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RP-HPLC法测定地骨皮中香草酸的含量



全 文 :·446· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
3讨论
从测定结果看,4种产地的翻白草的样品均含
有槲皮素,因地域不同,含量各异。4种翻白草中槲
皮素质量分数在69.5~105.72肛g/g,平均质量分
数85.4875弘g屈,说明翻白草植株各部分均含黄酮
类化合物槲皮素。黄酮类化合物中的槲皮素有抑制
非酶糖化作用[2],并通过抑制蛋白糖化来抑制醛糖
还原酶活性,有降血糖作用。本实验测定出翻白草中
黄酮类化合物槲皮素含量,为进一步研究翻白草可
能的降糖作用提供了科学依据。
References:
[1]YangJ,QingJH.IdentifyandresearchonPotentilladisco—
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药)1998,9(5):436.
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RP—HPLC法测定地骨皮中香草酸的含量
李康,陈晓辉,毕开顺
(沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳 110016.)
地骨皮为茄科植物枸杞LyciumchineseMill.或
宁夏枸杞L.barbarumL.的干燥根皮。气微、味微甘
而后苦,具有凉血除蒸、清肺降火的功效,主治阴虚潮
热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咯血、衄血、内热消渴等[1]。但
关于地骨皮药材中成分的分离与测定的报道不多。本
实验用RP—HPLC法首次分离并测定了不同产地地骨
皮药材中香草酸的含量,方法简便快速、灵敏准确,为
该药材的质量评价提供参考依据。
1仪器与试药
2010A型高效液相色谱仪(Shimadz),Class—
VP色谱数据处理系统。
地骨皮药材购于各地药店,均由沈阳药科大学
孙启时教授鉴定。
香草酸对照品(中国药品生物制品检定所),色
谱乙腈(天津四友公司),水(二次蒸馏水),冰醋酸
(分析纯),色谱甲醇(天津康科德科技有限公司),
95%乙醇(沈阳卫龙商贸有限公司),分析甲醇(天津
康科德科技有限公司)。
2方法与结果
2.1 色谱条件:DiamonsilC18色谱柱(200mm×
4.6mm,5肛m);流动相为乙腈一1%冰醋酸水溶液
(10:90,pH一3);体积流量为0.8mL/min,柱温为
30℃。检测波长为260nm。香草酸在此条件下有较
好分离,色谱行为见图1。
2.2对照品溶液的制备:精密称取香草酸6.1mg,
甲醇溶解于10mL量瓶中,吸取2.0mL于100mL
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
时间t/min
图1 对照品(A)和样品(B)HPLC色谱图
Fig.1HPLCchromatogramofreference
substance(A)andsample(B)
量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配制成12.2弘g/mL的
对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备:精密称取各地药材约1g,
用甲醇100mL索氏提取30min,减压回收溶剂,残
渣用甲醇溶解至10mL量瓶中,稀释至刻度,即得。
各产地均做一平行样。
2.4标准曲线的制备:分别精密吸取对照品溶液
0.10、0.50、1.00、2.OO、3.00、4.00、5.00mL,置
mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,进样10弘L,测定峰
面积。以峰面积平均值为纵坐标,其对应进样质量浓
度为横坐标,进行回归计算,得线性方程为
收稿日期:2004—0510
作者简介:李康(1975),男,四川人,在读博士,沈阳药科大学药物分析专业,主要从事中药现代化研究。
Tel:(024)23843711-3363E—mail:likan9229@sohu.COrn
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㈡1j
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·447·
Y一28677X+10663,r一0.9998。香草酸在
0.244~12.20tlg/mL,线性关系良好。
2.5精密度试验:精密吸取对照品溶液(4.88弘g/
mL)10MI.,进样,连续测定6次,求得峰面积值的
RSD为1.5%,结果表明仪器精密度良好。
2.6稳定性试验:精密吸收对照品溶液10肛L,进
样,分别于1、2、3、5、8、12、24、36、72h重复上述操
作,计算峰面积值的RSD为0.7%,结果表明对照
品溶液在3d内基本稳定。
2.7 重珊陛试验:称取同一样品6份,依次分别制得样
品溶液,进样10肚L,测得峰面积,RSD为1.9%。
2.8 回收率试验:精密称取同产地药材约1g,按
高、中、低3个质量浓度0.244、4.88、12.20tLg/mL
加入一定量对照品溶液,按供试品溶液制备方法制
备,采用上述色谱条件进样测定,得香草酸平均回收
率分别为97.7%、98.6%、97.1%。
2.9含量测定:分别精密吸取各地药材供试品溶液
10肛L,进样,以外标法计算供试品溶液中香草酸含
量,结果见表1。
3讨论
3.1地骨皮中脂溶性成分很少。先后用水提取,甲
醇提取,50%、70%、95%乙醇和无水乙醇提取,然后
甲醇溶解进样。还将上述提取物提取后,用水混悬,
醋酸乙酯萃取,挥干醋酸乙酯后,甲醇溶解进样。还
用了生药材碱提酸沉法,和上述溶剂提取后再碱提
酸沉纯化后甲醇溶解进样,进行实验。结果表明,用
表1香草酸含量测定结果(聍一3)
Table1 Determinationofvanillicacid(一一3)
药材产地 香草酸/(pg·g一1)药材产地 香草酸/(pg·g_1)
河南濮阳 i8.i3 内蒙古五原 38.68
河北石家庄 21.93 甘肃兰州 55.5l
宁夏中宁 13.54 北京 4.63
宁夏银川 16.55 江苏杭州8.81
河北唐山 9.20 河北辛集 35.92
辽宁朝阳 15.65 吉林四平 ,23.52
四川i成都 42.24 贵州贵阳 45.03
上海 59.03 新疆鸟鲁木齐 23.58
广东广州 50.56 内蒙古通辽 4.43
山东济南 103.47 云南昆明 27.40
四JiI资中 34.54 重庆 6.22
辽宁兴县 88.06 四JiI雅安 9.25
青海西宁 17.63
甲醇提取效果好,杂质干扰少,香草酸含量高。
3.2 提取药材时,先后用水浴回流提取、超声提取、索
氏提取,最后证明索氏提取方便、提取完全。还考察了
索氏提取时间,试验结果表明30min提取完全。
3.3香草酸在217、260、290nm有最大吸收,在
217nm时,杂质较多;260nm比290nm有更强吸
收,所以选择260nm为测定波长。
3.4分析结果表明,各产地的地骨皮中香草酸的含
量有较大差别,地骨皮的质量有待正确评价。
Reference:
[1]C^P(中国药典)[S].VolI.2000.
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万方数据
RP-HPLC法测定地骨皮中香草酸的含量
作者: 李康, 陈晓辉, 毕开顺
作者单位: 沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(3)
被引用次数: 1次

参考文献(1条)
1.中国药典(一部) 2000

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