全 文 ：·214· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
异鼠李素、山柰素质量浓度分别为44．8、353．2、94．
9tzg／mL的混合对照品溶液0．8、1．0、1．2mL，制备
供试品溶液，进样测定。结果槲皮素、异鼠李素、山柰
RSD分别为1．70％、2．50％、2．19％。
2．9样品的测定：分别精密吸取混合对照品溶液、
供试品溶液各10弘L，进样测定，以峰面积按外标法
素的平均回收率分别为98．0％、98．0％、100．9％，计算，结果见表2，色谱图见图1。
表2蒲黄炭中槲皮素、异鼠李素和山柰素的测定结果(n一2)
Table2 Quercetin．isorhamnetin。andkaempferolP llenTyphaeCarbonisatus(肛一2)
产地 批号
／(mgmL
产槲皮素批号异鼠李素分数山柰素。“L一1)
质量分数 · 1)
槲皮素 异鼠李素 山柰素
内蒙 nmll 0．0381 0．4083 0．0824 江苏 jSl0 0．1272 0．7152 0．1720
内蒙 nml2 0．0749 0．6457 0．0742 江苏 js20 0．133l 0．7190 0．1730
内蒙 nml3 0．0532 0．4168 0．0487 宁夏 nxl0 0．081 0．4741 0．1272
内蒙 nm20 0．0399 0．3594 0．1253 宁夏 nx20 0．0728 0．5023 0．1527
内蒙 nm30 0．0665 0．4145 0．0994 宁夏 nx30 0．1172 0．6648 0．171
A
0
j ／I i
L—————————一L——』古—<上}—
0 4 H 12 16 20 0 4 g 12 16 2(J
t／mIn
1槲皮素 2一异鼠李素 3一山柰素
1 quereetin2 sorhamnetin3-kaempferol
图1 混合对照品(A)和蒲黄炭样品nmll(B)HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramofmixedreference
substances(A)andPollenTyphae
Carbonisatussamplenmll(B)
3讨论
3．1 对供试品溶液制备条件进行了考察。考察了取
样量1．0、1．5、2．0g，发现1．0、1．5g取样量下黄酮
水解都较完全，但1．0g取样量的峰面积较小，不在
线性范围内，故确定取样量为1．5g。同时比较了不
同加热温度(80、90、100℃)和不同水解时间(30、
60、90min)，结果表明100℃，60min条件下可将
蒲黄中黄酮水解完全，故选择100℃回流1h。另外
对水解酸度的考察时，对CH。oH一25％HCl比较了
(7：1)、(5：1)、(4：1)、(3：1)、(2：1)，结果发现
(4：1)、(3：1)、(2：1)对黄酮苷水解程度相当，但
高酸度对色谱柱和管路都有损害，故选择了
CH。0H一25％HCl(4：1)比例。
3．2本实验建立的3种黄酮苷元的HPLC测定方
法，可作为考察工艺的指标，同时可作为控制炒蒲黄
的内在质量。
3．3通过药效学实验筛选发现炒蒲黄的总黄酮是
其止血的主要活性部位，10批炒蒲黄的HPLC测定
结果表明，产自内蒙的黄酮苷元的量相对较高，因此
止血疗效较好。
References：
[1]ChP(中国药典)Es3．Vol1．2005．
[2]LiuB，ShiRB，WangW．Studyonthemethodforthe
quantitativedeterminationoftotalf avonei PollenTyphae
EJ]．JBeijingU ivTraditChinMed(北京中医药大学学
报)，2001，24(4)：23—25．
E3]GaoY，LiaoMC，FengYX．Determinationofflavonoids
andqualityevaluationofChinesetraditionaldrug”puhuang’’
[J]．AriaPharmSin(药学学报)，1998，33(4)：300—303．
[4]LiuB，LuYR．HPLCDeterminationoftwoflavonoidsin
PollenTyphae[J]．ChinJPharmA al(药物分析杂志)，
]998．18(2)180—83．
HPLC法测定舒筋活血片中杠柳毒苷
杨 虹，刘 虹，孙 巍 王 萌，何俊，高秀梅
(天津中医药大学中医药研究中心，天津300193)
舒筋活血片由红花、泽兰叶、香附、香加皮等10
味药组成，具有舒筋活络、活血散瘀之功效，用于筋
骨疼痛、肢体拘挛、腰背酸痛、跌打损伤。该药作为一
种治疗跌打损伤的内服药物，在临床上有一定应用
范围。本制剂中含有香加皮Periplocasepium
Bunge，又名北五加皮、杠柳皮，祛风湿、强筋骨，主
收稿日期：200604—03
基金项目：天津市高等学校科技发展基金项目(20050310)；天津市卫生局中医、中西医结合科研基金(2005072)；天津市科委应用基础研
究计划项目(05YFJZJC01102)
作者简介：杨虹(198l一)，女，天津人，天津中医药大学中医药研究中心硕士研究生，毕业于天津医科大学药物制剂专业，研究方向为
中药化学。Tel：(022)23051114Email：yangwawa811228@163．com
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·215·
要用于风寒湿痹、腰膝酸软、心悸气短、下肢浮肿等。
《中国药典))2005年版记载香加皮“有毒”，临床上香
加皮不良反应主要见恶心、呕吐、腹泻等胃肠道症
状，以及心率减慢、早博、房室传导阻滞等心律失常
表现[1]，因此有必要重视香加皮的不良反应。香加皮
主要化学成分为强心苷类和c。，甾体苷类，其中杠柳
毒苷又名杠柳苷(periplocin)为强心苷成分，其作用
与毒毛旋花子苷相似[2]。鉴于舒筋活血片内服量大，
长期服用有可能造成强心苷类成分的积聚。为有效
的控制其中的毒性成分，同时也为制定质量标准提
供依据，本实验对该片剂中的杠柳毒苷采用高效液
相色谱法进行测定，为该制剂的质量控制提供了快
速、简便、准确的测定方法。
1仪器与试药
Waters色谱系统(600HPLC泵，2487Dual入
AbsorbanceDetector)，超声波清洗器，0．45／am微
孔滤膜。乙腈为色谱纯，水为超纯水，乙醇为医用乙
醇。杠柳毒苷对照品(天津中医药大学中医药研究中
心提供，质量分数为98％以上)，舒筋活血片(市售)。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱为依利特ODS柱(250mm×
4．6mm，5弘m)，流动相为乙腈一水(24：76)，体积流
量为1．0mL／min，柱温25℃，检测波长220rim。
2．2溶液的制备
2．2．1对照品溶液的制备：精密称取杠柳毒苷对照
品4．66mg，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，即得。
2．2．2供试品溶液的制备：取样品20片(规格：0．3
rag／片)，研细，精密称取0．5g，置25mI。量瓶中，加
70％乙醇约20mL，超声提取30min，放冷，加相同
溶剂至刻度，摇匀用微孔滤膜(0．45肛m)，滤过，取
续滤液，即得。
2．3 阴性空白试验：按处方制备缺香加皮阴性样
品，按供试品溶液的制备方法制备阴性溶液，测定，
结果处方中其他药味无干扰。色谱图见图1。
2．4标准曲线的测定：精密吸取杠柳毒苷对照品溶
液0．05、0．1、0．4、0．8、1．2、1．6、2mL置10mL量
瓶中，加甲醇稀释至刻度，各取20pL分别注入色谱
仪，测定峰面积。以进样量(X)为横坐标，峰面积(y)
为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程y一1．0×106
X一3．4×103，r一0．9994，线性范围0．00466～
0．18640／lg。
2．5精密度试验：精密吸取供试品溶液，重复进样
6次，测定杠柳毒苷峰面积，计算得RSD为1．6％。
2．6稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0、2、
0 6 12182430 6 12182430
，／min
1一杠柳毒苷
1一periplocin
图1杠柳毒苷对照品(A)、舒筋活血片(B)和阴性
样品(C)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsofperiplocinreference
substance(A)，ShujinHuox eTablets(B)，
andnegativesample(C)
4、6、8h进样测定，得杠柳毒苷峰面积积分值RSD
为2．3％，表明供试品溶液在8h内稳定。
2．7重现性试验：取同一批号样品，分别制备6份
供试品溶液，进样测定杠柳毒苷峰面积值，计算得杠
柳毒苷质量分数的RSD为0．9％。
2．8 回收率试验：取同一批号样品(含杠柳毒苷
0．1032mg／g)6份，0．25g，精密称定，精密加入
0．55mL杠柳毒苷对照品溶液(0．0466mg／mL)，
制备供试品溶液，测定，结果平均回收率为98．7％，
RSD为1．9％。
2．9样品测定：精密吸取1mL杠柳毒苷对照品溶
液至10mL量瓶中，加甲醇至刻度得4．66>g／mL
的杠柳毒苷对照品溶液；吸取对照品溶液10pI。，供
试品溶液15肛L，分别注入液相色谱仪，记录峰面
积，以外标法计算质量分数。结果见表1。
表1舒筋活血片中杠柳毒苷的测定结果(聆一3)
Table1 DeterminationofperiplocininShujin
HuoxueTablets(聍一3)
批号 杠柳i孽苷／(mg·片1)批号 杠柳毒苷／(mg·片1)
050601 O．03 050104 0．01
050401 0．05 4123010 0．07
3讨论
曾参考测定香加皮药材中杠柳毒苷采用的流动
相[3]，由于该处方药味多，成分复杂，未实现本制剂
中杠柳毒苷峰的基线分离，使用现方法的条件，分析
时间短，峰形良好，阴性无干扰。
杠柳毒苷为强心苷，其并不是该制剂发挥药效作
用的有效成分。对其进行定量测定的意义在于杠柳毒
苷有一定的毒性，对其进行质量控制，可以保证临床
上的用药安全。此外，香加皮药材中杠柳毒苷的量波
动范围大口]，从0．05％到0．43％，有可能造成含香加
皮制剂中杠柳毒苷有所差异，本实验结果表明香加皮
制剂中杠柳毒苷确实有所波动，故针对方中的毒性成
分杠柳毒苷进行质量控制具有实际意义。
万方数据
·216· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2,El
References：
[1]ChenYP，LiGX，WuP，eta1．Ther asonandprevention
fortheadverseeactionofCortexPeriplocaeEJ]．ChinHosp
PharmJ(中国医院药学杂志)，2005，25(7)：689．
[2]WangSN．TheManualofDrugPoisonRemedy(药物中毒救
治手册)EM]．Beijing：People’SMilitaryM dicalPress，
1962．
E3]LiuH，PanGX，GaoXM，eta1．Determinationofper plocin
intheCortexPeriplocaebyhighperformanceliquidchromato—
graphy[J]．ChinTraditHerbDrugs(中草药)，2004，35
(5)：578—579．
正交设计优选蔓荆子中总黄酮的提取工艺
尹文清1，陈柳生1，王力生2，张青松1
(1．广西师范大学化学化工学院，广西桂林541004；2．桂林三金药业股份有限公司，广西桂林541004)
蔓荆子始载于《神农本草经》，被列为上品，为马
鞭草科牡荆属多年生落叶小灌木单叶蔓荆Vitex
trifoliaL．var．simplicifoliaChain．或三叶蔓荆y．
trifoliaL．的于燥成熟果实，主要产于山东、江西、
浙江、福建、广东、广西及云南等地，具有疏散风热、
清利头目、止痛的功效[1]。民间常用于治疗感冒、头
痛、周期性头痛及眼痛等E2|。其主要活性成分为黄酮
类化合物，具有抗炎、降低血压、抗癌、镇痛等多种药
理活性[3]。本实验通过L。(34)正交试验优选出蔓荆
子中黄酮类化合物的提取工艺条件，为蔓荆子的综
合利用提供了依据。
1材料、试剂与仪器
蔓荆子由广西桂林市临桂县广益农业开发有限
公司提供，经广西师范大学生命科学学院教研室鉴
定为单叶蔓荆V．trifoliaL．var．simplicifolia
Cham．的干燥成熟果实。芦丁对照品由中国药品生
物制品检定所提供，其他试剂均为分析纯。
TU一1901双光束紫外可见分光光度计(JL京
普析通用仪器有限责任公司)，旋转蒸发仪(上海亚
荣生化仪器厂)，电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器
有限公司)，B一220型恒温水浴锅(上海亚荣生化仪
器厂)。
2方法与结果
2．1 蔓荆子中总黄酮的UV法测定[4]
2．1．1标准曲线的绘制：准确称取干燥至恒重的芦
丁对照品10mg，用无水乙醇水浴微热溶解，并完全
转入50mL量瓶中，用无水乙醇定容，得0．2000
mg／mL的芦丁对照品溶液。精密吸取0、0．25、
1．Oo、2．00、3．00、4．00mL上述芦丁对照品溶液，分
别置于7支lomL刻度试管中，加5％NaNO：0．30
mL，摇匀后放置6min，加10％Al(N03)30．3
mL，摇匀后放置6min，加4％NaOH2．00mL，再
用无水乙醇稀释成刻度，摇匀后放置15min，于510
nm处测定吸光度(以第一管为测定空白)。芦丁质
量浓度(c)与吸光度(A)进行线性回归，得回归方
程：A一0．0104C一0．0071，r一0．9998。结果表明
芦丁在5～80t-tg／mL与吸光度线性关系良好。
2．1．2样品的测定：精密地称取10g干燥至恒重
的蔓荆子9份，回流提取。提取液减压浓缩后水沉，
滤过后定容到250mL量瓶中，分别精密地吸取上
述2mL溶液，按标准曲线的绘制项下方法操作，测
定吸光度，根据回归方程计算样品中黄酮类化合物
的量。
2．2提取溶剂的选择：蔓荆子中的主要黄酮类化合
物是紫花牡荆素，其他黄酮的量较少。紫花牡荆素不
溶于水，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿等
有机溶剂。乙醇毒性小、渗透性强、易于回收、价格也
较便宜，因此选定不同体积分数的乙醇为提取溶剂。
2．3提取次数的选择：称取10g蔓荆子干燥粉末，
加入50mL70％乙醇，在85℃下提取4h，然后将
提取过的粉末分别在相同条件下进行第2、3、4次提
取，结果各次总黄酮的提取率分别为0．6392％、
0．1589％、0．1266％、0．072％，表明，经过3次提
取，可以认为总黄酮基本提取完全。
2．4正交试验设计：根据已有的资料和实际情况，
选用乙醇体积分数、固液比、提取时间、提取温度作
为考察因素，以蔓荆子中总黄酮的提取率为考察指
标，选用L。(34)正交表设计，因素水平见表1。正交
收稿日期：2006—05—04
基金项目：广西教育厅科研资助项目(桂教科研E2004120号)
作者简介：尹文清(1968一>，女，湖南省郴州市人，副教授，博士，现在桂林三金药业股份有限公司博士后科研工作站从事科研工作，主要
从事天然产物化学的研究。E—mail：Yinwq0000@yahoo．eom．cn
万方数据
HPLC法测定舒筋活血片中杠柳毒苷
作者： 杨虹， 刘虹， 孙巍， 王萌， 何俊， 高秀梅
作者单位： 天津中医药大学,中医药研究中心,天津,300193
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(2)
被引用次数： 2次

参考文献(3条)
1.Chen Y P;Li G X;Wu P The reason and prevention for the adverse reaction of Cortex Periplocae
2005(07)
2.Wang S N 药物中毒救治手册 1962
3.Liu H;Pan G X;Gao X M Determination of periplocin in the Cortex Periplocae by high performance
liquid chromatography 2004(05)

本文读者也读过(6条)
1. 朱山寅.ZHU Shan-yin HPLC法测定舒筋活血片中原儿茶醛的含量[期刊论文]-中华中医药学刊2007,25(2)
2. 颜惠芳 HPLC测定舒筋活血片中4-甲氧基水杨醛的含量[期刊论文]-现代食品与药品杂志2007,17(1)
3. 李岩.梁帅 复方羊角片补充检验方法的研究[期刊论文]-中国实用医药2010,05(31)
4. 林斯民.吴义忠.LIN Si-min.WU Yi-zhong 舒筋活血片质量标准研究[期刊论文]-广东药学院学报2009,25(5)
5. 李光泽.孙华.曲福军.LI Guang-ze.SUN Hua.QU Fu-jun 反相HPLC法测定脉炎消口服液中丹参素和原儿茶醛的
含量[期刊论文]-哈尔滨医科大学学报2009,43(1)
6. 张秋红.闫滨.韩文正.Zhang Qiuhong.Yan Bin.Han Wenzheng HPLC法测定舒筋活血片的含量[期刊论文]-中国药
师2007,10(2)

引证文献(2条)
1.李闫飞.孙国祥 舒筋活血片高效液相色谱数字化定量指纹谱和对数指纹谱研究[期刊论文]-中南药学 2012(3)
2.刘虹.刘芳.朱晓月.王萌.王怡 香加皮产生毒副反应的原因及安全用药对策[期刊论文]-中成药 2011(1)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200702022.aspx