全 文 ：·1836· 中草黄 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
乌苏瑞宁的抗血栓作用
邓伟峰-一，赵伟杰3，吕 莉2，王世盛3，潘 平2，韩国柱”
(1．怀化医学高等专科学校，湖南怀化418000|2．大连医科大学药理教研室，辽宁大连116044；
3．大连理工大学，辽宁大连116024)
摘 要：目的 研究乌苏里藜芦总生物碱中乌苏瑞宁对大鼠的抗血栓作用，确证乌苏瑞宁是否为总碱中抗栓活性
成分。方法应用电刺激诱发大鼠颈总动脉血栓形成模型和瘀血诱发大鼠下腔静脉血栓形成模型评价乌苏瑞宁的
抗动、静脉血栓形成作用；采用Born’S法测定大鼠体内外血小板聚集率以研究鸟苏琦宁的抗血小板作用。结果
大鼠iv5种不同剂量的乌苏瑞宁(1．25～20．00ttg／kg)均能导致电刺激诱发的大鼠颈总动脉血栓形成所致的血
管阻塞时阅显著延长；亦能减少大鼠下腔静脉血栓的干质量，乌苏瑞宁在剂量为1．25～5．00fIg／kg以及质量浓度
为6．25～50btg／L时，能抑制大鼠体内外血小板聚集。结论乌苏瑞宁具有强大的抗大鼠动、静脉血栓形成作用和
抗血小板作用。乌苏里藜芦总碱的抗血栓作用与其中的化学成分乌苏瑞宁有关。 ．
。
关键词：乌苏里藜芦总生物碱(VnA)；乌苏瑞宁，血栓 。
中图分类号：R286．32 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)12—1836一03
AntithromboticeffectofverussurininefromVeratrum咒igrumvar．ussuriensealkaloids
DENGWei—fen91’2，ZHAOWei—jie3，LULi2，WANGShi—shen93，PANPin92，HANGuo—zhu2
(1．HuaihuaMedicalCo lege，Huaihua418000，China；2．DepartmentofPh macology，DalianMedicalUn versity。
Dalian116044，China，3．DalianUniversityofScience＆Technology，Dalian116024，Ch na)
Abstract：ObjectiveTos udytheffectsofverussurinine(VSRN)，analkaloidisolatedfrom
Veratrumnigrumvar．ussuriensealkaloids(VnA)，againstthrombosisandtsplateletaggregation
inhibitoryactivityinratsinordertofindoutwhetherVSRNiStheantithromboticactiveingredientof
VnA．MethodsThelectricallyinducedratcarotidarterythrombosisandstasis—inducedratinferiorvena
cavathrombosismodelswereusedtOevaluatethanti，—arterialandanti．．venousthrombosiseffectof
VSRN．respectively．Born
7
SturbidimetricthodwasusedtOexaminetheinvivoandinvitroanti—
plateleteffectSOastoinvestigatetheantiplateletaggregationofVSRN．ResultsIncomparisonwith
saline，VSRNinfivedifferentdoses(1．25—20．00／19／kg)showedsignificantlyandose—dependently
prolongedocclusiont me(oT)ofcarotidarteryinjuredbyelectricalstimulationndreducedthrombusdry
weightofinferiorvenacavaligatedfor4htOcausetasis．Plateletggr gationwasfoundtobeinhibited
byVSRNinthedosesof1．25～5．00ag／kgandattheconcentrationof6．25—50弘g／Linbothinvivoand
invitrotest．ConclusionVSRNhaspowerfularteriovenousantithrombosisandant plateletaggregationof
rats．TheantithromboticeffectofVSRNisrelatedoitsplateletaggregationinhibitoryactivity．The
abovefindingsindicatethatVSRNiSanantithromboticactiveingredientofV A．
Keywords：Veratrumnig L．var．ussurienseNakailkaloid(VnA)；verussurinine；thrombosis
乌苏里藜芦VeratrumnigrumL．var．
ussurienseNakai(VnA)为藜芦属植物，广泛分布
于我国东北地区。藜芦可用于中风失语、黄疸疥疮，
提示藜芦可能具有降血压、抗血栓等方面的作用。本
研究组近年来通过对乌苏里藜芦总生物碱
(VeratrumnigrumL． var． ussurienseNakai
alkaloids；VnA)的药理实验研究，发现VnA具有
强大的抗血栓等作用[1]，并借助于生物测定法研究
了VnA在大鼠和小鼠体内的药动学特点，表明
VnA在体内消除迅速，无明显蓄积毒性[。]，为查明
VnA的确切抗血栓活性成分，本研究组采用现代植
化和分析技术从VnA中分离出11种酯型甾体类
生物碱[3“]。本实验研究其中一种生物碱乌苏瑞宁
(verussurinine．VSRN)的抗血栓作用和抗血小板
收穰日期；2007—03—07
基金项目：国家自然科学基金资助项目(NSFCE0372014)
作者简介：邓伟峰(1962一)，湖南省怀化市人，副教授，研究方向为中药和民族药学。
Tel：13874439688E—mail：shengyaojys@126．tom
*通讯作者韩国柱Tel：(0411)86110415E—mail：hgzhx2236@sina．com．Cn
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1837·
活性。
1材料
1．1药物：乌苏瑞宁注射液(500弘g／mL)，由大连
理工大学赵伟杰教授实验室提供，用前以生理盐水
稀释。肝素钠，上海生物化学制药厂产品；ADP，
Sigma公司产品；注射用赖氨匹林(LAS)，安徽蚌
埠安宝制药厂产品。
1．2 仪器：BT87—3型实验性体内血栓形成测定
仪，包头医学院心血管研究室产品。LXJ一2型离心
机和LBY—NJ2四通道血小板聚集仪，北京普利生
公司产品。
1．3动物：Wistar大鼠，雄性，体重180～220g，由
大连医科大学试验动物中心提供(辽实动字第
022号)。
2方法与结果
2．1对大鼠电刺激颈总动脉体内血栓形成的影响：
取大鼠70只，随机分为生理盐水(NS)组、VSRN
5个剂量(1．25、2．50、5．oo、10．00、20．00／zg／kg)
组及LAS(18mg／kg)组。大鼠以20％乌拉坦ip1
g／kg麻醉，分离大鼠右侧颈总动脉，将体内血栓形
成测定仪的刺激电极置于已分离的颈总动脉近心
端，其远端置测温电极。大鼠舌下iv给药，15min
后，开始电刺激(1．6mA)颈总动脉持续7min，引
起血管内膜损伤，从而形成血栓。记录从电刺激开始
至颈总动脉表面温度突降所需时间，即为颈总动脉
血栓形成时间，即为堵塞时间(occlusiontime，
OT)[5]。与NS组相比，计算各剂量给药组的oT延
长率。数据以z±s表示，组间均值比较用t检验。由
表1可知，VSRN5种剂量给药(1．25～20．00,g／
kg)均能显著延长OT值，其中5．00弘g／kg剂量组
作用最强(与18mg／kgLAS相当)。给药剂量再增
加，其0T值不增反降。
2．2对大鼠静脉血栓形成的影响：大鼠70只，动
物分组[除阳性对照改为肝素钠(400pg／kg)外]、
麻醉方法同2．1项。按Rayers法[6]，于正中切开大
鼠腹壁，分离下腔静脉，并于左肾静脉下方预置丝线
备结扎用。VSRN5种剂量和等容NS及肝素钠iv
给药，15min后结扎下腔静脉，关闭好腹腔，结扎后
4h重新打开腹腔，于结扎线下方2cm处夹闭血
管，同时夹住段内主要静脉侧枝并用注射器吸尽静
脉段内残血，纵行剖开管腔，观察有无血栓形成，若
血栓形成，则置烤箱内60℃烘烤20min称其干质
量。计算血栓干质量抑制率。结果VSRN组均显著
抑制大鼠静脉血栓的形成。见表1。
表1 VSRN对大鼠体内动静脉血栓形成的影响
(；±s，弹一10)
Table1 EffectofVSRNonarterioveuousthr mbosis
ofratsinvivo(；士s，席一10)
与NS组比较：’P。P2．3对大鼠体内外血小板聚集的影响
2．3．1 对大鼠体内血小板聚集的影响：大鼠60
只，随机分为6组，分别为NS组，VSRN(2．5、5．0、
10．0、20．0,ug／kg)组及LAS(18mg／kg)组，采用
Born
7S法‘7|，iv给药后15min，腹主动脉采血，
3．8％枸橼酸钠抗凝(血与抗凝剂体积比9：1)，以
800r／rain离心10min，制备富血小板血浆(PRP)，
剩余血液经3000r／min离心10min，制备贫血小
板血浆(PPP)。用PPP调RPR中血小板数4×
1012～5×1012／L，分别取PRP200pL，加入诱导剂
ADP(终浓度2弘mol／L)，测定血小板5min最大
聚集率。血小板聚集测定均在3h内完成。由表2可
见，VSRN各给药剂量组显著抑制大鼠体内血小板
聚集，用剂量为10／tg／kg的VSRN对血小板聚集
的抑制作用与18000／，g／kgLAS相当。
表2 VSRN对大鼠体内血小板聚集的影晌(；±s，徉一10)
Table2 EffectofVSRNoninvivoplateletaggregation
ofrats(；±s，撑=10)
组别剂量／(p-g·kg一)血小板聚集率／％ 聚集抑制率／％
与NS组比较：一P<0·01
’’P<0．01口5NSgroup
2．3．2对大鼠体外血小板聚集的影响：大鼠同前麻
醉后，腹主动脉采空白血制备RPR和PPP。将2弘L
不同质量浓度的VSRN、LAS和NS分别加入200
弘LPRP中，37oC温浴3min，然后加入ADP(终
浓度2肛mol／L)诱导血小板聚集，同2．3．1方法测
定血小板聚集率。结果表明，VSRN显著抑制大鼠
万方数据
·1838· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
体外血小板聚集，其作用与加入药物的质量浓度呈
剂量依赖关系，且质量浓度为25．0／-g／L的VSRN
对血小板聚集的抑制作用与40mg／L的LAS相
近。见表3。
表3 VSRN对大鼠体外血小板聚集的影响。士s，席一10)
Table3 EffectofVSRNoninvitroplateletaggregation
ofrats(j士s。露一10)
与NS组比较：一P<0．01
’‘P3讨论
本实验研究采用经典的电刺激诱发大鼠颈总动
脉血栓形成模型和瘀血诱发大鼠下腔静脉血栓形成
模型以评价VSRN的抗动、静脉血栓作用。结果表
明：VSRN具有显著的血栓形成抑制效能和强大的
抗血栓强度。本研究组在以往研究VnA时，曾发现
其抗血栓有效剂量为7．2～42．9,ug／kg，本次实验
发现VSRN的抗栓有效剂量为1．25一-5／-g／kg。由
此可见VSRN的抗栓作用强于VnA[8]。这些结果
可以说明：VSRN为VnA中重要抗栓活性成分。本
研究中还发现VSRN在5．00～20．00／卫g／kg剂量，
其抗动脉血栓作用随剂量增加不仅不增加，反而降
低；但其抗静脉血栓作用强度与其剂量呈依赖关系，
该现象的机制有待阐明。
本研究还表明VSRN尚具有强大的体内外血小
板聚集抑制活性，这提示该活性成分的抗血栓作用与
其抗血小板聚集作用有关。以上结果表明：乌苏瑞宁
为乌苏里藜芦总碱中重要的抗栓活性成分之一。
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眼镜蛇毒细胞毒素CTX—d诱导NB4细胞凋亡及其机制研究
陈纯，陈崇宏+
(福建医科大学药学院药理系，福建福州 350004)
摘 要：目的 探讨眼镜蛇毒细胞毒素CTX—d诱导NB细胞凋亡的机制。方法MTT法测定CTX—d体外细胞毒
作用，电镜、流式细胞仪观察CTX—d对NB4细胞的诱导凋亡作用，流式细胞仪检测NB4细胞线粒体膜电位的变
化，Western—blotting测定胞浆细胞色素c及caspase一9、caspase一3的变化。结果CTX-d作用NB4细胞6、12h的
IC。。分别为1．8、1．35tlg／mL；CTX—d引起NB4细胞线粒体肿胀、核固缩等形态学改变；诱导NB4细胞出现亚G-
期的凋亡峰，且有时效及量效关系；CTX—d(1．0tug／mL)作用0．5h，NB4细胞线粒体膜电位已开始下降，同时在
胞浆中检测到细胞色素C，显示细胞色素C已由线粒体释放入胞浆；easpase一9酶原的量在CTX—d(1．0}tg／mL)作
用1h时开始下降，而活化的easpase一3片断在0．5h即检测到，表明除了通过caspase一9,CTX—d还可能通过其他
途径激活caspase一3。结论CTX—d可通过降低线粒体膜电位、细胞色素c释放，激活caspase一9和caspase-3，从而
诱导NB4细胞凋亡，还可能通过其他途径激活caspase一3，参与凋亡作用。
收稿日期：2007—05—17
作者简介：陈纯(1972一)，女，博士，讲师，专业方向为抗肿瘤药物药理。
Tel：(0591)83756200Fax：(0591)83756200E—mail：chenchun--0428@163．corn
*通讯作者陈崇宏E—mail：chench2008@163．corn
万方数据
乌苏瑞宁的抗血栓作用
作者： 邓伟峰， 赵伟杰， 吕莉， 王世盛， 潘平， 韩国柱， DENG Wei-feng， ZHAO Wei-jie
， L(U) Li， WANG Shi-sheng， PAN Ping， HAN Guo-zhu
作者单位： 邓伟峰,DENG Wei-feng(怀化医学高等专科学校,湖南,怀化,418000;大连医科大学,药理教研
室,辽宁,大连,116044)， 赵伟杰,王世盛,ZHAO Wei-jie,WANG Shi-sheng(大连理工大学,辽
宁,大连,116024)， 吕莉,潘平,韩国柱,L(U) Li,PAN Ping,HAN Guo-zhu(大连医科大学,药
理教研室,辽宁,大连,116044)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(12)
被引用次数： 4次

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4.张晓雪.赵洪礼.姚成芳 中药对脑血管的保护作用及其防治脑血栓形成的研究进展[期刊论文]-中国民康医学
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200712027.aspx