全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·411·
绿茶提取物对小肠黏膜oc一葡萄糖苷酶和葡萄糖转运能力的影响
全吉淑1，尹学哲2，柳明洙1，沈明花1，金明1
(1．延边大学医学院生物化学教研室，吉林延吉133000；2．延边大学医学院附属医院，吉林延吉133000)
茶叶对人体具有多种药理作用，如降血糖、调血
脂和抗氧化[13等，这些作用是以茶叶中所含的茶多
酚和茶多糖等活性物质为基础的。绿茶因富含茶多
酚等有效成分，具有很好的保健作用，因此近年来作
为一种畅销茶饮料走入人们的生活。笔者在动物实
验中也发现，绿茶对糖尿病大鼠具有明显的降糖作
用，主要表现在糖尿病大鼠负荷蔗糖或淀粉后其糖
耐量的改善上。但关于绿茶降糖作用的机制目前尚
不清楚。本实验研究绿茶提取物对大鼠小肠黏膜a一
葡萄糖苷酶活性和兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能
力的影响，以期为揭示绿茶降糖作用机制提供依据。
1材料与方法
1．1仪器：日本1wAKI公司REN一1型旋转蒸发
仪、EYELA公司FDU一830型冷冻干燥仪、东芝
HITACttIU一2010型紫外分光光度仪和美国
Wallac1209Rackbeta闪烁记数器。
1．2绿茶提取物的制备：绿茶为市售品，江苏省溧
阳市桂林茶场产品。100g绿茶用2L蒸馏水浸泡
过夜。重复提取3次后，将提取液合并，经减压蒸
馏、冷冻干燥得干粉。此干粉为富含茶多酚的绿茶提
取物(其含茶多酚37．9％，茶多糖6．1％)。
1．3 大鼠小肠黏膜a一葡萄糖苷酶冻干粉的制备：
将大鼠小肠解冻，刮取黏膜，在5倍体积含5mmol／
I。EDTA的pH7．0的100mmol／L磷酸缓冲液中
匀浆，21000×g离心60min，所得沉淀用5倍体积
含0．1％TritonX一100的pH7． 、100mmol／L磷
酸缓冲液在4℃搅拌溶解60min。将其在4℃、
11000×g离心90min，所得悬浮液用pH7．0、10
mmol／L磷酸缓冲液在4℃透析24h后，冷冻干
燥即可得到a一葡萄糖苷酶冻干粉＆]。
1．4 蔗糖酶、麦芽糖酶及a一葡萄糖苷酶活性的测
定：小肠黏膜蔗糖酶和麦芽糖酶活性的测定分两步
进行。首先分别以蔗糖和麦芽糖为底物进行酶解反
应，标准反应液分别含700弘L50mmol／L底物，
200肛L测试液和100肛L酶液(o．066U)。在37℃
反应30min后，用1．5mL2mol／LTris液终止反
应。取50肚L反应液，利用葡萄糖发色试剂盒
(Wako公司)以葡萄糖氧化酶法测定生成的葡萄
糖含量[2]。抑制酶活性50％时所需的绿茶提取物浓
度定义为IC。。。a一葡萄糖苷酶活性的测定则按文献
方法进行[3]。即取10弘L测试液与240ttL酶液
(0．053U)，在37℃预热5min后，加750,uL10
mmol／L4-硝基酚一a—D一吡晡葡萄糖苷溶液为底物，
置37℃继续反应15min。用0．5mLTris溶液终
止反应，测定400nm处吸光度(A)值。所用绿茶提
取物质量浓度为0．1～6g／L，并采用Excel软件计
算IC50值。
1．5兔小肠上皮刷状缘囊泡悬液的制备[4]：将兔小
肠剪断并用冷生理盐水充分洗涤后，采用MgCI：沉
淀法和序列离心法制备兔小肠上皮刷状缘囊泡悬
液。首先将兔小肠浸泡于300mL含50mmol／L甘
露醇的pH7．4的2mmol／LHEPESI-N一(2一hy—
droxyethyl)piperazine—N7一(2-ethanesulfonic
acid)]一Tris缓冲液中，用载玻片将小肠黏膜刮下，
在冰浴以最大速度匀浆2min。加入0．61g固体
MgCl。后，继续在冰浴中搅拌20min以沉淀膜囊
泡。4℃、3000×g离心15rain去除肌肉碎块，
4℃、35000×g继续离心30rain以分离膜囊泡。倾
去上清液，将所得囊泡用10mL含100mmol／L甘
露醇、0．1mmol／LMgS04的pH7．4的2mmol／L
HEPES—Tris缓冲液溶解，4℃、35000xg离心40
min以纯化膜囊泡，所得囊泡用3倍体积含300
mmol／L甘露醇、0．1mmol／LMgS04的pH7．4的
10mmol／LHEPES—Tris缓冲液溶解，用注射针头
反复抽吸几次即可得到刷状缘囊泡悬液。用Lowry
法测得含蛋白质约为8～10g／L。
1．6 小肠上皮刷状缘葡萄糖转运活性的测定：以
3H—D一葡萄糖为底物，采用快速过滤法口]测定刷状缘
收稿日期：2004—05—17
基金项目：国家自然科学基金资助项目(39960073)
作者简介：全吉淑(1968一)，女(gq鲜族)，吉林省延吉市人，副教授，硕士，主要研究方向为中草药中生物活性物质的分离及其药理作用
研究。Tel：(0433)2660588E—mail：quanjs@public．YJ．j1．cn
万方数据
·412。 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
囊泡葡萄糖转运能力。将20弘L测试液与20肛L含
0．2mmol／L葡萄糖、0．3MBq／mL3H—D一葡萄糖、
200mmol／LNaSCN、200mmol／L甘露醇的pH
7．4的20mmol／LHEPES—Tris缓冲液混合后，加
20弘L囊泡悬液在25℃保温10S。加1mL含200
mmol／LNaCl、250／lmol／Lph orizin的pH7．4的
10mmol／LHEPES—Tris冷终止液以终止反应。反
应液中的囊泡立即抽滤到MiliporeHA0．45／,m过
滤膜上，并用1mL终止液重复洗涤2次。过滤膜立
即放入闪烁瓶中用闪烁计数器测定放射活性。抑制
葡萄糖转运活性50％时所需的提取物浓度定义为
IC。。。所用绿茶提取物质量浓度为0．1～1g／L，并采
用Excel软件计算IC。。值。
2 结果
2．1 绿茶提取物对大鼠小肠黏膜a一葡萄糖苷酶活
性的影响：见表1。绿茶提取物降低大鼠小肠黏膜a一
葡萄糖苷酶活性，且呈剂量依赖性关系(图1)。绿茶
提取物对麦芽糖酶的IC。。值仅为0．245g／L，抑制
活性最为明显。本实验同时测定富含多酚的乌龙茶
和橄榄菜提取物的a一葡萄糖苷酶抑制活性，绿茶提
取物对麦芽糖酶抑制作用均强于二者，对蔗糖酶抑
制作用较弱于乌龙茶，但明显强于橄榄菜提取物。
2．2绿茶提取物对兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运
能力的影响：绿茶提取物降低兔小肠刷状缘囊泡的
葡萄糖转运能力，且呈剂量依赖性关系(表1)。将绿
表1 绿茶提取物对小肠黏膜oc一葡萄糖苷酶
活性和葡萄糖转运能力的影响
Table1 Effectsofgreenteaextractonactivitiesofa—
glucosidaseandglucoseintransportability
ofmucousmembraneinsmallintestine
IC50／(g·L一1)
测试样品 a一葡萄糖苷酶 麦芽糖酶 蔗糖酶 葡萄糖
(K。=o．60mol／LXK。=1．67mmol／LXK。=21．2retool／L)转运
茶提取液与刷状缘囊泡悬液保温时，保温时间(即
作用时间)对葡萄糖转运作用的抑制效应几乎无影
响，仅需作用几秒即可，说明其对刷状缘囊泡葡萄糖
转运的抑制作用为快速反应。
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葶
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器
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0 Z 4 6
绿茶提取物质量浓度／(g·L。)
图1绿茶提取物对o【一葡萄糖苷酶活性的抑制效应
Fig．1Inhibitionofgreenteaextract
ona—glucosidaseactivities
3讨论
在糖尿病降糖药物家族里a一葡萄糖苷酶抑制
剂是一组通过延缓糖的消化来达到降低餐后高血糖
目的的口服降糖药，其作用特点是在糖消化的最后
一步抑制双糖降解为单糖E5|。其中与餐后血糖密切
相关的主要有麦芽糖酶和蔗糖酶。肠道对葡萄糖的
吸收则以葡萄糖转运体的主动吸收来完成，因此抑
制葡萄糖转运活性也是降低餐后血糖的重要环节之
一。本实验结果表明，绿茶提取物降低大鼠小肠黏膜
d一葡萄糖苷酶活性，尤其明显降低麦芽糖酶活性；同
时降低兔小肠刷状缘囊泡的葡萄糖转运能力，从而
能够延缓糖类在肠道中的消化和吸收。笔者在动物
实验中发现绿茶提取物对糖尿病模型大鼠具有明显
降糖作用，尤其明显抑制负荷蔗糖或淀粉后血糖的
持续升高趋势。这可能与绿茶提取物对小肠黏膜a一
葡萄糖苷酶抑制及葡萄糖转运能力抑制有关。
References：
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万方数据
绿茶提取物对小肠黏膜α-葡萄糖苷酶和葡萄糖转运能力的影
响
作者： 全吉淑， 尹学哲， 柳明洙， 沈明花， 金明
作者单位： 全吉淑,柳明洙,沈明花,金明(延边大学医学院,生物化学教研室,吉林,延吉,133000)， 尹学
哲(延边大学医学院附属医院,吉林,延吉,133000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(3)
被引用次数： 3次

参考文献(5条)
1.DengZY;Tao B Y;Li X L Effect of tea on blood glucose,blood lipids and antioxidative activity in
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2.Kawatama J;Kasai T S α-Glucosidase inhibitor 2000
3.Watanabe J;Kawabata J;Kurihara H Isolation and identification of alpha-glucosidase inhibitors from
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4.Vedavanam K;Srijayanta S;OReilly J Antioxidant action and potential antidiabetic properties of an
isoflavonoidcontaining soybean phytochemical extract (SPE) 1999
5.Garriga C;Moret6 M;Planas J M Hexose transport in the apical and basolateral membranes of
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1. 全吉淑.尹学哲.及川和志.QUAN Ji-shu.YIN Xue-zhe.KAZUSHI Oikawa 茶多糖降糖作用机制[期刊论文]-中国公
共卫生2007,23(3)

引证文献(3条)
1.汪东风.王林戈.张莉.徐莹.Bucheli Peter 绿茶对糖尿病的防治作用[期刊论文]-茶叶科学 2010(4)
2.禹利君.刘仲华.范铁芳 中国茶产业发展现状分析[期刊论文]-中国林副特产 2007(3)
3.王黎明 具有降血糖活性的茶多糖组分分离纯化与结构鉴定[学位论文]博士 2006


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