparisonforthemselvesinthree
growing—seedlingstages,respectively;capitallettershows
comparisoninra geof5%andsmalletterin angeof1%(Table4
and6 aresame)
0。一’16’。‘’菊。’‘历 丽 一56‘。。。丽
t|min
图2不同移栽期样品的HPLC指纹图谱重叠图
Fig.2HPLCSuperposedchromatogramsfvarious
transplantingstagesamples
积还继续上升外,其余24个共有峰的峰面积均达到
最大值,之后迅速下降(表5,峰7为24一乙酰泽泻醇
A,峰9为23一乙酰泽泻醇B)。随着生育期的进行,
23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇A的量逐渐上升
(表6)。
表3不同移栽期样品主要共有峰平均峰面积比较(撑一3)
Table3 Comparisonofmeanpeakareaformaincommonpeaksonvarioustransplantingstagesamples(撑一3)
表4不同移栽期样品23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇
A的量及主要共有峰总峰面积差异分析(n一3)
Table4 Differenceanalysesof23-alisolBand24一alisolA
contents,andtotalpeakareaformaincommon
peaksonsamplesatvarioustransplantingstages
(腮一3)
移栽期
23一乙酰泽泻醇B/24一乙酰泽泻醇A/主要共有峰显著水平
(pg·mL一1)(腿·mL一1) 总峰面积 5% 1%
3结论与讨论
3.1育苗期对川泽泻总体质量的影响:若以色谱共
有峰总峰面积及23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻
醇A的量来确定最佳的育苗期,则在所设置的3个
lO 20 30 40 50 60 70
t/min
图3不同采收期样品的HPLC指纹图谱重叠图
Fig.3HPLCSuperposedchromatogramssamples
atvariouscollectingsta es
表5不同采收期样品主要共有峰平均峰面积比较(席=3)
Table5 Comparisonofmeanpeaksareaformaincommonpeaksonsamplesatvariouscollectingmes(疗一3)
万方数据
·758· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第5期2007年5月
裹6不同采收期样品23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻醇
A的量及主要共有峰总峰面积差异分析(n----3)
Table6 Differenceanalysesof23-alisolBand
24-alisolAcontentsandtotalpeakarea
formaincommonpeaksonsamplesat
variouscollectingmes(拧一3)
采收期23一乙酰泽泻醇B/24一乙酰泽泻譬A/主要董!峰—』望坚
(pg·mL一1)(pg·mL一1)总蜂面积 5% 1%
11—15 0.73 0.03 4 794.04A/A/A——
11—22 0.86 0.04 5 616.90A/B/Ba/b/b
12—01 1.03 0.09 7 114.51AB/C/Cc/cA
12—08 1.31 o.10 8 213.11AB/D/Dd/d/d
12—15 1.46 0.10 8 684.69C/D/Dd/-/一
12—22 1.49 0.13 9 141.39C/E/Ee/e/e
12—29 1.83 0.07 7 295.55 一 一
01一05 1.66 0.05 5765.63 一 一
育苗期中,6月25El育苗是最佳的,其次为7月5
El。育苗期越早,越易培育壮苗,移栽大田后能很快
适应田问环境,对泽泻的后期生长有利;育苗期越
晚,则泽泻的生育期就越短,所接受光照、吸收养分
不足,合成成分的量就会相应降低。但并不是越早越
好,播期提早易抽薹,过迟则生长期太短,二者皆影
响产量。王书林等叫研究表明川泽泻种子无论是早
熟的还是晚熟的,其播种期均不宜晚于7月中旬。
3.2移栽期对川泽泻总体质量的影响:若以色谱共
有峰总峰面积及23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻
醇A的量来确定最佳的移栽期,则在所设置的3个
移栽期中,9月10El移栽是最佳的。周正n3认为在
四川以7月下旬至8月上旬栽植为宜。移栽时间过
晚,泽泻生育期缩短,严重影响其质量。由于泽泻为
水稻后作,四川盆周丘陵区水滔的收获一般在9月
上、中旬,所以此时移栽效果最佳,若移栽期需提前,
则应需选择早稻品种。

3.3采收期对川泽泻总体质量的影响:若以色谱共
有峰总峰面积及23一乙酰泽泻醇B和24一乙酰泽泻
醇A的量来确定最佳的采收期,则在当年的12月
下旬是川泽泻的最佳采收期。采收过早成分积累不
足,采收过迟各成分的量开始下降,越往后,气温越
低,地上部分开始大面积的消苗,生长发育停止,均
影响其总体质量。
过去对川泽泻药材育苗期、移栽期和采收期的
研究仅以球茎的大小及其产量为标准,主观性和随
意性较大。本试验首次通过川泽泻指纹图谱来研究
不同育苗期、移栽期和采收期川泽泻药材的总体质
量变化,以众多成分量的变化来确定最佳的育苗期、
移栽期和采收期,更具科学性和客观性,可为生产实
践中川泽泻药材规范化栽培的操作规程提供可靠的
科学依据。
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二昂誉譬零占嗡零搴祭零鹕髫譬瀑葛黜寥嘘$鹕祭秘零鹞祭搴鹕零祭祭搴零零零笞均器祭祭鹋秘牙啦滓零祭牙啦器_笞§祭零祭零鹞搴;孓
八 荣 八耻
树立社会主义荣辱观,坚持以热爱祖国为荣、以危害祖国为耻,以服务人民为荣、以背离人民为耻,以崇尚科学为荣、以愚
昧无知为耻,以辛勤劳动为荣、以好逸恶劳为耻,以团结互助为荣、以损人利己为耻,以诚实守信为荣、以见利忘义为耻,以遵
纪守法为荣、以违法乱纪为耻,以艰苦奋斗为荣、以骄奢淫逸为耻。
万方数据
不同育苗期、移栽期和采收期川泽泻质量变化研究
作者: 刘红昌, 杨文钰, 陈兴福, LIU Hong-chang, YANG Wen-yu, CHEN Xing-fu
作者单位: 四川农业大学,农学院,四川,雅安,625014
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(5)
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implementation of GAP 2003(11)
4.Zhou Z Preliminary study on Alisma plantago-aquatic transplanting stage 1995(04)
5.Wen H M;Li W;Peng G P Content variety of alisol B 23-acetate in Rhizoma Alismatis reaped at
different times 1998(12)
6.Wang X W;Li X D;Tang R Quantitative methods on several chemical ingredients of Alisma Orientalis
(Sam.)Juzep[期刊论文]-中国医院药学杂志 2003(01)
7.Wang L X;Wu Q N;Peng G P A Study on determination of content of 23-acetyl alisol B in Rhizoma
Alismatis Orientalitis[期刊论文]-南京中医药大学学报(自然科学版) 2002(02)
8.Peng G P;Pan L M;Wen H M A study of check samples of Rhizoma Alismatis[期刊论文]-南京中医药大学学
报(自然科学版) 2001(03)
9.Zhou Y X 医药指纹图谱技术 2002

引证文献(2条)
1.李敏 氮肥运筹对泽泻产量、品质和氮肥利用率的影响[期刊论文]-作物杂志 2011(1)
2.李敏 氮肥运筹对泽泻产量、品质和氮肥利用率的影响[期刊论文]-作物杂志 2011(1)


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