全 文 ：收稿日期:2015-06-04
基金项目:贵州省卫生计生委科学技术基金(gzwjkj2014-2-103);贵阳医学院博士启动基金(院基金合同字第 010 号);贵州省教育厅大学
生创新训练一般项目(201410660025)
作者简介:张嫩玲(1984-)，女，博士，主要从事天然产物的提取分离研究;E-mail:elly02@ 163. com。
* 通讯作者:邱声祥，Tel:020-37081190，E-mail:sxqiu@ scib. ac. cn。
黑龙骨的化学成分
张嫩玲1，2，刘 香1，沈祥春1，蔡佳仲3，胡英杰3，邱声祥2*
(1. 贵州医科大学，贵州 贵阳 550004;2. 中国科学院华南植物园植物资源保护与可持续利用重点实验室，
广东 广州 510650;3. 广州中医药大学，广东 广州 510006)
摘要 目的:研究黑龙骨的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20 柱色谱及 ＲP-18 柱色谱进行分
离纯化，并运用波谱学方法对化合物进行结构鉴定。结果:从黑龙骨根茎中分得了 7 个化合物，经波谱解析分别鉴
定为:汉黄芩素(1)、黄芩素-7-甲醚(2)、香草醛(3)、异香草醛(4)、杠柳苷 L(5)、β-谷甾醇(6)、β-胡萝卜苷(7)。结
论:其中，化合物 1、2 为首次从该属植物中分离得到，化合物 3 ～ 5 为首次从该植物中分离得到。
关键词 黑龙骨;黄酮;香草醛;杠柳苷 L
中图分类号:Ｒ284. 1 /Ｒ284. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2016)02-0329-02
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2016. 02. 023
Chemical Constituents from Periploca forrestii
ZHANG Nen-ling1，2，LIU Xiang1，SHEN Xiang-chun1，CAI Jia-zhong3，HU Ying-jie3，QIU Sheng-xiang2
(1. Guizhou Medical University，Guiyang 550004，China;2. Key Laboratory of Plant Ｒesources Conservation and Sustainable Utilization，
South China Botanical Garden，Chinese Academy of Sciences，Guangzhou 510650，China;3. Guangzhou University of Chinese Medicine，
Guangzhou 510006，China)
Abstract Objective:To study the chemical constituents from Periploca forrestii. Methods:The constituents were separated by col-
umn chromatography and their structures were elucidated by spectroscopic methods. Ｒesults:Seven compounds were isolated from Perip-
loca forrestii and identified as wogonin(1)，negletein(2) ，vanilline(3) ，isovanilline(4) ，periplocoside L(5) ，β-sitosterol(6)and β-
daucosterol(7). Conclusion:Compounds 1 and 2 are obtained from this genus for the first time，and compounds 3 ～ 5 are isolated from
this plant for the first time.
Key words Periploca forrestii Schltr.;Flavonoids;Vanilline;Periplocoside L
萝藦科杠柳属植物黑龙骨 Periploca forrestii
Schltr. ，又称黑骨藤、黑骨头、滇杠柳，主要分布于我
国西南地区。全株入药，具有通经、活血、解毒、祛风
的功效，主治风湿关节痛、跌打损伤、月经不调等，为
贵州少数民族用药〔1〕。主要含强心甾类、三萜类及
黄酮类化合物〔2〕。为寻找其中的抗癌活性成分及
其作用机制，本课题组对黑龙骨根茎进行了系统的
化学成分研究，前期已从黑龙骨分离得到了黄酮类、
大黄素类、杠柳苷类等 11 个化合物〔3〕，本文在后续
工作中又分离得到了 7 个化合物，分别鉴定为:汉黄
芩素(1)、黄芩素-7-甲醚(2)、香草醛(3)、异香草醛
(4)、杠柳苷 L(5)、β-谷甾醇(6)、β-胡萝卜苷(7)。
其中，化合物 1 和 2 为首次从该属植物中分离得到，
化合物 3 ～ 5 为首次从该植物中分离得到。
1 仪器与材料
VG Autospec-3000 型质谱仪;Bruker AM-400
MHz核磁共振光谱仪(以 TMS 为内标);柱层析硅
胶(200 ～ 300 目)、薄层色谱硅胶 GF254(青岛美高集
团有限公司);Sephadex LH-20(Pharmacia公司)。
实验用黑龙骨根茎由笔者胡英杰教授采自云南
昆明市，经云南红河州食品药品监督管理局薛云主
任药师鉴定为萝藦科杠柳属植物黑龙骨 Periploca
forrestii Schltr. 的干燥根茎，标本(标本号:PF090920)
保存于华南植物园天然产物化学生物学研究组。
2 提取与分离
黑龙骨根茎 10 kg，粉碎后用 95%乙醇回流提
取 3 次，每次 3 h，合并滤液浓缩成浸膏，加水混悬，
依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液浓缩至浸膏，
得乙酸乙酯部分 120 g、正丁醇部分 80 g。取乙酸乙
酯部分 100 g，经硅胶柱层析，以石油醚-丙酮溶剂系
统，梯度洗脱，得到 10 个流分 E1 ～ 10。流分 E1 经
Sephadex LH-20 柱，以氯仿-甲醇(1∶ 3)洗脱，经薄层
检测合并得到 5 个流分 E1-1 ～ 1-5。流分 E1-2 再经
反复硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯(98∶ 2)洗脱得
化合物 6(36. 2 mg)。流分 E3 经 Sephadex LH-20
(甲醇)柱后，再经 ＲP-18(60% ～ 90%甲醇)分离得
·923·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 2 期 2016 年 2 月
化合物 1(15. 6 mg)、2(11. 2 mg)。流分 E6 经硅胶
柱层析，以氯仿-甲醇(10∶ 0 ～ 0∶ 10)洗脱，分为 4 个
流分 E6-1 ～ 6-4。流分 E6-2 经硅胶柱层析，以氯仿-
甲醇(95∶ 5)洗脱，薄层检测合并为 5 个流分 E6-2-1
～6-2-5。流分 E6-2-4 经硅胶柱层析，以氯仿-甲醇
(95∶ 5)洗脱，再经 Sephadex LH-20(甲醇)层析，得
到化合物 3(15. 3 mg)、4(16. 5 mg)。流分 E6-2-5
经 Sephadex LH-20(甲醇)柱洗脱，薄层检测合并为
7 个流分 E6-2-5-1 ～ 6-2-5-7。流分 E6-2-5-1 有白色
固体析出，以二氯甲烷-甲醇(100∶ 2)洗脱后，以甲醇
进行重结晶，得到无色针晶，即化合物 5(18. 7 mg)。
流分 E6-4 经 Sephadex LH-20(甲醇)洗脱，再经硅胶
柱层析，以氯仿-甲醇(95∶ 5 ～ 80∶ 20)洗脱，及 Sepha-
dex LH-20(甲醇)洗脱得到化合物 7(23. 1 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:黄色粉末。ESI-MS m/z:285［M +H］+;
ESI-MS m/z:283［M － H］－，分子式为 C16 H12 O5。
1H-
NMＲ(400 MHz，CDCl3)δ:12. 51(1H，s，5-OH)，7. 91
(2H，d，J = 7. 1 Hz，H-2，6) ，7. 56(3H，m，H-3 ～
5) ，6. 70(1H，s，H-3) ，6. 45(1H，s，H-6) ，4. 05(3H，
s，-OCH3);
13C-NMＲ(100 MHz，CDCl3)δ:163. 5(C-
2)，105. 8(C-3) ，182. 5(C-4) ，155. 3(C-5) ，98. 9(C-
6) ，157. 7(C-7) ，126. 2(C-8) ，148. 7(C-9) ，104. 9
(C-10) ，132. 0(C-1) ，126. 2(C-2，6) ，129. 3(C-
3，5) ，132. 0(C-4) ，62. 1(-OCH3)。以上波谱数据
与文献〔4〕报道对照基本一致，故鉴定该化合物为汉
黄芩素。
化合物 2:黄色粉末。ESI-MS m/z:285［M +
H］+，分子式为 C16 H12 O5。
1H-NMＲ(400 MHz，DM-
SO-d6)δ:7. 98(2H，d，J = 8. 4 Hz，H-1，6)，7. 55
(3H，m，H-3 ～ 5) ，6. 85(1H，s，H-3) ，6. 64(1H，s，
H-8) ，4. 05(3H，s，-OCH3);
13C-NMＲ(100 MHz，DM-
SO-d6)δ:163. 4(C-2)，104. 8(C-3) ，182. 3(C-4) ，
152. 8(C-5) ，131. 0(C-6) ，159. 2(C-7) ，94. 9(C-8) ，
153. 0(C-9) ，104. 1(C-10) ，132. 0(C-1) ，126. 6(C-
2，6) ，129. 5 (C-3，5) ，132. 3 (C-4) ，60. 2 (-
OCH3)。以上波谱数据与文献
〔5〕报道对照基本一
致，故鉴定该化合物为黄芩素-7-甲醚。
化合物 3:无色片状结晶。ESI-MS m/z:175［M
+ Na］+，153［M + H］+。1H-NMＲ(400 MHz，DMSO-
d6)δ:7. 96(1H，d，J = 8. 1 Hz，H-6)，7. 37(1H，s，H-
2) ，6. 78(1H，d，J = 8. 1 Hz，H-5) ，3. 87(3H，s，
-OCH3)。以上波谱数据与文献
〔6〕报道对照基本一
致，且与香草醛对照品共薄层，用不同溶剂系统展
开，Ｒf值一致，故鉴定该化合物为香草醛。
化合物 4:无色片状结晶。ESI-MS m/z:153［M
+ H］+。1H-NMＲ(400 MHz，DMSO-d6)δ:8. 29(1H，
d，J = 8. 1 Hz，H-6)，7. 37(1H，s，H-5，J = 8. 1 Hz) ，
7. 04(1H，s，H-2) ，3. 79(3H，s，-OCH3)。以上波谱
数据与文献〔6〕报道对照基本一致，故鉴定该化合物
为异香草醛。
化合物 5:白色粉末。ESI-MS m/z:517［M +
Na］+，分子式为 C28 H46 O7。
1H-NMＲ(400 MHz，DM-
SO-d6)δ:5. 33(1H，m，H-6)，4. 39(1H，d，J = 5. 5
Hz，dig-1) ，1. 19 (3H，d，H-21) ，0. 85 (3H，s，H-
18) ;13C-NMＲ(100 MHz，Pyr-d6)δ:36. 2(C-1)，29. 4
(C-2) ，77. 0(C-3) ，38. 4(C-4) ，140. 5(C-5) ，121. 2
(C-6) ，31. 6(C-7) ，31. 4(C-8) ，49. 6(C-9) ，36. 9(C-
10) ，20. 2(C-11) ，31. 4(C-12) ，45. 0(C-13) ，50. 8
(C-14) ，23. 5(C-15) ，38. 4(C-16) ，84. 5(C-17) ，
14. 0(C-18) ，19. 1(C-19) ，69. 7(C-20) ，18. 8(C-
21) ，101. 3(C-1) ，70. 3(C-2) ，83. 3(C-3) ，69. 3
(C-4) ，70. 3(C-5) ，16. 8(C-6) ，56. 2(-OCH3)。
以上波谱数据与文献〔7〕报道对照基本一致，故鉴定
该化合物为杠柳苷 L。
化合物 6:无色针晶。与 β-谷甾醇对照品共薄层
检测 Ｒf值一致，混合熔点不下降，故鉴定该化合物为
β-谷甾醇。
化合物 7:白色粉末。与 β-胡萝卜苷对照品共
薄层检测 Ｒf 值一致，混合熔点不下降，故鉴定该化
合物为 β-胡萝卜苷。
参 考 文 献
［1］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草
［M］．第六册 . 上海:上海科学技术出版社，1999:380.
［2］罗建蓉，钱金栿 . 杠柳属植物研究进展［J］．大理学院
学报，2006，5(8):54-58.
［3］张嫩玲，蔡佳仲，黄日明，等 . 滇杠柳的化学成分［J］．
中草药，2011，42(10):1909-1912.
［4］刘英学，刘中刚，苏兰，等 . 黄芩化学成分研究［J］． 中
国药物化学杂志，2009，19(1):59-62.
［5］ Collado IG，Macias FA，Massanet GM，et al． Flavonoids
from Centaurea clementei［J］． Journal of Natural Products，
1985，48(5) :819-822.
［6］张庆英，刘雪辉 . 生藤化学成分研究［J］．中国中药杂
志，2000，25(2):101-103.
［7］ Itokawa H，Xu JP，Takeya K. Studies on chemical constitu-
ents of antitumor fraction from Periploc asepium. Ⅳ:Struc-
tures of new pregnane glycosides，periplocosides D，E，L
and M［J］． Chemical and Pharmaceutical Bulletin，1988，36
(6) :2084-2089.
·033· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 39 卷第 2 期 2016 年 2 月