全 文 ：于给药组的 ET 增高幅度明显低于模型组, 其胃溃
疡的发生率和严重程度也明显低于模型组,所以, 推
测加味丹参饮通过降低血浆 ET 水平, 改善胃黏膜
血流量,缓解平滑肌痉挛性收缩而起到保护胃黏膜
的作用。通过检测血中 NOS 活性可以间接反应
NO 水平,本实验结果表明模型组 NOS 活性明显升
高,且其升高水平亦与胃黏膜损伤程度呈正相关, 而
给药组的 NOS 活性明显低于模型组。提示加味丹
参饮通过降低血浆 ET 水平,进而降低了 iNOS 表
达,而表现为总的 NOS 水平的下降。
胃酸是应激性胃溃疡形成中另一不容忽视的因
素,胃酸即盐酸,它是局部最强的攻击因子, 其强酸
性对胃黏膜具有很强的腐蚀性[ 6] , 本研究结果还显
示应激对胃液 pH 值无影响, 但可使胃液分泌量显
著增加,服用加味丹参饮的家兔胃液 pH 值亦变化
不大,而胃液分泌量显著增加,服用加味丹参饮的家
兔胃液 pH 值亦变化不大,而胃液分泌量则增加不明
显,由此推测,抑制胃液的过量分泌也是加味丹参饮
发挥抗应激性胃溃疡的机制之一。
总之,加味丹参饮通过减少胃液分泌,降低应激
家兔血浆 ET 和 NOS 水平,从而改善胃黏膜血流量、
保护胃黏膜,对应激性胃溃疡有显著的抑制作用。
参考文献:
[ 1] Guth P H1 T opical aspi rin plus HCl gast ric lesion in th e rat
cyto- protect ive ef fect of pros taglandin cim ct idine and proban-
T hine [ J]1 Gast roenterlogy , 1987, 57( 6) : 85- 871
[ 2] 陈 虹, 孙 红, 王维亚1 五磨饮子对大鼠胃溃疡的治疗作
用 [ J]1 中草药, 2008, 39( 3) : 415-4161
[ 3] 王本祥1 现代中药药理学 [ M ]1 天津:天津科学技术出版社,
19971
[ 4] 胡伏莲1 消化性溃疡发病机制的现代理念 [ J]1 中华消化杂
志, 2005, 25( 3) : 189-1901
[ 5] 张国锋, 陈易人, 张明璈, 等1 一氧化氮、内皮素与胃粘膜损
伤 [ J]1 胃肠病学和肝病学杂志, 1999, 8( 4) : 293-2961
[ 6] 曹 霞, 余良主, 赵小玉1 复方丹参注射液对大鼠运动应激
性溃疡的影响 [ J ]1 咸宁学院学报( 医学版 ) , 2003, 17( 5 ) :
318-3211
乌苏瑞宁对家兔血液流变学和血凝时间及小鼠出血和凝血时间的影响
邓伟峰1, 2 ,赵伟杰3 ,吕 莉2 ,王世盛3 , 潘 平2 ,韩国柱2*
( 11 怀化医学高等专科学校, 湖南 怀化 418000; 21 大连医科大学 临床药理教研室,辽宁 大连 116044;
31 大连理工大学, 辽宁 大连 116024)
摘 要:目的 研究乌苏瑞宁 ( verussur inine, VSRN ) 对家兔血液流变学和血凝时间参数及小鼠出血、凝血时间的
影响 ,以查明乌苏瑞宁是否为乌苏里藜芦总碱的抗栓活性成分。方法 应用血液流变仪测定低切和高切全血比黏
度、血浆比黏度; 应用血凝仪测定凝血酶时间 ( T T ) 和复钙时间 ( RT ) ; 应用鼠尾横切法和毛细玻璃管法分别测定
出血、凝血时间。结果 家兔和小鼠 iv 4 种不同剂量的乌苏瑞宁导致家兔全血比黏度及血浆比黏度呈剂量依赖性
降低; TT 和 RT 显著延长; 小鼠出血、凝血时间明显延长。结论 乌苏瑞宁能够显著降低家兔血液黏度,延长家兔
TT 和 RT 以及小鼠出血、凝血时间。
关键词:乌苏瑞宁; 血液流变学; 血凝时间; 出血时间; 凝血时间
中图分类号: R2861 1 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 07-1115-03
乌苏里藜芦 Ver atr um nigr um L. v ar. ussu-
r iense Nakai系百合科藜芦属植物,为中药藜芦的一
种,主要分布于我国东北地区。以往国内外对藜芦
的研究均集中于其降压作用方面[ 1, 2]。本研究组近
年发现乌苏里藜芦总生物碱 ( Ver aturm nigr um L.
var. ussur iense N akai alkalo ids, VnA) 具有强大的
抗血栓作用[ 3] ,并应用生物效应法,研究了 VnA 在
小鼠和大鼠体内的药动学特点, 表明 VnA 毒效成
分在小鼠体内消除极快 ( t 1/ 2ED为 21 17 min) ,无明显
蓄积毒性, 其抗栓效应成分自大鼠体内消除颇快
( t 1/ 2 ED为 160 min) , 但较毒效半衰期长[ 3, 4] 。为查明
VnA 的确切抗血栓活性成分,本研究组采用现代植
化和分析技术, 从 VnA 中分离出数种酯型异甾体
类生物碱[ 5, 6] , 并对其抗栓药理活性及其机制分别
进行研究。笔者曾对其中一种单体生物碱乌苏瑞宁
( v er ussurinine, VSRN ) 的抗血栓作用、抗血小板
#1115#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
* 收稿日期: 2008- 12-02 基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( NSFC20372014)作者简介:邓伟峰( 1962 ) ) ,男,湖南省怀化人,副教授,硕士,主要从事生药和民族药学研究。
T el : 13874439688 E- mail : s hen yaojys@ 126. com
* 通讯作者 韩国柱 T el: ( 0411) 86110415 E-mail: hgzhx2236@ s ina. com. cn
活性进行了研究 [ 7]。本实验将进一步研究 VSRN
对家兔血液流变学和血凝时间参数的影响以及对小
鼠出血时间和全血凝血时间的影响,为其抗栓作用
提供实验支持以及为其进一步研发提供实验依据。
1 材料
11 1 药物:乌苏瑞宁注射液 ( 500 Lg / mL) , 由大连
理工大学化学制药系赵伟杰教授实验室提供, 用时
以生理盐水 ( NS) 稀释。
11 2 仪器: PLS2000 ) 4 血凝仪、LBY ) N6 普利生
血流变仪,均由北京普利生仪器中心生产。
11 3 动物:新西兰大耳白家兔,雌性, 21 5~ 31 0 kg;
昆明种小鼠,雄性, 25~ 30 g, 均由大连医科大学实
验动物中心提供 (辽实动字第 022号)。
2 方法与结果
211 数据处理: 计量资料数据用 x ? s 表示, 统计处
理用 SPSS 101 0 软件进行方差分析,组间行 t 检验。
21 2 对家兔血液流变学的影响:家兔 24 只, 随机
分为 4 组, 每组 6 只。各组家兔分别耳缘 VSRN
21 5、51 0、101 0、201 0 Lg / kg,分别于给药前和给药后
20、60、180 min 由心脏采血, 肝素 ( 25 U/ mL) 抗
凝,取 1 mL 抗凝血, 用血液流变仪测定全血比黏
度。剩余抗凝血,以 3 000 r/ min 离心 20 m in,制备
贫血小板血浆, 同法测定血浆比黏度。结果表明, 给
药后家兔全血比黏度、血浆比黏度均显著降低,并呈
剂量依赖性,其降黏作用至少维持 180 m in (表 1)。
21 3 对家兔血凝时间参数的影响:分组及给药方法
同 21 1项。分别于给药前及给药后 20、60、180 m in
自心脏采血 31 6 mL,以 31 8% 枸橼酸钠抗凝 (血与
抗凝剂比例为9 B 1) , 混合后以30 00r / m in离心
20 m in,分取血浆。取血浆 50 LL 置于血凝仪小杯
中,加入 01 1 mol/ L T ris-HCl ( pH= 7. 4) 缓冲液和
凝血酶试液 ( 5 U / mL) 各 50 LL,仪器自动给出血
凝时间值,此即凝血酶时间 ( thr ombin t ime, TT )。
另取血浆 100 LL, 置于血凝仪小杯中,再加入已预
温的 01 025 mol/ L CaCl2溶液 100 LL,此时,仪器自
动给出的血凝时间即为复钙时间 ( recalcification
t ime, RT)。由表 2可知, VSRN 能显著延长 T T 和
RT,且对 RT 的延长具有较好的量效关系;另可看出
iv 本品后 TT 和 RT 的延长可维持 60 min 左右,至
180 min TT 和 RT 已基本恢复至给药前水平。
表 1 VSRN 对家兔血液流变学的影响 (x ? s, n= 6)
Table 1 Effect of VSRN on hemorrheology of rabbits
( x? s, n= 6)
VSRN 剂量/
( Lg # kg- 1 )
时间/
min
全血比黏度/ s- 1
低切 ( 20 s- 1) 高切 ( 80 s- 1)
血浆比
黏度
21 5 给药前 - 41 50 ? 01 30 31 27 ? 01 13 11 61 ? 01 17
给药后 20 31 90 ? 01 15* * 21 87 ? 01 17* * 11 28 ? 01 12*
60 31 82 ? 01 20* * 21 83 ? 01 14* * 11 26 ? 01 11*
180 31 80 ? 01 25* * 21 78 ? 01 11* * 11 27 ? 01 10*
51 0 给药前 - 41 56 ? 01 33 31 29 ? 01 11* * 11 64 ? 01 29
给药后 20 31 20 ? 01 17* * 21 41 ? 01 19* * 11 14 ? 01 22*
60 31 24 ? 01 11* * 21 38 ? 01 17* * 11 13 ? 01 33*
180 31 26 ? 01 21* * 21 40 ? 01 08* * 11 14 ? 01 09*
101 0 给药前 - 41 52 ? 01 26 31 28 ? 01 10* * 11 61 ? 01 19
给药后 20 21 83 ? 01 18* * 21 13 ? 01 11* * 11 00 ? 01 06*
60 21 72 ? 01 16* * 21 08 ? 01 10* * 01 96 ? 01 01*
180 21 70 ? 01 14* * 21 16 ? 01 17* * 01 98 ? 01 02*
201 0 给药前 - 41 55 ? 01 29 31 32 ? 01 13 11 69 ? 01 15
给药后 20 21 22 ? 01 10* * 21 02 ? 01 16* * 01 98 ? 01 03* *
60 21 28 ? 01 16* * 11 99 ? 01 16* * 01 99 ? 01 04* *
180 21 27 ? 01 15* * 21 01 ? 01 18* * 01 99 ? 01 05* *
与给药前比较: * P < 01 05 * * P < 01 01
* P < 01 05 * * P< 01 01 v s pre-adm inist ration
表 2 VSRN 对家兔 TT和 RT的影响 ( x? s, n= 6)
Table 2 Effect of VSRN on TT and RT of rabbits (x ? s, n= 6)
V SRN 剂量/
(Lg# kg- 1 )
T T / s RT / s
给药前 给药后
20 m in 60 min 180 min
给药前 给药后
20 m in 60 min 180 m in
21 5 91 07? 01 42 131 50? 11 31* * 131 32? 11 73* * 91 01? 01 34 171 13 ? 11 36 231 93? 31 95* 231 72 ? 31 42* 181 32 ? 11 77
51 0 91 13? 01 35 131 77? 11 50* * 131 72? 31 03* 91 20? 01 39 151 95 ? 11 83 341 83? 21 68* * 341 92 ? 11 80* * 161 13 ? 11 93
101 0 91 03? 01 33 141 27? 01 79* * 121 98? 11 21* * 91 13? 01 36 161 32 ? 11 70 461 03? 31 57* * 451 08 ? 31 64* * 161 48 ? 11 78
201 0 91 03? 01 22 131 10? 11 60* * 131 33? 11 66* * 91 02? 01 23 151 58 ? 21 55 521 73? 41 35* * 521 42 ? 41 66* * 151 45 ? 21 18
与给药前比较: * P< 01 05 * * P< 01 01
* P< 01 05 * * P < 01 01 vs pre-adminis trat ion
21 4 对小鼠全血凝血时间和尾出血时间的影响: 采
用毛细玻璃管法测定全血凝血时间 ( coagulant
time, CT)。小鼠 40 只, 随机分为 4 组, 分别 iv
VSRN 51 0、101 0、201 0 Lg / kg, 或等容量 N S, 药后
20 min 将内径 1 mm 玻璃毛细管插入小鼠内眦球
后静脉丛取血,至毛细管中血柱长达 5 cm 为止,并
记时,每隔 30 s 折断一小节含血柱的毛细管, 肉眼
仔细观察折断血柱时有无凝血丝出现, 计算从采血
到有凝血丝出现的时间, 即为 CT, 并与 NS 组比较
计算各给药组 CT 延长率。结果见表 3。
#1116# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
采用鼠尾横切法测定小鼠尾出血时间 ( bleed-
ing t ime, BT )。动物分组及给药方法同上,给药后
30 min, 将小鼠置于固定器中, 使其尾部垂直, 于尾
尖处剪断鼠尾,每隔 30 s 用滤纸轻吸尾尖血液, 直
至吸不出血液, 记录断尾至出血停止时间, 即为
BT ,与 NS 组比较计算各给药组 BT 延长率。结果
见表 3。
表 3 VSRN 对小鼠 CT和 BT 的影响 (x ? s, n= 10)
Table 3 Effect of VSRN on CT and BT of mice
( x? s, n= 10)
组别 剂量/
( Lg# kg- 1)
CT
时间/ s 延长率/ %
BT
时间/ s 延长率/ %
N S - 1181 50 ? 241 00 - 131 70? 31 10 -
V SRN 51 0 1361 50 ? 161 80* 131 18 171 30? 11 68* 201 81
101 0 1931 00 ? 161 40* 381 60 231 00? 51 90* 401 43
201 0 2311 00 ? 101 30* * 481 70 271 00? 31 20* * 491 25
与 NS 组比较: * P< 01 05 * * P < 01 01
* P< 01 05 * * P < 01 01 v s NS group
3 讨论
血液流变学指标中血液比黏度的增高或降低对
心血管系统疾病的发生有预测、预报的作用。本实
验结果表明 VSRN 能显著降低家兔的低切全血比
黏度和高切全血比黏度, 并呈剂量依赖性,说明 VS-
RN 能够降低红细胞聚集性, 并增强红细胞变形能
力;结果还表明 VSRN 降低血浆比黏度, 说明不但
对血液中影响黏度的细胞成分有改善作用, 而且对
血液中非细胞成分(如纤维蛋白原、血脂等)也有改
善作用 [ 8]。这些表明 VSRN 具有降低血液黏度的
作用。本研究发现 iv V SRN 导致 RT 和 TT 的延
长,说明 VSRN 作用于血凝级联反应中内源性通路
和共同通路从而产生抗凝作用。以上研究进一步证
明 VSRN 是乌苏里藜芦总碱抗血栓活性成分之一。
VSRN 在降黏抗凝的同时, 还显示一定的 CT、BT
延长作用,提示在应用 VSRN 降黏抗栓的同时, 应
注意其可能产生的出血不良反应。本研究结果为
VSRN 的抗栓作用提供了进一步实验支持。
参考文献:
[ 1] Li H, Gao G Y, Li S Y1 E ffect s of Ver atr um nigr um alka-
loids on cent ral catecholam inergic neu ron s of renal hyperten-
sive rat s [ J]1 A cta Phamacol Sin , 2000, 21( 1) : 23-281
[ 2] 徐敦海, 徐雅红 1 藜芦属植物化学成分和药理作用 [ J ]1 国
外医药:植物分册, 2002, 17( 5) : 1835- 18391
[ 3] H an G Z, L i X Y, Lu L, et al . Pharmacokin et ic prof iles of
Verat rum nig rum L. var. ussuieuse Nakai alkaloids in rat s
[ J]1 A sian J Dr ug Metab P harmacokin, 2001, 1( 3) : 1692-
17411
[ 4] 赵伟杰, 陈 钧, 郭永田1 黎芦生物碱的化学研究 [ J ]1 中药
通报, 1987, 12( 1) : 34-351
[ 5] Zhao W J, T ezuk a Y, Kikuch I T , e t al . S tudies on the con-
st ituents of Verat rum nig rum L. var. ussureinse. S t ructure
an d 1H- and 13C- nuclearm agn et ic res on an ce spect ra of a new
alkaloid, verus surinin e, an d related alk alods [ J]1 Chem
P harm Bu ll , 1911, 39( 3) : 549-5541
[ 6] T ezuk a Y, Kik uch I T, Zhao W J, e t al . ( + )-Veru ssur-i
nine, a new steroidal alkaloid f rom th e root s an d rhiz oma Ve-
rat rum nigr um var. u ssu ri ense and st ructu re r evision of ( + )-
veru ssurin ine [ J]1 J N at P rod , 1998, 61( 11) : 1397-13991
[ 7] 邓伟峰, 赵伟杰, 吕 莉, 等1 乌苏瑞宁的抗血栓作用 [ J ]1
中草药, 2007, 38( 12) : 1836-18381
[ 8] 杨晓静, 张泓巍, 张大伟, 等1 胶陀螺对血瘀动物血液流变
学的影响 [ J ]1 中草药, 1996, 27( 6) : 3581
高良姜总黄酮对实验性胃黏膜损伤的保护作用及其机制
江 涛,唐春萍,冯毅凡, 杨超燕,楚 博,林楚雄*
(广东药学院, 广东 广州 510006)
摘 要:目的 研究高良姜总黄酮对无水乙醇致大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法 采用无水乙醇致大
鼠胃黏膜损伤模型,通过测定胃黏膜溃疡指数观察高良姜总黄酮对胃黏膜损伤的保护作用; 测定血清一氧化氮
( NO) 的量、胃黏膜组织丙二醛 ( MDA ) 的量和超氧化物歧化酶 ( SOD) 的活性以及胃壁结合黏液量来探讨作用机
制。结果 高良姜总黄酮可剂量依赖性地降低无水乙醇致大鼠胃黏膜损伤指数, 显著升高血清 NO 和胃壁结合黏
液量 ,明显阻遏乙醇引起的胃黏膜 MDA 水平升高和 SOD 活性降低。结论 高良姜总黄酮对实验性胃黏膜损伤
具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化、增强胃黏膜保护因子有关。
关键词:高良姜总黄酮; 胃黏膜损伤; SOD
中图分类号: R2851 5 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 07-1117-03
#1117#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
* 收稿日期: 2008- 12-06 基金项目:广东省教育部产学研结合项目 ( 2006D90504006)作者简介:江 涛( 1966 ) ) ,男,副教授,主要研究方向为新药研究与开发。 T el: ( 020) 39352152 E-mail: t jiang66@ 21cn. com